অসমোটিক স্ট্রেস দ্বারা Cistanche Deserticola এর কোষ সংস্কৃতিতে Phenylethanoid Glycosides বায়োসিন্থেসিস বৃদ্ধি

যোগাযোগ:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

চুন-ঝাও লিউ। শি-ইউ চেং

বিমূর্তকোষের বৃদ্ধি এবং ফেনিলেথানয়েড গ্লাইকোসাইডস (পিইজি) জৈব সংশ্লেষণের উপর অসমোটিক চাপের প্রভাব কোষ সাসপেনশন সংস্কৃতিতে তদন্ত করা হয়েছিলCistanche deserticolaYC Ma, চীনের পশ্চিম অঞ্চলে জন্মানো একটি মরুভূমির ঔষধি গাছ। বিভিন্ন প্রাথমিক সুক্রোজ ঘনত্ব সাসপেনশন কালচারে কোষের বৃদ্ধি এবং PeGs জৈবসংশ্লেষণকে উল্লেখযোগ্যভাবে প্রভাবিত করে এবং সর্বোচ্চ শুষ্ক ওজন এবং PeGs সঞ্চয় যথাক্রমে 15.9 gl–1-DW এবং 20.7 mg g–1-DW-তে পৌঁছে 300 mOsm kg–1 এর চাপ যেখানে সুক্রোজের ঘনত্ব ছিল 175.3 mM। সুক্রোজ এবং নন-মেটাবলিক সুগার (ম্যানিটল) বা নন-সুগার অসমোটিক এজেন্ট (PEG এবং NaCl) এর বিভিন্ন সংমিশ্রণ সহ স্টোইচিওমেট্রিক বিশ্লেষণ প্রকাশ করেছে যে অসমোটিক স্ট্রেস নিজেই কোষ সাসপেনশন সংস্কৃতিতে PeGs বায়োসিন্থেসিস বাড়ানোর জন্য একটি গুরুত্বপূর্ণ কারণ।Cistanche deserticola. সর্বাধিক PeGs বিষয়বস্তু 26.9 এবং 23.8 mg g–1-DW 21 দিন পরে 87.6 mM সুক্রোজের সাথে 164.7 mM mannitol (303 mOsm kg–1) বা 20 mM PEG এর সংমিশ্রণে প্রাপ্ত হয়েছিল, যা এর চেয়ে বেশি ছিল। 30 দিন পর 175.3 মিমি প্রাথমিক সুক্রোজ ঘনত্বের অধীনে জন্মানো C. deserticola কোষের সংস্কৃতি। সেল সাসপেনশন কালচারে উদ্দীপিত PeGs জমে আসমোটিক স্ট্রেস দ্বারা প্ররোচিত ফেনিল্যালানাইন অ্যামোনিয়াম লাইজ (PAL) কার্যকলাপের বৃদ্ধির সাথে সম্পর্কযুক্ত ছিল।

কীওয়ার্ড Cistanche deserticola, মরুভূমির ঔষধি উদ্ভিদ, ফেনিলেথানয়েড গ্লাইকোসাইডস, অসমোটিক স্ট্রেস, ফেনিল্যালানিন অ্যামোনিয়া-লাইজ

সিস্তানচেটিউবুলোসাঅনেক প্রভাব আছে, আরো জানতে এখানে ক্লিক করুন

ভূমিকা

Cistanche deserticolaওয়াইসি মা, একটি মূল্যবান চীনা ভেষজ, হ্যালোক্সিলন অ্যামোডেনড্রনের শিকড়কে পরজীবী করে এবং পশ্চিম চীনের মরুভূমিতে জন্মায়। ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইডস (পিইজি), সি. ডেসার্টিকোলা থেকে বিচ্ছিন্ন প্রধান বায়োঅ্যাকটিভ উপাদান, ফ্রি র‌্যাডিকেল স্ক্যাভেঞ্জিং, অনাক্রম্যতা বাড়ানো, যৌন ক্রিয়াকলাপের উন্নতি ইত্যাদিতে চিহ্নিত কার্যকলাপ রয়েছে (জং এট আল। 1996; লু 1998; ওয়াং এট আল। 2001)। অনিয়ন্ত্রিত শোষণ ও ব্যবহারের কারণেCistanche deserticola, এর প্রাকৃতিক সম্পদCistanche deserticoলা ক্লান্তির প্রান্তে ছিল। এই সমস্যাগুলির পরিপ্রেক্ষিতে, C. deserticola-এর সেল সাসপেনশন কালচার দ্বারা PeGs উৎপাদনের ঘাটতি সমাধানের জন্য একটি প্রতিশ্রুতিশীল বিকল্প হিসাবে বিবেচিত হয়েছে।Cistanche deserticolaউদ্ভিদ উপকরণ (Lu and Mei 2003; Ouyang et al. 2003; Cheng et al. 2005a)।

অসমোটিক স্ট্রেস হল একটি গুরুত্বপূর্ণ কারণ যা উদ্ভিদের বৃদ্ধি, বিকাশ, মরফোজেনেসিস এবং গৌণ বিপাক গঠনকে প্রভাবিত করে। সর্বোত্তম অসমোটিক স্ট্রেসের অধীনে ভিট্রো টিস্যু কালচার থেকে সেকেন্ডারি মেটাবোলাইটের বর্ধিত উত্পাদন কয়েকটি ঔষধি উদ্ভিদ প্রজাতিতে রিপোর্ট করা হয়েছে (কিম এট আল। 2001; ওয়াং এট আল। 1999; উ এট আল। 2005)। সুক্রোজ একটি সাধারণ অসমোটিক স্ট্রেস এজেন্ট যা এই ক্ষেত্রে ব্যবহৃত হয় এবং এটি একটি গুরুত্বপূর্ণ কার্বন এবং শক্তির উত্স হিসাবেও কাজ করে। অতএব, অসমোটিক স্ট্রেসের প্রভাব এবং কার্বন উত্স হিসাবে শর্করার পুষ্টির ভূমিকা আলাদা করা খুব কঠিন। ননমেটাবলিক ম্যানিটল, সরবিটল এবং পিইজির সাথে প্রাথমিক অসমোটিক স্ট্রেসের বৃদ্ধি ট্যাক্সাস চিনেনসিস সেল কালচারে প্যাক্লিট্যাক্সেল সঞ্চয়ন, প্যানাক্স নোটোগিনসেং সেল কালচারে স্যাপোনিন এবং পলিস্যাকারাইড জমে এবং ইলিউথেরোসাইডস জমে উন্নতি করেছে। et al. 2001; Shohael et al. 2006)। তাদের ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে কার্বোহাইড্রেট ঘনত্ব এবং অসমোটিক স্ট্রেসের প্রভাবগুলি উদ্ভিদ প্রজাতি এবং গৌণ বিপাক অনুসারে আলাদা ছিল।

বর্তমান অধ্যয়নের উদ্দেশ্য কোষের বৃদ্ধির উপর সুক্রোজ, ম্যানিটল, পিইজি, এবং NaCl-এর অসমোটিক প্রভাবের উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করা হয়েছে এবং PeGs জৈব সংশ্লেষণেCistanche deserticolaসেল সাসপেনশন সংস্কৃতি। সাসপেনশন সংস্কৃতিতে PAL ক্রিয়াকলাপ প্রাথমিক অসমোটিক এজেন্টগুলির বিভিন্ন সংমিশ্রণের অধীনে তদন্ত করা হয়েছিল এবং অসমোটিক স্ট্রেস বাড়িয়ে উন্নত PeGs সঞ্চয়নের সম্ভাব্য প্রক্রিয়া নিয়ে আলোচনা করা হয়েছে।

উপকরণ এবং পদ্ধতিসমূহ

উদ্ভিদ উপকরণ এবং কলাস আনয়ন

এর বীজCistanche deserticolaওয়াইসি মা চীনের জিনজিয়াং প্রদেশের মরুভূমি এলাকা থেকে সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং ব্যবহারের আগে 4C এ সংরক্ষণ করা হয়েছিল। ইন্সটিটিউট অফ বোটানি, চাইনিজ একাডেমি অফ সায়েন্সেস, পিআর চায়না-এর রেফারেন্স মানগুলির সাথে তুলনা করে বোটানিকাল পরিচয় নিশ্চিত করা হয়েছিল। 30 সেকেন্ডের জন্য 70 শতাংশ ইথানলে ডুবিয়ে বীজগুলিকে জীবাণুমুক্ত করা হয়েছিল, তারপর 20 মিনিটের জন্য জলে 5.4 শতাংশ সোডিয়াম হাইপোক্লোরাইটের 20 শতাংশ জলীয় দ্রবণে ডুবিয়ে রাখা হয়েছিল, তারপরে জীবাণুমুক্ত পাতিত জল দিয়ে তিনটি ধুয়ে ফেলা হয়েছিল। ক্যালি পৃষ্ঠের জীবাণুমুক্ত বীজ থেকে প্ররোচিত হয়েছিলCistanche deserticolaMS (Murashige and Skoog 1962) মাধ্যম 1 দিয়ে পরিপূরক। }BA), 0.25 মিলিগ্রাম l–1 2, 4-ডিক্লোরোফেনক্সাইসেটিক অ্যাসিড (2, 4-D), 6 gl–1 আগর (ফাইটোটেকনোলজি ল্যাবরেটরিজটিএম, পণ্য আইডি: A181) এবং 30 gl–1 সুক্রোজ 60 দিনের জন্য একটি গ্রোথ ক্যাবিনেটে 25C তাপমাত্রায় অন্ধকারে। বীজ বিস্ফোরণ থেকে উদ্ভূত কলাস কালচারগুলি পরবর্তীতে 30 দিনের ব্যবধানে উপরের কঠিন মাধ্যমের উপসংস্কৃতি করা হয়েছিল (চেং এট আল। 2005a)।

সেল সাসপেনশন কালচার স্থাপন ও রক্ষণাবেক্ষণ

সাসপেনশন কলাস কালচার (3.0 গ্রাম তাজা ওজন) যা একটি 1,000 lm মেশ স্ক্রিনের মাধ্যমে ফিল্টার করা হয়েছিল এবং একটি 200 lm মেশ স্ক্রিনে ধরে রাখা হয়েছিল একটি 500-ml Erlenmeyer-এ সাবকালচার করা হয়েছিল উপরোক্ত তরল মাধ্যমের 100 মিলি ফ্লাস্কটি একটি রোটারি শেকারে 110 rpm-এ 25C তে অন্ধকারে 18 দিনের সাবকালচার ব্যবধানে। অটোক্লেভিংয়ের আগে মাঝারি pH 1 M NaOH বা 1 M HCl সহ 5.8 এ সামঞ্জস্য করা হয়েছিল। সাসপেনশন কলাস কালচারগুলি দশবার পরে উপসংস্কৃতি করা হয়েছিল নিম্নলিখিত পরীক্ষামূলক ফ্লাস্ক সংস্কৃতির জন্য ইনোকুলাম হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। সমস্ত ফ্লাস্ক পরীক্ষাগুলি 250 মিলি এরলেনমেয়ার ফ্লাস্কে সম্পাদিত হয়েছিল যাতে 50 মিলি তরল মাধ্যম থাকে 30 gl–1 সুক্রোজ এবং 1.5 গ্রাম তাজা ওজনের 18- দিন-পুরাতন কোষ সাসপেনশন কালচারের সাথে টিকা দেওয়া হয়। এই Erlenmeyer ফ্লাস্কগুলি অন্ধকারে 25C তাপমাত্রায় একটি ঘূর্ণমান শেকার (110 rpm) এ ইনকিউব করা হয়েছিল।

অসমোটিক স্ট্রেস পরীক্ষা

প্রাথমিক সুক্রোজ ঘনত্বের প্রভাব তদন্ত করতেকোষের বৃদ্ধি এবং PeGs জমে,Cistanche deserticolaসাসপেনশন কালচার 87.6 সহ এমএস মিডিয়ামে চাষ করা হয়েছিল,175.3, এবং 262.9 মিমি সুক্রোজ। অসমোটিক স্ট্রেস অবস্থার জন্য,Cistanche deserticolaসাসপেনশন কালচার এমএস-এ ইনকিউবেট করা হয়েছিল87.6 মিমি সুক্রোজ যুক্ত মাঝারি164.7 মিমি ম্যানিটল। অন্যান্য অসমোটিক এজেন্ট (PEG 4,000 এবংNaCl) এর অসমোলারিটির সমতুল্য যোগ করা হয়েছিল87.6 মিমি সুক্রোজ। অসমোটিক সমতুল্য ঘনত্বঅসমোটিক এজেন্টগুলির পরীক্ষামূলকভাবে PEG হিসাবে নির্ধারিত হয়েছিল4,000 যথাক্রমে 20 মিমি এবং NaCl 50 মিমি। ট্রিপ্লিকেট ফ্লাস্কগুলি সমস্ত পরীক্ষায় এবং সমস্ত মানগুলিতে ব্যবহৃত হয়েছিলট্রিপ্লিকেট ফ্লাস্ক ± SD এর উপায় ছিল।

বিশ্লেষণ

Cistanche deserticolaনিকন এএফএক্স-ডিএক্স লাইট মাইক্রোস্কোপ (নিকন, জাপান) দ্বারা 400· ম্যাগনিফিকেশনের অধীনে বিভিন্ন অসমোটিক স্ট্রেসের অধীনে সভ্য কোষগুলি পর্যবেক্ষণ করা হয়েছে। সংস্কৃতি মাধ্যমের অসমোলারিটি একটি বাষ্প চাপ অসমোমিটার (ফিস্ক ওয়ান-টেন অসমোমিটার, এমএ, ইউএসএ) দিয়ে পরিমাপ করা হয়েছিল। তাজা ওজন (FW) নির্ধারণের জন্য,Cistanche deserticolaঅতিরিক্ত জল অপসারণের জন্য কোষগুলিকে ফিল্টার পেপারে আলতো করে চাপানো হয়েছিল এবং ওজন করা হয়েছিল। পরবর্তীকালে, কোষগুলি 24 ঘন্টার জন্য 60C তাপমাত্রায় একটি চুলায় শুকানো হয়েছিল এবং শুকনো ওজন (DW) রেকর্ড করা হয়েছিল। অবশিষ্ট চিনির ঘনত্ব ফিনল এবং ঘনীভূত সালফিউরিক অ্যাসিড ব্যবহার করে, একটি মান হিসাবে গ্লুকোজ ব্যবহার করে নির্ধারিত হয়েছিল (ডুবোইস এট আল। 1956)।

40 kHz ফ্রিকোয়েন্সি এবং 100 W এর শক্তি সহ একটি অতিস্বনক ওয়াটার বাথ (KQ2200, Shanghai Cany Precision Instrument Co., Ltd, China) এ 60C তাপমাত্রায় 15 মিনিটের জন্য মিথানল সহ শুকনো কোষ থেকে PeGs বের করা হয়েছিল। পরিস্রাবণটি ঘনীভূত ছিল। এবং অবশিষ্টাংশ পাতিত জলে দ্রবীভূত হয় এবং তারপর একটি ম্যাক্রো রেটিকুলার রজন কলামের মধ্য দিয়ে যায় (AB-8, নানকাই বিশ্ববিদ্যালয়ের রাসায়নিক পণ্য, তিয়ানজিন, চীন)। মিথানল ইলুয়েট সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং একটি স্ট্যান্ডার্ড হিসাবে ইচিনাকোসাইড ব্যবহার করে মোট PeGs বিষয়বস্তু 333 এনএম এ পরীক্ষা করা হয়েছিল (Du এবং Liu 1993a; Du et al. 1993b)।

কোষের কার্যক্ষমতা 2, 3, 5- ট্রাইফেনাইল টেট্রাজোলিয়াম ক্লোরাইড (টিটিসি) (স্টেপনকাস এবং ল্যানফিয়ার 1967) হ্রাস দ্বারা অনুমান করা হয়েছিল। কার্যকারিতা সূচকটি তাজা টিস্যুর প্রতি গ্রাম পরিমাপ করা শোষণ হিসাবে সংজ্ঞায়িত করা হয়। PAL কার্যকলাপের সংকল্প Koukol এবং Conn (1961) এর পদ্ধতির উপর ভিত্তি করে ছিল। PAL কার্যকলাপের একটি একক (U) 0.01 এর শোষণ বৈচিত্র্যের পরিমাণ হিসাবে সংজ্ঞায়িত করা হয়।

ফলাফল এবং আলোচনা

কোষের সাসপেনশন সংস্কৃতিতে কোষের বৃদ্ধি এবং পেজি বায়োসিন্থেসিসের উপর প্রাথমিক সুক্রোজ ঘনত্বের প্রভাবCistanche deserticola.এর প্রতিক্রিয়াCistanche deserticola87.6 এবং 262.9 মিমি এর মধ্যে প্রাথমিক সুক্রোজ ঘনত্বের জন্য সেল সাসপেনশন কালচার পরীক্ষা করা হয়েছিল। চিত্র 1-এ দেখানো হয়েছে, 87.6 মিমি কম প্রাথমিক সুক্রোজ ঘনত্বে কোষগুলি দ্রুত বেড়েছে এবং জমা হয়েছে, এবং 262.9 মিমি উচ্চ প্রাথমিক সুক্রোজ ঘনত্বে কোষের বৃদ্ধি এবং PeGs সঞ্চয়ন স্পষ্টতই দমন করা হয়েছে। শুষ্ক ওজনের সাথে তাজা ওজনের অনুপাত কমে যায় যখন প্রাথমিক সুক্রোজ ঘনত্ব 262.9 মিমি থেকে 87.6 থেকে বেড়ে যায় (ডেটা দেখানো হয়নি)। সর্বাধিক শুষ্ক ওজন 15.9 gl–1 এবং PeGs সামগ্রী 20.7 mg g–1-DW 30 দিনে 175.3 মিমি প্রাথমিক সুক্রোজ ঘনত্বে প্রাপ্ত হয়েছিল যার মধ্যে অসমোলারিটি ছিল প্রায় 300 mOsm kg–1। মাইক্রোস্কোপিক পর্যবেক্ষণের অধীনে, কোষের দেয়ালগুলি তাদের সাইটোপ্লাজম থেকে 388 mOsm kg–1 এর সর্বোচ্চ অসমোটিক স্ট্রেস থেকে আলাদা করা হয়েছিল যেখানে একটি প্রাথমিক সুক্রোজ ঘনত্ব ছিল 262.9 মিমি (চিত্র 2), এবং সর্বোচ্চ অসমোটিক স্ট্রেস কোষের বিপাককে ব্যাহত করতে পারে এবং এর ফলে গুরুতর বৃদ্ধি দমন এবং PeGs জৈব সংশ্লেষণের পতন। টি. চিনেনসিস সাসপেনশন সেল কালচারের সাসপেনশন কালচারেও একই ধরনের ঘটনা পরিলক্ষিত হয়েছে এবং প্যাক্লিট্যাক্সেল উৎপাদনের জন্য সর্বোত্তম সুক্রোজ ঘনত্ব ছিল 175.3 মিমি (কিম এট আল। 2001)। যাইহোক, 204.5 মিমি প্রাথমিক সুক্রোজ ঘনত্ব ই. সেসিলিফ্লোরাস কোষের সংস্কৃতির বৃদ্ধির জন্য উপকারী ছিল। উচ্চতর সুক্রোজ ঘনত্ব 262.9 মিমি এলিউথেরোসাইডস, ফেনল, এবং ফ্ল্যাভোনয়েডের জৈব সংশ্লেষণকে এলিউথেরোকোকাস সংস্কৃতিতে উন্নত করে (শোহেল এট আল। 2006)। এটা স্পষ্ট যে প্রাথমিক সুক্রোজ ঘনত্ব উদ্ভিদ কোষের সংস্কৃতির বৃদ্ধি এবং গৌণ বিপাক জমে গুরুত্বপূর্ণ এবং এর প্রভাব একটি নির্দিষ্ট কোষ লাইনের সাথে সম্পর্কিত।

C. deserticola এর কোষ সাসপেনশন কালচারে কোষের বৃদ্ধি এবং PeGs জৈবসংশ্লেষণের উপর বিভিন্ন অসমোটিক এজেন্টের প্রভাব

কোষ সাসপেনশন সংস্কৃতিতে PeGs জৈবসংশ্লেষণে বিপাকীয় সুক্রোজ এবং অন্যান্য অ-বিপাকীয় রাসায়নিক সাবস্ট্রেটের অসমোটিক ভূমিকা বোঝার জন্যCistanche deserticola, ননমেটাবলিক অসমোটিক এজেন্ট (ম্যানিটল, পিইজি, এবং NaCl) এর সাথে মিলিত সুক্রোজ ব্যবহার করে একটি সিরিজ পরীক্ষা করা হয়েছিল। এই পরীক্ষাগুলিতে, 164.7 mM mannitol, 20 mM PEG, এবং 50 mM NaCl 87.6 mM সুক্রোজ ধারণকারী মাঝারিতে যোগ করা হয়েছিল এবং প্রাথমিক অসমোলারিটি প্রায় 300 mOsm kg–1 তৈরি করেছিল, যা m53 m.53 এর সাথে তুলনীয় একটি সমতুল্য অসমোটিক অবস্থা ছিল। সুক্রোজ

চিত্র 3a, b-তে দেখানো হয়েছে, ম্যানিটল (নন-মেটাবলিক সুগার অসমোটিক এজেন্ট) এবং পিইজি (অ-ভেদ্য অসমোটিক এজেন্ট) যোগ করা কোষের বৃদ্ধির হারকে কিছুটা বাধা দেয় কিন্তু উল্লেখযোগ্যভাবে পেজির জৈবসংশ্লেষণকে বাড়িয়ে তোলেCistanche deserticolaসেল সাসপেনশন সংস্কৃতি। সর্বাধিক PeGs বিষয়বস্তু যথাক্রমে 26.9 এবং 23.8 mg g–1-DW প্রাপ্ত হয়েছিল, 21 তম দিনে যখন কোষগুলি 87.6 মিমি সুক্রোজের সংমিশ্রণে 164.7 mM ম্যানিটল (303 mOsm kg–1) অথবা 20 mM PEG (299 mOsm kg–1)। পেজির পরিমাণ এর চেয়ে বেশি ছিলCistanche deserticola30 দিনে 175.3 মিমি প্রাথমিক সুক্রোজ ঘনত্বের সাথে এমএস তরল মাধ্যমে কোষের সংস্কৃতি বৃদ্ধি পায়। চিনি ধীরে ধীরে খাওয়া হয়েছিলCistanche deserticolaকোষ সংস্কৃতি, এবং তারপরে চিনি-প্ররোচিত অসমোটিক স্ট্রেস সেই অনুযায়ী নিচে নেমে গেছে (চিত্র 3c, d)। 175.3 মিমি প্রাথমিক সুক্রোজ ঘনত্ব সহ তরল মাধ্যমের অসমোটিক স্ট্রেস 280 থেকে 110 mOsm kg–1 এ নেমে আসে যখন কোষের সংস্কৃতিতে PeGs 9 তম দিনে জমা হতে শুরু করে এবং 30 দিনে তাদের সর্বোচ্চে পৌঁছায় (ডেটা দেখানো হয়নি)। নন-মেটাবলিক অসমোটিক এজেন্ট (ম্যানিটল এবং পিইজি) সেল কালচারের সময় সেবন করা হয়নি, যার ফলে তরল মাধ্যমের অসমোটিক স্ট্রেস 200 থেকে 280 mOsm kg–1 এর মধ্যে বজায় রাখা যায়, যা PeGs জৈব সংশ্লেষণের জন্য অনুকূল একটি অসমোটিক চাপ। এই ফলাফলগুলি দেখায় যে অসমোটিক স্ট্রেস নিজেই পেজি বায়োসিন্থেসিসের বৃদ্ধিতে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করেছিল।Cistanche deserticolaকোষ সংস্কৃতি।

ক্যাথারান্থাস রোজাস এবং প্যানাক্স জিনসেং (স্মিথ এট আল। 1987; উ এট আল। 2005) এর কোষ সংস্কৃতিতে যথাক্রমে NaCl এর সংযোজন ইন্ডোল অ্যালকালয়েড এবং স্যাপোনিন জৈব সংশ্লেষণের উন্নতির জন্য রিপোর্ট করা হয়েছিল, কিন্তু NaCl এর চিকিত্সা টি চিনেনের কোষের বৃদ্ধিকে দমন করে। যদিও প্যালিটাক্সেল জৈব সংশ্লেষণে কোন পার্থক্য দেখায় না (কিম এট আল। 2001)। অতএব, প্রতিটি ক্ষেত্রে একটি বিস্তারিত তদন্ত প্রয়োজন. 50 mM NaCl এর একটি অসমোটিক সমতুল্য যোগ করা কোষের বৃদ্ধি এবং PeGs জৈব সংশ্লেষণকে দমন করে। এই ফলাফলটি NaCl এর প্রবেশযোগ্য প্রকৃতির কারণে হতে পারে যা এই মরুভূমি উদ্ভিদ প্রজাতির কোষ সংস্কৃতির জন্য উপকারী নয় যা খরার চাপকে খুব ভালভাবে সহ্য করতে পারে।

চিত্র 3 কোষের বৃদ্ধিতে সুক্রোজ এবং অন্যান্য নন-মেটাবলিক আসমোটিক এজেন্টের সংমিশ্রণের প্রভাব (a), PeGs সঞ্চয়ন (b), চিনির ব্যবহার (c), এবং সি. ডেসার্টিকোলা কোষের মধ্যে অসমোটিক স্ট্রেস পরিবর্তন (d) সংস্কৃতি মান হল ট্রিপ্লিকেট ফ্লাস্ক ± SD এর উপায়

Cistanche deserticola এর কোষ সাসপেনশন সংস্কৃতিতে কোষের কার্যক্ষমতা এবং PAL কার্যকলাপের উপর বিভিন্ন অসমোটিক এজেন্টের প্রভাব

আমাদের পূর্ববর্তী গবেষণায় (চেং এট আল। 2005b, 2006), ইলিসিটর সংযোজন নাটকীয়ভাবে PeGs জৈবসংশ্লেষণকে উদ্দীপিত করেছেCistanche deserticolaকোষের সংস্কৃতি, এবং উদ্দীপনাটি PAL-এর বর্ধিত কার্যকলাপের সাথে সম্পর্কযুক্ত ছিল, PeGs বায়োসিন্থেসিসের প্রথম মূল এনজাইম (Hahlbrock and Grisebach 1979)। চিত্র 4-তে দেখানো হয়েছে, 87.6 মিমি সুক্রোজ ধারণকারী এমএস তরল মাধ্যমে অ-মেটাবলিক 164.7 মিমি ম্যানিটল বা 20 মিমি পিইজি যোগ করা কোষের কার্যক্ষমতা কিছুটা কমিয়ে দেয়, তবে উল্লেখযোগ্যভাবে বর্ধিত PAL কার্যকলাপ যা প্রাথমিক সুক্রোজ ঘনত্বের দ্বারা প্ররোচিত হওয়ার চেয়ে বেশি ছিল। 175.3 মিমি। উন্নত PeGs সঞ্চয়Cistanche deserticolaসেল সাসপেনশন কালচারগুলি অসমোটিক স্ট্রেস দ্বারা উদ্দীপিত PAL কার্যকলাপের বৃদ্ধির সাথে সম্পর্কিত ছিল। এমএস লিকুইড মিডিয়ামে 175.3 মিমি প্রাথমিক সুক্রোজ ঘনত্ব 15 দিনের মধ্যে কোষের কার্যক্ষমতা হ্রাস করে এবং 21 দিনের মধ্যে PAL কার্যকলাপকে বাধা দেয়। এক সময় চিনি খাওয়ার পর ক্রমবর্ধমানCistanche deserticolaকোষের সংস্কৃতি, উভয় কোষের কার্যক্ষমতা এবং সংস্কৃত কোষের PAL কার্যকলাপ বৃদ্ধি পায় এবং যথাক্রমে 24 এবং 30 দিনে তাদের সর্বোচ্চে পৌঁছেছে। পি. জিনসেং কোষের সংস্কৃতিতে স্যাপোনিন জৈবসংশ্লেষণ এবং সি. রোজাস কালচারড কোষে অ্যালকালয়েড জমার উন্নতির জন্যও অসমোটিক স্ট্রেস দ্বারা উন্নত PAL কার্যকলাপ পরিলক্ষিত হয়েছে (Godoy-Hernandez et al. 2000; Wu et al. 2005)। যাইহোক, 87.6 মিমি সুক্রোজ ধারণকারী এমএস তরল মাধ্যমে প্রবেশযোগ্য NaCl সংযোজন কোষের কার্যক্ষমতা হ্রাস করে এবং পুরো সংস্কৃতির সময়কালে PAL কার্যকলাপকে বাধা দেয়। ফলস্বরূপ, কোষের বৃদ্ধি এবং PeGs বায়োসিন্থেসিস উভয়ই স্পষ্টতই দমন করা হয়েছিল।

চিত্র 4 কোষের কার্যক্ষমতার তারতম্য (a) এবং PAL কার্যকলাপ (b) C. deserticola কোষের সংস্কৃতির মধ্যে বিভিন্ন অসমোটিক চাপের মধ্যেCistanche deserticolaসেল সংস্কৃতি. মান হল ট্রিপ্লিকেট ফ্লাস্ক ± SD এর উপায়

Cistanche deserticolaএটি একটি মরুভূমির প্রজাতি এবং ভিট্রো কোষ সংস্কৃতিতে একটি মরুভূমির প্রজাতির তদন্ত উদ্ভিদ শারীরবৃত্তি এবং পরিবেশগত অভিযোজন বোঝার জন্য নতুন চ্যালেঞ্জ এবং সুযোগ উপস্থাপন করেছে। এই সমীক্ষায়, আমরা একটি অসমোটিক স্ট্রেস-মিডিয়াটেড সিগন্যাল ট্রান্সডাকশন বায়োসিন্থেসিস পাথওয়ে অধ্যয়ন করার সম্ভাবনা সহ একটি সিস্টেম তৈরি করেছি, এবং সিস্টেমটি ব্যবহার করে পেজিগুলির বড় আকারের উত্পাদনের ভিত্তি সরবরাহ করেছিল।Cistanche deserticolaএকটি নতুন অসমোটিক স্ট্রেস-নিয়ন্ত্রিত কৌশলের মাধ্যমে কোষ সংস্কৃতি।

স্বীকৃতি

লেখকরা চাইনিজ একাডেমি অফ সায়েন্সেসের ইনোভেশন রিসার্চ প্রোগ্রাম থেকে আর্থিক সহায়তা স্বীকার করেছেন।

থেকে: 'অসমোটিক স্ট্রেস দ্বারা সিস্তানচে ডেজার্টিকোলার কোষ সংস্কৃতিতে ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইড বায়োসিন্থেসিস' চুন-ঝাও লিউ দ্বারা। শি-ইউ চেং

---উদ্ভিদ কোষ প্রতিনিধি (2008) 27:357–362 DOI 10.1007/s00299-007-0443-3

তথ্যসূত্র

চেং XY, Wei T, Guo B, Ni W, Liu CZ (2005a)Cistanche deserticolaসেল সাসপেনশন কালচার: ফেনিলেথানয়েড গ্লাইকোসাইড বায়োসিন্থেসিস এবং অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপ। প্রক্রিয়া বায়োকেম 40:3119–3124
চেং XY, Guo B, Zhou HY, Ni W, Liu CZ (2005b) বারবার এলিটেশন সেল সাসপেনশন কালচারে ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইড জমা হওয়াকে বাড়িয়ে তোলেCistanche deserticola. বায়োকেম ইঞ্জিঃ J 24:203–207
চেং XY, Zhou HY, Cui X, Ni W, Liu CZ (2006) chitosan elicitor দ্বারা Cistanche deserticola সেল সাসপেনশন সংস্কৃতিতে phenylethanoid glycosides biosynthesis এর উন্নতি। জে বায়োটেক 121:253–260
Du NS, Liu JL (1993a) ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইডের নির্ণয়Cistanche deserticolaম্যাক্রো রেটিকুলার রজন স্পেকট্রোফটোমেট্রি দ্বারা। Nat Prod Res Dev 5:30-33
Du NS, Wang H, Yi YH (1993b) থেকে ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইডের বিচ্ছিন্নতা এবং সনাক্তকরণCistanche deserticola. Nat Prod Res Dev 5:5-8
Dubois M, Gilles KA, Hamilton JK (1956) চিনি এবং সম্পর্কিত পদার্থ নির্ধারণের জন্য রঙিন পদ্ধতি। অ্যানাল কেম 28:350-357

Godoy-Hernandez GC, Vazquez-Flota FA, Loyola-Vargas VM (2000) একটি 14-l বায়োরিয়্যাক্টরে সংষ্কৃত অসমোটিকভাবে চাপযুক্ত ক্যাথারান্থাস রোজাস কোষের ট্রান্স-সিনামিক অ্যাসিডের এক্সপোজার অ্যালকালয়েড জমা বাড়ায়। Biotechnol Lett 22:921–925
হ্যালব্রক কে, গ্রিসবাচ এইচ (1979) লিগিন এবং ফ্ল্যাভোনয়েডের জৈব সংশ্লেষণে এনজাইমিক নিয়ন্ত্রণ। অ্যান রেভ প্ল্যান্ট ফিজিওল 30:105-130
কিম এসআই, চোই এইচকে, কিম জেএইচ (2001) ট্যাক্সাস চিনেনসিসের সাসপেনশন সেল সংস্কৃতিতে প্যাক্লিট্যাক্সেল উত্পাদনের উপর অসমোটিক চাপের প্রভাব। এনজাইম মাইক্রোব টেক 28:202-209
Koukol J, Conn EE (1961) হর্ডিয়াম ভালগারের ফেনিল্যালানাইন ডিমিনেজের সুগন্ধি এবং বৈশিষ্ট্যের বিপাক। J Biol Chem 236:2692–2698
লু এমসি (1998) এর প্রশমক প্রভাবের উপর অধ্যয়নCistanche deserticola.J Ethnopharmacol 59:161–165

Lu CT, Mei XG (2003) সেল সাসপেনশন কালচারে একটি ছত্রাক ইলিসিটর দ্বারা ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইড উৎপাদনের উন্নতিCistanche deserticola. বায়োটেকনোল লেট 25:1437–1439
মুরাশিগে টি, স্কুগ এফ (1962) তামাক টিস্যু কালচারের সাথে দ্রুত বৃদ্ধি এবং জৈব গবেষণার জন্য একটি সংশোধিত মাধ্যম। প্ল্যান্ট ফিজিওল 15:473–497
Ouyang J, Wang XD, Zhao B, Yuan XF, Wang YC (2003) এর বৃদ্ধিতে বিরল পৃথিবীর উপাদানগুলির প্রভাবCistanche deserticolaকোষ এবং phenylethanoid glycosides উত্পাদন. জে বায়োটেকনোল 102:129-134
Shohael AM, Hakrabarty D, Ali MB, Yu KW, Hahn EJ, Lee HL, Paek KY (2006) সুক্রোজ-প্ররোচিত অসমোটিক স্ট্রেসের প্রতিক্রিয়ায় এলিউথেরোকোকাস সেসিলিফ্লোরাসের ভ্রূণজনিত সংস্কৃতিতে এলিউথেরোসাইড উৎপাদনের বৃদ্ধি। প্রক্রিয়া বায়োকেম 41:512-518
Smith JL, Smart NJ, Kurd WGW, Misawa M (1987) জৈব এবং অজৈব যৌগের ব্যবহার ক্যাথারানথাস রোজাস (L.) ডন সেল সাসপেনশন কালচারে ইনডোল অ্যালকালয়েডের জমে থাকা বাড়ানোর জন্য। J Exp Bot 38:1507–1511
Steponkus PL, Lanphear FO (1967) ঠান্ডা আঘাত নির্ধারণের জন্য ট্রাইফেনাইল টেট্রাজোলিয়াম ক্লোরাইড পদ্ধতির পরিশোধন। Plant Physiol 42:1423–1426Wang HQ, Wu JT, Zhong JJ (1999) সুক্রোজ খাওয়ানোর কৌশল দ্বারা ট্যাক্সাস চিনেনসিসের সাসপেনশন কালচারে ট্যাক্সেন উৎপাদনের উল্লেখযোগ্য উন্নতি। প্রক্রিয়া বায়োকেম 35:479-483
Wang XW, Jiang XY, Wu LY, Wang XF (2001) এর গ্লাইকোসাইডের স্ক্যাভেঞ্জিং প্রভাবCistanche deserticolaফ্রি র্যাডিকেল এবং ভিট্রোতে OH-প্ররোচিত DNA ক্ষতির বিরুদ্ধে এর সুরক্ষার উপর। চিন ফার্ম জে 36:29-31
Wu JY, Wong K, Ho KP, Zhou LG (2005) অসমোটিক স্ট্রেস এবং পুষ্টিকর খাওয়ানোর মাধ্যমে প্যানাক্স জিনসেং কোষ সংস্কৃতিতে স্যাপোনিন উৎপাদনের বর্ধিতকরণ। এনজাইম মাইক্রোব টেকনোল 36:133–138
Zhang YH, Zhong JJ, Yu JT (1995) প্যানাক্স নোটোজিনসেং-এর সাসপেনশন সংস্কৃতিতে কোষের বৃদ্ধি এবং জিনসেং স্যাপোনিন এবং পলিস্যাকারাইডের উৎপাদনের উপর অসমোটিক চাপের প্রভাব। বায়োটেকনোল লেট 17:1347–1350
Zong GZ, He W, Wu GL, Chen LH (1996) এর মধ্যে তুলনাCistanche deserticolaYC Ma এবং Cistanche tubulosa (Scheak) কিছু ফার্মাকোলজিক্যাল কার্যক্রম. ট্রেডিট চিন মেড জে 21:436–438