বিমূর্ত

বর্তমান উদ্ভাবনটি প্রকাশ করে কহাড়ের খনিজ ঘনত্ব (BMD) উন্নত করার জন্য Cistanche নির্যাস. নির্যাস মধ্যে,ইচিনাকোসাইড এবং অ্যাক্টিওসাইডের মোট বিষয়বস্তু (ভারবাস্কোসাইড)হয়>২৫ wt%. নির্যাস সম্পাদন দ্বারা প্রস্তুত করা হয়পাতিত জল নিষ্কাশনএরএর অপরিশোধিত গুঁড়াCistanche tubulosa, অনুসরণ করেপরিস্রাবণ, কেন্দ্রীভূতকরণপরিস্রুত এর,একাগ্রতা, তরল-তরল নিষ্কাশন, অপবিত্রতা অপসারণ সঙ্গে ঘনত্ব, dilution, পোস্ট-ট্রিটমেন্ট, এবং তারপরচূড়ান্ত ঘনত্ব এবং শুকানোরCistanche নির্যাস পেতে.

 

 

Cistanche নিষ্কাশন প্রক্রিয়া

উদ্ভাবন অনুসারে হাড়ের খনিজ ঘনত্ব উন্নত করার জন্য সিস্টানচে নির্যাস,ইচিনাকোসাইড এবং অ্যাক্টিওসাইডের মোট সামগ্রীহয়25-30 wt%(25 wt% ব্যতীত), এবং নির্যাসটিও সমৃদ্ধশিকিমিক অ্যাসিডসেইসাথেphenylpropionic-অ্যাসিড-টাইপ উপাদানএবংঅ্যালকালয়েড-টাইপ উপাদান, এটা সক্রিয় করাস্থিরভাবে একটি হাড়-ঘনত্ব-উন্নতি প্রভাব প্রয়োগ করুন.

 

দাবি

1. প্রস্তুতির পদ্ধতি

হাড়ের খনিজ ঘনত্বের উন্নতির জন্য একটি সিস্টানচে নির্যাস প্রস্তুত করার একটি পদ্ধতি, এতে নিম্নলিখিত পদক্ষেপগুলি অন্তর্ভুক্ত রয়েছে:

নিষ্পেষণCistanche tubulosaএর অপরিশোধিত গুঁড়া পেতেCistanche tubulosa;

এর অপরিশোধিত পাউডারে পাতিত জল যোগ করাCistanche tubulosaনিষ্কাশন, ফিল্টারিং, পরিস্রাবণ কেন্দ্রীভূতকরণ এবং ঘনীভূত সমাধান পাওয়ার জন্যCistanche tubulosa;

এর ঘনীভূত সমাধান নিষ্কাশন করা হচ্ছেCistanche tubulosa, অমেধ্য অপসারণের জন্য নিম্ন নিষ্কাশন পর্যায়ে ঘনীভূত করা, এবং একটি লোডিং সমাধান পেতে পাতলা করা;

লোডিং দ্রবণটির চিকিত্সার পরে, সিস্টানচে নির্যাস পাওয়ার জন্য ঘনত্ব এবং শুকানোর পরে।

2. জল থেকে উপাদানের অনুপাত

দাবি 1 অনুযায়ী পদ্ধতি, যেখানে অশোধিত পাউডারের ভর-থেকে-ভলিউম অনুপাতCistanche tubulosaপাতিত জল হয়1 : (15–25).

3. নিষ্কাশন তাপমাত্রা

দাবি 1 অনুযায়ী পদ্ধতি, যেখানে পাতিত জল নিষ্কাশন তাপমাত্রা60-100 ডিগ্রী.

4. তরল-তরল নিষ্কাশনের সময় অনুপাত

দাবি 1 অনুযায়ী পদ্ধতি, যেখানে ঘনীভূত দ্রবণ নিষ্কাশনের সময়, ঘনীভূত দ্রবণের আয়তনের অনুপাতCistanche tubulosaনিষ্কাশন দ্রাবক হয়1 : (1–5).

5. নিষ্কাশন দ্রাবক

দাবি 4 অনুযায়ী পদ্ধতি, যেখানে নিষ্কাশন দ্রাবক অন্তত একটি গঠিতপেট্রোলিয়াম ইথার, ইথাইল অ্যাসিটেট, এন-হেক্সেন, বা সাইক্লোহেক্সেন.

6. পোস্ট-ট্রিটমেন্ট প্রক্রিয়া

দাবি 1 অনুযায়ী পদ্ধতি, যেখানে লোডিং সলিউশনের পোস্ট-ট্রিটমেন্ট অন্তর্ভুক্ত: একটি মাধ্যমে লোডিং সলিউশন পাস করাম্যাক্রোপোরাস রজন, এবং তারপর সঙ্গে ক্রমানুসারে elutingপাতিত জলএবং একটিইথানল সমাধান.

7. ইলিউশন ভলিউম

দাবি 6 অনুসারে পদ্ধতি, যেখানে ম্যাক্রোপোরাস রজনে পাতিত জলের আয়তনের অনুপাত(5–10) : 1, এবং ম্যাক্রোপোরাস রজনে ইথানল দ্রবণের আয়তনের অনুপাত(3–9) : 1.

8. নির্যাস

হাড়ের খনিজ ঘনত্বের উন্নতির জন্য একটি সিস্টানচে নির্যাস, এটি বৈশিষ্ট্যযুক্ত যে এটি 1-7 দাবির যেকোনো একটি অনুযায়ী প্রস্তুত করা হয়।

9. সক্রিয় মার্কার সামগ্রী

দাবি 8 অনুযায়ী সিস্টানচে নির্যাস, যেখানে ইচিনাকোসাইড এবং অ্যাক্টিওসাইডের মোট বিষয়বস্তু25-30 wt%, 25 wt% ব্যতীত.

10. আবেদন

হাড়ের খনিজ ঘনত্ব উন্নত করার জন্য একটি পণ্য প্রস্তুত করার জন্য 8-9 দাবিগুলির যে কোনও একটি অনুসারে সিস্তানচে নির্যাস ব্যবহার করা, যেখানে পণ্যটিতে সিস্তানচে নির্যাসের ঘনত্ব12.5-25 ug/mL.

 

প্রযুক্তিগত ক্ষেত্র

[0001] বর্তমান উদ্ভাবন ক্ষেত্রের সাথে সম্পর্কিতমেডিকেল ফর্মুলেশন, এবং বিশেষভাবে একটি এর সাথে সম্পর্কিতহাড়ের খনিজ ঘনত্ব উন্নত করার জন্য সিস্টানচে নির্যাস, এরপ্রস্তুতি পদ্ধতি, এবংঅ্যাপ্লিকেশন.

পটভূমি

[0002] Cistanche বলতে ওরোবাঞ্চেসি উদ্ভিদের স্কেল পাতা সহ শুকনো মাংসল কান্ডকে বোঝায়Cistanche deserticola YC MaবাCistanche tubulosa (Schenk) Wight. Cistanche যেমন একাধিক কার্যক্রম আছেরোগ প্রতিরোধ ক্ষমতা নিয়ন্ত্রণ, প্রদাহ বিরোধী, বিরোধী ক্লান্তি, অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, নিউরোপ্রোটেক্টিভ, এবংপ্রজনন সিস্টেম সমর্থন.

Phenylethanoid glycosides (PhGs)-সহechinacosideএবংঅ্যাক্টিওসাইড (ভারবাস্কোসাইড)Cistanche-এ প্রধান PhG-গুলি গুরুত্বপূর্ণ উপাদান।ইচিনাকোসাইডউপর প্রভাব আছে প্রদর্শিত হয়েছেহাড়ের খনিজ ঘনত্ব উন্নত করা. যাইহোক, আমরা দেখতে পেয়েছি যে সিস্তানচে নির্যাসের হাড়-ঘনত্ব-উন্নতি প্রভাবইচিনাকোসাইড সামগ্রীর সাথে সম্পূর্ণভাবে সম্পর্কিত নয়. সহজভাবে ইচিনাকোসাইড সামগ্রী নিয়ন্ত্রণ করানিশ্চিত করতে পারে নাযে নির্যাস হবেস্থিরভাবেএকটি হাড়-ঘনত্ব-উন্নতি প্রভাব প্রয়োগ করুন। অতএব, এটি একটি Cistanche নির্যাস এবং একটি প্রস্তুতি পদ্ধতি যা করতে পারে বিকাশ করা অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণস্থিরভাবেকাঙ্খিত হাড়-ঘনত্ব-সমর্থক প্রভাব প্রদান করে।

[0003] চীনা উদ্ভাবন পেটেন্ট আবেদনCN102441040Aসিস্তানচে থেকে মোট ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইডের জন্য একটি প্রস্তুতির পদ্ধতি প্রকাশ করে পালভারাইজেশন, নিষ্কাশন, ম্যাক্রোপোরাস রজন শোষণ, ইলুশন, ঘনত্ব, ইত্যাদির মাধ্যমে। দুর্বলভাবে অম্লীয় অবস্থার (পিএইচ 2-4) অধীনে, সিস্তানচে ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইডের স্থায়িত্ব উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত হয়, এবং জিকোসাইডের মোট অ্যাক্টিভিটি অ্যাক্টিভসাইডের মধ্যে রয়েছে। সম্মিলিত অনুপাত > 90%। তবে পণ্যটি পারবে কিনা তা যাচাই করা হয়নিস্থিরভাবেহাড়ের খনিজ ঘনত্ব উন্নত করুন।

চীনা উদ্ভাবন পেটেন্ট আবেদনCN105111255Aসিস্টানচে থেকে ইচিনাকোসাইড এবং অ্যাক্টিওসাইড নিষ্কাশন এবং পৃথক করার একটি পদ্ধতি প্রকাশ করে, নিষ্কাশন দ্রাবক হিসাবে 75% ইথানল, প্যাকিং উপাদান হিসাবে AB-8 ম্যাক্রোপোরাস রজন, এবং 55% ইথানল ইলিউশন ব্যবহার করে, ইচিনাকোসাইড > 25%, Ph > 10% > মোট > 8%, অ্যাক্টিওসাইড সহ সিস্টানচে নির্যাস দেয়। যাইহোক, এটি এখনও একটি গ্যারান্টি নাও হতে পারেস্থিতিশীলহাড়-ঘনত্ব-উন্নতি প্রভাব।

 

উদ্ভাবনের সারাংশ

[0004] একটি Cistanche নির্যাস এবং প্রস্তুতি পদ্ধতি বিকাশ করতে পারেন যেস্থিরভাবেউন্নত হাড়ের খনিজ ঘনত্ব সমর্থন করে, আবিষ্কারটি প্রদান করে:

প্রথম দিক: প্রস্তুতির পদ্ধতি

হাড়ের খনিজ ঘনত্ব উন্নত করার জন্য সিস্টানচে নির্যাসের জন্য একটি প্রস্তুতির পদ্ধতি, যার মধ্যে রয়েছে:

নিষ্পেষণCistanche tubulosaঅশোধিত গুঁড়া প্রাপ্ত করার জন্য;

পাতিত জল দিয়ে অপরিশোধিত গুঁড়া নিষ্কাশন, ফিল্টারিং, সেন্ট্রিফিউজিং, এবং ঘনীভূত দ্রবণ পেতে মনোনিবেশ করা;

নিষ্কাশন সম্পাদন; অমেধ্য অপসারণের জন্য নিম্ন পর্যায়ে ঘনীভূত করা; একটি লোডিং সমাধান পেতে diluting;

Cistanche নির্যাস প্রাপ্ত করার জন্য লোডিং দ্রবণ, ঘনীভূতকরণ এবং শুকানোর পরে চিকিত্সা করা।

[0005] একটি মূর্তিতে, অশোধিত গুঁড়া একটি মাধ্যমে পাস হয়40-জালচালনি

[0006] একটি মূর্তিতে, অপরিশোধিত পাউডার এবং পাতিত জলের ভর-থেকে-ভলিউম অনুপাত হল1 : (15–25).

[0007] একটি মূর্তিতে, ভর-থেকে-ভলিউম অনুপাত1 : 20.

[0008] এক মূর্তিতে, নিষ্কাশন তাপমাত্রা হয়60-100 ডিগ্রী.

[0009] এক মূর্তিতে, নিষ্কাশন তাপমাত্রা হয়80 ডিগ্রী.

[0010] এক মূর্তিতে, নিষ্কাশন সঞ্চালিত হয়1-2 বার, প্রতিবার 1 ঘন্টা.

[0011] একটি মূর্তিতে, পরিস্রাবণ একটি মাধ্যমে সঞ্চালিত হয়80-জালফিল্টার

[0012] এক মূর্তিতে, সেন্ট্রিফিউগেশন গতি3000-4000 r/minএবং সময় হয়3-9 মিনিট.

[0013] এক মূর্তিতে, সেন্ট্রিফিউগেশন গতি3500 r/মিনিটএবং সময় হয়5 min.

[0014] একটি মূর্তিতে, কেন্দ্রীভূতকরণের পরে, পরিস্রাবণটি এখানে ঘনীভূত হয়70 ডিগ্রীথেকে18%–28%প্রাথমিক আয়তনের।

[0015] একটি মূর্তিতে, ঘনীভূত দ্রবণ নিষ্কাশনের সময়, নিষ্কাশন দ্রাবক থেকে ঘনীভূত দ্রবণের আয়তনের অনুপাত হয়1 : (1–5).

[0016] একটি মূর্ত মধ্যে, অনুপাত হয়1 : 3.

[0017] একটি মূর্তিতে, নিষ্কাশন দ্রাবক অন্তত একটি গঠিতপেট্রোলিয়াম ইথার, ইথাইল অ্যাসিটেট, এন-হেক্সেন, বা সাইক্লোহেক্সেন.

[0018] একটি মূর্তিতে, নিষ্কাশন ক্রমানুসারে ব্যবহার করে সঞ্চালিত হয়পেট্রোলিয়াম ইথারদ্বারা অনুসরণ করাইথাইল অ্যাসিটেট.

[0019] একটি মূর্তিতে, "অশুদ্ধতা অপসারণের সাথে ঘনত্ব" মানে নিম্ন নিষ্কাশন পর্বকে একটি পেস্টে ঘনীভূত করা, এটিকে দ্রবীভূত করা।50 wt% জলীয় ইথানলের 300 মিলিঅমেধ্য অপসারণ, এবং সামঞ্জস্য1.0-1.5 গ্রাম অপরিশোধিত ভেষজ প্রতি এমএললোডিং সমাধান হিসাবে।

[0020] একটি মূর্তিতে, লোডিং সমাধান ঘনত্ব হয়1.0-1.5 গ্রাম অপরিশোধিত ঔষধি/মিলি জল.

[0021] একটি মূর্তিতে, পোস্ট-ট্রিটমেন্টের মাধ্যমে লোডিং দ্রবণটি পাস করা অন্তর্ভুক্ত।ম্যাক্রোপোরাস রজন, এবং তারপর সঙ্গে ক্রমানুসারে elutingপাতিত জলএবং একটিইথানল সমাধান.

[0022] একটি মূর্তিতে, ম্যাক্রোপোরাস রজনের মাধ্যমে লোডিং প্রবাহের হার1-5 মিলি/মিনিট.

[0023] এক মূর্তিতে, রজন হয়AB-8 ম্যাক্রোপোরাস রজনএকটি রজন ভলিউম সঙ্গে0.93 L.

[0024] একটি মূর্তিতে, পাতিত জলের সাথে রজনের আয়তনের অনুপাত হল(5–10) : 1, এবং রজন থেকে ইথানল দ্রবণের আয়তনের অনুপাত(3–9) : 1.

[0025] একটি মূর্তিতে, পাতিত জলের সাথে রজনের আয়তনের অনুপাত হল7 : 1, এবং রজনে ইথানল দ্রবণের অনুপাত6 : 1.

[0026] একটি মূর্তিতে, ইথানল দ্রবণ80% (w/w) জলীয় ইথানল.

দ্বিতীয় দিক: নির্যাস

[0027] উদ্ভাবনটি উপরের পদ্ধতি দ্বারা প্রস্তুত একটি সিস্টানচে নির্যাস প্রদান করে।

[0028] একটি মূর্তিতে, ইচিনাকোসাইড এবং অ্যাক্টিওসাইডের মোট বিষয়বস্তু25-30 wt%, 25 wt% ব্যতীত।

তৃতীয় দিক: ব্যবহার করুন

[0029] উদ্ভাবনটি হাড়ের খনিজ ঘনত্বের উন্নতির জন্য পণ্য প্রস্তুত করার জন্য সিস্টানচে নির্যাসের ব্যবহার প্রদান করে, যেখানে পণ্যটিতে নির্যাসের ঘনত্ব12.5-25 ug/mL.

 

সুবিধা / উপকারী প্রভাব

[০০৩০] পূর্ববর্তী শিল্পের সাথে তুলনা করে, উদ্ভাবনের নিম্নলিখিত উপকারী প্রভাব রয়েছে:

Cistanche নির্যাস রয়েছে25-30 wt%মোট ইচিনাকোসাইড এবং অ্যাক্টিওসাইড, এবং সমৃদ্ধশিকিমিক অ্যাসিড, phenylpropionic-অ্যাসিড-টাইপ উপাদান, অ্যালকালয়েড, এবংফ্যাটি অ্যাসিড, এটা সক্রিয় করাস্থিরভাবেহাড়ের খনিজ ঘনত্বের উন্নতিতে সহায়তা করে।

মধ্যে12.5-25 ug/mLঘনত্ব পরিসীমা, নির্যাস বিস্তার প্রচার করেMC3T3-E1চমৎকার proliferative প্রভাব সঙ্গে কোষ.

নির্যাস কোষের বিস্তার প্রচারে একই ডোজ-সম্পর্কিত প্রবণতা দেখায় এবংALP কার্যকলাপ, এবং স্থিরভাবে বিস্তার এবং পার্থক্য প্রচার করতে পারে। অস্টিওব্লাস্ট খনিজকরণের প্রচারে, এটি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণের চেয়ে ভাল প্রভাব দেখায়17 -এস্ট্রাডিওল.

নির্যাস অস্টিওব্লাস্ট-নির্দিষ্ট ট্রান্সক্রিপশন কারণগুলিকে উদ্দীপিত করেRunx2এবংওএসএক্স, অস্টিওব্লাস্ট পার্থক্য বাড়ায়, এবং অস্টিওজেনিক মার্কার প্রকাশের প্রচার করেOPNএবংওসিএন, যার ফলে হাড় গঠন প্রচার. এটাও বাড়েBmp2 mRNAএক্সপ্রেশন সক্রিয় করে অস্টিওব্লাস্ট পার্থক্য এবং নতুন হাড় গঠন উন্নতBMP/Smad পথ; উপরন্তু, নিয়ন্ত্রন দ্বারাLrp5 mRNA, Lrp6 mRNA, এবংWnt3 mRNA, এটা সক্রিয়Wnt/ -catenin সংকেত, ডাউনস্ট্রিম ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টর এক্সপ্রেশনকে প্রভাবিত করে এবং অস্টিওব্লাস্ট পার্থক্য এবং হাড় গঠনের প্রচার করে।

প্রস্তুতির পদ্ধতিতে ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইড (ইচিনাকোসাইড এবং অ্যাক্টিওসাইড), শিকিমিক অ্যাসিড এবং ফিনাইলপ্রোপিয়নিক অ্যাসিড, অ্যালকালয়েড এবং ফ্যাটি অ্যাসিড ধারণকারী নির্যাস পাওয়া যায়। এই উপাদানগুলি একত্রে নির্যাসকে প্রসারণ, পার্থক্য এবং খনিজকরণে সামঞ্জস্যপূর্ণ ডোজ-নির্ভরতা প্রদর্শন করার অনুমতি দেয়, স্থিতিশীল হাড়-ঘনত্ব-সমর্থক প্রভাবগুলি সক্ষম করে।

 

অঙ্কন সংক্ষিপ্ত বিবরণ

[0035] চিত্র. 1: MC3T3-E1 কোষের বিস্তারে নির্যাসের প্রভাব (উদাহরণ 1)
চিত্র. 2: MC3T3-E1 কোষের বিস্তারে নির্যাসের প্রভাব (উদাহরণ 2)
চিত্র. 3: MC3T3-E1 কোষের বিস্তারে নির্যাসের প্রভাব (উদাহরণ 3)
চিত্র. 4: ALP কার্যকলাপে নির্যাসের প্রভাব (উদাহরণ 1)
চিত্র. 5: ALP কার্যকলাপের উপর নির্যাসের প্রভাব (উদাহরণ 2)
চিত্র. 6: ALP কার্যকলাপে নির্যাসের প্রভাব (উদাহরণ 3)
চিত্র. 7: অস্টিওব্লাস্ট খনিজকরণের অ্যালিজারিন লাল দাগের ছবি (উদাহরণ 2)
চিত্র. 8: অস্টিওব্লাস্ট খনিজকরণের পরিমাণগত ফলাফল (উদাহরণ 2)
চিত্র. 9–12: Runx2, Osx, Opn, Ocn mRNA এক্সপ্রেশনে উদাহরণ 2-এর প্রভাব
চিত্র. 13: Bmp2 mRNA এক্সপ্রেশনে উদাহরণ 2 এর প্রভাব (BMP/Smad)
চিত্র. 14–16: Lrp5, Wnt3, Lrp6 mRNA এক্সপ্রেশনে উদাহরণ 2 এর প্রভাব (Wnt/ -catenin)
চিত্র. 17–18: Osx এবং RUNX2 প্রোটিন অভিব্যক্তিতে উদাহরণ 2-এর প্রভাব

 

বিশদ বিবরণ / প্রতিমূর্তি

উদাহরণ 1

[0036] একটি প্রস্তুতি পদ্ধতির মধ্যে রয়েছে:

নিষ্পেষণCistanche tubulosa, প্রাপ্ত করার জন্য একটি 40-জাল চালনী মাধ্যমে ক্ষণস্থায়ী200 gঅশোধিত গুঁড়া;

সঙ্গে নিষ্কাশন5× ভরে পাতিত জল(যেমন বর্ণনা করা হয়েছে), এ এক্সট্রাক্ট করা হচ্ছে75 ডিগ্রীজন্য2 বার, 1 ঘন্টা প্রতিটি, এ মনোনিবেশ করা70 ডিগ্রীএকটি ঘনত্ব অনুপাত1 : 2.2একটি ঘনীভূত সমাধান পেতে;

চূড়ান্ত ইথানল ভর ঘনত্বের সাথে গ্রেডেড ইথানল বৃষ্টিপাতের জন্য ঘনীভূত দ্রবণে পরম ইথানল যোগ করা20%, 40%, 60%, 80%, এ বৃষ্টিপাত24 ঘন্টার জন্য 5 ডিগ্রী, পরে supernatant সংগ্রহ80 wt%ইথানল বৃষ্টিপাত;

ঘনীভূত এবং শুকিয়ে এ70 ডিগ্রীCistanche নির্যাস প্রাপ্ত করার জন্য, একটি ফলন সঙ্গে20.75%.

উদাহরণ 2

[০০৩৭] একটি প্রস্তুতি পদ্ধতির মধ্যে রয়েছে:

নিষ্পেষণCistanche tubulosaপেতে240 gঅশোধিত গুঁড়া;

পাতিত জল দিয়ে নিষ্কাশন, ফিল্টারিং, সেন্ট্রিফিউজিং, এবং ঘনীভূত দ্রবণ পেতে মনোনিবেশ করা;

ঘনীভূত সমাধান নিষ্কাশন; অমেধ্য অপসারণের জন্য নিম্ন পর্যায়ে ঘনীভূত করা; একটি লোডিং সমাধান পেতে diluting;

লোডিং দ্রবণটির চিকিত্সার পরে; ঘনীভূত এবং শুকিয়ে এ70 ডিগ্রীনির্যাস প্রাপ্ত করার জন্য, একটি ফলন সঙ্গে19.69%.

[0038] অপরিশোধিত গুঁড়া একটি 40-জাল চালুনির মধ্য দিয়ে যায়।
[০০৩৯] পাতিত জলে অপরিশোধিত পাউডারের ভর থেকে আয়তনের অনুপাত হল1 : 20.
[0040] নিষ্কাশন তাপমাত্রা হয়80 ডিগ্রী.
[0041] নিষ্কাশন সঞ্চালিত হয়1-2 বার, 1 ঘন্টা প্রতিটি.
[0042] পরিস্রাবণ একটি মাধ্যমে হয়80-জালফিল্টার
[০০৪৩] সেন্ট্রিফিউগেশন5 মিনিটের জন্য 3500 r/min.
[0044] কেন্দ্রীকরণের পরে ঘনত্ব: এ মনোনিবেশ করুন70 ডিগ্রীথেকে20%প্রাথমিক আয়তনের।
[০০৪৫] নিষ্কাশনের সময়, ঘনীভূত দ্রবণের আয়তনের অনুপাত দ্রাবক1 : 3.
[0046] নিষ্কাশন সঙ্গে ক্রমানুসারে সঞ্চালিত হয়পেট্রোলিয়াম ইথারএবংইথাইল অ্যাসিটেট.
[0047] নীচের পর্বটি একটি পেস্টে ঘনীভূত হয় এবং দ্রবীভূত হয়50 wt% জলীয় ইথানলের 300 মিলিঅমেধ্য অপসারণ করতে।
[০০৪৮] লোড হচ্ছে সমাধান ঘনত্ব:1.0 গ্রাম অপরিশোধিত ঔষধি/মিলি জল.
[০০৪৯] পোস্ট-ট্রিটমেন্ট: ম্যাক্রোপোরাস রেজিনের মধ্য দিয়ে যায়, পাতিত জল দিয়ে ইলুট তারপর ইথানল দ্রবণ।
[0050] রজন মাধ্যমে প্রবাহ হার:3 মিলি/মিনিট.
[0051] রজন:AB-8, রজন ভলিউম0.93 L.
[0052] পাতিত জল থেকে রজন ভলিউম অনুপাত:7 : 1. ইথানল-দ্রবণ থেকে রজন অনুপাত:6 : 1.
[0053] ইথানল সমাধান:80% (w/w)জলীয় ইথানল।

 

cistanche কারখানা সম্পর্কে আরো বিস্তারিত জানতে ক্লিক করুন

উদাহরণ 3

[০০৫৩] একটি প্রস্তুতি পদ্ধতির মধ্যে রয়েছে:

নিষ্পেষণCistanche tubulosa, প্রাপ্ত করার জন্য একটি 40-জাল চালনী মাধ্যমে ক্ষণস্থায়ী120 gঅশোধিত গুঁড়া;

সঙ্গে নিষ্কাশন12× ভরএর50 wt% জলীয় ইথানল, extracting at70 ডিগ্রী, 2 বার, 1 ঘন্টা প্রতিটি, এ মনোনিবেশ করা70 ডিগ্রীএকটি অনুপাত থেকে1 : 2.5একটি ঘনীভূত সমাধান পেতে;

ঘনত্ব সামঞ্জস্য করতে জল যোগ করা0.2 গ্রাম অপরিশোধিত ভেষজ/মিলি জল, সেন্ট্রিফিউজিং এ5 মিনিটের জন্য 3500 r/min, লোডিং দ্রবণ হিসাবে সুপারনাট্যান্ট গ্রহণ;

ম্যাক্রোপোরাস রজন মাধ্যমে ক্ষণস্থায়ী; পাতিত জল এবং ইথানল দ্রবণ দিয়ে ক্রমান্বয়ে ইলুটিং; ইথানল নির্গতকরণ সংগ্রহ করা এবং ঘনীভূত করা/শুকানো70 ডিগ্রীএকটি ফলন সঙ্গে নির্যাস প্রাপ্ত করার জন্য24.30%.

[0054] রজন:HPD750, রজন ভলিউম0.93 L.
[0055] পাতিত জল থেকে রজন অনুপাত:3 : 1. ইথানল-দ্রবণ থেকে রজন অনুপাত:4 : 1.
[0056] ইথানল সমাধান:30% (w/w)জলীয় ইথানল।

 

কর্মক্ষমতা পরীক্ষা

1.1 কোষের বিস্তার পরীক্ষা

[০০৫৭] অস্টিওব্লাস্ট হল হাড় গঠনের জন্য দায়ী প্রধান কার্যকরী কোষ, যার মধ্যে প্রাক-অস্টিওব্লাস্টের বিস্তার, হাড়ের ম্যাট্রিক্সের উৎপাদন এবং চূড়ান্ত পার্থক্য জড়িত। দMC3T3-E1সেল লাইন সাধারণত অস্টিওজেনিক কার্যকলাপ অধ্যয়ন করতে ব্যবহৃত হয়। অস্টিওব্লাস্ট ডিফারেন্সিয়েশনের মধ্যে রয়েছে বিস্তার, পার্থক্য এবং খনিজকরণ-প্রক-অস্টিওব্লাস্ট সংখ্যা বৃদ্ধি, অস্টিওব্লাস্টে পরিপক্কতা এবং নতুন হাড়ের ম্যাট্রিক্স গঠন।

ক্ষারীয় ফসফেটেস (ALP)এটি একটি অস্টিওব্লাস্ট ফেনোটাইপ-সম্পর্কিত প্রোটিন যা কোষের বিস্তার এবং ম্যাট্রিক্স পরিপক্কতার সময় সনাক্ত করা যায় এবং এটি অস্টিওব্লাস্ট পার্থক্যের একটি সাধারণভাবে ব্যবহৃত প্রাথমিক চিহ্নিতকারী।

অতএব, MC3T3-E1 প্রসারণ এবং ALP কার্যকলাপ মূল্যায়ন করে, উদাহরণ 1-3-এ প্রস্তুত করা নির্যাসের অস্টিওজেনেসিস-প্রোমোটিং কার্যকলাপ তুলনা করা হয়েছিল।

MC3T3-E1 কোষগুলি পুনরুজ্জীবিত এবং পাস করা হয়েছিল। স্থিতিশীলতার পরে, কোষগুলি হজম, কেন্দ্রীভূত এবং সংগ্রহ করা হয়েছিল। কোষের ঘনত্ব সামঞ্জস্য করা হয়েছিল যাতে প্রতিটি 100 μL 5 × 1035 \\ বার 10^ 35 × 103 কোষ ধারণ করে এবং একটি 96-ওয়েল প্লেটে বীজ করা হয়। রাতারাতি কালচারের পরে, মাধ্যমটিকে সম্পূর্ণ মাধ্যম দিয়ে প্রতিস্থাপিত করা হয়েছিল যার ঘনত্বে উদাহরণ 1-3 নির্যাস রয়েছে6.25, 12.5, 25, এবং 50 ug/mL, বা ধারণকারী0.1 এম এস্ট্রাডিওল(ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ), বা মাঝারি একা (খালি নিয়ন্ত্রণ), এবং সংস্কৃতির জন্য48 h. হালকা-সুরক্ষিত অবস্থার অধীনে, এমটিটি স্টক সলিউশন (কূপের আয়তনের 10%-20%) যোগ করা হয়েছিল,4 hএকটি CO₂ ইনকিউবেটরে, মাঝারি সরানো, এবং200 μL DMSOফরমাজান দ্রবীভূত করতে যোগ করা হয়েছে। OD মান পরিমাপ করা হয়েছিল490 nm.

ফলাফল: চিত্র. 1 (উদাহরণ 1), চিত্র. 2 (উদাহরণ 2), চিত্র. 3 (উদাহরণ 3)।

[0058] কোষের বিস্তারের হার (%)=OD(উদাহরণ 1–3)−OD(খালি) OD(খালি)×100%\\frac{OD(\\text{উদাহরণ 1–3}) - OD(\\text{Blank})}{OD(\\text{Blank})} \\0%(OD(\\text{Blank})} \\0% OD(Times) 1-3)−OD(খালি)×100%

[০০৫৯] যেমন চিত্র. 1–৩ এ দেখানো হয়েছে, ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ MC3T3-E1 বিস্তারকে উন্নীত করেছে। উদাহরণ 1 6.25, 12.5, এবং 25 ug/mL এ প্রসারিত প্রসারণ; 12.5 ug/mL এ বিস্তারের হার ছিল 1.4× ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণের, কিন্তু উল্লেখযোগ্য পার্থক্য ছাড়াই (P > 0.05)। উদাহরণ 2 6.25, 12.5, 25, এবং 50 ug/mL তে প্রসারণ প্রচার করা হয়েছে; 12.5, 25, এবং 50 ug/mL এর প্রভাবগুলি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণের (P <0.01 বা P <0.001) থেকে উচ্চতর ছিল, যার বিস্তারের হার 2.55×, 3.46×, এবং 2.59× ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণের। উদাহরণ 3 6.25, 12.5, 25, এবং 50 ug/mL তে প্রসারণ প্রচার করা হয়েছে; 12.5, 25, এবং 50 ug/mL এ এটি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণের (P <0.01 বা P <0.001) থেকে উচ্চতর ছিল, যার বিস্তারের হার 1.40×, 1.76×, এবং 0.93× ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণের। এটি ইঙ্গিত করে যে উদাহরণ 2 MC3T3-E1 বিস্তারের প্রচারে সর্বোত্তম প্রভাব ফেলেছিল।

1.2 ALP অ্যাকটিভিটি অ্যাসে

একটি ALP অ্যাস কিট ব্যবহার করে ALP কার্যকলাপ পরিমাপ করা হয়েছিল। পি-নাইট্রোফেনলের স্টক ঘনত্ব ছিল 10 মিমি, এবং স্ট্যান্ডার্ড বক্ররেখার ঘনত্ব ছিল 0, 0.02, 0.04, 0.08, 0.12, 0.16, 0.2 এবং 0.25 মিমি, সনাক্তকরণ বাফার সহ গ্রেডিয়েন্ট ডিলিউশন দ্বারা প্রস্তুত করা হয়েছে।

একটি 96-ওয়েল প্লেটে প্রতিটি নমুনার জন্য, 49 μL সনাক্তকরণ বাফার, চিকিত্সা করা MC3T3-E1 কোষ থেকে নিষ্কাশিত 1 μL প্রোটিন (বিভাগ 1.1 থেকে), এবং 50 μL ক্রোমোজেনিক সাবস্ট্রেট (শেষ যোগ করা হয়েছে) যোগ করা হয়েছিল। আলো থেকে সুরক্ষিত ইনকিউবেটরে 30 মিনিটের জন্য প্রতিক্রিয়াটি এগিয়ে যায়, 100 μL স্টপ দ্রবণ যোগ করে সমাপ্ত হয় এবং শোষণ পরিমাপ করা হয়405 nm. ALP কার্যকলাপ স্ট্যান্ডার্ড বক্ররেখা থেকে গণনা করা হয়েছিল।

ফলাফল: চিত্র. 4 (উদাহরণ 1), চিত্র. 5 (উদাহরণ 2), চিত্র. 6 (উদাহরণ 3)।

[0061] ALP কার্যকলাপ (U/L)=(প্রোটিনের আপেক্ষিক মোলার ঘনত্ব) × 1000 × 100 / 30
(মোলার ইউনিট রূপান্তরের জন্য 1000; মোট প্রতিক্রিয়া ভলিউমের জন্য 100; 30 মিনিট প্রতিক্রিয়া সময়ের জন্য 30)

ALP হল MC3T3-E1 পার্থক্যের একটি প্রাথমিক চিহ্নিতকারী। চিত্র. 4–6 দেখায় যে ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ ALP কার্যকলাপ বৃদ্ধি করেছে। উদাহরণ 1 ALP কার্যকলাপ প্রচার করেনি। উদাহরণ 2 12.5, 25, এবং 50 ug/mL এ ALP কার্যকলাপ বৃদ্ধি করেছে; 25 এবং 50 ug/mL পার্থক্য বনাম ফাঁকা ছিল তাৎপর্যপূর্ণ (P <0.01)। উদাহরণ 3 12.5 এবং 25 ug/mL (P <0.001) এ ALP কার্যকলাপ বৃদ্ধি করেছে, কিন্তু ক্রমবর্ধমান ঘনত্বের সাথে, বৃদ্ধি হ্রাস পেয়েছে। এটি নির্দেশ করে যে শুধুমাত্র উদাহরণ 2 এবং 3 ALP কার্যকলাপ বৃদ্ধি করেছে এবং সমর্থিত পার্থক্য।

[০০৬২] সামগ্রিকভাবে, শুধুমাত্র উদাহরণ 2 12.5 এবং 25 ug/mL এ MC3T3-E1 প্রসারণ এবং ALP কার্যকলাপ উভয় ক্ষেত্রে ডোজ-ইতিবাচক সম্পর্ক দেখিয়েছে। উদাহরণ 3 বিস্তারের জন্য ডোজ-ইতিবাচক সম্পর্ক দেখায় কিন্তু ALP-এর জন্য ডোজ-নেতিবাচক সম্পর্ক। তুলনামূলকভাবে, উদাহরণ 2 হাড়ের খনিজ ঘনত্ব উন্নত করার জন্য আরও উপযুক্ত।

1.3 উদাহরণ 2 এর খনিজকরণ (আলিজারিন লাল দাগ)

[0063] যেহেতু উদাহরণ 2 উদাহরণ 1 এবং 3 এর তুলনায় সর্বোত্তম কার্যকলাপ এবং ডোজ পারস্পরিক সম্পর্ক দেখিয়েছে, খনিজকরণ পরীক্ষাগুলি এর প্রভাবকে আরও মূল্যায়ন করার জন্য পরিচালিত হয়েছিল।

[০০৬৪] MC3T3-E1 কোষগুলিকে 72 ঘন্টা সংস্কৃতির পরে উদাহরণ 2 নির্যাস দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল12.5, 25, এবং 50 ug/mL, জন্য 37 ডিগ্রী incubated14 days(ক্যালসিয়াম নডিউল গঠনের উপর ভিত্তি করে), প্রতি 2 দিনে মাঝারি পরিবর্তনের সাথে। অ্যালিজারিন রেড স্টেনিং সঞ্চালিত হয়েছিল: মাঝারি সরানো হয়েছে, কোষগুলিকে 10% নিরপেক্ষ ফর্মালিন (300 μL/ওয়েল) দিয়ে 30 মিনিটের জন্য স্থির করা হয়েছে, ধুয়ে ফেলা হয়েছে, 0.1% অ্যালিজারিন লাল (300 μL/ওয়েল) দিয়ে 30 মিনিটের জন্য দাগ দেওয়া হয়েছে (ঘরের তাপমাত্রা, আলো থেকে সুরক্ষিত), এবং লাল রঙ না হওয়া পর্যন্ত ধোয়া। ছবি তোলা হয়েছে। তারপর 10% cetylpyridinium ক্লোরাইড দ্রবণ (400 μL/ওয়েল) যোগ করা হয় এবং ক্যালসিফাইড নোডুলগুলি দ্রবীভূত করার জন্য 1 ঘন্টার জন্য ঝাঁকানো হয়। দ্রবীভূত দ্রবণটি একটি 96-ওয়েল প্লেটে (100 μL/ওয়েল) স্থানান্তরিত হয়েছিল এবং OD পরিমাপ করা হয়েছিল562 nmখনিজকরণের হার গণনা করতে। ছবি: চিত্র. 7; পরিমাণগত ফলাফল: চিত্র. 8.

[0065] খনিজকরণের হার (%)=OD(উদাহরণ 2)−OD(খালি)OD(খালি)×100%\\frac{OD(\\text{উদাহরণ 2}) - OD(\\text{Blank})}{OD(\\text{Blank})} \\times 100%(ODBlank%) 2) −OD(খালি)×100%

[0066] চিত্র. 7 দেখায় যে ক্যালসিয়াম নোডিউল সংখ্যা ঘনত্ব বনাম ফাঁকা সহ ক্রমান্বয়ে বৃদ্ধি পেয়েছে। চিত্র. 8 নির্দেশ করে যে উদাহরণ 2 12.5, 25, এবং 50 ug/mL-এ ঘনত্ব-নির্ভর পদ্ধতিতে খনিজকরণকে উন্নীত করেছে, 50 ug/mL-এ শক্তিশালী প্রভাব সহ, ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ (P <0.001) থেকে উল্লেখযোগ্যভাবে ভাল। যেহেতু খনিজ নোডুলগুলি অস্টিওব্লাস্ট পার্থক্যের চূড়ান্ত পর্যায়ে প্রতিনিধিত্ব করে, এই ফলাফলগুলি উদাহরণ 2-এর হাড়-ঘনত্ব-সমর্থক প্রভাবকে আরও নিশ্চিত করে এবং এর স্থিতিশীল কার্যকলাপ প্রদর্শন করে। উদাহরণ 2 এস্ট্রাদিওলের চেয়ে উচ্চতর ছিল, যা হাড়ের স্বাস্থ্য পণ্যগুলির সম্ভাব্য মান নির্দেশ করে।

জিন এক্সপ্রেশন এবং পাথওয়ে মেকানিজম (উদাহরণ 2)

[০০৬৭] উদাহরণ 2 নির্যাস (12.5, 25, 50 ug/mL) 3 দিনের জন্য MC3T3-E1 কোষে প্রয়োগ করা হয়েছিল। RNA নিষ্কাশন, পরিমাণ নির্ধারণ, বিপরীত প্রতিলিপি (20 μL সিস্টেম; 800 ng RNA ইনপুট), এবং qRT-PCR এর আপেক্ষিক অভিব্যক্তি মাত্রা পরিমাপ করার জন্য পরিচালিত হয়েছিলRunx2 mRNA, Osx mRNA, Opn mRNA, এবং Ocn mRNA. ফলাফল: চিত্র. 9–12।

[0068] Runx2 এবং Osx হল BMP সিগন্যালিং-এর মূল ডাউনস্ট্রিম নিয়ন্ত্রক, যা অস্টিওব্লাস্ট ডিফারেন্সিয়েশনকে প্ররোচিত করে। Runx2 প্রাথমিক প্রতিশ্রুতি পর্যায়ে গুরুত্বপূর্ণ, যখন Osx টার্মিনাল ডিফারেন্সিয়েশনে কাজ করে। OPN এবং OCN হল অস্টিওব্লাস্ট কার্যকলাপ এবং টিস্যু খনিজকরণের জন্য গুরুত্বপূর্ণ সূচক। চিত্র. 9–12 দেখায় যে উদাহরণ 2 এই মার্কারগুলির আপেক্ষিক অভিব্যক্তি বাড়িয়েছে, বর্ধিত অস্টিওব্লাস্ট পার্থক্য এবং হাড়ের গঠনকে সমর্থন করে।

[0069] উদাহরণ 2 আপ-রেগুলেটেডBmp2 mRNA(চিত্র. 13), সক্রিয়করণ নির্দেশ করেBMP/Smad পথ, যা অস্টিওব্লাস্ট পার্থক্য এবং নতুন হাড় গঠন সমর্থন করে।

[0071] উদাহরণ 2 এর আপেক্ষিক অভিব্যক্তি বৃদ্ধিLrp5 mRNA, Lrp6 mRNA, এবং Wnt3 mRNA(চিত্র. 14–16), সক্রিয়করণ সমর্থন করেWnt/ -catenin সংকেত, যা অস্টিওব্লাস্ট বিস্তার, পার্থক্য, এবং হাড় গঠনের সাথে ঘনিষ্ঠভাবে সম্পর্কিত।

প্রোটিন এক্সপ্রেশন (উদাহরণ 2)

[০০৭৩] ওয়েস্টার্ন ব্লট বিশ্লেষণ দেখিয়েছে যে উদাহরণ 2 বৃদ্ধি পেয়েছেওএসএক্সএবংRUNX2প্রোটিন এক্সপ্রেশন (চিত্র. 17–18), অস্টিওব্লাস্ট পার্থক্যকে উন্নীত করার জন্য ট্রান্সক্রিপশনাল এবং ট্রান্সলেশনাল উভয় স্তরেই নিয়ন্ত্রণ নির্দেশ করে।

[০০৭৫] এই কার্যকলাপ পরীক্ষাগুলি দেখায় যে উদাহরণ 2 সর্বোত্তম প্রসারণ-প্রোমোটিং প্রভাব প্রদান করে এবং এটিই প্রসারণ এবং ALP উভয়ের জন্য সুসংগত ডোজ সম্পর্কযুক্ত একমাত্র। উদাহরণ 2 এছাড়াও MC3T3-E1 বিস্তার এবং খনিজকরণের প্রচারে estradiol থেকে উচ্চতর ছিল, তুলনামূলক পার্থক্য প্রভাব সহ, সর্বোত্তম হাড়-ঘনত্ব-সমর্থক সম্ভাবনার পরামর্শ দেয়।

 

রাসায়নিক রচনা পরীক্ষা

6.1 ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইড সামগ্রী

[০০৭৬] চীনা ফার্মাকোপিয়াতে "সিস্তানচে" পরীক্ষা পদ্ধতির রেফারেন্সে, উদাহরণ 1-3-তে ইচিনাকোসাইড এবং অ্যাকটিওসাইড বিষয়বস্তু পরিমাপ করা হয়েছিল (সারণী 1 এ দেখানো হয়েছে)। ইচিনাকোসাইড, অ্যাক্টিওসাইড এবং মোট PhG-এর উপর ভিত্তি করে, প্রবণতাটি সামঞ্জস্যপূর্ণ ছিল: উদাহরণ 3 > উদাহরণ 1 > উদাহরণ 2, এবং উদাহরণ 3-এ অ্যাক্টিওসাইড ছিল যথাক্রমে 3.85× এবং 4.27× উদাহরণ 1 এবং 2 এর। কার্যকলাপ এবং বিষয়বস্তুর ফলাফলের সমন্বয় ইঙ্গিত করে যে একাইনাকোসাইড এবং অ্যাক্টিওসাইড সরাসরি অস্টিওজেনিক প্রভাব নির্ধারণ করে না।

 

সারণি 1. সিস্টানচে এক্সট্রাক্টে ইচিনাকোসাইড এবং অ্যাক্টিওসাইডের বিষয়বস্তু (%)

নমুনা (উদাহরণ)	ইচিনাকোসাইড (%)	অ্যাকটিওসাইড / ভার্বাসকোসাইড (%)	মোট (%)
উদাহরণ 1	28.68	1.63	30.31
উদাহরণ 2	26.27	1.47	27.74
উদাহরণ 3	30.39	6.27	36.66

 

6.2 অন্যান্য উপাদান (UPLC/Q-TOF/MS)

[০০৭৮] UPLC/Q-TOF/MS উদাহরণ 1-3 এর মধ্যে রাসায়নিক উপাদানের তুলনা করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। প্রতিক্রিয়া মান সারণী 2 এ দেখানো হয়েছে।

[০০৭৯] ইচিনাকোসাইড এবং অ্যাক্টিওসাইড ছাড়াও, উদাহরণ 2-এ অতিরিক্ত রয়েছেshikimic অ্যাসিড এবং phenylpropionic-অ্যাসিড-টাইপ উপাদান, এবং এছাড়াওঅ্যালকালয়েড. উদাহরণ 1 এবং 3 এর সাথে তুলনা করে, উদাহরণ 2-তে 11টি ফিনাইলপ্রোপিয়নিক/শিকিমিক-অ্যাসিড-সম্পর্কিত উপাদান রয়েছে যার মধ্যে সর্বোচ্চ প্রতিক্রিয়া রয়েছে:

সারণি 2. সিস্টানচে এক্সট্রাক্টের মূল উপাদানগুলির UPLC/Q-TOF/MS প্রতিক্রিয়া মান (উদাহরণ 1-3)

注:原表为"响应值(প্রতিক্রিয়া মান)";我保留为纯数值,不加单位(与图表一致)।表内分一致为শিকিমিক অ্যাসিড এবং ফিনাইলপ্রোপিয়নিক অ্যাসিড ডেরিভেটিভস(莽草酸及苯丙酸类)与 অ্যালকালয়েড(生物碱).

A. শিকিমিক অ্যাসিড এবং ফিনাইলপ্রোপিয়নিক অ্যাসিড ডেরিভেটিভস

যৌগ	উদাহরণ 1	উদাহরণ 2	উদাহরণ 3
আইসোডানফেনলিক অ্যাসিড বি (异丹酚酸B)	1,514,590.932	5,985,000.378	5,279,315.212
পি-হাইড্রক্সিফেনিলপ্রোপিয়নিক অ্যাসিড (对羟基苯丙酸)	2,897,237.374	6,144,507.902	1,139,582.918
শিকিমিক অ্যাসিড (莽草酸)	6,539,932.014	8,883,034.928	7,442,038.152
(2R)-2-[(E)-3-[3-[(1R)-1-carboxy-2-(3,4-dihydroxyphenyl)ethoxy]carbonyl-2-(3,4-dihydroxyphenyl)-7-hydroxy-2,3-dihydrobenzofuran-4-yl]prop-2-enoyl]oxy-3, 3,4-এসিড, 3,4-ডিহাইড্রোক্সিফেনাইল)	1,514,590.932	5,985,000.378	5,279,315.212
বেনজয়লেসেটোন (苯甲酰丙酮)	4,235,952.540	4,526,539.189	4,297,281.060
এপিপিনোরেসিনল 4′-O- -ডি-গ্লুকোসাইড (表丁香树脂酚 4′-O- -D-葡萄糖苷)	2,758,386.748	4,338,477.068	1,182,637.856
ইয়াংমেই চ্যাংশান গ্লাইকোসাইড* (杨梅常山苷)	713,259.014	9,202,359.822	841,791.016
Jionoside A1 (焦地黄苯乙醇苷A1)	2,184,856.679	3,736,929.302	3,098,713.743
3,4-ডাইমেথাইলবেনজোয়িক অ্যাসিড (3,4-2甲基苯甲酸)	585,269.7562	1,386,349.28	1,400,433.204
রোবাস্টাসাইড ডি	1,693,753.421	3,272,248.064	4,236,657.164
7-[(2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-[[(2S,3R,4S,5R)-3,4,5-trihydroxytetrahydropyran-2-yl]oxymethyl]tetrahydropyran-2-yl]oxychromen-2-one	4,489,728.765	1,167,879.841	824,633.4

 

---

B. অ্যালকালয়েড

যৌগ	উদাহরণ 1	উদাহরণ 2	উদাহরণ 3
ভার্টিসিন (野百合碱)	1,306,481.28	524,919.97	4,057,704.757
ডাইহাইড্রোকপ্টিসিন (氢化可他宁碱)	6,406,217.365	9,533,850.521	4,649,410.535
থাইমিন (胸腺嘧啶)	2,658,397.084	2,715,160.269	554,956.4602
জেলসেমিন (钩吻碱)	3,698,263.919	1,554,195.385	5,144,366.562
ইয়োহিম্বিন (育亨宾)	3,929,806.438	1,286,932.427	9,431,924.132

আইসোডানফেনলিক অ্যাসিড বি,

পি-হাইড্রোক্সিফেনাইলপ্রোপিয়নিক অ্যাসিড,

(2R)-2-[(E)-3-[3-[(1R)-1-carboxy-2-(3,4-dihydroxyphenyl)ethoxy]carbonyl-2-(3,4-dihydroxyphenyl)-7-hydroxy-2,3-dihydrobenzofuran-4-yl]prop-2-enoyl]oxy,3-propnyl (3,4-ডিহাইড্রোক্সিফেনাইল)

benzoylacetone,

এপিপিনোরেসিনল 4′-O- -ডি-গ্লুকোসাইড,

মাইরিসেটিন-সম্পর্কিত গ্লাইকোসাইড (তালিকা হিসাবে),

জিওনোসাইড এ 1,

3,4-ডাইমেথাইলবেনজয়িক অ্যাসিড,

রোবাস্টাসাইড ডি,

7-[(2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-ট্রাইহাইড্রোক্সি-6-[[(2S,3R,4S,5R)-3,4,5-ট্রাইহাইড্রোক্সিটেট্রাহাইড্রোপাইরান-2-ইএল]অক্সিমিথাইল]টেট্রাহাইড্রোপাইরান-2-ইএল]অক্সিক্রোমেন-2-এক।

এটিতে 5টি অ্যালকালয়েডও রয়েছে, যার মধ্যে রয়েছে:

ভার্টিসিন,

ডাইহাইড্রোকপ্টিসিন (তালিকা হিসাবে),

থাইমিন,

জেলসেমিন-সম্পর্কিত অ্যালকালয়েড (তালিকা হিসাবে),

yohimbine

[0080] বিস্তার/ALP কার্যকলাপের তুলনামূলক ফলাফলের উপর ভিত্তি করে, ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইড অ্যাসেস এবং রাসায়নিক প্রোফাইলিং, এটি উপসংহারে পৌঁছানো যেতে পারে যে ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইড (ইচিনাকোসাইড এবং অ্যাক্টিওসাইড), শিকিমিক/ফেনাইলপ্রোপিয়নিক অ্যাসিড, অ্যালকালয়েড, এবং টেরাপেনয়েড এক্সপ্লেক্স 2 এর যৌথ গঠন। বিস্তার, পার্থক্য, এবং খনিজকরণ জুড়ে ধারাবাহিক ডোজ-নির্ভরতা (12.5-25 ug/mL) উত্পাদন করা, স্থিতিশীল হাড়-ঘনত্ব-সমর্থক প্রভাবগুলি সক্ষম করে।

[০০৮১] টেবিল 2: উপাদানগুলির প্রতিক্রিয়া মান।
[0082] উদ্ভাবন, উদাহরণ 2 এর প্রক্রিয়ার মাধ্যমে, মোট ইচিনাকোসাইড + অ্যাক্টিওসাইড > 25% এবং সমৃদ্ধ শিকিমিক/ফেনাইলপ্রোপিয়নিক অ্যাসিড এবং অ্যালকালয়েড সহ একটি সিস্টানচে নির্যাস প্রদান করে, যা স্থিতিশীল হাড়-ঘনত্ব-সমর্থক প্রভাবের অনুমতি দেয়। 12.5-25 ug/mL-এর মধ্যে, এটি MC3T3-E1 প্রসারণ, পার্থক্য এবং খনিজকরণের প্রচার করে ডোজ-বর্ধক পদ্ধতিতে সামঞ্জস্যপূর্ণ ডোজ পারস্পরিক সম্পর্ক, ভাল এবং আরও স্থিতিশীল হাড়ের স্বাস্থ্যের ফলাফল সমর্থন করে এবং হাড়ের খনিজ ঘনত্ব উন্নত করার সাথে সম্পর্কিত পণ্যগুলিতে ব্যবহার সক্ষম করে।