ABST′ACT

উদ্দেশ্য: সাধারণ কিনা তা স্পষ্ট করাcistanosides(GCs) উন্নত করেজ্ঞানীয় কর্মহীনতানির্দিষ্ট এন্ড্রোজেন রিসেপ্টর (AＲ) মধ্যস্থতা করে দ্রুত বার্ধক্যযুক্ত ইঁদুর (SAMP8)সিনাপটিক প্রোটিনের প্রকাশের নিয়ন্ত্রণ． 

পদ্ধতি: মোট 76 7- মাস বয়সী পুরুষ SAMP8 ইঁদুরকে এলোমেলোভাবে মডেল গ্রুপ, GCs গ্রুপ, GCs + ফ্লুটামাইড (F) গ্রুপ, GCs + ফুলভেস্ট্র্যান্ট (ICI) গ্রুপ, F গ্রুপ এবং ICI গ্রুপে ভাগ করা হয়েছিল৷ প্রতিটি গ্রুপের ইঁদুরের শেখার এবং স্মৃতি ফাংশন মরিস ওয়াটার মেজ দিয়ে পরীক্ষা করা হয়েছিল। ওয়েস্টার্ন ব্লটিং এবং আরটি-পিসিআর পরীক্ষা করার জন্য ব্যবহার করা হয়েছিলসিনাপটোফিসিনের অভিব্যক্তি স্তর(SYN), পোস্টসিনাপটিক ঘনত্ব － 95 ( PSD － 95), এবং প্রতিটি গ্রুপে ইঁদুরের মস্তিষ্ক থেকে প্রাপ্ত নিউরোট্রফিক ফ্যাক্টর (BDNF)।

ফলাফল: GCs উল্লেখযোগ্যভাবে SAMP8 ইঁদুরের শেখার এবং জ্ঞানীয় ফাংশন উন্নত করেছে৷

GCsgroup-এর সাথে তুলনা করে, GCs + F গ্রুপ এবং GCs + ICI গ্রুপে ইঁদুরের শেখার এবং মেমরির কার্যকারিতা উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল৷ ওয়েস্টার্ন ব্লটিং এবং আরটি-পিসিআর ফলাফলগুলি দেখিয়েছে যে মডেল গ্রুপের তুলনায় BDNF, SYN, এবং PSD－95 এর অভিব্যক্তি স্তর GCs গ্রুপে প্রোটিন স্তর এবং জিন স্তরে উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে ( P ＜ 0． {{ 11}}5)। GCs + F এবং GCs + ICI গ্রুপে SYN এক্সপ্রেশন লেভেল বাড়ানো হয়েছিল, এবং BDNF এবং PSD －95 এর এক্সপ্রেশন লেভেল GCs + F এবং GCs + ICI গ্রুপে GCs গ্রুপের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে ( P ＜ 0． 05) .

উপসংহার: SAMP8 ইঁদুরে সিনাপটিকপ্লাস্টিসিটি বাড়ানোর জন্য GCগুলি বিশেষভাবে AＲ-এর মধ্যস্থতা করতে পারে, যা ফলস্বরূপ শেখার এবং জ্ঞানীয় কার্যকারিতা উন্নত করে৷

কীওয়ার্ড:সাধারণ cistanosides; অ্যান্ড্রোজেন রিসেপ্টর; সিনাপটিক প্লাস্টিকতা; SAMP8 ইঁদুর

Cistanche সম্পূরক জ্ঞানীয় ফাংশন উন্নতি খাদ্যতালিকাগত সম্পূরক PhGs75% Ech 30% আইন 12%

আলঝেইমার রোগ(AD) একটি সাধারণস্নায়বিক ডিজেনারেটিভ রোগ, চিকিৎসাগতভাবে প্রগতিশীল জ্ঞানীয় ফাংশন হ্রাস এবং মানসিক এবং মনস্তাত্ত্বিক অবস্থার পরিবর্তন দ্বারা চিহ্নিত করা হয় [1]। গবেষণায় দেখা গেছে যে পুরুষ AD রোগীদের টেস্টোস্টেরনের মাত্রা স্বাভাবিক পুরুষদের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে কম।

দ্যরোগীদের জ্ঞানীয় ফাংশনপরে বিভিন্ন ডিগ্রী উন্নত করা হয়েছেকেটোন প্রতিস্থাপন থেরাপি[২], যা ইঙ্গিত করে যে বয়স-সম্পর্কিত অ্যান্ড্রোজেনের মাত্রা কমে যাওয়া বয়স্ক পুরুষদের মধ্যে AD এর ঝুঁকির কারণ হতে পারে।

Cistanche deserticola মোট গ্লাইকোসাইড (সাধারণ cistanosides, GCs) হল Cistanche deserticola-এর অন্যতম প্রধান নির্যাস, যা এডি-সম্পর্কিত শিক্ষার উন্নতি করতে পারে এবংজ্ঞানীয় কর্মহীনতা[৩]। তদতিরিক্ত, গ্যাভেজ দ্বারা জিসিগুলির প্রশাসন প্রাণীদের মধ্যে টেস্টোস্টেরনের মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি করে [৪]। GC-এরও ইয়াংকে উন্নীত করার কাজ আছে এবং তা প্রয়োগ করতে পারে

অ্যান্ড্রোজেনের মতো ফার্মাকোডাইনামিক প্রভাব। পূর্ববর্তী গবেষণায় রিপোর্ট করা হয়েছে যে টেস্টোস্টেরন AD মডেলের প্রাণীদের শেখার এবং জ্ঞানীয় ফাংশনগুলিকে উন্নত করতে পারে এবং এই প্রক্রিয়াটি নির্দিষ্ট অ্যান্ড্রোজেন রিসেপ্টর (এন্ড্রোজেন রিসেপ্টর, এআর)-মধ্যস্থ [5] এর উপর নির্ভর করে।

এটা সুপরিচিত যে AD রোগীদের জ্ঞানীয় কর্মহীনতা সিনাপটিক প্লাস্টিসিটির সাথে ঘনিষ্ঠভাবে সম্পর্কিত। যাইহোক, নির্দিষ্ট প্রক্রিয়া যার মাধ্যমে GC গুলি সিনাপটিক প্লাস্টিসিটি নিয়ন্ত্রণ করে এবং এর ফলে শেখার এবং জ্ঞানীয় ফাংশনগুলিকে উন্নত করে তা এখনও অস্পষ্ট। এই অধ্যয়নের লক্ষ্য ছিল GCs সিনাপটিক প্লাস্টিসিটি প্রভাবিত করতে নির্দিষ্ট ARＲ মধ্যস্থতা করে কিনা তা অন্বেষণ করা এবং এর ফলে AD-তে শেখার এবং জ্ঞানীয় কার্যকারিতা উন্নত করা।

1 উপাদান এবং পদ্ধতি

1. 1 পরীক্ষামূলক প্রাণী এবং সরঞ্জাম

পুরুষ 3-মাস বয়সী SAMP8 ইঁদুরগুলি পিকিং ইউনিভার্সিটি স্কুল অফ মেডিসিন (SCXK [বেইজিং] 2016-0010) থেকে কেনা হয়েছিল এবং তাদের 7 মাস বয়স পর্যন্ত বড় করা হয়েছিল। (24 ± 1) ডিগ্রী এবং একটি পরিষ্কার পরিবেশে প্রাণী রাখা হয়েছিল

প্রাণীদের প্রাকৃতিক আলো সরবরাহ করা হয়েছিল, এবং খাবার ও জলের বিনামূল্যে অ্যাক্সেস দেওয়া হয়েছিল এবং পরীক্ষামূলক প্রাণীদের ব্যবহারের জন্য 3R নীতি অনুসারে মানবিক যত্ন দেওয়া হয়েছিল। এই পরীক্ষামূলক অধ্যয়নটি বাওটু মেডিকেল কলেজের (বাওতু মেডিকেল কলেজ নং 20201102) পরীক্ষামূলক প্রাণী নীতিশাস্ত্র কমিটি দ্বারা অনুমোদিত হয়েছে।

পরীক্ষার প্রধান বিকারকগুলি হল:Cistanche deserticola মোট গ্লাইকোসাইড(GCs, Xi'an Ciyuan Biological Co., Ltd.); অ্যান্ড্রোজেন রিসেপ্টর বিরোধী-ফ্লুটামাইড (সিগমা কোম্পানি, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র); ইস্ট্রোজেন রিসেপ্টর বিরোধী-ফুলভেস্ট্র্যান্ট (ICI 182780, USA) Med Chem Express); খরগোশের অ্যান্টি-মাউস বিডিএনএফ অ্যান্টিবডি,

PSD-95 অ্যান্টিবডি, SYN অ্যান্টিবডি, -অ্যাক্টিন অ্যান্টিবডি (মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রের প্রোটিনটেক কোম্পানি); প্রোটিন ইলেক্ট্রোফোরেসিস সলিউশন, প্রোটিন ট্রান্সফার সলিউশন, টেমড, অ্যাক্রিলামাইড বাফার, অ্যামোনিয়াম পারসালফেট, ট্রিস (বেইজিং সোলেবাও টেকনোলজি কোং, লিমিটেড); cDNA সংশ্লেষণ কিট, ট্যালেন্ট ফ্লুরোসেন্স পরিমাণগত সনাক্তকরণ

রিএজেন্ট কিট (Tiangen Biochemical Technology Co., Ltd.), ইত্যাদি। প্রধান পরীক্ষামূলক সরঞ্জামগুলির মধ্যে রয়েছে একটি উল্লম্ব প্লেট ইলেক্ট্রোফোরেসিস ট্যাঙ্ক, ইলেক্ট্রোফোরেসিস যন্ত্রপাতি, স্থানান্তর ট্যাঙ্ক, ডেসটেনিং শেকার (বেইজিং লিউই বায়োটেকনোলজি কোং, লিমিটেড), প্রোটিন জেল ইমেজিং বিশ্লেষণ সিস্টেম। (Shanghai Tanon Technology Co., Ltd.), রিয়েল-টাইম ফ্লুরোসেন্স কোয়ান্টিটেটিভ PCR ইন্সট্রুমেন্ট (USA Roche) ইত্যাদি।

1. 2 গ্রুপিং এবং প্রশাসন

খাওয়ানোর প্রক্রিয়া চলাকালীন দুটি ইঁদুর স্বাভাবিকভাবেই মারা গিয়েছিল, এবং বাকি 78টি ইঁদুরকে এলোমেলোভাবে মডেল গ্রুপ, GCs গ্রুপ, GCs + ফ্লুটামাইড (F) গ্রুপ, GCs + ফুলভেস্ট্র্যান্ট (ICI) গ্রুপ, F গ্রুপ, ICI গ্রুপে ভাগ করা হয়েছিল।

প্রতিটি 13টি প্রাণীর দল। মডেল গ্রুপ, এফ গ্রুপ, এবং আইসিআই গ্রুপ ব্যতীত, অন্যান্য গোষ্ঠীগুলিকে 30 দিনের জন্য 50 মিলিগ্রাম/(কেজি·ডি) ডোজে ক্রমাগত GC দেওয়া হয়েছিল।

GCs প্রশাসনের 24 তম দিন থেকে, GCs + ফ্লুটামাইড (F) গ্রুপ এবং GCs + fulvestrant (ICI) গ্রুপকে GCগুলি পরিচালনা করার 30 মিনিট পরে F (5 mg/kg/d) এর ইন্ট্রাপেরিটোনিয়াল ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল। গ্যাভেজ দ্বারা ), ICI (1 mg/kg/d), 7 দিনের জন্য একটানা ইনজেকশন। ইঁদুরের সর্বোচ্চ গ্যাস্ট্রিক ভলিউম 0. 5 মিলি, 1 সময়/ডি নিশ্চিত করতে ডোজ ঘনত্ব সামঞ্জস্য করুন।

1. 3 মরিস জল গোলকধাঁধা পরীক্ষা

ইঁদুরগুলো একদিন আগেই পানির পরিবেশের সাথে খাপ খাইয়ে নেয়। মরিস জলের গোলকধাঁধা 6 দিন ধরে চলেছিল। প্রথম 5 দিন ছিল পজিশনিং এবং নেভিগেশন পরীক্ষা। ইঁদুরগুলিকে প্রতিদিন একবার চারটি চতুর্ভুজের প্রতিটিতে 1 মিনিটের জন্য প্রশিক্ষণ দেওয়া হয়েছিল। প্রতিটি প্রশিক্ষণের ব্যবধান ছিল 15 মিনিট, এবং রেকর্ড একই সময়ে রেকর্ড করা হয়েছিল। প্রাণী পজিশনিং এবং নেভিগেশন পরীক্ষার এস্কেপ লেটেন্সি; 6 তম দিনে, জল থেকে প্ল্যাটফর্মটি সরান এবং একটি মহাকাশ অনুসন্ধান পরীক্ষা পরিচালনা করুন। প্ল্যাটফর্ম ক্রসিংয়ের সংখ্যা এবং মাউসের লক্ষ্য চতুর্ভুজে ব্যয় করা সময়ের শতাংশ রেকর্ড করুন। লক্ষ্য চতুর্ভুজ) এবং স্থানিক অন্বেষণ সুইমিং ট্র্যাজেক্টোরি (স্পেশিয়ালপ্রোব টেস্টের সাঁতারের গতিপথ) এবং অন্যান্য সূচক।

1. 4 পশ্চিমী দাগ সনাক্তকরণ

SYN, PSD-95, এবং BDNF সিন্যাপস-সম্পর্কিত প্রোটিনের অভিব্যক্তি। মরিস জলের গোলকধাঁধা পরীক্ষার পরে, সমস্ত ইঁদুরকে নিয়মিত চেতনানাশক করা হয়েছিল, তাদের মাথা কেটে ফেলা হয়েছিল, তাদের মস্তিষ্ক সরানো হয়েছিল, এবং তাদের হিপ্পোক্যাম্পি খুলে ফেলা হয়েছিল। হিপোক্যাম্পাল টিস্যু প্রোটিন লাইজড ছিল, 4 ডিগ্রীতে আল্ট্রাসাউন্ড দ্বারা ব্যাহত হয়, 30 মিনিটের জন্য বরফের উপর রেখে দেওয়া হয় এবং 12,000 r/min 4 ডিগ্রিতে 15 মিনিটের জন্য সেন্ট্রিফিউজ করা হয়। সুপারনাট্যান্ট নেওয়া হয়েছিল, এবং বিসিএ পদ্ধতি ব্যবহার করে প্রোটিনের ঘনত্ব পরিমাপ করা হয়েছিল। প্রোটিন লোড করার পরে, 80 V এর একটি ধ্রুবক ভোল্টেজে স্ট্যাকিং জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস, 120 V এর একটি ধ্রুবক ভোল্টেজে বিচ্ছেদ জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস এবং 300 mA এর একটি ধ্রুবক প্রবাহে ভেজা স্থানান্তর সঞ্চালন করুন; PVDF ঝিল্লি বের করে নিন, ঘরের তাপমাত্রায় 80 মিনিটের জন্য 5% স্কিম মিল্ক দিয়ে ব্লক করুন এবং TBST দিয়ে ঝিল্লি তিনবার ধুয়ে ফেলুন। 15 মিনিট/সময়, প্রাথমিক অ্যান্টিবডি 4 ডিগ্রীতে কাঁপানো টেবিলে রাতারাতি ইনকিউবেট করা হয়েছিল; পরের দিন, ঝিল্লি টিবিএসটি দিয়ে 3 বার ধুয়ে নেওয়া হয়েছিল।

15 মিনিট/সময়, সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডিটি ঘরের তাপমাত্রায় 2 ঘন্টার জন্য ইনকিউবেট করা হয়েছিল, তারপরে ইসিএল কালার ডেভেলপমেন্ট করা হয়েছিল, এবং ইমেজিং একটি কেমিলুমিনেসেন্স ইমেজিং সিস্টেমের সাথে সঞ্চালিত হয়েছিল। -অ্যাক্টিন অভ্যন্তরীণ রেফারেন্স হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল, এবং ব্যান্ডের অপটিক্যাল ঘনত্বের মান চিত্র জে সফ্টওয়্যার ব্যবহার করে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।

1. 5ＲRT-PCRＲডিটেকশন

SYN, PSD-95, এবং BDNF-এর mRNA এক্সপ্রেশন হিপ্পোক্যাম্পাল টিস্যু টোটাল RNA থেকে Trizol নিষ্কাশন পদ্ধতি অনুসারে বের করা হয়েছিল, এবং cDNA উল্টো প্রতিলিপির পরে তৈরি হয়েছিল। প্রতিভা ফ্লুরোসেন্স পরিমাণগত সনাক্তকরণ কিট আপেক্ষিক ফ্লুরোসেন্স পরিমাণগত সনাক্তকরণের জন্য ব্যবহৃত হয়েছিল। পরীক্ষাটি তিনবার পুনরাবৃত্তি করা হয়েছিল, এবং ফলাফলগুলিকে 2 - ΔΔCT-এ রূপান্তরিত করা হয়েছিল। মাউস-অ্যাক্টিন, SYN, PSD-95, এবং BDNF প্রাইমারগুলি সাংহাই সানগন কোম্পানি দ্বারা ডিজাইন করা হয়েছে, এবং প্রাইমারের ক্রমগুলি সারণি 1 এ দেখানো হয়েছে।

1. 6 পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণ

SPSS 25 এর মাধ্যমে। 0 প্রক্রিয়াকরণের জন্য পরিসংখ্যানগত সফ্টওয়্যার, গ্রাফপ্যাড প্রিজম 8 সফ্টওয়্যার পরিসংখ্যানগত গ্রাফ আঁকার জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল, এবং একাধিক নমুনার পেয়ারওয়াইজ উপায়ে তুলনা করার জন্য একমুখী ANOVA ব্যবহার করা হয়েছিল। পি < 0। 05 মানে পার্থক্য পরিসংখ্যানগতভাবে তাৎপর্যপূর্ণ।