ফলাফল এবং আলোচনা: একক-ফ্যাক্টর অপ্টিমাইজেশান, উদ্বায়ী অ্যারোমা প্রোফাইলিং, এবং সিস্তানচে মুসালাইসের মেটাবোলোমিক্স

 

 

 

2 ফলাফল এবং বিশ্লেষণ

 

2.1 সিস্তানচে মুসালাইসের জন্য একক-ফ্যাক্টর পরীক্ষা

একক-ফ্যাক্টর ফলাফলগুলি চিত্র 2-এ দেখানো হয়েছে। দ্রবণীয় কঠিন পদার্থগুলি প্রাথমিকভাবে মোট অবশিষ্ট শর্করা এবং গাঁজন করার পরে অবশিষ্ট অন্যান্য দ্রবণীয় পদার্থগুলিকে প্রতিফলিত করে। প্রাথমিক চিনির মাত্রা যত বেশি, চূড়ান্ত অবশিষ্ট দ্রবণীয় কঠিন পদার্থ তত বেশি। একই প্রাথমিক চিনি এবং সিস্টানচে সংযোজন স্তরে, 25 ডিগ্রিতে দ্রবণীয় কঠিন পদার্থগুলি 22 ডিগ্রি এবং 28 ডিগ্রির চেয়ে সামান্য কম ছিল। খামির গাঁজন কার্যকলাপ 25 ডিগ্রীতে বেশি হয়, বেশি শর্করা গ্রহণ করে; যাইহোক, উচ্চ চিনির বেসলাইনের কারণে, এই খরচ মোটে উল্লেখযোগ্যভাবে কমাতে পারে না, ফলন মাত্র ছোট পার্থক্য। 3%, 5%, এবং 7% Cistanche সংযোজন গোষ্ঠীর মধ্যে ত্রুটি বারগুলি ওভারল্যাপ করা হয়েছে, কোন উল্লেখযোগ্য পার্থক্য ছাড়াই, নির্দেশ করে Cistanche সংযোজন স্তরের মোট দ্রবণীয় কঠিন পদার্থের উপর একটি নগণ্য প্রভাব রয়েছে, যা প্রধানত প্রাথমিক চিনি দ্বারা প্রভাবিত হয়।

 

Cistanche-msalais

 

 

Cistanche Musalais তালিকা বিস্তারিত

সাপোর্টিভ সার্ভিস অফ ওয়েসিস্তানচে- চীনের বৃহত্তম সিস্টানচে রপ্তানিকারক:
ইমেল:wallence.suen@wecistanche.com

 

 

অ্যালকোহল উপাদান গাঁজন দক্ষতার সবচেয়ে সরাসরি নির্দেশক; ইথানল হল খামির চিনির গাঁজন [10] প্রধান পণ্য। 32 ডিগ্রী Bx গ্রুপ 26 ডিগ্রী Bx এবং 29 ডিগ্রী Bx গ্রুপের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি অ্যালকোহল সামগ্রী দেখিয়েছে, কারণ উচ্চতর প্রাথমিক চিনি আরও অ্যালকোহল তৈরি করতে আরও গাঁজনযোগ্য স্তর সরবরাহ করে। 25 ডিগ্রির নিচে, এলআই এট আল-এর সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ, প্রায় সমস্ত প্রাথমিক চিনি এবং সিস্টানচে সংযোজন সংমিশ্রণে অ্যালকোহলের পরিমাণ শীর্ষে পৌঁছেছে। [১১]। খুব কম তাপমাত্রা (22 ডিগ্রি) খামিরকে দমন করে, ধীরগতিতে বা অসম্পূর্ণভাবে গাঁজন শেষ করে; অত্যধিক উচ্চ (28 ডিগ্রী) অকাল খামির হ্রাস বা আরও উপ-পণ্যের কারণ হতে পারে, এছাড়াও চূড়ান্ত ইথানল ফলন হ্রাস করতে পারে। 25 ডিগ্রীতে, 7% সিস্তানচে সংযোজন সর্বোচ্চ অ্যালকোহল সামগ্রী অর্জন করেছে, যা পরামর্শ দেয় যে কিছু সিস্টানচে উপাদান খামির বৃদ্ধি এবং গাঁজনীয় শক্তিকে উন্নীত করতে পারে।

মোট অম্লতা মুখের অনুভূতি এবং স্থায়িত্বকে প্রভাবিত করে। গাঁজন করার সময় কাঁচামাল এবং মাইক্রোবিয়াল বিপাক থেকে অ্যাসিডের উৎপত্তি হয়। অতিরিক্ত অম্লতা তীক্ষ্ণ, ভিনেরি নোট সৃষ্টি করে এবং নিম্ন স্তরে নিয়ন্ত্রণ করা উচিত [12]। 22 ডিগ্রিতে মোট অম্লতা 25 ডিগ্রি এবং 28 ডিগ্রির তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল কারণ 22 ডিগ্রি ল্যাকটিক অ্যাসিড ব্যাকটেরিয়া (LAB) এর জন্য সাবঅপ্টিমাল। নিম্ন তাপমাত্রা LAB বৃদ্ধি এবং বিপাককে দৃঢ়ভাবে বাধা দেয়, ম্যালোলাকটিক ফার্মেন্টেশন (এমএলএফ) খুব ধীর, অসম্পূর্ণ বা এমনকি শুরু করা হয়নি; ফলস্বরূপ, ম্যালিক অ্যাসিড অপরিবর্তিত থেকে যায়, পরিমাপকৃত মোট অম্লতাকে উন্নত করে। বিপরীতে, 25-28 ডিগ্রী MLF-এর জন্য একটি অনুকূল পরিসর। LAB এখানে অত্যন্ত সক্রিয় এবং দ্রুত এবং পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে ম্যালিক অ্যাসিডকে ল্যাকটিক অ্যাসিডে রূপান্তর করতে পারে [13], যার ফলে মোট অম্লতা কম হয়। মোট অম্লতার উপর প্রাথমিক চিনি এবং Cistanche যোগের প্রভাব সামগ্রিকভাবে কম সামঞ্জস্যপূর্ণ ছিল; যাইহোক, 7% যোগ শর্ত সহ 25 ডিগ্রি সাধারণত একটি মাঝারি অম্লতা তৈরি করে। খুব কম অম্লতা একটি সমতল তালু বাড়ে; খুব বেশি তীক্ষ্ণতা দেয়-সংযম সর্বোত্তম।

মোট ফ্ল্যাভোনয়েড এবং মোট পলিফেনল সরাসরি কার্যকরী উপাদান এবং অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা পরিমাপ করে, প্রধানত যোগ করা সিস্টানচে থেকে পাওয়া যায়। সিস্টানচে সংযোজন স্তরটি সবচেয়ে প্রভাবশালী ছিল: প্রাথমিক চিনি এবং তাপমাত্রায়, 7% গ্রুপে সর্বাধিক ফ্ল্যাভোনয়েড এবং পলিফেনল সামগ্রী ছিল, তারপরে 5% এবং 3%। এটি প্রমাণ করে যে সিস্টানচে বৃদ্ধি পণ্য কার্যকারিতা বাড়ানোর সবচেয়ে কার্যকর উপায়। 25 ডিগ্রিতে পারফরম্যান্স এই সূচকগুলির জন্য উচ্চতর ছিল। উচ্চ তাপমাত্রা (28 ডিগ্রি) তাপ-সংবেদনশীল সক্রিয়গুলির আংশিক অবক্ষয়/অক্সিডেশন ঘটাতে পারে; নিম্ন তাপমাত্রা (22 ডিগ্রি) ম্যাট্রিক্স থেকে সম্পূর্ণ নিষ্কাশনকে বাধা দিতে পারে। স্বাস্থ্যের মান সর্বাধিক করার জন্য (মোট ফ্ল্যাভোনয়েড এবং পলিফেনল), হালকা 25 ডিগ্রী গাঁজনে 7% সিস্টানচে সংযোজন এই উপাদানগুলিকে রক্ষা এবং দক্ষতার সাথে নিষ্কাশনের মূল চাবিকাঠি।

সংক্ষেপে, চিকিত্সা জুড়ে সর্বোত্তম অবস্থা ছিল: প্রাথমিক চিনি 32 ডিগ্রী বিএক্স, 25 ডিগ্রী গাঁজন এবং 7% সিস্টানচে সংযোজন। এটি গাঁজন দক্ষতা, পণ্যের গুণমান এবং কার্যকারিতার ভারসাম্য বজায় রাখে। এটি আবুদুরেহেমান এট আল থেকে পৃথক। [১৪]। ট্যাং এট আল। [১৫] ঐতিহ্যবাহী মুসালাইতে মূল কার্যকরী জীবাণু পাওয়া গেছে যার মধ্যে রয়েছে ব্লাউটিয়া, লিউকোনোস্টক, ল্যাকটিপ্লান্টিব্যাসিলাস, রোডোকোকাস এবং থার্মোস্কাস; থার্মোআস্কাস মূল বিপাক (গ্লাইসিন, অ্যাসিটামাইড, মোনাকোলিন কে, ইত্যাদি) সংশ্লেষণ চালায়। একটি উচ্চ-চিনির খোলা গাঁজন একাধিক কার্বন উত্স প্রবর্তন করে, গৌণ বিপাককে সক্রিয় করে এবং চিনির স্তর সরাসরি ফেনোলিক জৈব সংশ্লেষিত পথগুলিকে প্রভাবিত করে (কেইজিজি-সমৃদ্ধ শিকিমেট পথ)। ওয়েন জিয়াওলি [১৬] পর্যবেক্ষণ করেছেন যে ফেনাইলপ্রোপ্যানয়েড (শিকিমেট) পথগুলি ফেনোলিক পূর্বসূরীদের সঞ্চয়কে উৎসাহিত করে। একটি উচ্চ-চিনির পরিবেশ (32 ডিগ্রি বিএক্স) অসমোটলরেন্ট ইস্ট (যেমন, স্যাকারোমাইসিস) প্রচার করে এবং দূষক দমন করে। যদিও ঐতিহ্যগত মুসালাইস ফেনোলিক সংশ্লেষণের জন্য থার্মোআস্কাসের উপর নির্ভর করে [১৫], সিস্তানচে মুসালাইস খামির দক্ষতার সাথে ফিনোলিক্স উত্পাদন করতে সিস্তানচে থেকে ফেনোলিক পূর্বসূরকে সরাসরি ব্যবহার করতে পারে [১৭]। অতএব, সর্বোত্তম অবস্থা হল 32 ডিগ্রী বিএক্স, 25 ডিগ্রী এবং 7% সিস্তানচে। এর অধীনে, দ্রবণীয় কঠিন পদার্থ ছিল (21.9 ± 1.1)%, অ্যালকোহল (12.6 ± 0.6)% ভলিউম, মোট অম্লতা (3.82 ± 0.19) g/L, মোট ফ্ল্যাভোনয়েড (0.80 ± 0.01) g/L, এবং পলিফেনল (0.60 ± 0.00) g/L

2.2 সিস্তানচে মুসালাইসে উদ্বায়ী গন্ধ যৌগ

বর্ধিত অনলাইন পরিপূরক সারণী 1 সিস্তানচে মুসালাইস বনাম নিয়ন্ত্রণ মুসালাইসে প্রতিনিধি সুগন্ধের উপাদান এবং আপেক্ষিক বিষয়বস্তু তালিকাভুক্ত করে। মোট, 38টি সুবাস যৌগ চিহ্নিত করা হয়েছিল: 24টি এস্টার, 6টি অ্যালকোহল, 2টি কিটোন, 2টি অ্যালডিহাইড এবং অন্যান্য।

এস্টার হল ইথাইল অ্যাসিটেট, আইসোঅ্যামিল অ্যাসিটেট এবং আইসোঅ্যামিল ফিনিলাসেটেট সহ ফলমূল এবং ভিনাস সুগন্ধের প্রাথমিক অবদানকারী। ইথাইল অ্যাসিটেট (ফল, মিষ্টি) গ্রুপ B (7% সিস্টানচে) 6.418% বনাম গ্রুপ A (নিয়ন্ত্রণ) 2.417% এ অনেক বেশি ছিল। ডাইথাইল অক্সালেট (সুগন্ধি) শুধুমাত্র বি গ্রুপে (0.521%) সনাক্ত করা হয়েছিল। এস্টারগুলি জৈব অ্যাসিড এবং অ্যালকোহল থেকে এস্টেরেসের মাধ্যমে তৈরি হয় [18]। সিস্টানচে এমন পদার্থ সরবরাহ করতে পারে যা এস্টেরেজ কার্যকলাপ বা প্রতিক্রিয়ায় অংশগ্রহণকারী এনজাইমগুলিকে উৎসাহিত করে; এর সংযোজন এস্টার-উৎপাদনকারী ইস্টের বৃদ্ধিকে উন্নীত করতে পারে যখন নন-এস্টার উৎপাদনকারীদের দমন করে। A, B এর সাপেক্ষে সাতটি নতুন এস্টার দেখায়: 2-ইথাইলহেক্সিল অ্যাক্রিলেট, ইথাইল বেনজয়াইলফরমেট, ইথাইল স্যালিসিলেট, হেক্সিল ভ্যালেরেট, ইথাইল মাইরিস্টেট, ইথাইল পামিটোলেট এবং ইথাইল ওলেট। এগুলি সম্ভবত সিস্টানচে থেকে নির্দিষ্ট ফ্যাটি বা অ্যারোমেটিক অ্যাসিড হিসাবে উদ্ভূত হয়েছিল যা মাইক্রোবিয়াল ইস্টারিফিকেশনের জন্য সাবস্ট্রেট হিসাবে কাজ করে। কিছু সক্রিয় উপাদান (যেমন, phenylethanoid glycosides, PhGs) শর্করা এবং aglycones মধ্যে ছেঁড়া হতে পারে; এগ্লাইকোনগুলি অস্থির এবং আরও মাইক্রোবালি বা নন-এনজাইম্যাটিকভাবে ফ্যাটি অ্যাসিডে রূপান্তরিত হয় যা অ্যালকোহলের সাথে বিক্রিয়া করে এস্টার তৈরি করে [19]। Isoamyl phenylacetate কম প্রান্তিক সহ মধুযুক্ত এবং ফুলের নোটের একটি মূল উৎস; ইথাইল পালমিটেট প্লাস ইথাইল অক্টানোয়েট কম্পোজিট ফ্রুটি-ফ্যাটি অ্যারোমাস [20]। নিম্ন-আণবিক এস্টার এবং অ্যালডিহাইড হল গুরুত্বপূর্ণ গৌণ সুগন্ধযুক্ত পণ্য যা গাঁজন করার সময় গঠিত হয় [২১] এবং মুসালাইসের ফলপ্রসূতা বাড়ায়।

আইসোবুটানল এবং আইসোমাইল অ্যালকোহলের মতো অ্যালকোহলগুলি প্রধান স্বাদের অবদানকারী। ইথানল, আইসোঅ্যামিল অ্যালকোহল, এবং আইসোবুটানল সবই A-এর তুলনায় B গ্রুপে কম ছিল। ইথানলের হ্রাস এস্টারের বৃদ্ধির সাথে সাথে কার্বন ফ্লাক্স অ্যালকোহল জমা থেকে এস্টার বায়োসিন্থেসিসে স্থানান্তরিত হওয়ার ইঙ্গিত দেয়- একটি অনুকূল দিক। উচ্চতর অ্যালকোহলগুলি প্রধানত ব্রাঞ্চেড-চেইন অ্যামিনো অ্যাসিড ক্যাটাবলিজম (ভ্যালিন, লিউসিন, আইসোলিউসিন) থেকে এহরলিচ পাথওয়ের মাধ্যমে উদ্ভূত হয় [22]। তাদের হ্রাস ইঙ্গিত দিতে পারে যে Cistanche সম্পর্কিত স্ট্রেইনের অতিরিক্ত বৃদ্ধি বা পরিমিত অ্যামিনো অ্যাসিড প্রবাহকে দমন করেছে। যদিও মাঝারি উচ্চতর অ্যালকোহল সুগন্ধ/শরীরে যোগ করতে পারে, অনেকের থ্রেশহোল্ড কম এবং কিছু স্বাদ তিক্ত; আইসোবুটানলের একটি শক্তিশালী তিক্ততা রয়েছে [২৩]। এইভাবে, সিস্তানচে মুসালাইসে কম উচ্চতর অ্যালকোহল পান করার আরাম উন্নত করতে পারে।

অ্যালডিহাইডস, কেটোনস এবং অন্যান্য যৌগগুলিও সনাক্ত করা হয়েছিল তবে কম বৈচিত্র্য এবং আপেক্ষিক প্রাচুর্যে। গ্রুপ বি 2,5-ডাইহাইড্রোক্সাইসেটোফেনন (মিষ্টি, ফুলের), A-তে অনুপস্থিত, সম্ভবত সিস্টানচে পিএইচজি (যেমন, ইচিনাকোসাইড, অ্যাক্টিওসাইড) এর মাইক্রোবিয়াল অবক্ষয় থেকে উদ্ভূত।

GC–MS ইঙ্গিত দেয় যে Cistanche যোগ করার ফলে উদ্বায়ী প্রোফাইল উল্লেখযোগ্যভাবে পরিবর্তিত হয়। ইথাইল অ্যাসিটেট (ফল, মিষ্টি) এবং ইথাইল পালমিটেট (ফল-ফ্যাটি) বর্ধিত ফলমূলে প্রধান অবদানকারী ছিল, সিস্তানচে মুসালাইসে 6.42% এবং 3.75% বনাম. 2.42% এবং ঐতিহ্যগতভাবে 1.18%। আইসোবুটানল (তিক্ত) 3.98% থেকে 2.11% এ নেমে এসেছে, তিক্ততা হ্রাস করে এবং ভারসাম্য উন্নত করে। নতুন সুগন্ধ যৌগ যেমন 2,5-ডাইহাইড্রোক্সাইসিটোফেনন সম্ভবত PhG-এর মাইক্রোবিয়াল অবক্ষয় থেকে উদ্ভূত, সুগন্ধকে বৈচিত্র্যময় করে। সামগ্রিকভাবে, Cistanche সংযোজন আরও কাঙ্খিত সুবাস এস্টার উৎপাদনের দিকে গাঁজনকে চালিত করে।

2.3 সিস্তানচে মুসালাইসের বিপাকবিদ্যা

 

2.3.1 অ-উদ্বায়ী বিপাক

একটি স্থানীয় লাইব্রেরি এবং পাবলিক ডাটাবেস সহ UPLC–MS/MS 11টি শ্রেণির যৌগ চিহ্নিত করেছে। চিত্র 3-এ হিসাবে দেখানো হয়েছে, জৈব হেটেরোসাইক্লিকগুলি সর্বাধিক প্রচুর (28.1% চিহ্নিত সামগ্রী), তারপরে জৈব অ্যাসিড এবং ডেরিভেটিভস (18.6%), লিপিড এবং লিপিড-সদৃশ অণু (13.8%), বেনজেনয়েডস (12.3%), জৈব অক্সিজেন যৌগ (9.6%), জৈব অক্সিজেন এবং 9.6%। (7.0%), অ্যালকালয়েড এবং ডেরিভেটিভস (4.2%), জৈব নাইট্রোজেন যৌগ (3.3%), নিউক্লিওসাইড/নিউক্লিওটাইডস এবং এনালগ (1.9%), এবং অন্যান্য (0.8%)।

জৈব heterocycles ওয়াইন স্বাদ গুরুত্বপূর্ণ; ফল-ওয়াইনের উপাদানগুলির মধ্যে, ফুরান এবং পাইরাজিন হল মূল গন্ধের উপাদান [24]। Pyrazines কম থ্রেশহোল্ড এবং শক্তিশালী গন্ধ আছে; ফুরানগুলি কম ফুটন্ত, অত্যন্ত উদ্বায়ী লিপোফাইল যা গন্ধ গঠনের জন্য গুরুত্বপূর্ণ এবং স্বাস্থ্যের জন্য সম্ভাব্য উপকারী [25]। জৈব অ্যাসিড এবং ডেরিভেটিভ ওয়াইনের জন্য অপরিহার্য; তাদের স্তর এবং প্রকারগুলি দৃঢ়ভাবে গন্ধ, রঙ এবং স্থায়িত্বকে প্রভাবিত করে [26]। জৈব অ্যাসিড ট্রাইকারবক্সিলিক অ্যাসিড (TCA) চক্র থেকে উদ্ভূত হয়: গ্লুকোজ এনজাইমাটিকভাবে পাইরুভেট গঠন করে; পাইরুভেট পাইরুভেট ডিহাইড্রোজেনেস দ্বারা এসিটাইল-কোএতে রূপান্তরিত হয়, তারপরে টিসিএ ইন্টারমিডিয়েটে (সাইট্রেট, ম্যালেট, সাক্সিনেট)। উপরন্তু, আমরা ট্রাইগোনেলাইন (হাইপোলিপিডেমিক এবং হাইপোগ্লাইসেমিক) এবং ক্রোসিন (অ্যান্টিক্যান্সার, অ্যান্টি-ইনফ্ল্যামেটরি, অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, হেপাটোপ্রোটেকটিভ/কোলেরেটিক এবং অ্যান্টিডায়াবেটিক কার্যকলাপ) সনাক্ত করেছি।

 

2.3.2 PCA এবং OPLS-DA অ-উদ্বায়ী বিপাকের জন্য

চিত্র 3-বি সমস্ত চিহ্নিত বিপাকের উপর ভিত্তি করে নিয়ন্ত্রণ (A) এবং 7% Cistanche (B) এর জন্য PCA স্কোর দেখায়। দুটি প্রধান উপাদান মোট বৈচিত্র্যের ~57.8% ব্যাখ্যা করেছে (PC1 42.8%, PC2 15.2%), নির্দেশ করে যে তারা বেশিরভাগ আসল তথ্য ক্যাপচার করে এবং চিকিত্সার মধ্যে মূল বৈশিষ্ট্যগুলিকে উপস্থাপন করে [২৭]। গোষ্ঠীর মধ্যে ক্লাস্টার করা নমুনা; A এবং B পৃথকভাবে পৃথক করা হয়েছে, Cistanche সংযোজন এবং ভাল সিস্টেম স্থিতিশীলতা/ডেটা নির্ভরযোগ্যতার কারণে উল্লেখযোগ্য বিপাকীয় পার্থক্য নির্দেশ করে।

চিত্র 3-e দেখায় OPLS-DA আরও বৈষম্যমূলক গোষ্ঠী এবং স্ক্রীনিং ডিফারেনশিয়াল মেটাবোলাইট। সমস্ত পয়েন্ট 95% আত্মবিশ্বাসের ব্যবধানের মধ্যে পড়েছে; A এবং B স্পষ্টভাবে পৃথক করা হয়েছিল, যা অ-উদ্বায়ী বিপাকীয়গুলির গঠন এবং প্রাচুর্যের মধ্যে উল্লেখযোগ্য পার্থক্য নির্দেশ করে। ভেরিয়েবল এবং ক্লাস লেবেলগুলিকে বিভক্ত করা হয়েছিল এবং বৈষম্যের জন্য অনুমান করা হয়েছিল, নির্ভরযোগ্যতা সমর্থন করে [২৮]। চিত্র 3-সি একটি পিএলএস-ডিএ স্কোর প্লট দেখায় যা চিহ্নিত অ-উদ্বায়ীকে নির্ভরশীল ভেরিয়েবল হিসাবে এবং চিকিত্সাগুলিকে স্বাধীন ভেরিয়েবল হিসাবে চিকিত্সা করে, যা শক্ত গ্রুপ ক্লাস্টারিংয়ের সাথে PCA-এর অনুরূপ প্যাটার্ন প্রকাশ করে। পারমুটেশন টেস্টিংয়ে (200 বার), মডেল মেট্রিক্স ছিল R2Y=1 এবং Q2=0.866; 200 পারমুটেশনের পরে, R2 এবং Q2 ধনাত্মক y-অক্ষকে ছেদ করেছে বাম-পাশের মান ডান-পাশের থেকে কম, বৈধতা নির্দেশ করে। পিএলএস-ডিএ-তে, ভিআইপি মানগুলি চিকিত্সা জুড়ে বিপাকীয় অবদানগুলিকে আলাদা করতে ব্যবহৃত হয়েছিল [30]। S-প্লট লোডিং বৃহৎ আন্তঃগ্রুপ পার্থক্য সহ বৈশিষ্ট্য চিহ্নিত করেছে; বৃহত্তর দূরত্ব বৃহত্তর তাত্পর্য নির্দেশ করে। ওপিএলএস-ডিএ কার্যকরভাবে দুটি ওয়াইনকে বৈষম্য করেছে, ডাউনস্ট্রিম মেটাবোলাইট নির্বাচনের জন্য একটি শক্তিশালী ভিত্তি প্রদান করেছে।

 

2.3.3 কী ডিফারেনশিয়াল মেটাবোলাইটের শ্রেণীবদ্ধ ক্লাস্টারিং

VIP > 1 এবং P < 0.05 সহ OPLS-DA এর উপর ভিত্তি করে, 230টি ডিফারেনশিয়াল যৌগ চিহ্নিত করা হয়েছিল: 125টি আপ-রেগুলেটেড এবং 64টি ডাউনরেগুলেটেড। প্রচুর সংখ্যার কারণে, প্রাচুর্যের ভিত্তিতে শীর্ষ 50টি শ্রেণীবদ্ধ ক্লাস্টারিংয়ের জন্য ব্যবহৃত হয়েছিল। হিটম্যাপ (চিত্র 3-জি) প্রতিটি সারিকে একটি বিপাক হিসাবে এবং প্রতিটি কলামকে একটি নমুনা হিসাবে দেখায় [31]; লাল উচ্চতর অভিব্যক্তি নির্দেশ করে, নীল কম। প্রতি গোষ্ঠীতে তিনটি প্রতিলিপি একই রঙের প্রদর্শন করেছে, যা ভাল প্রজননযোগ্যতা এবং সামঞ্জস্যপূর্ণ প্রবণতা নির্দেশ করে। চিত্র 3-জি পরামর্শ দেয় যে অণুজীবের ক্রিয়াকলাপের অধীনে আঙ্গুরের রস অ্যামিনো অ্যাসিড, গ্লুকোজ, জৈব অ্যাসিড, টারপেনস, ইত্যাদি তৈরি করে। ট্যাং এট আল। [১৫] অণুজীব সম্প্রদায়ের প্রাকৃতিক উত্তরাধিকার (যেমন, অ্যাসপারগিলাস, গ্লুকোনোব্যাক্টর, ইস্ট) এবং মুসালাইস গাঁজন করার সময় সংশ্লিষ্ট বিপাকীয় পরিবর্তনের বিশদ বিবরণ। গ্রুপ A এই সহজাত মাইক্রোবিয়াল ভারসাম্যের সাথে সারিবদ্ধ। সিস্তানচে অবশ্য জড় নয়; এর বায়োঅ্যাকটিভ (যেমন, পিএইচজি) অ্যান্টিমাইক্রোবিয়াল প্রভাব ফেলতে পারে [৩২], বিদ্যমান ভারসাম্যকে বিরক্ত করে। মোগ্রোসাইড আইসোমার (যেমন, মোগ্রোলের আইসোমার), ক্রোসিন বি, অ্যান্ড্রোগ্রাফোলাইড, ইত্যাদি, বি-তে বেশি ছিল (7%) এবং A-তে কম, সম্ভবত কারণ সিস্তানচে-এর শক্তিশালী অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা (পিএইচজি সমৃদ্ধ) একটি অ্যান্টিঅক্সিডেটিভ পরিবেশ প্রদান করে যা এই অণুগুলির অক্সিডেটিভ অবক্ষয় হ্রাস করে। L(+)-অর্নিথাইন, L(+)-সিট্রুলাইন, এবং ভিটামিন B7 (বায়োটিন) B-তে কম কিন্তু A-তে বেশি ছিল, বাহ্যিক ফ্যাক্টর (সিস্টানচে) মূল মাইক্রোবিয়াল ভারসাম্যকে বিঘ্নিত করে, নির্দিষ্ট কার্যকরী স্ট্রেনকে দমন করে এবং মূলধারার বিপাকীয় দিক পরিবর্তন করে। এটি ঐতিহ্যগত মুসালাইসের তুলনায় সিস্তানচে মুসালাইসের সম্ভাব্য কার্যকরী সুবিধা নির্দেশ করে।

 

2.3.4 কার্যকরী উপাদান

লক্ষ্যবিহীন বিপাকবিদ্যা শুধুমাত্র গন্ধ গঠনের প্রক্রিয়াকে ব্যাখ্যা করে না বরং সমৃদ্ধ বায়োঅ্যাকটিভ উপাদানগুলিকেও চিহ্নিত করে, যা পণ্যের বিকাশের জন্য সরাসরি রাসায়নিক ভিত্তি প্রদান করে। নথিভুক্ত হাইপোগ্লাইসেমিক, হাইপোলিপিডেমিক এবং নিউরোপ্রোটেক্টিভ প্রভাব [৩৩] সহ পরীক্ষামূলক গোষ্ঠীতে ট্রাইগোনেলাইন উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নীত হয়েছিল। ক্রোসিন, একটি শক্তিশালী জল-দ্রবণীয় অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে, যা প্রদাহ-বিরোধী, উদ্বেগ-বিরোধী এবং সম্ভাব্য ক্যানসার বিরোধী কার্যকলাপের জন্য পরিচিত। সর্বোত্তম প্রক্রিয়ার অধীনে (25 ডিগ্রীতে 7%), মোট ফ্ল্যাভোনয়েড এবং মোট ফেনোলিক্স যথাক্রমে 0.80 g/L এবং 0.60 g/L পৌঁছেছে, লক্ষণীয়ভাবে অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা বৃদ্ধি করে। এই সমৃদ্ধিগুলি সিস্টানচে (যেমন, পিএইচজি, পলিস্যাকারাইড) [4-5] থেকে উদ্ভূত হয় এবং গাঁজন করার সময় মাইক্রোবিয়াল বায়োট্রান্সফরমেশন এবং সমৃদ্ধিও প্রতিফলিত করতে পারে।

 

2.3.5 কী ডিফারেনশিয়াল মেটাবোলাইটের আগ্নেয়গিরির প্লট

আগ্নেয়গিরির প্লট বিপাকীয় প্রাচুর্যের পরিবর্তনগুলি কল্পনা করে। 1 এবং P < 0.05 এর চেয়ে বড় বা সমান VIP ব্যবহার করে, 230 ডিফারেনশিয়াল যৌগ চিহ্নিত করা হয়েছিল: 125 আপ-রেগুলেটেড এবং 64 ডাউনরেগুলেটেড (চিত্র 3-e)। x-অক্ষ হল log2 ভাঁজ পরিবর্তন, এবং y-অক্ষ হল −log10 P। উল্লেখযোগ্যভাবে আপ-রেগুলেটেড মেটাবোলাইট FC এর সাথে 1 এর চেয়ে বড় বা সমান এবং P <0.05 লাল; FC এর সাথে উল্লেখযোগ্যভাবে নিয়ন্ত্রিত 1 এর থেকে কম বা সমান এবং P <0.05 নীল; অগুরুত্বপূর্ণ হয় ধূসর. P < 0.05 এবং VIP > 1-এর অধীনে সর্বাধিক উচ্চারিত পরিবর্তন সহ শীর্ষ 20টি পরিপূরক সারণী 2-তে তালিকাভুক্ত করা হয়েছে। সবচেয়ে বড় আপগ্র্যুলেশনটি ছিল একটি গ্লাইকোসাইড ডেরিভেটিভ (Log2FC=2.60; FC=6.06), একটি ফিনিলেথানয়েড গ্লাইকোসাইড-উত্পন্ন গ্লাইকোসাইড ক্যারেক্টার বা শক্তিশালী কনসেন্টসাইড থেকে প্রাপ্ত গ্লাইকোসাইড। সিস্তানচে ইচিনাকোসাইড এবং অ্যাক্টিওসাইডের মতো PhG-তে সমৃদ্ধ; গাঁজন করার সময় এই প্রোটোটাইপগুলি হাইড্রোলাইসিস, গ্লাইকোসিল স্থানান্তর বা পুনর্বিন্যাসের মধ্য দিয়ে যেতে পারে এই ধরনের অভিনব গ্লাইকোসিডিক ডেরিভেটিভ তৈরি করতে। ডিফারেনশিয়াল মেটাবোলাইটের মধ্যে রয়েছে একাধিক অ্যামিনো অ্যাসিড এবং ডেরিভেটিভস-যেমন, (E)-N5-(1-অ্যামিনোইথিলিডেন)-L-অর্নিথিন (Log2FC=1.76, up), trigonelloxazolidine (Log2FC=1.80), আপ), এবং মেথিওনিন ইথাইল এস্টার (Log2FC 146}, নিচের সাথে) ট্যাং এট আল। [১৫], যিনি উচ্চ-চিনির পরিবেশে অ্যামিনো অ্যাসিড জৈবসংশ্লেষণকে লক্ষ্য করেছেন স্বাদ গঠনের উপর ভিত্তি করে। Cistanche সংযোজন অতিরিক্ত নাইট্রোজেন বা অগ্রদূত প্রদান করতে পারে, শুধুমাত্র অ্যামিনো অ্যাসিড পথের মাধ্যমে প্রবাহ বৃদ্ধি করে না বরং নির্দিষ্ট রূপান্তরের দিকে পরিচালিত করে যা স্বতন্ত্র অ্যামিনো অ্যাসিড থেকে প্রাপ্ত স্বাদের যৌগ তৈরি করে।

 

2.3.6 KEGG পথ সমৃদ্ধকরণ

কী ডিফারেনশিয়াল মেটাবোলাইটের KEGG সমৃদ্ধকরণ (চিত্র 3-i) শীর্ষ 20টি পথ তুলে ধরেছে: ABC ট্রান্সপোর্টার, অ্যামিনো অ্যাসিডের জৈব সংশ্লেষণ, আর্জিনাইন বায়োসিন্থেসিস, পিউরিন মেটাবলিজম, অ্যামিনোঅ্যাসিল-টিআরএনএ বায়োসিন্থেসিস, ডি-অ্যামিনো অ্যাসিড মেটাবলিজম, ট্রিপটোপ মেটাবোলিজম, মেটাবোলিজম এবং মেটাবোলিজম। পথ, ট্রোপেন/পাইপেরিডিন/পাইরিডিন অ্যালকালয়েড জৈবসংশ্লেষণ, সায়ানোমাইনো অ্যাসিড বিপাক, ফ্ল্যাভোনয়েড বায়োসিন্থেসিস, 2-অক্সোকারবক্সিলিক অ্যাসিড বিপাক, গ্লুকোসিনোলেট বায়োসিন্থেসিস, ফ্ল্যাভোন এবং ফ্ল্যাভোনল জৈব সংশ্লেষণ, ক্যাফিন বিপাকীয় প্রক্রিয়া, ডিসক্রিয়েশন অ্যালানাইন/অ্যাসপার্টেট/গ্লুটামেট বিপাক, পাইরিমিডিন বিপাক এবং ভিটামিন বি 6 বিপাক। রং: বিপাকের জন্য নীল; পরিবেশগত তথ্য প্রক্রিয়াকরণের জন্য কমলা; জেনেটিক তথ্য প্রক্রিয়াকরণের জন্য সবুজ। এর মধ্যে, এবিসি ট্রান্সপোর্টার, অ্যামিনো অ্যাসিডের জৈব সংশ্লেষণ, আর্জিনাইন জৈব সংশ্লেষণ, পিউরিন বিপাক, অ্যামিনোঅ্যাসিল-টিআরএনএ বায়োসিন্থেসিস এবং ডি-অ্যামিনো অ্যাসিড বিপাক উল্লেখযোগ্য, সমৃদ্ধ যৌগিক সংখ্যা যথাক্রমে 138, 128, 23, 101, এবং 52,। ABC পরিবহণকারীরা অণুজীব ঝিল্লিতে মূল ট্রান্সমেমব্রেন পরিবহন মধ্যস্থতা করে, এটিপি হাইড্রোলাইসিস দ্বারা চালিত সাবস্ট্রেটগুলি (শর্করা, অ্যামিনো অ্যাসিড, অ্যান্টিবায়োটিক), সরাসরি পুষ্টি অর্জন এবং পরিবেশগত অভিযোজনকে প্রভাবিত করে [34]। গ্লুকোনোব্যাক্টর কার্যকরভাবে ইথানল গ্রহণ করে এবং ABC ট্রান্সপোর্টারদের মাধ্যমে অ্যাসিটিক গাঁজন চালায় [35]। Aminoacyl-tRNA জৈবসংশ্লেষণ অনুবাদের একটি মূল হার-সীমিত পদক্ষেপ। অ্যামিনো অ্যাসিড বিপাক ফল-ওয়াইন গাঁজনে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে; এর পণ্যগুলি জেরানিয়লের মতো বৈশিষ্ট্যযুক্ত সুবাস যৌগগুলিতে রূপান্তরিত হতে পারে, যা এটিকে সুগন্ধ গঠনের জন্য একটি মূল পথ করে তোলে [৩৬]।

 

3 উপসংহার

Hotan লাল আঙ্গুর ব্যবহার করে এবংসিস্তানচে, Cistanche Musalais-এর জন্য সর্বোত্তম প্রক্রিয়া 32 ডিগ্রি Bx প্রাথমিক চিনি, 25 ডিগ্রি গাঁজন তাপমাত্রা, এবং 7% Cistanche সংযোজন, অ্যালকোহল (12.6 ± 0.6)% ভলিউম, মোট অম্লতা (3.82 ± 0.19) g/L, মোট ফ্ল্যাভোনয়েডস (.0±L/01) এবং 0.00L) (0.60 ± 0.00) g/L. GC–MS 38টি সুবাস যৌগ সনাক্ত করেছে (24টি এস্টার, 6টি অ্যালকোহল, 2টি কিটোন, 2টি অ্যালডিহাইড, অন্যান্য)। ঐতিহ্যবাহী মুসালাইয়ের সাথে আপেক্ষিক, কী এস্টারগুলি সিস্টানচে এর সাথে উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল, যেমন, ইথাইল অ্যাসিটেট (6.42% বনাম. 2.42%) এবং ইথাইল পামিটেট (3.75% বনাম. 1.18%), যখন উচ্চতর অ্যালকোহল যেমন আইসোবুটানল কম ছিল (2.11% বনাম. 3.98%)। বিপাকবিদ্যা 230টি উল্লেখযোগ্যভাবে ভিন্ন বিপাক শনাক্ত করেছে (ভিআইপি 1, পি <0.05 এর চেয়ে বড় বা সমান): 125টি আপরেগুলেটেড (যেমন, মোগ্রোল আইসোমার, ক্রোসিন বি) এবং 64টি নিম্ননিয়ন্ত্রিত (যেমন, এল(+)-অর্নিথিন, এল(+)-সিট্রুলাইন)। কেইজিজি সমৃদ্ধকরণ এবিসি ট্রান্সপোর্টার এবং অ্যামিনো অ্যাসিড জৈবসংশ্লেষণ পথগুলিতে প্রাথমিক ক্লাস্টারিং নির্দেশ করে। ট্রাইগোনেলাইন, ক্রোসিন, ফ্ল্যাভোনয়েড এবং পলিফেনল সহ কার্যকরী সক্রিয়গুলি সিস্তানচে মুসালাইসে উল্লেখযোগ্যভাবে সমৃদ্ধ হয়েছিল, যা সম্ভাব্য স্বাস্থ্য সুবিধার পরামর্শ দেয়; অ্যামিনো অ্যাসিড জৈব সংশ্লেষণ চরিত্রগত গন্ধ গঠনে একটি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে। মূল গন্ধের গভীরতার জন্য, ভবিষ্যতের কাজে গ্যাস ক্রোমাটোগ্রাফি-অলফ্যাক্টোমেট্রি (GC–O) অন্তর্ভুক্ত করা উচিত যাতে প্রচুর পরিমাণে উদ্বায়ী পদার্থের গন্ধের কার্যকলাপ/অবদান (যেমন, FD ফ্যাক্টর) এবং ট্রাইগোনেলাইন, ক্রোনেভাল, স্বাস্থ্যের মান উন্নত করার জন্য নিখুঁত পরিমাণের জন্য লক্ষ্য পরিমাণগত MS (যেমন, MRM)।

মেটাবোলাইট শনাক্তকরণের জন্য ব্যবহৃত বাহ্যিক বর্ণালী/মেটাবোলাইট সংস্থানগুলির উত্স (পদ্ধতি 1.3.8.3 এ উদ্ধৃত ডেটাবেস অনুসারে):

হিউম্যান মেটাবোলোম ডেটাবেস (HMDB 5.0): https://hmdb.ca/ - রাসায়নিক, ক্লিনিকাল এবং জৈব রাসায়নিক ডেটা সহ 220,945 মেটাবোলাইট এন্ট্রি সহ একটি বিস্তৃত, অবাধে উপলব্ধ ডাটাবেস; টেক্সট, সিকোয়েন্স, স্ট্রাকচার, MS, এবং NMR সার্চ সমর্থন করে; KEGG, PubChem, MetaCyc, ChEBI, PDB, UniProt, এবং GenBank-এর সাথে সংযুক্ত। সংশ্লিষ্ট ডাটাবেস: ড্রাগব্যাঙ্ক, T3DB, SMPDB, FooDB।

LIPID MAPS: https://www.lipidmaps.org/ - একটি বিনামূল্যে, ওপেন-অ্যাক্সেস লিপিডমিক্স রিসোর্স। LMSD এখন 50,000 কিউরেটেড লিপিড স্ট্রাকচারকে ছাড়িয়ে গেছে বিশদ শ্রেণীবিভাগ, ক্রস-লিঙ্ক, এবং প্রোভেনেন্স সহ; এমএস বিশ্লেষণ, কাঠামো অঙ্কন, বর্ণালী ডাটাবেস, পথ, এবং নামকরণ/শ্রেণীবিন্যাস সরঞ্জাম সরবরাহ করে।

mzCloud - অ্যাডভান্সড ম্যাস স্পেকট্রাল ডেটাবেস: https://www.mzcloud.org/ - বর্ণালী, গঠন, উপকাঠামো, গাছ এবং m/z অনুসন্ধানগুলিকে সমর্থন করে৷ বর্তমান স্কেল: 32,330 যৌগ, 51,002 গাছ, এবং 16,531,567 বর্ণালী (2024 সালে + বৃদ্ধি)। Firefox/Chrome ডেস্কটপ ব্রাউজারগুলির জন্য অপ্টিমাইজ করা হয়েছে। কপিরাইট © 2013–2025 HighChem LLC।

 

তথ্যসূত্র

[18] ফ্যান GS, Wu QH, Liu PX, et al. বাইজিউতে এস্টারের সংশ্লেষণে লিপেসের ভূমিকা নিয়ে গবেষণার অগ্রগতি। চাইনিজ ইনস্টিটিউট অফ ফুড সায়েন্স অ্যান্ড টেকনোলজির জার্নাল. 2021;21(1):351–360।
[১৯] Xue J, Wang YA, Jia XH, et al. ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইডের শ্রেণীবিভাগ এবং গবেষণার অগ্রগতি। জার্নাল অফ ফার্মাসিউটিক্যাল রিসার্চ. 2018;37(5):282–290।
[২০] লিউ সিওয়াই, ঝাও এক্সকিউ, কং এলআর, এট আল। উদ্বায়ী গন্ধ উপাদান এবং বায়ু-শুকনো সসেজের গুণমানে তুঁত ব্র্যান্ডির প্রভাব। খাদ্য বিজ্ঞান. 2023;44(6):244–253.
[২১] রেন ওয়াইটি, কিয়াও এমএল, সান জেডওয়াই, এট আল। হালকা-গন্ধ Baijiu এর গাঁজন সময় উচ্চ অ্যালকোহল গঠন আইন. খাদ্য ও গাঁজন শিল্প. 2023;49(4):38–44.
[২২] Cao WY, Shu N, Yang YM, et al. মৌলিক শারীরিক এবং রাসায়নিক সূচক, রঙ এবং উদ্বায়ী যৌগের উপর ভিত্তি করে নয়টি আঙ্গুরের জাতগুলির ব্যাপক মূল্যায়ন। গবেষণা প্রতিবেদন. 2023;13(2):121–144।
[২৩] Zhou R, Yuan Q, Jin XY, et al. শক্তিশালী-সস-গন্ধ বয়সী বাইজিউ-এর সুগন্ধ উপাদানগুলির বিশ্লেষণ। চায়না ব্রুইং. 2020;39(7):137–143.
[২৪] লুও ওয়াই, কং এলএইচ, জু আরকিউ, এট আল। অ্যালকোহলযুক্ত পানীয়গুলিতে তিক্ততা: উপলব্ধি, উপাদান এবং অবদানকারীদের প্রোফাইল। খাদ্য বিজ্ঞান ও প্রযুক্তির প্রবণতা. 2020;96:222–232।
[২৫] হুয়াং ওয়াইএইচ, কাও টিএইচ, চেন বিএইচ। মডেল সিস্টেম এবং বাণিজ্যিক খাবারে ফুরান এবং 10টি ডেরিভেটিভ গঠন অধ্যয়নের জন্য HS-SPME-তীরের সাথে মিলিত একটি GC-MS/MS পদ্ধতির বিকাশ। খাদ্য রসায়ন. 2022;395:133572.
[২৬] রবেলস এ, ফ্যাবজানোভিজ এম, চমিয়েল টি, এট আল। ওয়াইন নমুনায় জৈব অ্যাসিড নির্ধারণ এবং সনাক্তকরণ: সমস্যা এবং চ্যালেঞ্জ। বিশ্লেষণাত্মক রসায়নে ট্রাক ট্রেন্ডস. 2019;120:115630।
[২৭] শাও এসএক্স, জু এমটি, লিন ওয়াইপি, এট আল। ইলেকট্রনিক নাক এবং HS-SPME-GC-MS ব্যবহার করে বিভিন্ন ভৌগলিক উত্স থেকে Huangguanyin oolong চায়ের সুগন্ধের উপাদানগুলির পার্থক্য বিশ্লেষণ। খাদ্য বিজ্ঞান. 2023;44(4):232–239।
[২৮] নি আরজে, ঝাঁ পি, তিয়ান এইচএল। GC-IMS এবং মাল্টিভেরিয়েট পরিসংখ্যান দ্বারা বিশ্লেষিত হিসাবে ভাজা মরিচ তেলের উদ্বায়ী গন্ধ যৌগের উপর ভাজার সময়ের প্রভাব। খাদ্য বিজ্ঞান. 2022;43(6):279–286.
[২৯] জিন ডব্লিউজি, লিউ জেএক্স, সান এইচওয়াই, এট আল। GC-IMS এবং কেমোমেট্রিক্স দ্বারা চিনাবাদাম তেলের সাথে ভেজাল দৈত্য স্যালামন্ডার তেলের উদ্বায়ী জৈব যৌগের বৈশিষ্ট্য। খাদ্য বিজ্ঞান. 2023;44(10):368–376.
[৩০] ঝাং ওয়াই, টং এক্সওয়াই, চেন বিজে, এট আল। সাইট্রাস রেটিকুলাটা পেরিক্যার্পে আঙ্গুলের ছাপ এবং স্বাদের ভিন্নতার জন্য HS–GC–IMS বিভিন্ন অ্যাসপারগিলাস নাইগার গাঁজন সহ স্টোরেজের সময়। খাদ্য রসায়ন. 2023;18:100653.
[৩১] লু ইয়া, লিউ এসজে, লিন এলএম, এট আল। প্রুনেলা ভালগারিসের ডিফারেনশিয়াল মেটাবোলাইট UPLC-MS/MS-এর উপর ভিত্তি করে বিভিন্ন পর্যায়ে স্পাইক করে। চায়না জার্নাল অফ চাইনিজ মেটেরিয়া মেডিকা. 2024;49(10):2734–2744।
[৩২] চেন এল, জিয়াং এক্সকিউ, ইউয়ান টি, এট আল। অ্যান্টিবায়োটিকের অ্যান্টিব্যাকটেরিয়াল ক্রিয়াকলাপ বৃদ্ধিতে চীনা ওষুধের প্রভাব এবং প্রক্রিয়া এবং এর সক্রিয় উপাদান: একটি পর্যালোচনা। চাইনিজ জার্নাল অফ এক্সপেরিমেন্টাল ট্র্যাডিশনাল মেডিকেল ফর্মুলা. 2025;31(11):305–313।
[৩৩] ইয়াং এসকিউ, লিউ ডব্লিউ, গান এমআর, এট আল। NF-κB/MMP-9 সংকেতের মাধ্যমে রেনাল সেল কার্সিনোমা কোষের আক্রমণ এবং স্থানান্তরের উপর ট্রাইগোনেলাইনের প্রভাব। চাইনিজ জার্নাল অফ জেরিয়াট্রিক্স. 2024;44(8):1998–2004।