ক্রস-রিঅ্যাকটিভ, ন্যাচারাল আইজিজি রিকগনিজিং এল. মেজর প্রোমোট প্যারাসাইট ইন্টারনালাইজেশন ডেনড্রাইটিক কোষ দ্বারা এবং প্রতিরক্ষামূলক অনাক্রম্যতা প্রচার করে

বিমূর্ত

মূল বার্তা

• বিভিন্ন জেনেটিকালি পরিবর্তিত ইঁদুর ব্যবহার করে, আমরা দেখেছি যে এই অ্যান্টিবডিগুলি IgG হতে পারে, শুধুমাত্র IgM নয়।

কীওয়ার্ড

লেশম্যানিয়া প্রধান · ডেনড্রাইটিক কোষ · বি কোষ · প্রাকৃতিক আইজিজি

ভূমিকা

Leishmania spp-এর সংক্রমণ। স্থানীয় দেশগুলিতে একটি বড় বোঝা প্রতিনিধিত্ব করে। রোগের প্রকাশ স্ব-সীমিত ত্বকের লেশম্যানিয়াসিস থেকে ছড়িয়ে পড়া, পুনরাবৃত্ত, শ্লেষ্মা এবং ভিসারাল রোগ পর্যন্ত। চিকিত্সা না করা, ভিসারাল লেশম্যানিয়াসিস হোস্টের জীবনের জন্য একটি গুরুতর হুমকি। একটি ভ্যাকসিন এখনও বিদ্যমান নেই. নিরাময় এবং আজীবনঅনাক্রম্যতাএই গুরুত্বপূর্ণ অন্তঃকোষীয় প্যাথোজেনের বিরুদ্ধে IFN-উৎপাদনকারী Th1/Tc1 কোষের বিকাশের উপর নির্ভর করে, যেখানে পরজীবী স্থায়ীত্ব এবং রোগের অগ্রগতি Th2 কোষের আধিপত্য, নিয়ন্ত্রক টি কোষ এবং/অথবা Th17 প্রতিক্রিয়াগুলির সাথে সম্পর্কিত। IFN রিলিজ NO উত্পাদনের দিকে পরিচালিত করে যা পরজীবীগুলিকে নির্মূল করে।প্রতিরক্ষামূলক অনাক্রম্যতাসংক্রামিত ডেনড্রাইটিক কোষ (ডিসি) দ্বারা প্ররোচিত হয়। স্যান্ডফ্লাই দ্বারা লেশম্যানিয়া মেজর ত্বকে ইনোকুলেশন করার পরে, প্রোমাস্টিগোট পরজীবীর জীবন ফর্মগুলি ত্বক-নিবাসী ম্যাক্রোফেজ (MΦ) এবং নিউট্রোফিল দ্বারা গৃহীত হয়। MΦ-এর মধ্যে, পরজীবীরা নন-ফ্ল্যাজেলেটেড অ্যামাস্টিগোট লাইফ ফর্মে রূপান্তরিত হয় এবং প্রতিলিপি তৈরি করে। পরে, মুক্তি পাওয়া অ্যামাস্টিগোটগুলি অন্যান্য হোস্ট কোষ যেমন ডিসি দ্বারা গ্রহণ করা হয়। সংক্রমিত ডিসি পরজীবী অ্যান্টিজেন প্রক্রিয়া করে এবং লিম্ফ নোড এবং প্রাইম টি কোষে স্থানান্তরিত করে। IL-12 এর মুক্তি, সেইসাথে সংক্রামিত DC থেকে অন্যান্য সাইটোকাইন, পরজীবী-নির্দিষ্ট টি কোষের Th1/Tc1 শিক্ষাকে নির্দেশ করে।

যেখানে MΦ প্যারাসাইট গ্রহণের জন্য কমপ্লিমেন্ট রিসেপ্টর (CR)3 ব্যবহার করে, DC-তে, Fc RI/III এর জন্য দায়ীপরজীবীঅভ্যন্তরীণকরণ. মজার বিষয় হল, প্রথম দিকে, CR3-সংশ্লিষ্ট পরজীবী গ্রহণের ফলে সংক্রামিত MΦ নীরব হয়ে যায়, যেখানে প্রতিষ্ঠিত সংক্রমণে, MΦ দ্বারা অ্যামাস্টিগোটস-এর Fc রিমিডিয়েটেড গ্রহণ Th2/Treg বিকাশে প্রদাহ-বিরোধী IL-10 উৎপাদনকে প্ররোচিত করে। এবং পরজীবী অধ্যবসায়. DC-তে Fc R-মিডিয়াটেড প্যারাসাইট গ্রহণ, বিপরীতে, কোষ সক্রিয়করণ, CD4 T কোষ প্রাইমিং এবং অ্যান্টিজেন ক্রস-প্রেজেন্টেশনকে প্ররোচিত করে। অতএব, পরজীবীর বিরুদ্ধে সুরক্ষা বিকাশের জন্য ডিসি দ্বারা অ্যান্টিবডি-মধ্যস্থিত পরজীবী গ্রহণ করা গুরুত্বপূর্ণ। অ্যান্টি-লেইশম্যানিয়া আইজিজি উত্পাদন এইভাবে লেশম্যানিয়া-নির্দিষ্ট Th1/Tc1 কোষগুলির দক্ষ (ক্রস-) প্রাইমিংয়ের জন্য একটি পূর্বশর্ত। সারিবদ্ধভাবে, বি কোষের অনুপস্থিতিতে, রোগের বিকাশ বৃহত্তর ক্ষতের পরিমাণ, উচ্চ পরজীবী বোঝা, বিলম্বিত টি কোষ প্রাইমিং এবং IFNΓ উত্পাদন হ্রাসের সাথে আরও গুরুতর ছিল। পূর্বে, আমরা দেখিয়েছি যে লেশম্যানিয়া-নির্দিষ্ট আইজিজি ক্ষতগুলিতে ডিসি জমা হওয়ার সময় সেরাতে উপস্থিত ছিল।

সংক্রমিত ডিসি দ্বারা বি সেল প্রাইমিংয়ের অনুপস্থিতিতে পরজীবীর প্রাথমিক বি কোষের প্রতিক্রিয়া কীভাবে বিকাশ লাভ করে তা একটি উন্মুক্ত প্রশ্ন থেকে যায়। তথাকথিত প্রাকৃতিক অ্যান্টিবডি লিশম্যানিয়া এসপিপিকে স্বীকৃতি দেয়। তাড়াতাড়ি সুবিধা দিতে পারেপরজীবী অভ্যন্তরীণকরণডিসি দ্বারা। উপরন্তু, যেহেতু পরজীবী ঝিল্লিতে অ্যাপোপটোটিক দেহের অনুরূপ ফসফ্যাটিডিলসারিন থাকে,ক্রস প্রতিক্রিয়াশীলঅ্যান্টিবডি ভূমিকা পালন করতে পারে। বর্তমান সমীক্ষায়, আমরা মূল্যায়ন করেছি যে অ্যান্টি-ফসফোলিপিড অ্যান্টিবডি উত্পন্ন হয়েছে, যেমন, অত্যধিক কোষের মৃত্যু বা প্রাকৃতিক IgG অপ্রতিরোধ্য প্রাণীদের মধ্যে উপস্থিত লেশম্যানিয়াকে স্বীকৃতি দেওয়ার সময় বি সেল এবং টি সেল প্রাইমিংকে উন্নীত করার জন্য প্যারাসাইট টেক ডিসিতে অবদান রাখে। আমরা দেখেছি যে মুরিন বা মানব সিরাম থেকে অ্যান্টি-ফসফোলিপিড অ্যান্টিবডি এবং সেইসাথে সাধারণ মাউস সিরাম (NMS) এর "প্রাকৃতিক আইজিজি" লেশম্যানিয়া প্যারাসাইটের সাথে আবদ্ধ হয়, যা প্রচারের জন্য যথেষ্ট।পরজীবীঅভ্যন্তরীণকরণডিসি দ্বারা এবং ভিভোতে আরও ভাল রোগের ফলাফল প্রচার করে।

উপাদান এবং পদ্ধতি

প্রাণী

ছয় থেকে আট সপ্তাহ বয়সী C57BL/6 ইঁদুর জানভিয়ার থেকে কেনা হয়েছিল। বি কোষের ঘাটতিযুক্ত µMT ইঁদুর উদারভাবে হ্যান্সজর্গ শিল্ড, ইমিউনোলজি ইনস্টিটিউট, ইউনিভার্সিটি মেডিকেল সেন্টার মেইনজ দ্বারা সরবরাহ করা হয়েছিল। IgGi এবং IgMi ইঁদুর (উভয় C57BL/6 ব্যাকগ্রাউন্ডে) আগে বর্ণনা করা হয়েছিল। সমস্ত প্রাণীকে নির্দিষ্ট প্যাথোজেন-মুক্ত (এসপিএফ) অবস্থার অধীনে জোহানেস গুটেনবার্গ বিশ্ববিদ্যালয়ের ট্রান্সলেশনাল অ্যানিমাল রিসার্চ সেন্টারে (টিএআরসি) রাখা হয়েছিল, মেইঞ্জ। সমস্ত পরীক্ষা-নিরীক্ষা অঞ্চল রাইনল্যান্ড-ফাল্জ-এর অ্যানিমাল কেয়ার অ্যান্ড ইউজ কমিটির অনুমোদিত লাইসেন্স নিয়ে করা হয়েছিল।

ভেষজ গবেষণা অনুসারে, এটি দেখানো হয়েছে যে সিস্টানচে এক ধরণের ছত্রাক যা বহু শতাব্দী ধরে ঐতিহ্যবাহী চীনা ওষুধে ব্যবহৃত হয়ে আসছে। এটি ছত্রাকের শুকনো ডালপালা এবং ডালপালা থেকে তৈরি করা হয়, যা এশিয়ার গ্রীষ্মমন্ডলীয় এবং উপক্রান্তীয় অঞ্চলে জন্মে। এটা সাধারণত ব্যবহার করা হয়অনাক্রম্যতা উন্নত করা, ক্লান্তি উপশম, এবং সর্দি এবং অন্যান্য সংক্রমণ চিকিত্সা.

গবেষণায় তা প্রমাণিত হয়েছেcistancheঅ্যান্টিবডিগুলির উত্পাদন বাড়াতে পারে, যা শরীরকে ভাইরাস এবং ব্যাকটেরিয়া মতো বিদেশী আক্রমণকারীদের বিরুদ্ধে লড়াই করতে সহায়তা করতে পারে। এটি টি কোষের সংখ্যা এবং ক্রিয়াকলাপ বাড়াতে দেখা গেছে, এক ধরণের শ্বেত রক্ত ​​​​কোষ যা ক্ষতিকারক আক্রমণকারীদের চিনতে এবং তাদের বিরুদ্ধে লড়াই করতে শরীরকে সহায়তা করার জন্য দায়ী।

এছাড়াও, গবেষণায় দেখা গেছে যে সিস্টানচে সর্দি, ফ্লু এবং অন্যান্য ভাইরাল সংক্রমণের তীব্রতা কমাতে পারে। এটি ভাইরাল বা ব্যাকটেরিয়া সংক্রমণ থেকে পুনরুদ্ধারের জন্য শরীরের জন্য যে সময় লাগে তা হ্রাস পাওয়া গেছে। cistanche নির্দিষ্ট ভাইরাস দ্বারা সৃষ্ট জ্বরের সময়কালও কমাতে পারে, সেইসাথে সেকেন্ডারি ইনফেকশন হওয়ার ঝুঁকি কমাতে পারে।

উপরন্তু,cistancheপ্রদাহ-বিরোধী বৈশিষ্ট্য রয়েছে বলে পরিচিত, যা নির্দিষ্ট রোগের সাথে যুক্ত প্রদাহ কমাতে পারে। গবেষণায় দেখা গেছে যে ডেনড্রোবিয়াম নির্দিষ্ট অ্যান্টিবায়োটিকের কার্যকারিতা উন্নত করতে সাহায্য করতে পারে।

জৈব Cistanche Sold Near Me-তে ক্লিক করুন

আরও তথ্যের জন্য প্লিজ আমাদের সাথে এখানে যোগাযোগ করুন:david.deng@wecistanche.com

সামগ্রিকভাবে, গবেষণা পরামর্শ দেয় যে cistanche একটি দরকারী চিকিত্সা হতে পারেউন্নতিঅনাক্রম্যতাএবং বিভিন্ন সংক্রমণ প্রতিরোধ. এটি শরীরের প্রাকৃতিক প্রতিরক্ষা উন্নত করতে সাহায্য করতে পারে, অসুস্থতার তীব্রতা এবং সময়কাল কমাতে পারে এবং এমনকি সেকেন্ডারি ইনফেকশন হওয়ার ঝুঁকিও কমাতে পারে।

পরজীবী এবং সংক্রমণ 

এল. মেজর ক্লোন VI (MHOM/IL/Friedlin) এর অ্যামাস্টিগোটস বা মেটাসাইক্লিক প্রোমাস্টিগোটগুলি পূর্বে বর্ণিত হিসাবে প্রস্তুত করা হয়েছিল। অ্যামাস্টিগোটগুলি আগে বর্ণিত হিসাবে BALB/c বা B কোষ-ঘাটতি µMT ইঁদুরের সংক্রামিত কান থেকে বিচ্ছিন্ন ছিল। বিচ্ছিন্ন পরজীবীগুলিকে 5 শতাংশ NMS, IMS, বা অ্যান্টি-PL দিয়ে 37 ডিগ্রিতে 10 মিনিটের জন্য অপসনাইজ করা হয়েছিল এবং ভিট্রো বা ভিভো সংক্রমণের আগে ধুয়ে ফেলা হয়েছিল।

সেরা, আইজিজি সমৃদ্ধকরণ, এবং পরজীবী বাঁধাই পরীক্ষা

সাধারণ মাউস সিরাম (NMS) নিষ্পাপ C57BL/6 ইঁদুর থেকে তৈরি করা হয়েছিল, যেখানে ইমিউন সিরাম (IS) নিরাময় করা ইঁদুর থেকে নেওয়া হয়েছিল যেগুলি 2 × 10L. মেজরের E5 মেটাসাইক্লিক প্রোমাস্টিগোট দ্বারা সংক্রামিত হয়েছিল। 6 সপ্তাহ পর্যন্ত। অ্যান্টিফসফোলিপিড অ্যান্টিবডি (পিএল) সেরাগুলি অ্যাপোপটোটিক থাইমোসাইটের সাথে বারবার টিকা দেওয়ার মাধ্যমে তৈরি হয়েছিল। সিরাম সংগ্রহের আগে, ফ্লো সাইটোমেট্রির মাধ্যমে বা গ্লাইকোপ্রোটিন-নির্দিষ্ট ELISA-তে অ্যাপোপটোটিক কোষের সাথে নির্দিষ্ট IgG বাইন্ডিং মূল্যায়ন করে ইমিউনাইজেশন সাফল্য যাচাই করা হয়েছিল। C57BL/6 ইঁদুরের গ্রুপগুলিকে ফ্রয়েডের সহায়ক (FA) উপস্থিতিতে রিকম্বিন্যান্ট 2-গ্লাইকোপ্রোটিন (2G) দিয়ে টিকা দেওয়া হয়েছিল; অ্যান্টি{12}G সমন্বিত সিরাম 4 সপ্তাহ পরে কাটা হয়েছিল। অ্যান্টি-লেশম্যানিয়া আইজিজি 5–6-সপ্তাহের চেয়ে বড় বা সমান প্রস্তুতকারকের প্রোটোকল অনুসরণ করে। IgG পরিশোধনের আগে সেরাকে -20 ডিগ্রিতে সংরক্ষণ করা হয়েছিল। বিশুদ্ধ IgG ব্যবহারের আগে PBS-এ 4 ডিগ্রি (0.8 mg/mL) সংরক্ষণ করা হয়েছিল।

নরমাল হিউম্যান সিরাম (এনএইচএস) স্বাস্থ্যকর নিয়ন্ত্রণ বিষয় থেকে ছিল এবং অ্যান্টি-লেশম্যানিয়া অ্যান্টিবডি ধারণকারী সিরাম মারাক্কো থেকে কিউটেনিয়াস লেশম্যানিয়াসিস (এলএম) রোগীদের কাছ থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল। অ্যান্টিফসফোলিপিড সিন্ড্রোম (পিএল) রোগীদের সিরামও ব্যবহার করা হয়েছিল।

প্যারাসাইট (প্রোমাস্টিগোটস বা অ্যামাস্টিগোটস) মাউস আইজির সাথে প্রতিক্রিয়াশীল আইসোটাইপ-নির্দিষ্ট সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডি ব্যবহার করে পৃষ্ঠ-সম্পর্কিত আইজির জন্য দাগ দেওয়া হয়েছিল: অ্যান্টি-আইজিএম (সেরোটেক), অ্যান্টি-আইজিজি1 (এ85-1), এবং অ্যান্টি-আইজিজি2a/বি ( R2-40, সমস্ত BD বায়োসায়েন্স থেকে)। দাগ দেওয়ার পরে, পরজীবীগুলিকে PBS/2 শতাংশ BSA দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয়েছিল, স্থির করা হয়েছিল এবং প্রবাহ সাইটোমেট্রি দ্বারা বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।

ইন ভিট্রো উদ্দীপনা

পূর্বে বর্ণিত হিসাবে 6 দিনের জন্য IL-4 (10 µg/mL) এবং GM-CSF (10 µg/mL) এর সাথে সম্পূরক RPMI/5 শতাংশ FCS মিডিয়াতে অস্থি-মজ্জা থেকে প্রাপ্ত ডিসি তৈরি হয়েছিল। অপরিণত ডিসি হিসাবে 6 তম দিনে কোষগুলি কাটা হয়েছিল। 2×105 DC সংক্রামিত BALB/c বা µMT ইঁদুর থেকে অপসোনাইজড অ্যামাস্টিগোট দিয়ে সহ-সংস্কৃতি করা হয়েছিল বা 18 ঘন্টার জন্য অপসোনাইজড মেটাসাইক্লিক প্রোমাস্টিগোটস (MOI 1:5) দিয়ে সংস্কৃত করা হয়েছিল। পরবর্তীতে, কোষগুলি কাটা হয়েছিল এবং পূর্বে বর্ণিত হিসাবে সাইটোস্পিন তৈরি হয়েছিল। ডিফকুইক-দাগযুক্ত কোষগুলি অন্তঃকোষীয় এবং বহির্মুখী পরজীবীর উপস্থিতির জন্য বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। নমুনা প্রতি কমপক্ষে 200 টি কোষ গণনা করা হয়েছিল।

ভিভো সংক্রমণে

ক্ষতের পরিমাণ সাপ্তাহিকভাবে তিনটি মাত্রায় পরিমাপ করা হয় এবং উপবৃত্তাকার হিসাবে রিপোর্ট করা হয় [(a/2×b/2×c/2)×4/3×π]। ক্ষত টিস্যুতে উপস্থিত পরজীবীগুলি পূর্বে বর্ণিত হিসাবে একটি সীমাবদ্ধ তরল পরীক্ষা ব্যবহার করে গণনা করা হয়েছিল।

অ্যান্টিজেন-নির্দিষ্ট সাইটোকাইন উত্পাদন পরিমাপের জন্য, সংক্রামিত C57BL/6 ইঁদুরের LN কোষগুলি নিষ্কাশন করা হয়েছিল এবং একক-কোষ সাসপেনশন প্রস্তুত করা হয়েছিল। এক মিলিয়ন LN কোষ/200 μL সম্পূর্ণ RPMI 1640 (বায়োক্রোম) 25 ug/mL SLA এর উপস্থিতিতে 96-ওয়েল প্লেটে যোগ করা হয়েছিল। IFNΓ (R&D সিস্টেম) এবং সেইসাথে IL-4 এবং IL-10 (BD) এর জন্য নির্দিষ্ট ELISAs ব্যবহার করে উদ্দীপনার 48 ঘন্টা পরে সুপারনাট্যান্টগুলি সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং পরীক্ষা করা হয়েছিল।

মাইলয়েড মানব ডিসি অপসোনাইজড পরজীবী দ্বারা সংক্রামিত

ম্যালয়েড হিউম্যান সিডি১সি প্লাস ডিসি (এইচডিসি) ম্যাগনেটিক সেল আইসোলেশন সিস্টেম এবং বিডিসিএ-1 হিউম্যান ডিসি আইসোলেশন কিট (মিল্টেনি, জার্মানি) ব্যবহার করে প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে পেরিফেরাল রক্ত ​​থেকে বিচ্ছিন্ন করা হয়েছিল। 1.5 × 107 কোষ 2.5 mL RPMI 1640/2 শতাংশ অটোলোগাস প্লাজমাতে প্রলেপ দেওয়া হয়েছিল। বিশুদ্ধতা সমৃদ্ধ করার জন্য, কোষগুলিকে উষ্ণ পিবিএস দিয়ে ধুয়ে পরিশেষে X-VIVO 15/প্লাজমা (1 শতাংশ) রিকম্বিন্যান্ট হিউম্যান IL-4 (150 U/mL) এবং GM-CSF (400 U/mL) দিয়ে পরিপূরক দিয়ে সংষ্কৃত করা হয়েছিল। . অপরিণত এইচডিসি 6 তম দিনে সংগ্রহ করা হয়েছিল। 2 × 105 এইচডিসি সংক্রামিত µMT ইঁদুর থেকে অপসোনাইজড অ্যামাস্টিগোট বা অপসোনাইজড মেটাসাইক্লিক প্রোমাস্টিগোটস (MOI 1:5) দিয়ে 18 ঘন্টার জন্য সহ-সংস্কৃতি করা হয়েছিল। পরবর্তীতে, কোষগুলি কাটা হয়েছিল এবং পূর্বে বর্ণিত হিসাবে সাইটোস্পিন তৈরি হয়েছিল। ডিফকুইক-দাগযুক্ত কোষগুলি অন্তঃকোষীয় এবং বহির্মুখী পরজীবীর উপস্থিতির জন্য বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। নমুনা প্রতি কমপক্ষে 200 টি কোষ গণনা করা হয়েছিল।

পরিসংখ্যান সংক্রান্ত বিশ্লেষণ

স্ট্যাটভিউ সফ্টওয়্যার ব্যবহার করে পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণ করা হয়েছিল এবং স্টুডেন্টস টি-টেস্ট আনপেয়ার করা হয়েছিল।

ফলাফল

অ্যান্টিফসফোলিপিড অ্যান্টিবডি-যুক্ত সিরাম এল মেজরকে আবদ্ধ করে

যেহেতু পরজীবীরা "অ্যাপোপ্টোটিক মিমিক্রি" নামক একটি প্রক্রিয়ার মাধ্যমে হোস্ট কোষে প্রবেশ করতে পারে এবং যেহেতু L. প্রধান প্রাণ তাদের পৃষ্ঠে ফসফোলিপিড প্রকাশ করে, তাই আমরা প্রতিষ্ঠিত প্রোটোকল ব্যবহার করে অ্যান্টিফসফোলিপিড অ্যান্টিবডি (PL) ধারণকারী সিরাম তৈরি করেছি। এই লক্ষ্যে, C57BL/6 ইঁদুরের দলগুলি এল. মেজর দ্বারা সংক্রামিত হয়েছিল, ফ্রয়েডের সহায়ক (এফএ) উপস্থিতিতে অ্যাপোপ্টোটিক থাইমোসাইট দিয়ে টিকা দেওয়া হয়েছিল। যেহেতু 2-গ্লাইকোপ্রোটিন (2G) হল অ্যান্টিফসফোলিপিড সিন্ড্রোমের (APS) প্রাথমিক অ্যান্টিজেন, তাই আমরা অ্যান্টি- 2G অ্যান্টিবডি ধারণকারী সিরাম পেতে FA-এর উপস্থিতিতে 2G দিয়ে ইঁদুরকে ইমিউনাইজ করি। নিয়ন্ত্রণ হিসাবে, অসংক্রমিত C57BL/6 ইঁদুর থেকে স্বাভাবিক মাউস সিরাম (NMS) এবং L. প্রধান-সংক্রমিত ইঁদুর থেকে ইমিউন সিরাম (IS) ব্যবহার করা হয়েছিল।

নিষ্পাপ বা ইমিউনাইজড ইঁদুরের এই ভিন্ন মাউস সেরাতে অ্যান্টিবডি আছে কিনা তা পরীক্ষা করার জন্য, আমরা প্রথমে এল. মেজর প্রোমাস্টিগোট ফ্রিজ-থাও লাইসেট (দ্রবণীয় লেশম্যানিয়া অ্যান্টিজেন, SLA) ব্যবহার করে ELISA দ্বারা প্যারাসাইট অ্যান্টিজেনের সাথে অ্যান্টিবডি বাইন্ডিং নির্ধারণ করেছি। (চিত্র 1A, কালো কলাম)। মান হিসাবে, আমরা এল মেজর-সংক্রমিত ইঁদুরের সেরা থেকে বিচ্ছিন্ন IgG ব্যবহার করেছি। মজার ব্যাপার হল, IS এর পাশাপাশি PL সিরামে লেশম্যানিয়া লাইসেটের সাথে অ্যান্টিবডি বাইন্ডিং এর তুলনীয় মাত্রা রয়েছে, যেটি এনএমএস বা সেরার সাথে শুধুমাত্র অ্যাডজুভেন্ট দিয়ে টিকা দেওয়া ইঁদুরের সাথে বাইন্ডিংয়ের তুলনায় 3-4 গুণ বেশি। উপরন্তু, 2G অ্যান্টিবডি ধারণকারী সিরাম এছাড়াও SLA আবদ্ধ। 2G (সাদা কলাম) এর জন্য নির্দিষ্ট একটি ELISA ব্যবহার করে, আমরা সিরামে 2G-IgG-এর উচ্চ মাত্রা চিহ্নিত করেছি, যেখানে অন্যান্য সমস্ত সেরাতে 2G IgG মাত্রা সনাক্তকরণ সীমার নীচে ছিল।

ডুমুর. 1 Detection of L. major cross-reactive antibodies in serum of mice containing antiphospholipid antibodies. Serum was obtained from groups of C57BL/6 mice that were left untreated (normal mouse serum, NMS) or which were infected for>2× 105 L. মেজর (ইমিউন সিরাম, IS) সহ 6 সপ্তাহ। অসম্পূর্ণ ফ্রয়েডস (FA) সহায়কের উপস্থিতিতে আরেকটি গ্রুপকে বারবার অ্যাপোপটোটিক থাইমোসাইট (অ্যান্টি-ফসফোলিপিড Ab, a-PL) বা রিকম্বিন্যান্ট 2-গ্লাইকোপ্রোটিন (a- 2G) দিয়ে টিকা দেওয়া হয়েছিল, FA হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল নিয়ন্ত্রণ সাবস্ট্রেট বা 2-গ্লাইকোপ্রোটিন হিসাবে L. মেজর লাইসেট ব্যবহার করে একটি ELISA-তে প্রতিক্রিয়ার জন্য একটি সিরাম পরীক্ষা করা হয়েছিল। এলিসা অ্যান্টি-মুরিন আইজিজি ব্যবহার করে তৈরি করা হয়েছিল। ডেটা গড় হিসাবে প্রকাশ করা হয় (±SEM, n 1 এর চেয়ে বড় বা সমান)। L. মেজরের বি মেটাসাইক্লিক প্রোমাস্টিগোটগুলি স্থির ফেজ কালচার (n{{10}}) থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল। সি অ্যামাস্টিগোটগুলি বি কোষের ঘাটতিযুক্ত µMT ইঁদুরের ক্ষত থেকে প্রস্তুত করা হয়েছিল (n=3)। বি এবং সি পরজীবী প্রস্তুতি বিভিন্ন সেরার সাথে অপসনাইজ করা হয়েছিল (5 শতাংশ, 10 মিনিট, 37 ডিগ্রি)। অ্যান্টিবডি বাইন্ডিং এফএসিএস দ্বারা অ্যান্টি-মাউস সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডিগুলির সাথে মূল্যায়ন করা হয়েছিল। Ig-এর বাইন্ডিং অ-অপসনাইজড প্যারাসাইটের বেসলাইন স্তরগুলি সম্পর্কে গণনা করা হয়েছিল (*p 0.05 এর চেয়ে কম বা সমান, **p 0.005 এর চেয়ে কম বা সমান, এবং ***p 0.002 এর চেয়ে কম বা সমান)

এর পরে, আমরা IS, PL, বা 2G সেরা থেকে সমৃদ্ধ IgG এর বিভিন্ন ঘনত্ব সহ L. মেজরের সংক্রামক পর্যায়ের মেটাসাইক্লিক প্রোমাস্টিগোটগুলিকে ইনকিউবেশন করেছি। আমরা IS- এবং 2G-প্রাপ্ত IgG-এর ডোজ-নির্ভর বাইন্ডিং লক্ষ্য করেছি যার সর্বোচ্চ 100 ng/mL (চিত্র 1B)। এল মেজরের প্রোমাস্টিগোটে PL-প্রাপ্ত IgG-এর আবদ্ধতা সনাক্ত করা যায়নি।

এছাড়াও, আমরা 10 মিনিটের জন্য বিভিন্ন সেরার সাথে বি কোষ-স্বল্পতাযুক্ত µMT ইঁদুরের ক্ষত থেকে বিচ্ছিন্ন এল. প্রধান অ্যামাস্টিগোটগুলিকে ইনকিউবেশন করেছি। পরজীবীগুলিকে তখন ব্যাপকভাবে ধুয়ে ফেলা হয় এবং তারপরে, PE-সংযোজিত অ্যান্টি-আইজিজি1, অ্যান্টিআইজিজি2এ/বি, বা অ্যান্টি-আইজিএম (চিত্র 1C) দিয়ে লেবেল করার পরে ফ্লো সাইটোমেট্রির মাধ্যমে পৃষ্ঠ-আবদ্ধ অ্যান্টিবডি সনাক্ত করা হয়েছিল। প্রত্যাশিত হিসাবে, IS-এ Leishmania-নির্দিষ্ট IgM, IgG1, এবং IgG2a/b রয়েছে। আমরা পূর্বের কাজও নিশ্চিত করি, যেহেতু আমরা তথাকথিত "প্রাকৃতিক অ্যাব" এর পুলে লেশম্যানিয়া-নির্দিষ্ট আইজিএম সনাক্ত করেছি। মজার বিষয় হল, আমরা PL সিরামে IgG এবং IgMও দৃঢ়ভাবে পেয়েছিক্রস প্রতিক্রিয়াL. মেজর অ্যামাস্টিগোটসের পৃষ্ঠের সাথে। অ্যান্টি- 2জিকটেইনিং আইজিজি অ্যান্টিবডিগুলি লেশম্যানিয়ার সাথে আবদ্ধ ছিল না, তবে 2জি সিরামে আইজিএম রয়েছেক্রস প্রতিক্রিয়াamastigote পৃষ্ঠতল সঙ্গে.

ক্রস-প্রতিক্রিয়াশীল অ্যান্টিবডিগুলি ডিসি দ্বারা পরজীবী অভ্যন্তরীণকরণের মধ্যস্থতা করে

আমরা পরবর্তীতে L. মেজর অ্যামাস্টিগোটসের পৃষ্ঠের সাথে আবদ্ধ হতে সক্ষম বিভিন্ন IgG অ্যান্টিবডিগুলি কার্যকরীভাবে সক্রিয় কিনা তা মূল্যায়ন করার উদ্দেশ্য নিয়েছিলাম। এইভাবে, আমরা GMCSF এবং IL-4 এর সাথে সম্পূরক অস্থি মজ্জা (BM) কোষের সংস্কৃতি ব্যবহার করে DC তৈরি করেছি। BM-DC 6 তম দিনে অপরিণত কোষ হিসাবে কাটা হয়েছিল এবং 2×105 কোষ/mL এ প্রলেপ দেওয়া হয়েছিল। বন্য-প্রকার BALB/c বা B কোষের ঘাটতিযুক্ত µMT ইঁদুরের সংক্রমিত ফুটপ্যাড থেকে প্রাপ্ত পরজীবী অ্যামাস্টিগোটগুলিকে বিভিন্ন সেরা (5 ভলিউম শতাংশ) দিয়ে অপসনাইজ করা হয়েছিল, ব্যাপকভাবে ধুয়ে ফেলা হয়েছিল এবং তারপর 5:1 অনুপাতের পরজীবী/কোষ অনুপাতে DC-তে যোগ করা হয়েছিল। 18 ঘন্টা পরে, কোষগুলি কাটা, ধুয়ে ফেলা এবং সাইটোস্পিন করা হয়েছিল।

পরজীবীঅভ্যন্তরীণকরণDifQuickstained স্লাইডে 100×(চিত্র 2) নির্ধারণ করা হয়েছিল। বর্ণিত হিসাবে, µMT ইঁদুর থেকে বিচ্ছিন্ন পরজীবী গ্রহণ উল্লেখযোগ্যভাবে প্রতিবন্ধী ছিল। এনএমএস-এর সাথে প্রাক-ইনকিউবেশন পরজীবী গ্রহণকে কিছুটা উন্নত করেছে, যেখানে আইএস-এর সাথে ইনকিউবেশনের ফলে ডিসি সংক্রমণের হার "সাধারণকরণ" হয়েছে BALB/c-প্রাপ্ত অ্যামাস্টিগোটসের সাথে পরিলক্ষিত হয়েছে। লক্ষণীয়, PL-এর সাথে পরজীবী অপসনাইজেশনও উল্লেখযোগ্যভাবে এবং স্পষ্টভাবে DC সংক্রমণের হারকে ~ 100 শতাংশ দ্বারা উন্নত করেছে। b2G-যুক্ত সিরামের সাথে অ্যামাস্টিগোটসের IgG অপসনাইজেশনের নিম্ন স্তরের সাথে সামঞ্জস্য রেখে (চিত্র 1C তুলনা করুন), এটি ডিসির সংক্রমণের হারকেও বাড়িয়েছে, তবে কিছুটা কম পরিমাণে।

চিত্র 2ক্রস-রিঅ্যাকটিভ অ্যান্টিবডি সহ L. মেজরের অপসনাইজেশন ডিসি দ্বারা বর্ধিত পরজীবী গ্রহণের দিকে পরিচালিত করে। অপরিণত C57BL/6 BMDC(2×105) BALB/c বা B কোষ-ঘাটতি µMT ইঁদুর (1:3) থেকে অ্যামাস্টিগোটের সাথে সহ-সংস্কৃতি করা হয়েছিল। কো-ইনকিউবেশনের আগে, অ্যামাস্টিগোটগুলিকে স্বাভাবিক মাউস সিরাম (NMS), ইমিউন সিরাম (IS), অ্যান্টি-ফসফোলিপিড অ্যান্টিবডিযুক্ত সিরাম অ্যাপোপটোটিক থাইমোসাইটস (এপিএল) দিয়ে বারবার ইমিউনাইজেশনের মাধ্যমে প্রাপ্ত, অথবা অ্যান্টি গ্লাইকোপ্রোটিনযুক্ত সিরামের সাথে অপসনাইজ করা হয়েছিল। অ্যান্টিবডি (2G)। 18 ঘন্টা পরে, সাইটোস্পিনগুলিতে সংক্রমণের হার হালকা মাইক্রোস্কোপি (n=3, *p এর চেয়ে কম বা 0 এর সমান।{19}}5,**p এর থেকে কম বা 0.005 এর সমান, দ্বারা নির্ধারিত হয়েছিল। এবং ***p unopsonized কন্ট্রোলের তুলনায় 0.002 এর কম বা সমান)

ক্রস-প্রতিক্রিয়াশীল অ্যান্টি-ফসফোলিপিড অ্যান্টিবডিগুলি ত্বকের লেশম্যানিয়াসিসে রোগের ফলাফলকে উন্নত করে

পরবর্তী পরীক্ষায়, আমরা পরজীবী অপসনাইজেশনের সাথে মূল্যায়ন করতে চেয়েছিলামক্রস প্রতিক্রিয়াশীলঅ্যান্টিবডিগুলি ভিভোতে রোগের ফলাফল পরিবর্তন করে। এই লক্ষ্যে, মেটাসাইক্লিক প্রোমাস্টিগোটগুলিকে বিচ্ছিন্ন এবং পরজীবী সংস্কৃতি থেকে সমৃদ্ধ করা হয়েছে উপরে বর্ণিত হিসাবে বিভিন্ন সেরার সাথে অপসনাইজ করা হয়েছিল। এনএমএসের সাথে অপসোনাইজড পরজীবী একটি নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে কাজ করে। ব্যাপকভাবে পরজীবী ধোয়ার পর, পাঁচটি C57BL/6 ইঁদুরের দল 103 L. মেজর দিয়ে ইন্ট্রাডার্মালি সংক্রমিত হয়েছিল। ক্ষত বিকাশ ~ 4 মাস ধরে পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল। পূর্বের অনুসন্ধানের সাথে সামঞ্জস্য রেখে, IS এর সাথে অপসনাইজ করা পরজীবীগুলি প্রাথমিক সময়ের পয়েন্টগুলিতে সংক্রামিত ত্বকের DC বৃদ্ধির ফ্রিকোয়েন্সির সাথে সামঞ্জস্য রেখে ছোট কানের ক্ষত তৈরি করে (চিত্র 3)। আশ্চর্যজনকভাবে, PL বা 2G এর সাথে অপসোনাইজ করা পরজীবী একইভাবে একইভাবে উন্নত রোগের ফলাফল প্রচার করে যা 50 এবং 8 সপ্তাহের পোস্ট-ইনফেকশনের মধ্যে ক্ষতের পরিমাণ 50 শতাংশ হ্রাস করে।

ক্রস-প্রতিক্রিয়াশীল অ্যান্টি-ফসফোলিপিড অ্যান্টিবডিগুলি ত্বকের লেশম্যানিয়াসিসে রোগের ফলাফলকে উন্নত করে

পরবর্তী পরীক্ষায়, আমরা পরজীবী অপসনাইজেশনের সাথে মূল্যায়ন করতে চেয়েছিলামক্রস প্রতিক্রিয়াশীলঅ্যান্টিবডিগুলি ভিভোতে রোগের ফলাফল পরিবর্তন করে। এই লক্ষ্যে, মেটাসাইক্লিক প্রোমাস্টিগোটগুলিকে বিচ্ছিন্ন এবং পরজীবী সংস্কৃতি থেকে সমৃদ্ধ করা হয়েছে উপরে বর্ণিত হিসাবে বিভিন্ন সেরার সাথে অপসনাইজ করা হয়েছিল। এনএমএসের সাথে অপসোনাইজড পরজীবী একটি নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে কাজ করে। ব্যাপকভাবে পরজীবী ধোয়ার পর, পাঁচটি C57BL/6 ইঁদুরের দল 103 L. মেজর দিয়ে ইন্ট্রাডার্মালি সংক্রমিত হয়েছিল। ক্ষত বিকাশ ~ 4 মাস ধরে পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল। পূর্বের অনুসন্ধানের সাথে সামঞ্জস্য রেখে, IS এর সাথে অপসনাইজ করা পরজীবীগুলি প্রাথমিক সময়ের পয়েন্টগুলিতে সংক্রামিত ত্বকের DC বৃদ্ধির ফ্রিকোয়েন্সির সাথে সামঞ্জস্য রেখে ছোট কানের ক্ষত তৈরি করে (চিত্র 3)। আশ্চর্যজনকভাবে, PL বা 2G এর সাথে অপসোনাইজ করা পরজীবী একইভাবে একইভাবে উন্নত রোগের ফলাফল প্রচার করে যা 50 এবং 8 সপ্তাহের পোস্ট-ইনফেকশনের মধ্যে ক্ষতের পরিমাণ 50 শতাংশ হ্রাস করে।

এর পরে, আমরা NMS, IS, বা PL (চিত্র 4) থেকে সমৃদ্ধ 100 μg IgG দিয়ে ইনকিউবেটেড µMT অ্যামাস্টিগোট ব্যবহার করেছি। আবার, আমরা লক্ষ্য করেছি যে আইএস বা পিএল উভয়ের আইজিজির ফলে আনঅপসনাইজড পরজীবী (চিত্র 4A) এর তুলনায় ছোট ক্ষত সহ হালকা রোগ হয়েছে। সারিবদ্ধভাবে, সংক্রমণ-পরবর্তী 6 সপ্তাহে নির্ধারিত ক্ষত টিস্যুর পরজীবী বোঝা প্রকাশ করেছে (উল্লেখযোগ্যভাবে) পরজীবী-বাইন্ডিং অ্যান্টিবডি (চিত্র 4বি) এর উপস্থিতিতে শুরু হওয়া সংক্রমণে ছোট পরজীবীর বোঝা। এসএলএ-র সাহায্যে লিম্ফ নোড কোষ নিষ্কাশনের অ্যান্টিজেন-নির্দিষ্ট পুনরুদ্ধারে IFN-এর অপরিবর্তিত মাত্রা প্রকাশ করা হয়েছে, যেখানে IgG-অপসনাইজড প্যারাসাইট (চিত্র 4C) দ্বারা সংক্রামিত ইঁদুরগুলিতে IL-4 এবং IL-10-এর নিম্ন স্তর পাওয়া গেছে। . এটি ক্ষত আকারের হ্রাসের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ কারণ পূর্ববর্তী কাজ দেখিয়েছে যে ইঁদুরের মধ্যে পরজীবী নির্মূল ক্ষত IFN দ্বারা সংক্রামিত MΦ সক্রিয়করণের উপর নির্ভরশীল, যা IL-4 এবং — অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণভাবে — IL-10 . যেমন, সংক্রামিত MΦ এর উপর IL-10 প্রভাব পরজীবী টিকে থাকার দিকে পরিচালিত করে। এইভাবে, একদিকে IFN এবং Th2/Treg-সম্পর্কিত সাইটোকাইনগুলির মধ্যে অনুপাত যেমন IL-4 এবং IL-10 রোগের ফলাফলের জন্য সবচেয়ে প্রাসঙ্গিক বলে মনে হয়।

মজার বিষয় হল, তবে, এই সেটিংয়ে, ছোট ক্ষত ভলিউমও পরিলক্ষিত হয়েছিল, যখন NMS থেকে IgG অপসনাইজেশনের জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল যা এর উপস্থিতি নির্দেশ করেক্রস প্রতিক্রিয়াশীলসাদামাটা ইঁদুরের সিরামেও প্রাকৃতিক অ্যান্টিবডি।

Leishmania-নির্দিষ্ট এবং ক্রস-রিঅ্যাকটিভ অ্যান্টিবডি উভয়ই IgG-এর জেনেটিকাল অভাবের বিকল্প করতে পারে

লেশম্যানিয়ার প্রতিক্রিয়ায় ইমিউনোগ্লোবুলিন সাব-টাইপগুলির নির্দিষ্ট অবদানকে আরও ভালভাবে বিশ্লেষণ করার জন্য, আমরা পূর্বে তৈরি করা IgMi এবং IgG1i ইঁদুর ব্যবহার করেছি। IgMi ইঁদুর হল ইঁদুর যেখানে সমস্ত B কোষ IgM প্রকাশ করে, কিন্তু শ্রেণী পরিবর্তন করতে পারে না বা অ্যান্টিবডি ক্ষরণ করতে পারে না। IgG1i ইঁদুরে, সমস্ত B কোষ IgG1 ব্যবহার করে তাদের B কোষ রিসেপ্টর হিসাবে বিকাশ করে, কিন্তু এই কোষগুলিও শ্রেণী পরিবর্তন করতে পারে না কিন্তু IgG1 অ্যান্টিবডি নিঃসরণ করতে সক্ষম হয়। আমরা C57BL/6 জেনেটিক ব্যাকগ্রাউন্ডে 103 L. মেজর সহ IgMi এবং IgG1i ইঁদুরকে সংক্রমিত করেছি। আমরা দেখতে পেয়েছি যে সেরাতে আইজিজি 1-এর উপস্থিতি ইঁদুরের জন্য পর্যাপ্ত প্রতিক্রিয়ার জন্য যথেষ্ট ছিল, বন্য-প্রজাতির প্রাণীর মতো (চিত্র 5A)। বিপরীতে, IgMi ইঁদুরের মধ্যে দেখা যায় নিঃসৃত অ্যান্টিবডির অনুপস্থিতি ইঁদুরের পুনরুদ্ধারে বিলম্ব করার জন্য যথেষ্ট ছিল (চিত্র 5A)।

এর পরে, আমরা IgMi ইঁদুর বা বন্য-টাইপ নিয়ন্ত্রণগুলিকে NMS বা IS দিয়ে পুনর্গঠন করি এবং তারপরে তাদের L. প্রধান প্রোমাস্টিগোট দ্বারা সংক্রামিত করি। প্রত্যাশিত হিসাবে, উভয় মাউস স্ট্রেনে, IS পুনর্গঠন ভিভোতে উল্লেখযোগ্যভাবে ছোট ক্ষতগুলিকে প্ররোচিত করেছে যা নিশ্চিত করে যে DC দ্বারা IgG-মধ্যস্থ ত্বরিত প্যারাসাইট গ্রহণ উন্নত অ্যান্টি-লেশম্যানিয়া প্রচার করেঅনাক্রম্যতা(চিত্র 5বি)। অবশেষে, আমরা অপসনাইজড পরজীবী ব্যবহারের পরে রোগের ফলাফল মূল্যায়ন করেছি। IgMi ইঁদুরের সংক্রমণের আগে, পরজীবীগুলিকে NMS, IS, বা PL সিরাম (চিত্র 5C) থেকে সমৃদ্ধ IgG দিয়ে অপসনাইজ করা হয়েছিল। চিত্র 5B-তে দেখানো পরীক্ষার সাথে সামঞ্জস্য রেখে, IS-অপসনাইজড পরজীবী বর্ধিত পরজীবী প্রতিরক্ষা সহজতর করেছে। আবার, অ্যান্টিফসফোলিপিড অ্যান্টিবডিগুলি IS থেকে Leishmania-নির্দিষ্ট IgG-এর বিকল্প করতে সক্ষম হয়েছিল যে উভয় IgG অ্যান্টিবডি L-এর সাথে আবদ্ধ। সংক্রমণের আগে প্রধান প্রোমাস্টিগোটগুলি IgMi ইঁদুরের আরও ভাল রোগের ফলাফল প্রচার করে। IS- এবং PL-অপসনাইজড প্যারাসাইটগুলি আনঅপসনাইজড প্যারাসাইটের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে ছোট ক্ষত ভলিউম এবং পূর্বে নিরাময়কে প্ররোচিত করে।

গুরুত্বপূর্ণভাবে, IgMi ইঁদুরের কাছে NMS-এর প্রশাসন C57BL/6 ইঁদুরে (চিত্র 5B) পরিলক্ষিত রোগের ফলাফলের জন্য তাদের ফেনোটাইপকে "স্বাভাবিক" করেছে। এই ফলাফলগুলি উপরে দেখানো আমাদের ডেটার সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ যা পরামর্শ দেয় যে NMS-এও একটি রয়েছেক্রস প্রতিক্রিয়াশীলঅ্যান্টিবডি IgG আইসোটাইপ যা পরজীবীদের সাথে আবদ্ধ করতে সক্ষম যা পরবর্তী কার্যকরী ফলাফলগুলি ভিট্রো এবং ভিভোতে। আরও নিশ্চিতকরণ এনএমএস-কোটেড পরজীবী দ্বারা সংক্রামিত IgMi ইঁদুর থেকে এসেছে, যা সংক্রমণকে আরও ভালভাবে নিয়ন্ত্রণ করতে সক্ষম হয়েছিল (চিত্র 5C)।

ডুমুর. 4অ্যান্টিবডি-অপসোনাইজড পরজীবী বি কোষের ঘাটতি µMT-এ দক্ষ অনাক্রম্যতা প্ররোচিত করে। প্যারাসাইটগুলিকে সাধারণ মাউস সিরাম (NMS), ইমিউন সিরাম (IS), অ্যান্টিফসফোলিপিড অ্যান্টিবডি (a-PL), অথবা — C57BL/6 ইঁদুর-সমৃদ্ধ সিরামে অ্যান্টি- 2 গ্লাইকোপ্রোটিন অ্যান্টিবডি (2G) দিয়ে অপসনাইজ করা হয়েছিল ফ্রয়েডের সহায়ক (এফএ) উপস্থিতি। 5 µMT ইঁদুরের চেয়ে বড় বা সমান গোষ্ঠীগুলি এল. মেজরের 103 অপসনাইজড মেটাসাইক্লিক প্রোমাস্টিগোটে আক্রান্ত হয়েছিল। ক্ষত বিকাশ সাপ্তাহিক মূল্যায়ন করা হয়েছিল। খ 6 সপ্তাহে, সংক্রামিত µMT ইঁদুরের ক্ষতবিক্ষত পরজীবী লোড ডিলিউশন অ্যাস সীমিত করে নির্ধারণ করা হয়েছিল। পৃথক পরজীবী সংখ্যা দেখানো হয়; বার এক্সপ্রেস মানে। µMT এলএন কোষ নিষ্কাশনের সি সাইটোকাইন প্রোফাইলগুলি দ্রবণীয় লেশম্যানিয়া অ্যান্টিজেন (এসএলএ) দিয়ে পুনঃস্থাপন দ্বারা নির্ধারিত হয়েছিল। IFNΓ, IL{{10}, এবং IL-10কে 48-h সুপারন্যাট্যান্টগুলিতে প্রকাশ করা হয়েছে ELISA দ্বারা মূল্যায়ন করা হয়েছিল (মানে±SEM, n=15 ইঁদুর/গোষ্ঠী স্বাধীন থেকে 3টি পরীক্ষা, *p এর থেকে কম বা সমান 0.05, **p কম বা সমান 0.005, এবং ***p 0.002 এর চেয়ে কম বা সমান ইঁদুরের তুলনায় অনপসনাইজড প্যারাসাইট দ্বারা সংক্রমিত)

হিউম্যান সিরামে কার্যকরীভাবে সক্রিয়, পরজীবী ক্রস-প্রতিক্রিয়াশীল অ্যান্টিবডি রয়েছে

মানুষের জন্য আমাদের অনুসন্ধানের প্রাসঙ্গিকতা পরীক্ষা করার জন্য, বি কোষের ঘাটতিযুক্ত µMT ইঁদুর থেকে বিচ্ছিন্ন প্রোমাস্টিগোট বা অ্যামাস্টিগোটগুলিকে স্বাভাবিক মানব সিরাম (NHS), L. মেজর-সংক্রমিত রোগীদের (LM) সিরাম বা এপিএস রোগীদের (এপিএস) সিরাম দিয়ে অপসনাইজ করা হয়েছিল। ) ফ্লো সাইটোমেট্রি ব্যবহার করে প্যারাসাইটের উপর সারফেস-বাউন্ড আইজিজি নির্ধারণ করা হয়েছিল। মজার বিষয় হল, এলএম সিরাম দুর্বলভাবে প্রোমাস্টিগোটসের পৃষ্ঠের সাথে আবদ্ধ, কিন্তু দৃঢ়ভাবে অ্যামাস্টিগোটের সাথে। মজার বিষয় হল, এপিএস সিরামে আইজিজির অনুরূপ স্তর রয়েছেক্রস প্রতিক্রিয়াশীলপরজীবী পৃষ্ঠের সাথে (চিত্র 6A)।

প্রোটিন A কলাম ব্যবহার করে LM সেরা থেকে IgG পরবর্তীতে সমৃদ্ধ করা হয়েছিল (চিত্র 6B)। এটি এবং রোগীদের বিভিন্ন (ইমিউন) রোগের চিকিৎসার জন্য ব্যবহৃত ইন্ট্রাভেনাস ইমিউনোগ্লোবুলিন (IVIG) এর বিভিন্ন ঘনত্ব পরবর্তীতে ফ্লো সাইটোমেট্রির আগে প্যারাসাইট অপসনাইজেশনের জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল। Leishmania IgG উল্লেখযোগ্যভাবে L. মেজরের প্রোমাস্টিগোটস এবং অ্যামাস্টিগোটসের সাথে আবদ্ধ। মজার বিষয় হল, বাণিজ্যিকভাবে উপলব্ধ আইভিআইজিতে আইজিজি রয়েছে যাক্রস প্রতিক্রিয়াপ্রোমাস্টিগোট এবং অ্যামাস্টিগোট প্যারাসাইট উভয়েরই প্রস্তুতি।

পরিশেষে, CD1c প্লাস প্রাইমারি মাইলয়েড হিউম্যান ডিসি বাফি কোট থেকে µMT অ্যামাস্টিগোট এল. মেজর এপিএস রোগীদের এলএম সিরাম বা সিরাম দিয়ে ইনকিউবেট করা হয়েছিল বা IVIG (MOI 3; চিত্র 7)। মানব কোষ ব্যবহার করে আমাদের মুরিন ডেটা নিশ্চিত করে আমরা লক্ষ্য করেছি যে আইজিজি (ক্রস প্রতিক্রিয়াশীলবা Leishmania-নির্দিষ্ট) Leishmania পৃষ্ঠে উন্নত প্রচারের জন্য যথেষ্টপরজীবীঅভ্যন্তরীণকরণডিসি দ্বারা। এপিএস সিরাম সংক্রামিত ডিসির শতকরা হার প্রায় 100 শতাংশ বৃদ্ধি করেছে, যেখানে এলএম সিরাম এবং আইভিআইজি অনপসনাইজড প্যারাসাইটের তুলনায় 30 শতাংশ পরজীবী গ্রহণকে বাড়িয়েছে। মজার বিষয় হল, এনএমএস সিরামেও পরজীবী-প্রতিক্রিয়াশীল আইজিজি প্রচার রয়েছেপরজীবীঅভ্যন্তরীণকরণ.

ডুমুর. 5 C57BL/6, IgMi, এবং IgGi ইঁদুরগুলি বিভিন্ন সেরার সাথে পুনর্গঠিত হয়েছে বা বিভিন্ন বিশুদ্ধ IgG অপসোনাইজড এল দ্বারা সংক্রমিত হয়েছে। প্রধান রোগের ফলাফলগুলি উন্নত করে। 5 C57BL/6, C57BL/6 IgMi, বা IgGi ইঁদুরের চেয়ে বৃহত্তর বা সমান একটি গ্রুপ L. মেজর (103 মেটাসাইক্লিক প্রোমাস্টিগোটস) এর শারীরবৃত্তীয় কম-ডোজ ইনোকুলার দ্বারা সংক্রামিত হয়েছিল। B সংক্রমণের এক সপ্তাহ আগে, C57BL/6 এবং B6 IgMi ইঁদুরের 100 µL সাধারণ মাউস সিরাম (NMS) বা ইমিউন সিরাম (IS) দিয়ে দুইবার ip পুনর্গঠন করা হয়েছিল। C IgMi ইঁদুরের সংক্রমণের আগে, প্রোটিন A কলাম [স্বাভাবিক মাউস সিরাম (NMS), ইমিউন সিরাম (IS), বা অ্যান্টি-ফসফোলিপিড অ্যান্টিবডি (a-PL)] ধারণকারী সিরামে আবদ্ধ হয়ে সেরা থেকে সমৃদ্ধ IgG দিয়ে পরজীবীগুলিকে অপসনাইজ করা হয়েছিল। A–C ক্ষত বিকাশ সাপ্তাহিক মূল্যায়ন করা হয়েছিল (মানে ±SEM, n=10 ইঁদুর/গোষ্ঠী স্বাধীন 2টি পরীক্ষা থেকে, *p কম বা 0.05 এর সমান, **p 0.005 এর চেয়ে কম বা সমান, এবং *** p C57BL/6 [A], C57BL/6 বা IgMi [B], বা কোনোটিই [C] এর তুলনায় 0.002 এর কম বা সমান

ডুমুর 6মানুষের সেরার অ্যান্টিফসফোলিপিড অ্যান্টিবডিগুলি L. প্রধান পৃষ্ঠের অণুর সাথে ক্রস-প্রতিক্রিয়া করে। স্থির ফেজ কালচার থেকে মেটাসাইক্লিক প্রোমাস্টিগোটস বা µMT ইঁদুর থেকে বিচ্ছিন্ন এল মেজর লেশনাল অ্যামাস্টিগোটগুলিকে বিভিন্ন ধরনের হিউম্যান সেরা (5 শতাংশ) বা বিশুদ্ধ IgG দিয়ে অপসনাইজ করা হয়েছিল। স্বাভাবিক মানব সেরা (NHS) সুস্থ নিয়ন্ত্রণ বিষয় থেকে প্রাপ্ত করা হয়েছিল। প্রমাণিত ত্বকের লেশম্যানিয়াসিস (LM, মারাক্কোতে অর্জিত, n=4) এবং অ্যান্টিফসফোলিপিড সিন্ড্রোম (PL, n=3) রোগীদের থেকে সেরাও ব্যবহার করা হয়েছিল। B IgG প্রোটিন A কলাম (n=3) ব্যবহার করে LM সেরা থেকে সমৃদ্ধ হয়েছিল। ইন্ট্রাভেনাস ইমিউনোগ্লোবুলিন (IVIG, n=2) এর বিভিন্ন ঘনত্ব ব্যবহার করা হয়েছিল (µg/mL)। A এবং B পরজীবীগুলি ফ্লো সাইটোমেট্রি ব্যবহার করে মোট মানব আইজির পৃষ্ঠের বাঁধনের জন্য বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। Ig-এর বাইন্ডিং গণনা করা হয়েছিল অনপসনাইজড প্যারাসাইটের বেসলাইন স্তরের সাথে সম্পর্কিত (মানে±SEM, *p কম বা 0 এর সমান।{8}}5, **p {{10 এর চেয়ে কম বা সমান }}.005, এবং ***p 0.002 এর থেকে কম বা সমান)

আলোচনা

ত্বকের লেশম্যানিয়াসিস থেকে নিরাময়ের জন্য দক্ষ টি সেল প্রাইমিং এবং IFN রিলিজ প্রয়োজন, উভয়ই সংক্রামিত DC-এর উপর নির্ভর করে যাতে নিষ্পাপ T কোষগুলিতে অ্যান্টিজেন উপস্থিত হয়। MΦ দ্বারা CR3-নির্ভর ফ্যাগোসাইটোসিসের বিপরীতে, আমরা তা দেখিয়েছিপরজীবীঅভ্যন্তরীণকরণDC দ্বারা Fc RI এবং Fc RIII এর মাধ্যমে ঘটে, যা একে অপরের প্রতিস্থাপন করতে পারে। যেমন, Fc -, Fc RI/ Fc RIII-ঘাটতি ইঁদুর, এবং B কোষ-ঘাটতি µMT ইঁদুর (সমস্তই C57BL/6 ব্যাকগ্রাউন্ডে) বড় ক্ষত তৈরি করে এবং নিরাময় বিলম্বিত হয়, যখন বন্য-প্রকার ইঁদুরের তুলনায়, দুর্বল DC-এর কারণে। নির্ভরশীল টি সেল প্রাইমিং। আমাদের বর্তমান অধ্যয়ন এই পূর্ববর্তী পর্যবেক্ষণ নিশ্চিত করে, কিন্তু উপরন্তু, IgMi এবং IgGi ইঁদুর ব্যবহার করে আমাদের ডেটা এও পরামর্শ দেয় যে প্রকৃতপক্ষে নিঃসৃত অ্যান্টিবডি, এবং বি কোষের নিছক উপস্থিতি নয়, পরজীবীর কার্যকর প্রতিক্রিয়া মাউন্ট করার জন্য গুরুত্বপূর্ণ। যেমন, B কোষ-ঘাটতি ইঁদুরের মতো, IgG উত্পাদন করতে অক্ষম B কোষ সহ IgMi ইঁদুরগুলি IgGi ইঁদুর বা বন্য-প্রকার ইঁদুরের তুলনায় বড় ক্ষত আকার দেখায়।

যেহেতু এনএমএস এবং আইএস-অপসনাইজড অ্যামাস্টিগোট উভয়ই একই পরিমাণে নেওয়া হয়েছিল এবং এনএমএস-অপসোনাইজড প্রোমাস্টিগোটগুলি ডিসি দ্বারা ফ্যাগোসাইটোজ করা হয়নি (তাদের পৃষ্ঠের সাথে আইজিএম-এর দক্ষ আবদ্ধতার সাথে), আমরা পূর্বে উপসংহারে পৌঁছেছি যে পরজীবী গ্রহণের জন্য আইজিএম প্রয়োজন নেই। বর্তমান সমীক্ষায়, আমরা ইঁদুরের সাধারণ মাউস সেরা ব্যবহার করে এই ফলাফলগুলি নিশ্চিত করতে সক্ষম হয়েছি যেগুলি সম্পূর্ণরূপে বি কোষের অভাব রয়েছে বা শুধুমাত্র নিঃসৃত অ্যান্টিবডি রয়েছে। আরও, আমরা দেখাতে সক্ষম হয়েছিলাম যে IgG1-সমৃদ্ধ সেরারা মানুষের এবং মাউস ডিসি উভয়ের মধ্যেই অ্যামাস্টিগোটের প্রবেশকে উন্নত করতে সক্ষম হয়েছিল।

সংক্রামিত ডিসির অনুপস্থিতিতে প্রাথমিক বি কোষের প্রতিক্রিয়া কীভাবে বিকশিত হয় তা অমীমাংসিত রয়ে গেছে। একটি সম্ভাবনা ছিল যে "প্রাকৃতিক" IgG এর পুলে,ক্রস প্রতিক্রিয়াশীলঅ্যান্টিবডি পরজীবী চিনতে সক্ষম হতে পারে এবং লেশম্যানিয়া-নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডিগুলির বিকল্প হিসাবে কাজ করতে পারে যা পরবর্তীতে বিকাশ লাভ করে (সপ্তাহ 4 এবং সপ্তাহ 6 পোস্ট-ইনফেকশনের মধ্যে বৃদ্ধি পায়)। অ্যান্টিজেন-নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডি ছাড়াও, তথাকথিত প্রাকৃতিক অ্যান্টিবডি জন্মের পরে ইঁদুর এবং মানুষ উভয়ের মধ্যে B-1 কোষ দ্বারা উত্পাদিত হয়। কিছু স্ব-অ্যান্টিজেন চিনতে ক্ষমতা আছে; দীর্ঘদিন ধরে, এটা বিশ্বাস করা হয়েছিল যে তাদের বিদেশী অ্যান্টিজেনের জন্য নির্দিষ্টতার অভাব রয়েছে। পরবর্তীতে, তথ্য প্রাকৃতিক আইজিএম বিভিন্ন মাইক্রোবিয়াল অ্যান্টিজেনকে স্বীকৃতি দেয় এবং প্যাথোজেন নির্মূলে অবদান রাখার প্রমাণ দেয়। তবে সম্প্রতি, বেশ কয়েকটি গবেষণায় দেখা গেছে যে প্রাকৃতিক আইজিজি একটি ভূমিকা পালন করেসহজাত অনাক্রম্যতাযেমন. এটি প্যাথোজেন-সম্পর্কিত লেকটিনগুলির (যেমন, এমবিএল) সাথে যোগাযোগ করতে এবং প্যাথোজেনগুলি পরিষ্কার করার জন্য ইমিউন কমপ্লেক্স গঠন করতে দেখানো হয়েছিল। প্যাথোজেন-বাউন্ড প্রাকৃতিক IgG ক্লাসিক্যাল কমপ্লিমেন্ট পাথওয়েকে সক্রিয় করতে C1q-এর মতো অন্যান্য PRR-এর সাথেও যোগাযোগ করবে বলে আশা করা হচ্ছে। এটি দেখানো হয়েছিল যে প্রাকৃতিক IgG বিশেষভাবে প্যাথোজেন-সম্পর্কিত লেকটিনের সাথে সহযোগিতা করে সুবিধাবাদী সিউডোমোনাস এরুগিনোসা এবং স্ট্যাফিলোকক্কাস অরিয়াস সংক্রমণের বিরুদ্ধে কার্যকর অ্যান্টিমাইক্রোবিয়াল অ্যাকশন তৈরি করতে।

অ্যাপোপটোটিক কোষের মৃত্যুর সময়, অ্যাপোপটোটিক দেহে ফসফ্যাটিডিলসারিন (পিএস) এক্সপোজার পরিলক্ষিত হয়। অ্যান্টিবডির মাধ্যমে মৃত বা মৃত কোষের পৃষ্ঠে PS-এর হোস্ট স্বীকৃতি তাদের ক্লিয়ারেন্সের একটি গুরুত্বপূর্ণ পদক্ষেপ। "অ্যাপোপ্টোটিক মিমিক্রি" নামক একটি প্রক্রিয়ায়, লেশম্যানিয়া প্যারাসাইটগুলি তাদের নিজস্ব পৃষ্ঠে PS প্রকাশ করতেও পরিচিত যা ফ্যাগোসাইটিক কোষগুলির জন্য একটি "ইট-মি" সংকেত হিসাবে পরিবেশন করে, যা অ্যাপোপটোটিক কোষ দ্বারা দেখা যায়। তদ্ব্যতীত, কিছু সংক্রামক পর্যায়ের প্রোমাস্টিগোট মারা যায় (ক্যাসপেসের জড়িত না হয়ে) এবং পিএস নিজেরাই প্রকাশ করে। অন্তঃকোষীয় অ্যামাস্টিগোট জীবন গঠন বাধ্যতামূলক করে, যাইহোক, সমস্তই তাদের পৃষ্ঠে PS প্রকাশ করে যাতে তারা দক্ষতার সাথে হোস্ট কোষে প্রবেশ করতে পারে। আমরা এখন মূল্যায়ন করেছি যে কৃত্রিমভাবে প্ররোচিত PL অ্যান্টিবডিগুলি লেশম্যানিয়া পরজীবীগুলিকে চিনতে সক্ষম কিনা এবং প্রাসঙ্গিক হোস্ট কোষগুলিতে পরজীবী প্রবেশের সুবিধার্থে এগুলি কার্যকরীভাবে সক্রিয় কিনা। আমরা লক্ষ্য করেছি যে মুরিন এবং মানুষের অ্যান্টি-ফসফোলিপিড অ্যান্টিবডিগুলি লেশম্যানিয়ার জীবন গঠনকে আবদ্ধ করে। বিভিন্ন পন্থা ব্যবহার করে, আমরা চিহ্নিত করেছিক্রস প্রতিক্রিয়াশীলপিএল সিরামের অ্যান্টিবডি যা এল মেজরের পৃষ্ঠের ফসফোলিপিডের সাথে অগ্রাধিকারমূলকভাবে আবদ্ধ বলে মনে হয়। মজার বিষয় হল, যদিও প্রোমাস্টিগোট পরজীবীগুলিও এই ফসফোলিপিডগুলিকে প্রকাশ করে যেমন একটি ELISA-তে এই পরজীবী জীবন ফর্ম থেকে দ্রবণীয় পরজীবী অ্যান্টিজেন ব্যবহার করে প্রদর্শিত হয়, পৃষ্ঠের ফসফোলিপিডগুলি অ্যামাস্টিগোটগুলিতে আরও জোরালোভাবে প্রকাশিত বলে মনে হয়। উপরন্তু, আমরা দেখিয়েছি যে এই আইজিজি অপসনাইজেশনটি ডিসি দ্বারা পরজীবী গ্রহণকে উন্নীত করার জন্য যথেষ্ট ছিল। গুরুত্বপূর্ণভাবে, ভিভোতে, পিএল-অপসোনাইজড পরজীবীগুলি ছোট ক্ষত ভলিউম এবং আগের ক্ষত রেজোলিউশনের সাথে একটি উন্নত রোগের ফলাফলকে প্ররোচিত করেছে। এইভাবে, আমাদের গ্রুপের পূর্ববর্তী পর্যবেক্ষণের সাথে সামঞ্জস্য রেখে, উপস্থিতিতে বর্ধিত ডিসি সংক্রমণের কারণে(ক্রস-প্রতিক্রিয়াশীল)পরজীবীদের উপর IgG, Th1/Tc1 কোষের একটি অগ্রাধিকারমূলক আবেশ Th2 এবং Treg কোষের সংখ্যা হ্রাসের সাথে জড়িত ছিল এবং এইভাবে রোগের আরও ভাল ফলাফল।

চিত্র 7মানুষের রক্ত ​​থেকে প্রাথমিক মাইলয়েড ডিসি প্যারাসাইটকে অভ্যন্তরীণভাবে পছন্দ করেক্রস প্রতিক্রিয়াশীলঅ্যান্টিফসফোলিপিড আইজিজি তাদের পৃষ্ঠের সাথে আবদ্ধ। CD1a প্লাস মাইলয়েড হিউম্যান ডিসিকে MACS পুঁতি ব্যবহার করে বাফি কোট থেকে বিচ্ছিন্ন করা হয়েছিল এবং 2×105 কোষ/mL এ প্রলেপ দেওয়া হয়েছিল। µMT ইঁদুর থেকে বিচ্ছিন্ন অ্যামাস্টিগোটগুলি ডিসি (1:3) এর সাথে একত্রিত হওয়ার আগে 5 শতাংশ সিরাম বা 10 µg/mL IVIG দিয়ে ইনকিউব করা হয়েছিল। 18 ঘন্টার পরে, সাইটোস্পিনগুলিতে সংক্রমণের হার হালকা মাইক্রোস্কোপি দ্বারা নির্ধারণ করা হয়েছিল (n=3, *p 0.05 এর চেয়ে কম বা সমান, এবং ***p 0.002 এর চেয়ে কম বা সমান অনপসনাইজড নিয়ন্ত্রণের তুলনায়)

মজার বিষয় হল, আমরা দেখেছি যে এনএমএস-এর সাথে অপসোনাইজড পরজীবীগুলি এনএমএস-এ প্রাকৃতিক আইজিজি-এর উপস্থিতি নির্দেশ করে যা লেশম্যানিয়াকে চিনতে সক্ষম নয় এমন পরজীবীর তুলনায় ভাল রোগের ফলাফল প্রচার করে। এটি NMS-এর সাথে প্রতিস্থাপিত IgMi (যেকোন IgG তৈরি করতে সক্ষম B কোষ বর্জিত) তে সবচেয়ে ভাল দৃশ্যমান ছিল। এখানে, IgMi ইঁদুরের স্পষ্টভাবে বড় ক্ষত আকারগুলি বন্য-টাইপ C57BL/6 ইঁদুরের (চিত্র 5) থেকে হ্রাস পেয়েছে। যাইহোক, প্রাকৃতিক, Leishmania উপস্থিতিক্রস প্রতিক্রিয়াশীলএনএমএস-অপসনাইজড পরজীবী দ্বারা সংক্রামিত বন্য-প্রকার ইঁদুরগুলিতেও আইজিজি দেখা গেছে অ-অপসনাইজড পরজীবীর তুলনায়। মুরিন এবং হিউম্যান সিরামে এই প্রাকৃতিক আইজিজির নির্দিষ্টতা আজ পর্যন্ত অস্পষ্ট। এটা অনুমান করতে প্রলুব্ধ হয় যে এগুলি পরজীবী পৃষ্ঠের PS সনাক্তকারী অ্যান্টিবডিও কারণ তারা প্রোমাস্টিগোটের তুলনায় পিএস-এর পরিচিত উচ্চতর এক্সপোজারের সাথে অ্যামাস্টিগোটের সাথে আবদ্ধ থাকে।

আমরা দেখেছি যে সুস্থ মানুষের নিয়ন্ত্রণ বিষয়ের সিরামে (যে অঞ্চল থেকে লেশম্যানিয়াসিস শুধুমাত্র একটি ভ্রমণ রোগ হিসাবে রিপোর্ট করা হয় এবং পূর্বের সংক্রমণের কোনো ইতিহাস নেই) এছাড়াও আইজিজি রয়েছে যা এল. প্রধান অ্যামাস্টিগোটসের সাথে আবদ্ধ হতে এবং DC দ্বারা উন্নত পরজীবী গ্রহণের প্রচার করতে সক্ষম। এটা লক্ষ করা গুরুত্বপূর্ণ যে আমাদের অধ্যয়নের জন্য ব্যবহৃত IVIG জার্মানির মধ্যে প্রস্তুত করা হয়েছে (লেশম্যানিয়াসিসের জন্য অ-স্থানীয়)। মজার বিষয় হল, লেশম্যানিয়া-নেতিবাচক ব্যক্তিদের থেকে IVIG থেকে সমৃদ্ধ মানব IgG এইভাবে IgG ধারণ করে যা প্রোমাস্টিগোট এবং (সম্ভবত উচ্চতর PS এক্সপোজারের কারণে) L. মেজর অ্যামাস্টিগোট উভয়কেই আবদ্ধ করতে সক্ষম। সারিবদ্ধভাবে, উচ্চ মাত্রার অ্যান্টিফসফোলিপিড অ্যান্টিবডি সহ APS রোগীদের সিরামে IgG থাকে যা অ্যামাস্টিগোটেসের সাথে আবদ্ধ থাকে, কম প্রোমাস্টিগোটের সাথে। এপিএস সেরার আইজিজি এবং আইভিআইজি-র আইজিজি উভয়ই প্রাথমিক মানব ডিসি দ্বারা উন্নত পরজীবী গ্রহণকে উন্নীত করেছে (অথবা পিএল-ধারণকারী এপিএস সেরার ক্ষেত্রে আরও ভাল) লিশম্যানিয়াসিস রোগীদের থেকে ইমিউন সিরাম থেকে প্রাপ্ত আইজিজিতে তুলনীয়।

সংক্ষেপে, আমাদের ডেটা দেখায় যে সাধারণ মাউস এবং সেইসাথে মানুষের সেরা, এমনকি এমন ব্যক্তিদের কাছ থেকে নেওয়া হয়েছে যারা কখনও লেশম্যানিয়ার সংস্পর্শে আসেনি, এতে IgG অ্যান্টিবডি রয়েছে যা এই পরজীবীর সাথে আবদ্ধ হতে সক্ষম, DC দ্বারা এটিকে আচ্ছন্ন করতে এবং এর একটি প্রতিরক্ষামূলক প্রতিরোধ ক্ষমতা বাড়াতে সক্ষম। হোস্ট যদিও লিশম্যানিয়া অ্যান্টিজেন (গুলি) স্বীকৃত সম্পূর্ণরূপে স্পষ্ট নয়, কিছু প্রতিক্রিয়াশীলতা প্রোমাস্টিগোট পৃষ্ঠের তুলনায় অ্যামাস্টিগোটে প্রচুর পরিমাণে ফসফোলিপিডগুলির বিরুদ্ধে পরিচালিত হতে পারে। আমাদের অনুসন্ধানগুলি এই পরজীবীর জন্য আরও ভাল থেরাপি ডিজাইন করার পথ প্রশস্ত করতে পারে এবং এমনকি লিশম্যানিয়া-সংক্রমিত এলাকায় ভ্রমণকারী ব্যক্তিদের জন্য প্রথম-সারির সতর্কতা হিসাবে কাজ করতে পারে।

স্বীকৃতি

সহায়ক আলোচনা এবং রোগীর নমুনা প্রদানের জন্য লেখকরা আন্তরিকভাবে মার্ক সি. উদে এবং ফিলিপ ভন ল্যান্ডেনবার্গকে ধন্যবাদ জানান।

লেখকের অবদান 

এফডি, এসএলকে এবং এসটি এই পাণ্ডুলিপিতে বর্ণিত পরীক্ষাগুলি সম্পাদন করেছে। ST, AW, এবং EvS প্রকল্পের জন্য তহবিল সুরক্ষিত করেছিল এবং কাজের তত্ত্বাবধান করেছিল। AW এবং EvS পাণ্ডুলিপি লিখেছেন।

অর্থায়ন

ওপেন অ্যাক্সেস ফান্ডিং সক্ষম এবং প্রজেক্ট ডিল দ্বারা সংগঠিত। গবেষণাটি DFG (SFB 490 থেকে EvS এবং AW এবং SFB 1292 থেকে EvS, AW, এবং ST) এবং সেন্টার ফর মলিকুলার মেডিসিন (CMMC) কোলন থেকে EvS পর্যন্ত তহবিল দ্বারা সমর্থিত হয়েছিল।

তথ্য ও উপকরণের প্রাপ্যতা 

প্রযোজ্য নয়।

ঘোষণাপত্র

নৈতিকতার অনুমোদন এবং অংশগ্রহণের সম্মতি

ইঁদুরের সাথে সমস্ত পরীক্ষা-নিরীক্ষা রাইনল্যান্ড ফাল্জ রাজ্যের নির্দেশিকা অনুসারে করা হয়েছিল।

প্রকাশনার জন্য সম্মতি

সমস্ত লেখক প্রকাশনার জন্য সম্মত হন।

প্রতিদ্বন্দ্বী স্বার্থ

লেখক কোন প্রতিদ্বন্দ্বী স্বার্থ ঘোষণা।

ওপেন অ্যাকসেস এই নিবন্ধটি ক্রিয়েটিভ কমন্স অ্যাট্রিবিউশন 4 এর অধীনে লাইসেন্সপ্রাপ্ত। (গুলি) এবং উত্স, ক্রিয়েটিভ কমন্স লাইসেন্সের একটি লিঙ্ক প্রদান করুন এবং পরিবর্তন করা হয়েছে কিনা তা নির্দেশ করুন৷ এই নিবন্ধের চিত্র বা অন্যান্য তৃতীয় পক্ষের উপাদান নিবন্ধের ক্রিয়েটিভ কমন্স লাইসেন্সে অন্তর্ভুক্ত করা হয়েছে যদি না উপাদানটির ক্রেডিট লাইনে অন্যথায় নির্দেশিত হয়। যদি উপাদান নিবন্ধের ক্রিয়েটিভ কমন্স লাইসেন্সে অন্তর্ভুক্ত না হয় এবং আপনার উদ্দেশ্যযুক্ত ব্যবহার বিধিবদ্ধ প্রবিধান দ্বারা অনুমোদিত না হয় বা অনুমোদিত ব্যবহার অতিক্রম করে, তাহলে আপনাকে সরাসরি কপিরাইট ধারকের কাছ থেকে অনুমতি নিতে হবে।

তথ্যসূত্র

1.Burza S, Croft SL, Boelaert M (2018) Leishmaniasis Lancet 392:951–970.

2. von Stebut E, Tenzer S (2018) Cutaneous leishmaniasis: Leishmania major এর সাথে হোস্ট ইমিউন সিস্টেমের মিথস্ক্রিয়ায় ডেনড্রাইটিক কোষ এবং ম্যাক্রোফেজের স্বতন্ত্র কাজ। Int J Med Microbiol 308:206–214.

3. Sacks D, Noben-Trauth N (2002) দ্য ইমিউনোলজি অফ সংবেদনশীলতা এবং ইঁদুরের প্রধান লেশম্যানিয়া প্রতিরোধের। Nat Rev Immunol 2:845–858.

4. ডি ফ্রেইটাস ইএসআর, ভন স্টেবুট ই (2021) লেশম্যানিয়াসিসে ইমিউন চেকপয়েন্টের ভূমিকা উদ্ঘাটন করা। ফ্রন্ট ইমিউনল 12:620144।

5. Schonlau F, Scharfetter-Kochanek K, Grabbe S, Pietz B, Sorg C, Sunderkotter C (2000) CD18 এর পরীক্ষামূলক লেশম্যানিয়াসিসের ঘাটতির ফলে পরিবর্তিত ম্যাক্রোফেজ ফাংশন এবং অসম্পূর্ণ Th1 কোষের প্রতিক্রিয়ার সাথে যুক্ত পরজীবী বিস্তার ঘটে। 2729-2740।

6. Woelbing F, Kostka SL, Moelle K, Belkaid Y, Sunderkoetter C, Verbeek S, Waisman A, Nigg AP, Knop J, Udey MC, et al (2006) ডেনড্রাইটিক কোষ দ্বারা Leishmania major এর গ্রহণ Fcgamma রিসেপ্টর দ্বারা মধ্যস্থতা করা হয় এবং প্রতিরক্ষামূলক অনাক্রম্যতা অর্জনের সুবিধা দেয়। J Exp Med 203:177–188

7. Nagele EP, Han M, Acharya NK, DeMarshall C, Kosciuk MC, Nagele RG (2013) প্রাকৃতিক IgG অটোঅ্যান্টিবডি মানুষের সেরাতে প্রচুর এবং সর্বব্যাপী এবং তাদের সংখ্যা বয়স লিঙ্গ এবং রোগ দ্বারা প্রভাবিত হয়। প্লস ওয়ান 8:e60726।

8. লুটজ এইচইউ, বাইন্ডার সিজে, কাভেরি এস (2009) হোমিওস্ট্যাসিস এবং রোগে প্রাকৃতিকভাবে ঘটে যাওয়া অটোঅ্যান্টিবডি। ট্রেন্ডস ইমিউনল 30:43-51।

9. Wanderley JL, Barcinski MA (2010) Apoptosis and apoptotic mimicry: the Leishmania connection. সেল মোল লাইফ সাই 67:1653–1659।

10. Waisman A, Croxford AL, Demircik F (2008) সাইটোমেগালোভাইরাস সংক্রমণে B কোষের ভূমিকা অধ্যয়নের জন্য নতুন টুল। মেড মাইক্রোবায়োল ইমিউনল 197:145-149

11. Von Stebut E, Ehrchen JM, Belkaid Y, Kostka SL, Molle K, Knop J, Sunderkotter C, Udey MC (2003) Interleukin 1alpha Th1 পার্থক্যকে উৎসাহিত করে এবং Leishmania প্রধান-সংবেদনশীল BALB/c ইঁদুরে রোগের অগ্রগতি রোধ করে। J Exp Med 198:191–199

12. Levine JS, Subang R, Nasr SH, Fournier S, Lajoie G, Wither J, Rauch J (2006) একটি অ্যাপোপটোটিক সেল-বাইন্ডিং প্রোটিনের সাথে ইমিউনাইজেশন নেফ্রাইটিস এবং সিস্টেমিক লুপাস এরিথেমেটোসাসের অনুক্রমিক অটোঅ্যান্টিবডি উত্থানের পুনরাবৃত্তি করে। জে ইমিউনল 177:6504–6516।

13. Wanderley JLM, DaMatta RA, Barcinski MA (2020) পরজীবী সংক্রমণ প্রতিষ্ঠার জন্য একটি কৌশল হিসাবে অ্যাপোপটোটিক অনুকরণ: একটি মূল অণু হিসাবে পরজীবী- এবং হোস্ট থেকে প্রাপ্ত ফসফ্যাটিডিলসারিন। সেল কমিউন সিগন্যাল 18:10।

14.McDonnell T, Wincup C, Buchholz I, Pericleous C, Giles I, Ripoll V, Cohen H, Delcea M, Rahman A (2020) বিটা-2-গ্লাইকোপ্রোটিন I এর ভূমিকা স্বাস্থ্য এবং রোগের সাথে কার্যকারিতা যুক্ত কাঠামোতে : শুধু এপিএসের চেয়ে বেশি। ব্লাড রেভ 39:100610।

15. ডমিনগুয়েজ এম, তোরানো এ (1999) ইমিউন আনুগত্য-মধ্যস্থ অপসোনোফ্যাগোসাইটোসিস: লিশম্যানিয়া সংক্রমণের প্রক্রিয়া। J Exp Med 189:25-35।

16. Belkaid Y, Hofmann KF, Mendez S, Kamhawi S, Udey MC, Wynn TA, Sacks DL (2001) নিরাময়ের পরে ত্বকে লেশম্যানিয়া মেজর এর অধ্যবসায় ইন্টারলেউকিন (IL)-10 এর ভূমিকা জীবাণুমুক্ত নিরাময়ের জন্য অ্যান্টি-IL-10 রিসেপ্টর অ্যান্টিবডির থেরাপিউটিক সম্ভাবনা। J Exp Med 194:1497–1506।

17. ওয়াইসম্যান এ, ক্রাউস এম, সিগাল জে, ঘোষ এস, মেলামেড ডি, সং জে, সাসাকি ওয়াই, ক্লাসেন এস, লুটজ সি, ব্রোম্বাচার এফ এট আল (2007) আইজিজি1 বি সেল রিসেপ্টর সিগন্যালিং CD22 দ্বারা বাধাগ্রস্ত হয় এবং এর বিকাশকে উৎসাহিত করে B কোষ যাদের বেঁচে থাকা Ig{alpha}/{beta} এর উপর কম নির্ভরশীল। J Exp Med 204:747–758

18. পান্ডা এস, ডিং জেএল (2015) প্রাকৃতিক অ্যান্টিবডি সহজাত এবং অভিযোজিত প্রতিরোধ ক্ষমতা। জে ইমিউনল 194:13-20।

19. Puga I, Cerutti A (2013) প্রাকৃতিক IgG দ্বারা সুরক্ষা: দ্রবণীয় লেকটিনের সাথে একটি মিষ্টি অংশীদারিত্ব কৌশলটি করে! EMBO J 32:2897–2899।

20. ডানকান এআর, উইন্টার জি (1988) IgG-তে C1q এর জন্য বাঁধাই সাইট। প্রকৃতি 332:738-740।

21. Panda S, Zhang J, Tan NS, Ho B, Ding JL (2013) প্রাকৃতিক IgG অ্যান্টিবডি কোলন-অপসনাইজড ব্যাকটেরিয়ার বিরুদ্ধে সহজাত সুরক্ষা প্রদান করে। EMBO J 32:2905–2919।

22. এল-হানি সি, বোর্হেস ভি, ওয়ান্ডারলি জেএল, বারসিনস্কি এম (2012) লিশম্যানিয়াতে অ্যাপোপটোসিস এবং অ্যাপোপটোটিক মিমিক্রি: একটি বিবর্তনীয় দৃষ্টিকোণ। ফ্রন্ট সেল ইনফেক্ট মাইক্রোবায়োল 2:96।

আরও তথ্যের জন্য আমাদের সাথে যোগাযোগ করুন:david.deng@wecistanche.com টেলিফোন:0013632399501