Cistanche Deserticola Polysaccharides জ্ঞানীয় পতন কমায় এবং বার্ধক্য মডেল ইঁদুরের স্মৃতিশক্তি উন্নত করে

যোগাযোগ: অড্রে হু হোয়াটসঅ্যাপ/এইচপি: 0086 13880143964 ইমেল:audrey.hu@wecistanche.com

Yuan Gao1,*, Bing Li1,*, Hong Liu1, Yajuan Tian2, Chao Gu1, Xiaoli Du1, Ren Bu1, Jie Gao1, Yang Liu1, Gang Li1

বিমূর্ত

সাম্প্রতিক প্রমাণগুলি পরামর্শ দেয় যে অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা-মস্তিষ্কের অক্ষের পরিবর্তনগুলি বয়সের সাথে জ্ঞানীয় দুর্বলতা চালাতে পারে। বর্তমান গবেষণায়, আমরা লক্ষ্য করেছি যে ইঁদুরের কাছে ডি-গ্যালাকটোজের দীর্ঘায়িত প্রশাসন জ্ঞানীয় হ্রাস, অন্ত্রের মাইক্রোবিয়াল ডিসবায়োসিস, পেরিফেরাল প্রদাহ এবং অক্সিডেটিভ স্ট্রেসকে প্ররোচিত করে। বয়স-সম্পর্কিত জ্ঞানীয় পতনের এই মডেলে, Cistanche deserticola polysaccharides (CDPS) অন্ত্রের মাইক্রোবিয়াল হোমিওস্ট্যাসিস পুনরুদ্ধার করে ডি গ্যালাকটোজ-চিকিত্সা করা ইঁদুরের জ্ঞানীয় কার্যকারিতা উন্নত করে, যার ফলে অক্সিডেটিভ স্ট্রেস এবং পেরিফেরাল প্রদাহ হ্রাস পায়। এই বার্ধক্য মডেলের ইঁদুরগুলিতে সিডিপিএসের উপকারী প্রভাবগুলি অ্যান্টিবায়োটিকের সাথে গুটমাইক্রোবায়োটা বা সাইক্লোফসফামাইডের সাথে ইমিউনোসপ্রেশনের মাধ্যমে বিলুপ্ত করা হয়েছিল। সিরাম বিপাকীয় প্রোফাইলিং দেখায় যে ক্রিয়েটিনিন, ভ্যালাইন, এল-মেথিওনিন, ও-টলুইডিন, এন-ইথিলানিলাইন, ইউরিক অ্যাসিড এবং প্রোলিনের মাত্রাগুলি বার্ধক্যজনিত মডেলের ইঁদুরগুলিতে পরিবর্তন করা হয়েছিল, কিন্তু সিডিপিএস দ্বারা পুনরুদ্ধার করা হয়েছিল। এই ফলাফলগুলি প্রমাণ করেছে যে সিডিপিএস অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা মস্তিষ্কের অক্ষের হোমিওস্ট্যাসিস পুনরুদ্ধার করে ইঁদুরের একটি ডি-গ্যালাকটোজ-প্ররোচিত বার্ধক্য মডেলে জ্ঞানীয় ফাংশন উন্নত করে, যা একটি অ্যামিনো অ্যাসিড ভারসাম্যহীনতা, পেরিফেরাল প্রদাহ এবং অক্সিডেটিভ স্ট্রেস দূর করে। CDPS এইভাবে মেমরি এবং শেখার ব্যাধিযুক্ত রোগীদের জন্য থেরাপিউটিক সম্ভাব্যতা দেখায়, বিশেষ করে যারা গুটমাইক্রোবিয়াল ডিসবায়োসিস সম্পর্কিত।

সিস্তানচেঔষধি

ভূমিকা

ডি-গ্যালাকটোজ (ডি-গাল) এবং বেরিলিয়াম লবণের দীর্ঘায়িত প্রশাসন পরীক্ষামূলক প্রাণী মডেল এবং ভিট্রো প্রাথমিক কোষ সংস্কৃতিতে বার্ধক্যকে প্ররোচিত করে এবং প্রাকৃতিক বার্ধক্য প্রক্রিয়া [1-4] এর অন্তর্নিহিত প্রক্রিয়াগুলি সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয়। পূর্ববর্তী গবেষণাগুলি দেখায় যে ডি-গ্যালাকটোজ-প্ররোচিত বার্ধক্যজনিত মডেল ইঁদুরের জ্ঞানীয় হ্রাস স্নায়ু বৃদ্ধির ফ্যাক্টর (এনজিএফ) প্রোটিনের মাত্রা হ্রাস এবং মস্তিষ্কে প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতি (আরওএস) বৃদ্ধির সাথে সম্পর্কিত, উভয়ই হিপোক্যাম্পাল নিউরনের অবক্ষয় ঘটায় এবং হ্রাস করে। নিউরোজেনেসিস [৩, ৪]। সাম্প্রতিক গবেষণায় আরও দেখা গেছে যে মানুষের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটার গঠন এবং সংখ্যা বার্ধক্য প্রক্রিয়ার সময় উল্লেখযোগ্যভাবে পরিবর্তিত হয়[5]।

Cistanche deserticola একটি ভেষজ উদ্ভিদ যা প্রধানত চীনের উত্তর-পশ্চিম মরুভূমি অঞ্চলে জন্মে এবং ঐতিহ্যগত চীনা ওষুধে ব্যবহৃত হয়। এটি সাধারণত "মরুভূমির জিনসেং" নামে পরিচিত। Cistanche deserticola নির্যাস phenylethanoid glycosides, iridoids, lignose, oligosaccharides, polysaccharides, এবং amino acids সহ বেশ কিছু ফার্মাকোলজিক্যালভাবে সক্রিয় যৌগ ধারণ করে; এই যৌগগুলি অ্যান্টি-ইনফ্ল্যামেটরি, অ্যান্টি-অক্সিডেটিভ, অ্যান্টি-সেনসেন্ট, নিউরোপ্রোটেক্টিভ এবং ইমিউনোমোডুলেটরি বৈশিষ্ট্যগুলির সাথে সম্পর্কিত [6, 7]। উদাহরণস্বরূপ, Cistanche deserticola থেকে নিষ্কাশিত পলিস্যাকারাইডগুলি কোলোরেক্টাল ক্যান্সারের চিকিত্সার জন্য ঐতিহ্যগত চীনা ওষুধে ব্যবহার করা হয়েছে [8]। উপকারী বায়োঅ্যাকটিভিটি সহ দুর্বলভাবে বিষাক্ত পলিস্যাকারাইডের একটি বিস্তৃত পরিসর বিভিন্ন জীব থেকে বিচ্ছিন্ন করা হয়েছে, যেমন চুয়ানকিওং পলিস্যাকারাইড, গ্যানোডার্মা লুসিডাম পলিস্যাকারাইড এবং লাইসিয়াম বারবারাম পলিস্যাকারাইড [9-11]। CDA 0.05 হল Cistanche deserticola থেকে বিচ্ছিন্ন একটি গ্যালাকটোগ্লুকান যা বেশ কিছু উপকারী অন্ত্রের ব্যাকটেরিয়া বৃদ্ধিতে উৎসাহিত করে, যার মধ্যে রয়েছে বিভিন্ন প্রজাতির ব্যাকটেরয়েড এবং ল্যাকটোব্যাসিলাস [12]।

স্বাভাবিক বার্ধক্য প্রক্রিয়ার অন্তর্নিহিত প্রক্রিয়াগুলি বিভিন্ন মানব রোগ যেমন নিউরোডিজেনারেটিভ ডিসঅর্ডার, করোনারি এথেরোস্ক্লেরোসিস, টাইপ 2 ডায়াবেটিস (T2DM), এবং উচ্চ রক্তচাপ [13, 14] এর সাথে জড়িত। সাম্প্রতিক গবেষণায় দেখা গেছে যে অন্ত্রের উদ্ভিদের পরিবর্তন মানুষের বার্ধক্যের ক্ষেত্রে একটি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে [15]। বেশ কিছু গবেষণায় দেখা গেছে যে পরীক্ষামূলক ইঁদুর এবং ইঁদুরগুলিতে ডি-গ্যালাকটোজের দীর্ঘায়িত প্রশাসন স্বাভাবিক বার্ধক্য প্রক্রিয়াকে অনুকরণ করে এবং এটি জ্ঞান হ্রাসের মতো বার্ধক্য-সম্পর্কিত ফিনোটাইপগুলি অধ্যয়ন করার জন্য একটি দরকারী মডেল [16]। তদুপরি, ডি-গ্যালাকটোজ-প্ররোচিত বার্ধক্যজনিত মডেল ইঁদুরগুলি অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটার সংমিশ্রণে পরিবর্তন দেখায় [17]। অতএব, আমরা অনুমান করেছি যে অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা সংমিশ্রণে পরিবর্তনগুলি ডি গ্যালাকটোজ-প্ররোচিত বার্ধক্যজনিত মডেল ইঁদুরের জ্ঞানীয় পতনের কারণ হতে পারে এবং তদন্ত করা হয়েছে যদি সিস্টানচে ডেজার্টিকোলা পলিস্যাকারাইডস (সিডিপিএস) অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা ডিসবায়োসিস পুনরুদ্ধার করে জ্ঞানীয় হ্রাস হ্রাস করতে পারে কিনা।

cistanche স্টেম

ফলাফল

ডি-গ্যালাকটোজ-প্ররোচিত বার্ধক্য মডেল ইঁদুর জ্ঞানীয় হ্রাস এবং অন্ত্রের মাইক্রোবিয়াল ডিসবায়োসিস প্রদর্শন করে

আমরা নভেল অবজেক্ট রিকগনিশন এবং মরিস ওয়াটার মেজ (MWM) পরীক্ষা ব্যবহার করে 2 মাস ধরে (মডেল বা মড) ওয়াইল্ড-টাইপ (WT) ইঁদুরের আচরণগত কর্মক্ষমতা বিশ্লেষণ করেছি এবং যাদের প্রতি কেজি শরীরের ওজন 150 মিলিগ্রাম ডি-গাল দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছে। অভিনব অবজেক্ট রিকগনিশন টেস্টে অগ্রাধিকারমূলক সূচক মানগুলি WT গ্রুপ ইঁদুরের তুলনায় মোড গ্রুপের ইঁদুরগুলিতে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে (চিত্র 1A, 1B)। MWM পরীক্ষার ফলাফলগুলি দেখিয়েছে যে ষষ্ঠ দিনের পরে পালানোর বিলম্বের সময় WT গ্রুপের তুলনায় মোড গ্রুপে উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে (চিত্র 1C, 1D)। তদুপরি, টার্গেট প্ল্যাটফর্ম ক্রসিং এবং টার্গেট কোয়াড্রেন্টের মধ্যে সাঁতারের সময়গুলি WT গ্রুপের (চিত্র 1E, 1F) তুলনায় মোড গ্রুপে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে। এই ফলাফলগুলি আইনী-প্ররোচিত বার্ধক্যজনিত মডেল ইঁদুরের শেখার এবং স্মৃতিশক্তিতে উল্লেখযোগ্য হ্রাস প্রদর্শন করেছে।

আমরা তারপরে মল নমুনা থেকে 16S রাইবোসোমাল আরএনএ (rRNA) সিকোয়েন্সিং ডেটা ব্যবহার করে ইঁদুরের মোড এবং ডাব্লুটি গ্রুপের মল নমুনাগুলিতে অন্ত্রের মাইক্রোবিয়াল ফাইলা, জেনারা এবং প্রজাতির প্রাচুর্য এবং গঠনের পার্থক্য বিশ্লেষণ করেছি। ডাব্লুটি এবং মোড গ্রুপের ইঁদুরের প্রধান অন্ত্রের উদ্ভিদগুলি ছিল ফার্মিক্যুটস এবং ব্যাকটেরয়েডস। যাইহোক, WT গ্রুপ (চিত্র 2A) এর তুলনায় মড গ্রুপে ব্যাকটেরয়েডের প্রাচুর্য উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে এবং ফার্মিক্যুটসের প্রাচুর্য উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে। এর পরে, আমরা WT এবং Mod গ্রুপের ইঁদুরগুলিতে বিভিন্ন ট্যাক্সার আপেক্ষিক প্রাচুর্যের মূল্যায়ন করতে ক্রুস্কাল-ওয়ালিস এবং উইলকক্সন পরীক্ষা দ্বারা অনুসরণ করে এলডিএ প্রভাব আকার (LEfSe) স্কোর নির্ধারণের জন্য লিনিয়ার ডিসক্রিমিন্যান্ট অ্যানালাইসিস (এলডিএ) করেছি। LDA ফলাফল চিত্র 2B এ দেখানো হয়েছে। তদ্ব্যতীত, আমরা WT এবং মডেল গ্রুপ (চিত্র 2C) তে ব্যাকটিরিওডস এবং ফার্মিক্যুটস ফাইলার অন্তর্গত বিভিন্ন জেনার এবং প্রজাতির ডিফারেনশিয়াল সমৃদ্ধি দেখানো ক্ল্যাডোগ্রামগুলি তৈরি করেছি। সামগ্রিকভাবে, আমাদের ফলাফলগুলি ডি-গ্যালাকটোজ-প্ররোচিত বার্ধক্য মডেল ইঁদুরগুলিতে প্রতিবন্ধী জ্ঞানীয় ক্ষমতা এবং অন্ত্রের মাইক্রোবিয়াল ডিসবায়োসিস প্রদর্শন করেছে।

cistanche স্বাস্থ্য উপকারিতা: অ্যান্টি-অক্সিডেশন

CDPS চিকিত্সা ডি-গাল-প্ররোচিত বার্ধক্য মডেল ইঁদুরের জ্ঞানীয় ক্ষমতা উন্নত করে

আমরা বিশ্লেষণ করেছি যদি সিডিপিএস চিকিত্সা ডি-গাল-প্ররোচিত বার্ধক্যজনিত মডেল ইঁদুরের জ্ঞানীয় হ্রাস হ্রাস করে। প্রশাসনের 2 মাসের সময়, শরীরের ওজন প্রতি অন্য দিন পরিমাপ করা হয়েছিল। ইঁদুরের মডেল এবং সিডিপিএস গ্রুপের শরীরের ওজন একই ছিল (চিত্র 3A)। শেষ ডোজ পরে আচরণগত পরীক্ষা পরিচালনা করুন। নোভেল অবজেক্ট রিকগনিশন এবং মরিস ওয়াটার মেজ পরীক্ষার ফলাফল দেখিয়েছে যে ইঁদুরের মডেল গ্রুপের তুলনায় ইঁদুরের সিডিপিএস গ্রুপে স্বল্পমেয়াদী স্মৃতি উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল; ইঁদুরের CDPS গ্রুপে দীর্ঘমেয়াদী মেমরি বেশি ছিল কিন্তু ইঁদুরের মডেল গ্রুপের তুলনায় পরিসংখ্যানগতভাবে নগণ্য (চিত্র 3B, 3C)। এটি পরামর্শ দেয় যে সিডিপিএস চিকিত্সা ডি-গাল চিকিত্সা করা ইঁদুরগুলিতে স্বল্পমেয়াদী অবজেক্ট রিকগনিশন মেমরির ক্ষতি বাতিল করে।

এই ইঁদুরগুলির স্থানিক শিক্ষা এবং স্মৃতি মরিস জলের গোলকধাঁধা পরীক্ষার দ্বারা মূল্যায়ন করা হয়েছিল, এবং ফলাফলগুলি দেখায় যে ইঁদুরের CDPS গ্রুপের পালানোর বিলম্বের সময়গুলি WT ইঁদুরের গ্রুপের সাথে তুলনীয় এবং মোড গ্রুপমাইসের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে ছোট ছিল (চিত্র 3D) . তদ্ব্যতীত, মডেল গ্রুপের (চিত্র 3E) তুলনায় সিডিপিএস-পরবর্তী ষষ্ঠ দিনের প্রশাসনে পালানোর বিলম্বের সময় উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল। মডেল গ্রুপের তুলনায় CH এবং CM গ্রুপে টার্গেট কোয়াড্রেন্টের মধ্যে সাঁতারের সময় উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল। CL গ্রুপটি মডেল গ্রুপের চেয়ে বেশি কিন্তু এর কোন পরিসংখ্যানগত গুরুত্ব নেই (চিত্র 3F)। তদুপরি, মডেল গ্রুপের তুলনায় সিএম এবং সিএল গ্রুপে প্ল্যাটফর্ম ক্রসিংয়ের সংখ্যা উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল। যাইহোক, CH গ্রুপটি মডেল গ্রুপের চেয়ে বেশি এবং এর কোন পরিসংখ্যানগত গুরুত্ব নেই (চিত্র 3G)। এই ফলাফলগুলি প্রমাণ করেছে যে সিডিপিএস চিকিত্সা ডি-গাল-প্ররোচিত বার্ধক্যজনিত মডেল ইঁদুরগুলিতে স্থানিক শিক্ষা এবং স্মৃতিশক্তি উন্নত করেছে।

চিত্র 1. ডি-গ্যালাকটোজের দীর্ঘায়িত প্রশাসন ইঁদুরের শেখার এবং স্মৃতিশক্তি দুর্বল করে দেয়।

চিত্র 2. ডি-গ্যালাকটোজের দীর্ঘায়িত প্রশাসন ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবিয়াল ডিসবায়োসিসকে প্ররোচিত করে।

সিডিপিএস চিকিত্সা ডি-গ্যালাকটোজ-এজিং মডেল ইঁদুরে অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা রচনার হোমিওস্ট্যাসিস পুনরুদ্ধার করে

মনোস্যাকারাইড এবং পলিস্যাকারাইড হল ব্যাকটেরিয়ার বৃদ্ধির জন্য প্রয়োজনীয় পুষ্টি উপাদান [18-21]। এটিও রিপোর্ট করা হয়েছে যে সিডিপিএস অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটার গঠন নিয়ন্ত্রণ করে [22]। অতএব, আমরা বিশ্লেষণ করেছি যে CDPS চিকিত্সাগুলি WT, মডেল এবং CDPS গোষ্ঠীর ইঁদুরগুলির মল নমুনার 16S rRNA সিকোয়েন্সিং ডেটা মূল্যায়ন করে মডেল গ্রুপের ইঁদুরগুলিতে অন্ত্রের মাইক্রোবিয়াল ডিসবায়োসিস হ্রাস করেছে কিনা।

প্রথমত, আমরা এই গোষ্ঠীগুলির মধ্যে সামগ্রিক মল মাইক্রোবায়োটার সমৃদ্ধি এবং কাঠামোগত পার্থক্য মূল্যায়ন করতে আলফা বৈচিত্র্য সূচকগুলি গণনা করেছি। আমরা আলফা বৈচিত্র্য (-বৈচিত্র্য) সূচক বিশ্লেষণ করেছি যেমন পর্যবেক্ষিত প্রজাতি, শ্যানন, চাও 1, এসিই, এবং সিম্পসন সূচক মান বিভিন্ন মুরিন গ্রুপের মলের নমুনায় বিভিন্ন ব্যাকটেরিয়া প্রজাতির গঠনের পরিবর্তন নির্ধারণ করতে। মডেল গ্রুপের তুলনায় ইঁদুরের WT এবং CDPS গ্রুপে বৈচিত্র্য (পর্যবেক্ষিত প্রজাতি, শ্যানন, চাও 1, ACE, এবং সিম্পসন সূচক) সূচকগুলি বেশি ছিল, কিন্তু পরিসংখ্যানগত তাত্পর্য শুধুমাত্র CM-এর মধ্যে Chao 1 সূচক মানের জন্য পরিলক্ষিত হয়েছিল। গ্রুপ এবং মোড গ্রুপ। এটি নির্দেশ করে যে সিডিপিএসের সাথে প্রশাসন মাইক্রোবায়োম সমৃদ্ধি বৃদ্ধি করে (চিত্র 4A–4E)। এরপরে, আমরা নন-মেট্রিক মাল্টিডাইমেনশনাল স্কেলিং (এনএমডিএস), প্রিন্সিপাল কোঅর্ডিনেটস অ্যানালাইসিস (পিসিওএ), এবং প্রিন্সিপাল কম্পোনেন্ট অ্যানালাইসিস (পিসিএ) ব্যবহার করে ডাব্লুটি, মডেল এবং সিডিপিএস গ্রুপের ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবিয়াল প্রজাতির মধ্যে পার্থক্য সনাক্ত করতে বৈচিত্র্য সূচক বিশ্লেষণ করেছি। . পিসিএ বার্ধক্য প্রক্রিয়া চলাকালীন মডেল গ্রুপ ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবিয়াল কম্পোজিশনে বৈচিত্র দেখিয়েছে, যার মধ্যে মাত্রা হ্রাস এবং নিদর্শন এবং প্রবণতাগুলির রক্ষণাবেক্ষণ (চিত্র 4F) রয়েছে। WT, মডেল এবং CDPS গোষ্ঠীর মধ্যে মল মাইক্রোবায়োটার পার্থক্যগুলি 16S rRNA জিনের (চিত্র 4G) জন্য ওজনহীন UniFrac দূরত্বের PCoA-এর উপর ভিত্তি করে চিহ্নিত করা হয়েছিল। ক্লাস্টারিং বিশ্লেষণ মডেল গ্রুপ এবং WT এবং CDPS গ্রুপের মধ্যে NMDS-এ উল্লেখযোগ্য পার্থক্য দেখিয়েছে (চিত্র 4H)।

আমরা অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটার শীর্ষ 10 টি ফাইলাকে মূল্যায়ন করেছি এবং দেখতে পেয়েছি যে মডেল গ্রুপের (চিত্র 4I) তুলনায় CH, CM এবং CL গ্রুপে ব্যাকটেরয়েড ফাইলার প্রাচুর্য উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল। এটি পরামর্শ দিয়েছে যে সিডিপিএস ডি-গাল-চিকিত্সা করা ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটার হোমিওস্ট্যাসিস পুনরুদ্ধার করেছে। ক্ল্যাডোগ্রামগুলি WT, মডেল এবং CDPS গ্রুপে (চিত্র 4J) ব্যাকটিরিওডস এবং ফার্মিক্যুটস ফাইলার অন্তর্গত বিভিন্ন জেনার এবং প্রজাতির ডিফারেনশিয়াল সমৃদ্ধি প্রদর্শন করেছে। হিটম্যাপে দেখানো হয়েছে, সিডিপিএস চিকিত্সা থার্মোপ্লাজমাটা, ব্যাসিলি, অজ্ঞাত অ্যাক্টিনোব্যাকটেরিয়া, ফুসোব্যাকটেরিয়া, এবং অজ্ঞাত ইলুসিমাইক্রোবিয়ার আপেক্ষিক প্রাচুর্যকে হ্রাস করেছে এবং মেথানোব্যাকটেরিয়া, স্পিরোচেটিয়া, ডেল্টাপ্রোটিওব্যাকটেরিয়া, অজ্ঞাত, অ্যানালিকোটেরিয়া,{5}অ্যানাডেন্টিফাইড অ্যানালিকোটেরিয়া ,ইরিসিপেলোট্রিচিয়া, এবং অজ্ঞাত_সায়ানোব্যাকটেরিয়া মডেল গ্রুপের তুলনায় (চিত্র 4K)। এই ফলাফলগুলি প্রমাণ করেছে যে সিডিপিএস চিকিত্সা উল্লেখযোগ্যভাবে ডি-গাল-প্ররোচিত বার্ধক্য মডেল ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটার হোমিওস্ট্যাসিস পুনরুদ্ধার করেছে।

চিত্র 3. সিডিপিএস চিকিত্সা ডি-গাল বার্ধক্য মডেল ইঁদুরের শেখার এবং স্মৃতিশক্তি উন্নত করে।

সিডিপিএস চিকিত্সা অক্সিডেটিভ স্ট্রেস হ্রাস করে ডি-গাল-প্ররোচিত বার্ধক্যজনিত মডেল ইঁদুরের নিউরোডিজেনারেশন হ্রাস করে

আমরা পরবর্তীতে প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি সাইটোকাইনস (IL-2 এবং TNF-), এবং অ্যান্টি-ইনফ্ল্যামেটরি সাইটোকাইনস (IL-4 এবং IL-10 এর সিরাম স্তরগুলি বিশ্লেষণ করে প্রদাহের উপর CDPS-এর প্রভাবগুলি বিশ্লেষণ করেছি৷ ) ইঁদুরের বিভিন্ন দলে। IL-2 এবং TNF--এর সিরামের মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল এবং IL-4 এবং IL-10-এর সিরাম স্তরগুলি মডেলের তুলনায় CH, CM, এবং CL গ্রুপে উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল দল এটি দেখানো হয়েছে যে CDPS-এর প্রদাহ-বিরোধী প্রভাব রয়েছে (চিত্র 5A–5D)।

অক্সিডেটিভ স্ট্রেস প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতির (ROS) বর্ধিত উত্পাদনের কারণে সৃষ্ট হয় এবং এটি একটি প্রধান কারণ যা বার্ধক্যকে উন্নীত করে [23]। অতএব, আমরা অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এনজাইম, এসওডি, এবং লিপিড পারক্সিডেশন পণ্য, ম্যালোন্ডিয়ালডিহাইড (এমডিএ) এর সিরাম স্তরের মূল্যায়ন করে ডি-গাল-প্ররোচিত বার্ধক্যজনিত মাউস মডেলে অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের উপর সিডিপিএসের প্রভাব বিশ্লেষণ করেছি। এমডিএর সিরামের মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল এবং ডব্লিউটি গ্রুপের তুলনায় মোড গ্রুপে এসওডি-র সিরামের মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে, কিন্তু, সিডিপিএস চিকিত্সা এই প্রভাবগুলিকে বিপরীত করেছে (চিত্র 5 ই, 5 এফ)। এই ফলাফলগুলি প্রমাণ করেছে যে ডি-গাল-প্ররোচিত বার্ধক্যজনিত মডেল ইঁদুরগুলিতে অক্সিডেটিভ স্ট্রেস বাড়ানো হয়েছিল, তবে সিডিপিএস চিকিত্সা দ্বারা হ্রাস করা হয়েছিল।

তদ্ব্যতীত, আমরা উন্নত অক্সিডাইজড প্রোটিন পণ্য (AOPP), সরাসরি লিপিড পারক্সিডেশন (LPO), এবং MDA এর পাশাপাশি অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এনজাইমগুলির কার্যকলাপ যেমন গ্লুটাথিয়ন পারক্সিডেস (GSH-Px) এর স্তরগুলি বিশ্লেষণ করে মস্তিষ্কের টিস্যুতে অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের মাত্রাগুলি মূল্যায়ন করেছি। ) এবং মস্তিষ্কের টিস্যু হোমোজেনেটে সুপারঅক্সাইড ডিসম্যুটেজ (এসওডি)। মড গ্রুপের ইঁদুরের মস্তিষ্ক SOD এবং GSH-PX-এর কার্যকলাপ উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেছে এবং WT গ্রুপের তুলনায় AOPP, LPO এবং MDA-এর মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি করেছে, কিন্তু এই প্রভাবগুলি CH, CM, এবং CL গ্রুপে বিপরীত হয়েছে (চিত্র 6A– 6ই)।

তদ্ব্যতীত, আমরা D-gal প্ররোচিত বার্ধক্যজনিত মডেল ইঁদুরের মস্তিষ্কে CDPS-এর প্রতিরক্ষামূলক প্রভাবগুলি মূল্যায়ন করতে H&E এবং Nissl দাগের সাথে মস্তিষ্কের অংশগুলির হিস্টোলজিকাল স্টেনিং করেছি। মোড গ্রুপের ইঁদুরগুলি WT গ্রুপের তুলনায় হিপোক্যাম্পাস CA1 অঞ্চলে নিউরোনাল সংখ্যা এবং আয়তনে উল্লেখযোগ্য হ্রাস, নিউরনের মধ্যে ব্যবধান বৃদ্ধি, নিউরনের অনিয়মিত বিন্যাস এবং নিউক্লিয়ার পাইকনোসিস দেখিয়েছে, কিন্তু এই রোগগত পরিবর্তনগুলি উল্লেখযোগ্যভাবে CDPS চিকিত্সা দ্বারা হ্রাস পেয়েছে ( চিত্র 6F)। এই ফলাফলগুলি প্রমাণ করেছে যে সিডিপিএস চিকিত্সাগুলি ডি গ্যাল-প্ররোচিত বার্ধক্য মডেল ইঁদুরগুলিতে অক্সিডেটিভ স্ট্রেস এবং মস্তিষ্কের প্যাথলজিকে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেছে।

চিত্র 4. সিডিপিএস চিকিত্সা ডি-গ্যালাকটোজ-প্ররোচিত বার্ধক্যজনিত মডেল ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবিয়াল গঠন পুনরুদ্ধার করে।

সিডিপিএস চিকিত্সা ডি-গাল-প্ররোচিত মডেল ইঁদুরগুলিতে অন্ত্রের মাইক্রোবিয়াল হোমিওস্টেসিস বজায় রেখে পেরিফেরাল প্রদাহ এবং অক্সিডেটিভ স্ট্রেস হ্রাস করে

এরপরে, আমরা বিশ্লেষণ করেছি যদি অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটার সংমিশ্রণে পরিবর্তনগুলি বর্ধিত পেরিফেরাল প্রদাহ এবং অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের সাথে যুক্ত থাকে। এর দিকে, আমরা একটি ট্রিপল-অ্যান্টিবায়োটিক ককটেল (এবিএক্স গ্রুপ) বা সাইক্লোফসফামাইড (সাই গ্রুপ; উপাদান এবং পদ্ধতিগুলিও দেখুন) ব্যবহার করেছি অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা হ্রাস করতে বা সিডিপিএস-চিকিত্সা করা বার্ধক্যজনিত মডেল ইঁদুরগুলিতে ইমিউনোসপ্রেশন প্ররোচিত করতে। অ্যান্টিবায়োটিক চিকিত্সা বার্ধক্যজনিত মডেল ইঁদুরগুলিতে সিডিপিএস চিকিত্সার উপকারী প্রভাবগুলিকে বাতিল করেছে। আমরা সিডিপিএস-চিকিত্সা করা গ্রুপের তুলনায় এবিএক্স গ্রুপের ইঁদুরগুলিতে অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা (চিত্র 7B, 7C) এর সংমিশ্রণে প্রতিবন্ধী শিক্ষা এবং স্মৃতি (চিত্র 7A) এবং পরিবর্তনগুলি পর্যবেক্ষণ করেছি। উপরের ফলাফলগুলি ইঙ্গিত করে যে এমনকি সিডিপিএস প্রশাসন অন্ত্রের উদ্ভিদ পরিবর্তনের পরে ইঁদুরের শেখার এবং স্মৃতিশক্তি বাড়াতে পারে না। তদুপরি, আমরা সিডিপিএস গ্রুপের তুলনায় মস্তিষ্কে প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি সাইটোকাইন এবং ABX গ্রুপের ইঁদুরের সিরামের বর্ধিত মাত্রা লক্ষ্য করেছি (চিত্র 7D–7N)। এবিএক্স গ্রুপ এবং সিওয়াই গ্রুপের ফলাফলে দেখা গেছে যে অন্ত্রের উদ্ভিদ এবং ইমিউন ফাংশন ধ্বংস হওয়ার পরে, এমনকি সিডিপিএসের প্রশাসন ইঁদুরের শেখার এবং স্মৃতিশক্তির উন্নতি করতে পারেনি। এই ফলাফলগুলি পরামর্শ দিয়েছে যে সিডিপিএস চিকিত্সা অন্ত্রের ডিসবায়োসিস প্রতিরোধ করে পেরিফেরাল প্রদাহ, অক্সিডেটিভ স্ট্রেস এবং আইনি-প্ররোচিত বার্ধক্য মডেল ইঁদুরের জ্ঞানীয় হ্রাস হ্রাস করেছে।

তারপরে আমরা সিডিপিএসের উপকারী প্রভাবগুলিতে প্রদাহের ভূমিকা নির্ধারণ করতে ইমিউনোসপ্রেসিভ ড্রাগ, সাইক্লোফসফামাইড [২৪] ব্যবহার করি। সাইক্লোফসফামাইড-চিকিত্সা করা সিডিপিএস ইঁদুর (সাই গ্রুপ) বন্য-প্রকার এবং সিডিপিএস গ্রুপের ইঁদুরের তুলনায় প্রতিবন্ধী শেখার এবং স্মৃতিশক্তি, অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটার সংমিশ্রণে পরিবর্তন এবং মস্তিষ্ক এবং সিরামে প্রো-এবং অ্যান্টি-ইনফ্ল্যামেটরি সাইটোকাইনগুলির বিভ্রান্তিকর মাত্রা দেখিয়েছে। যাইহোক, মডেল এবং ABX গ্রুপের সাথে তুলনা করার কোন গুরুত্ব নেই। (চিত্র 7A–7N)। এই তথ্যগুলি দেখায় যে অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটার সংমিশ্রণে পরিবর্তনগুলি ডি-গাল-প্ররোচিত বার্ধক্য মডেল ইঁদুরগুলিতে পেরিফেরাল প্রদাহ বাড়ায়।

চিত্র 5. সিডিপিএস চিকিত্সা ডি-গ্যালাকটোজ-প্ররোচিত বার্ধক্যজনিত মডেল ইঁদুরের প্রো-এবং অ্যান্টি-ইনফ্লেমেটরি সাইটোকাইন এবং অক্সিডেটিভ স্ট্রেস-সম্পর্কিত ফ্যাক্টরগুলির সঞ্চালন স্তরকে সংশোধন করে।

CDPS অ্যামিনো অ্যাসিড বিপাক নিয়ন্ত্রণ করে ডি-গাল-প্ররোচিত বার্ধক্য প্রতিরোধ করে

হোস্টের ইমিউন সিস্টেম অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা দ্বারা উত্পন্ন বিপাক দ্বারা প্রভাবিত হয় [25]। মল বিপাকগুলি অন্ত্রের মাইক্রোবিয়াল বিপাক এবং অন্ত্রের মাইক্রোবিয়াল কম্পোজিশনের একটি কার্যকরী রিডআউট প্রতিনিধিত্ব করে[26]। তদুপরি, অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটার বিপাকগুলি রক্ত ​​​​সঞ্চালনে প্রবেশ করে এবং হোস্ট বিপাক এবং স্বাস্থ্যকে প্রভাবিত করে [26, 27]। FWT, Mod এবং CDPS ইঁদুর থেকে সিরাম নমুনাগুলিতে মোট 1058 বিপাক সনাক্ত করা হয়েছিল। তারপরে, আমরা বায়োসাইক, কিয়োটো এনসাইক্লোপিডিয়া অফ জিনস অ্যান্ড জিনোম (কেইজিজি), এবং হিউম্যান মেটাবোলোম ডেটাবেস (এইচএমডিবি) ব্যবহার করে এই বিপাকগুলি বিশ্লেষণ করেছি এবং দেখতে পেয়েছি যে ডাব্লুটি গ্রুপের তুলনায় মোড গ্রুপে 65টি বিপাক পৃথকভাবে প্রকাশ করা হয়েছিল। অধিকন্তু, আমরা দেখতে পেলাম যে WT, Mod এবং CDPS গোষ্ঠীর মধ্যে 8টি বিপাকের মাত্রা (ক্রিয়েটিনাইন, ভ্যালাইন, L-(-)-মেথিওনিন, ও-টোলুইডিন, এন ইথাইলানিলাইন, ইউরিক অ্যাসিড, প্রোলিন এবং ফেনাইলালানিন) উল্লেখযোগ্যভাবে পৃথক। মেটাবোঅ্যানালিস্ট [২৮, ২৯] ব্যবহার করে এই 8টি বিপাকের পাথওয়ে সমৃদ্ধকরণ বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে এই বিপাকগুলি আর্জিনাইন, হিস্টিডিন, আরজিনাইন, প্রোলিন এবং পিউরিন বিপাকের সাথে সম্পর্কিত ছিল (চিত্র 8A, 8B)। WT গ্রুপে MOD গ্রুপ এবং CDPS গ্রুপের 7টি ভিন্ন মেটাবোলাইট।

তারপরে আমরা বিশ্লেষণ করেছি যদি অ্যামিনো অ্যাসিড বিপাকের পরিবর্তনগুলি অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটার সংমিশ্রণে পরিবর্তনের সাথে সম্পর্কিত ছিল। আমরা লক্ষ্য করেছি যে WT, Mod এবং CDPS গোষ্ঠীর 7 টি ভিন্ন বিপাক (creatinine, valine, L-(-)-Methionine, o-Toluidine, N-Ethylaniline, ইউরিক অ্যাসিড, এবং proline) উল্লেখযোগ্যভাবে কমে গেছে ABX, Cy, এবং মড গ্রুপগুলি WT এবং CDPS গ্রুপের তুলনায়। অধিকন্তু, ABX এবং Cy গ্রুপের মধ্যে কোন তাৎপর্য নেই (চিত্র 8C)। অবশেষে, অন্বেষণ করার জন্য ডিফারেনশিয়াল মেটাবলিজম এবং অন্যান্য বার্ধক্যজনিত রোগের মধ্যে একটি সম্পর্ক রয়েছে। আমরা MetaboAnalyst ডাটাবেস ব্যবহার করে এই সাতটি ভিন্নভাবে প্রকাশিত মেটাবোলাইট এবং মানুষের রোগের মধ্যে পারস্পরিক সম্পর্ক বিশ্লেষণ করেছি এবং দেখতে পেয়েছি যে এই বিপাকগুলি আলঝাইমার রোগের সাথে যুক্ত ছিল (p=0.00173; চিত্র 8D, 8E)। সামগ্রিকভাবে, এই তথ্যগুলি পরামর্শ দিয়েছে যে CDPS অ্যামিনো অ্যাসিড বিপাক নিয়ন্ত্রণ করে ডি-গাল-প্ররোচিত বার্ধক্য থেকে রক্ষা করে।

চিত্র 6. সিডিপিএস চিকিত্সা ডি-গ্যালাকটোজ-প্ররোচিত বার্ধক্য মডেল ইঁদুরের মস্তিষ্কে অক্সিডেটিভ স্ট্রেস হ্রাস করে

আলোচনা

জ্ঞানীয় ফাংশনে একটি প্রগতিশীল পতন বার্ধক্যের একটি বৈশিষ্ট্য। পূর্ববর্তী গবেষণায় দেখা গেছে যে সিডিপিএস চিকিত্সা বার্ধক্যজনিত মডেল ইঁদুরগুলিতে [30-33] শেখার এবং স্মৃতিশক্তি উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত করেছে। এই সমীক্ষায়, আমরা দেখিয়েছি যে ডি-গাল-প্ররোচিত বার্ধক্য মডেল ইঁদুরগুলিতে অন্ত্রের মাইক্রোবিয়াল হোমিওস্ট্যাসিস পুনরুদ্ধারের মাধ্যমে পেরিফেরাল প্রদাহ এবং অক্সিডেটিভ স্ট্রেসকে বাধা দিয়ে সিডিপিএস চিকিত্সা জ্ঞানীয় কার্যকারিতা উন্নত করেছে (চিত্র 9)। সিস্টানচে পলিস্যাকারাইড খাওয়ানো স্প্রাগ-ডাউলি ইঁদুরগুলি উপকারী অন্ত্রের ব্যাকটেরিয়ার বৃদ্ধি এবং অন্ত্রের মাইক্রোবিয়াল বৈচিত্র্যকে বর্ধিত দেখায় [৩৪]। CDA-0.05, একটি Cistanche নিরপেক্ষ পলিস্যাকারাইড, প্রোবায়োটিক ল্যাকটোব্যাসিলির বৃদ্ধিকে উন্নত করেছে [22]। এই তথ্যগুলি পরামর্শ দিয়েছে যে সিস্টানচে পলিস্যাকারাইডগুলি অন্ত্রের ব্যাকটেরিয়ার হোমিওস্টেসিসকে উন্নত করেছে।

এই গবেষণায়, আমরা দেখিয়েছি যে CDPS-এর প্রদাহ-বিরোধী প্রভাব রয়েছে এবং ব্যাকটেরোয়েডেটস, ফার্মিক্যুটস এবং প্রোটিওব্যাকটেরিয়ার মতো অন্ত্রের ব্যাকটেরিয়া জেনারের প্রাচুর্যকে সংশোধন করে বার্ধক্যজনিত মডেল ইঁদুরের জ্ঞানীয় ক্ষমতাকে উন্নত করে। অতএব, সিডিপিগুলি অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটার সংমিশ্রণকে পুনর্নির্মাণ করে বার্ধক্যজনিত রোগের জন্য চিকিত্সাগতভাবে উপকারী হতে পারে [35,36]। অধিকন্তু, পূর্ববর্তী গবেষণায় দেখা গেছে যে সিরাম এবং কোলনে প্রদাহজনক সাইটোকাইনের মাত্রা ব্যাকটেরিয়া জেনারের আপেক্ষিক প্রাচুর্যের সাথে যুক্ত যেমন ব্যাকটেরিয়াডেটস, ফার্মিক্যুটস এবং প্রোটিওব্যাকটেরিয়া [37, 38]। তদ্ব্যতীত, অন্ত্রের মাইক্রোবিয়াল কম্পোজিশন বিভিন্ন সাইটোকাইনের [39-43] সঞ্চালন স্তরগুলিকে সংশোধন করে মস্তিষ্কের কার্যকারিতা নিয়ন্ত্রণ করে। আমাদের ফলাফলে দেখা গেছে যে সিডিপিএস চিকিত্সা থার্মোপ্লাজমাটা, ব্যাসিলি, অজ্ঞাত অ্যাক্টিনোব্যাকটেরিয়া, ফুসোব্যাকটেরিয়া, এবং অজ্ঞাত ইলুসিমাইক্রোবিয়ার আপেক্ষিক প্রাচুর্যকে হ্রাস করেছে এবং মেথানোব্যাকটেরিয়া, স্পিরোচেটিয়া, ডেল্টাপ্রোটোব্যাকটেরিয়া, অজ্ঞাত{8}}অ্যানালাইনব্যাকটেরিয়া, অ্যানালাইনব্যাকটেরিয়া, ডেল্টাপ্রোটোব্যাকটেরিয়া, অ্যানালাইন ব্যাকটেরিয়া, অ্যানালিকোব্যাক্টেরিয়া, অ্যানডেনটেরিয়া, অ্যানডেনডেনটেরিয়া, ডিসপ্লেক্সের আপেক্ষিক প্রাচুর্য বৃদ্ধি করেছে। ইরিসিপেলোট্রিচিয়া, এবং অজ্ঞাত_সায়ানোব্যাকটেরিয়া।

অন্ত্রের মাইক্রোবিয়াল বিপাকগুলি রক্ত ​​​​প্রবাহে মুক্তি পায় এবং হোস্টের স্বাস্থ্য এবং বিপাক নিয়ন্ত্রণ করে [26, 27]। অন্ত্রের অণুজীব বিপাকগুলি মল বিপাক রচনার মূল্যায়ন করে অনুমান করা যেতে পারে, যা অন্ত্রের জীবাণুর সংমিশ্রণে পরিবর্তনের সাথে পরিবর্তিত হয় [44]। সাম্প্রতিক গবেষণায় দেখানো হয়েছে যে সিট্রুলাইন, প্রোলিন, আর্জিনাইন, অ্যাসপারাজিন, ফেনিল্যালানাইন এবং থ্রোনিনের প্লাজমা স্তরগুলি আলঝাইমার রোগ [৪৫, ৪৬] সহ নিউরোডিজেনারেটিভ ব্যাধিগুলির সাথে যুক্ত। আমাদের গবেষণায় দেখা গেছে যে ক্রিয়েটিনিন, ভ্যালাইন, এল-মেথিওনিন, ও-টোলুইডিন, এন ইথিলানিলাইন, ইউরিক অ্যাসিড এবং প্রোলিনের সিরাম স্তর ইঁদুরের ডি-গাল-প্ররোচিত বার্ধক্যের সাথে যুক্ত ছিল।

সিস্টানচে নির্যাস: অ্যান্টি-আলঝাইমার রোগ

ইমিউন সিস্টেমের সহজাত এবং অভিযোজিত বাহুগুলি অন্ত্রের লুমিনাল পৃষ্ঠে হোস্ট-মাইক্রোবিয়াল হোমিওস্ট্যাসিস বজায় রাখতে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে [47]। অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা রক্তের প্রবাহে সাইটোকাইন এবং বিপাক মুক্ত করে কেন্দ্রীয় স্নায়ুতন্ত্র (সিএনএস) এবং অনাক্রম্যতা নিয়ন্ত্রণে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে [৪৮, ৪৯]। প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি সাইটোকাইনগুলি বেশ কয়েকটি নিউরোডিজেনারেটিভ রোগে একটি মূল ভূমিকা পালন করে [50-52]। উদাহরণস্বরূপ, বয়স-সম্পর্কিত ম্যাকুলার ডিজেনারেশন (AMD) এবং গ্লুকোমা রেটিনাল গ্যাংলিয়ন কোষে (RGC) অ্যামাইলয়েড (A ) এবং হাইপার-ফসফরিলেটেড টাউ (পি টাউ) এবং আয়রনের অন্তঃকোষীয় জমার সাথে যুক্ত। অধিকন্তু, গ্লুকোমা [53] এর সাথে যুক্ত প্যাথোজেনেসিসে প্রদাহ একটি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে। দৃষ্টি প্রতিবন্ধকতা আল্জ্হেইমের রোগের (AD) একটি প্রাথমিক উপসর্গ এবং জ্ঞানীয় পতন শুরু হওয়ার আগে প্রকাশ পায় [54]। আমাদের গবেষণায় দেখা গেছে যে সিডিপিএস অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটার হোমিওস্ট্যাসিস বজায় রেখে জ্ঞানীয় হ্রাস এবং পেরিফেরাল প্রদাহ থেকে রক্ষা করে।

এই গবেষণায় বেশ কিছু সীমাবদ্ধতা রয়েছে। প্রথমত, অ্যামিনো অ্যাসিড বিপাক এবং অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটার গঠনের মধ্যে সম্পর্ক সুপরিচিত নয়। দ্বিতীয়ত, CDPS এর গঠন এবং আণবিক গঠন জানা নেই। অতএব, অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা-ব্রেনসিগন্যালিং অক্ষের মাধ্যমে এডি কমাতে CDPS-এর নিয়ন্ত্রক ভূমিকা আরও অন্বেষণ করার জন্য ভবিষ্যতের অধ্যয়নগুলি প্রয়োজন।

উপসংহারে, আমাদের গবেষণায় দেখা গেছে যে সিডিপিএস অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটার হোমিওস্ট্যাসিস পুনরুদ্ধার করে ডি-গাল-প্ররোচিত বার্ধক্যজনিত মডেল ইঁদুরের জ্ঞানীয় ক্ষমতা উন্নত করেছে, যার ফলে অ্যামিনো অ্যাসিড ভারসাম্যহীনতা, পেরিফেরাল প্রদাহ এবং অক্সিডেটিভ স্ট্রেস পুনরুদ্ধার করে। এই ফলাফলগুলি পরামর্শ দেয় যে সিডিপিএস একটি সম্ভাব্য থেরাপিউটিক যা শেখার এবং মেমরির ব্যাধিযুক্ত রোগীদের জন্য, বিশেষত যারা অন্ত্রের ডিসবায়োসিসের সাথে যুক্ত।

উপকরণ এবং পদ্ধতিসমূহ

CDPS এর প্রস্তুতি

প্রায় 1.{1}} কেজি পরিষ্কার করা সিস্তানচে মরুভূমিকে 40 ডিগ্রি সেলসিয়াস তাপমাত্রায় চুলায় বাতাসে শুকানো হয়েছিল এবং অপরিশোধিত পাউডারে পরিণত করা হয়েছিল। পাউডারটি গরম ইথানলে 3 ঘন্টার জন্য বের করা হয়েছিল। ফিল্টার অপসারণের জন্য অবশিষ্টাংশগুলিকে গজের মাধ্যমে ফিল্টার করা হয়েছিল এবং তারপরে জল (8X) দিয়ে মিশ্রিত করা হয়েছিল এবং 2 ঘন্টা, 1.5 ঘন্টা এবং 1 ঘন্টার জন্য 90 ডিগ্রি সেলসিয়াস তাপমাত্রায় পর্যায়ক্রমে রিফ্লাক্স করা হয়েছিল। প্রতিবার বিন্দুতে, দ্রবণটি সুপারনাট্যান্টকে আলাদা করার জন্য সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল এবং বাদামী-লাল পরিস্রুতি সঙ্গে মিলিত. তারপরে, পরিস্রুতকে কম চাপে ঘনীভূত করা হয়, ঘরের তাপমাত্রায় ঠান্ডা করা হয়, ধীরে ধীরে 95 শতাংশ ইথানলে (3X) যোগ করা হয় এবং 24 ঘন্টার জন্য 4 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডে দাঁড়াতে দেওয়া হয়। তারপরে, দ্রবণটি 6000 r/min-এ 4 ডিগ্রি সেলসিয়াসে 20 মিনিটের জন্য সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল। জল নিষ্কাশন এবং অ্যালকোহল বর্ষণ তিনবার পুনরাবৃত্তি করার পরে অবক্ষেপ সংগ্রহ করা হয়েছিল। অশোধিত Cistanche deserticola পলিস্যাকারাইড (CDPs) পেতে অবক্ষেপকে জলে পুনর্গঠন করা হয়েছিল, ডিপ্রোটিনাইজড, ডায়ালাইজড এবং ফ্রিজে শুকানো হয়েছিল। আল্ট্রাভায়োলেট স্পেকট্রোফোটোমেট্রি দ্বারা মূল্যায়ন করা পলিস্যাকারাইডের পরিমাণ 90 শতাংশের বেশি ছিল।

cistanche নির্যাস

প্রাণীদের গ্রুপিং এবং চিকিত্সা

আট-সপ্তাহ বয়সী পুরুষ কুনমিং ইঁদুর (SCXK লাইসেন্স নং।{2}}) SPF Biotechnology Co. Ltd (Beijing, China) থেকে কেনা হয়েছিল, একটি আলো এবং তাপমাত্রা-নিয়ন্ত্রিত ঘরে রাখা হয়েছিল, এবং খাবার ও জল দিয়ে খাওয়ানো হয়েছিল৷ ইনার মঙ্গোলিয়া মেডিকেল বিশ্ববিদ্যালয়ের ইনস্টিটিউশনাল অ্যানিমাল কেয়ার অ্যান্ড ইউজ কমিটি দ্বারা অনুমোদিত প্রোটোকল অনুসারে সমস্ত প্রাণী পরীক্ষা করা হয়েছিল। গবেষণাগারের প্রাণীদের যত্ন এবং ব্যবহারের জন্য জাতীয় স্বাস্থ্য ইনস্টিটিউটস (এনআইএইচ) গাইড অনুসারে পরীক্ষাগুলি করা হয়েছিল।

নতুন আশেপাশে 1 সপ্তাহ অভিযোজনের পরে, 120টি ইঁদুরকে নিম্নলিখিত 7 টি গ্রুপে বিভক্ত করা হয়েছিল: (1) বন্য প্রকার নিয়ন্ত্রণ (WT); মডেল গ্রুপ (150 mg/Kg/day D-gal; Mod); (3) CH: D-gal প্লাস 100 mg/kg CDPS; (4) CM: D-gal প্লাস 50 mg/kg CDPS; (5) CL: D-gal প্লাস 25 mg/kg CDPS; (6) ABX গ্রুপ: অ্যান্টিবায়োটিক প্লাস ডি-গাল প্লাস 50 মিগ্রা/কেজি সিডিপিএস; (7) সাই গ্রুপ: সাইক্লোফসফামাইড প্লাস ডি-গাল প্লাস 50mg/kg CDPS।

মডেল, ABX, Cy, এবং CDPS গ্রুপের ইঁদুর 2 মাস ধরে প্রতিদিন 150 মিগ্রা/কেজি ডি-গ্যাল স্যালাইন-দ্রবীভূত ইনজেকশন পেয়েছে। ডব্লিউটি গ্রুপকে 2 মাসের জন্য সমান পরিমাণে স্যালাইন দিয়ে সাবকিউটেনিয়াস ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল। CDPS গ্রুপের ইঁদুরগুলিকে 2 মাসের জন্য 100 mg/kg, 50 mg/Kg বা 25 mg/Kg CDPS সমন্বিত ইন্ট্রাগ্যাস্ট্রিক ইনজেকশন দিয়েও প্রতিদিন পরিচালনা করা হয়েছিল। ABX গ্রুপের ইঁদুররা D-gal এবং CDPS ইনজেকশন ছাড়াও 2 মাস ধরে 0.1 mg/mL অ্যাম্পিসিলিন এবং 0.5 mg/mL স্ট্রেপ্টোমাইসিন সহ পানীয় জল পান। ডি-গ্যাল পরিচালনার আগে, ইঁদুরগুলি ABX গ্রুপে 7 দিনের জন্য 0.1 mg/mL অ্যাম্পিসিলিন, 0.5 mg/mL স্ট্রেপ্টোমাইসিন এবং 0.1 mg/mL কোলিস্টিনযুক্ত ইনজেকশন গ্রহণ করেছিল। সাই গ্রুপের ইঁদুর ডি-গাল এবং সিডিপিএস-এর প্রতিদিনের ইনজেকশন ছাড়াও 2 মাস ধরে প্রতি অন্য দিন (qod) 20 মিলিগ্রাম/কেজি সাইক্লোফসফামাইডের ইন্ট্রাপেরিটোনিয়াল ইনজেকশন পেয়েছে।

অভিনব বস্তু স্বীকৃতি পরীক্ষা

শেষ ডোজ পরে আচরণগত পরীক্ষা পরিচালনা করুন। বস্তুর স্বীকৃতি পরীক্ষায় পরিচিতি, প্রশিক্ষণ এবং পরীক্ষার পর্যায় জড়িত। পরিচিতি পর্যায়ে, ইঁদুর দুটি দিনের জন্য 10 মিনিটের জন্য একটি খালি পরীক্ষার চেম্বারে অভ্যস্ত ছিল। তারপরে, তৃতীয় দিনে (প্রশিক্ষণের দিন), একই আকার, আকৃতি এবং রঙের দুটি বস্তু (A1 এবং A2) চেম্বারের বিপরীত দিকে স্থাপন করা হয়েছিল। প্রতিটি মাউসকে তখন 10 মিনিট সময় দেওয়া হয়েছিল দুটি অনুরূপ বস্তু অন্বেষণ করার জন্য। 1-ঘন্টা (তৃতীয় দিনে) এবং 24-ঘন্টা (চতুর্থ দিনে) প্রশিক্ষণ-থেকে-পরীক্ষার ব্যবধানের পরে, অনুরূপ বস্তুগুলির মধ্যে একটি (A1 বা A2) একটি B বা C দিয়ে প্রতিস্থাপিত হয়েছিল পরীক্ষার দিনে আকার, রঙ এবং আকারে ভিন্ন বস্তু। পরীক্ষার পর্যায়ে, প্রতিটি মাউস 5 মিনিটের জন্য পরীক্ষা করা হয়েছিল এবং নিম্নলিখিত সূত্রটি ব্যবহার করে অভিনব বস্তু (B বা C) স্বীকৃতির স্মৃতি নির্ধারণ করতে অগ্রাধিকার সূচক গণনা করা হয়েছিল: অগ্রাধিকার সূচক{11}}বস্তু B বা C/ এর উপর সময় (বস্তুর B বা C প্লাস A অবজেক্টের সময়)×100 শতাংশ।

মরিস জল গোলকধাঁধা পরীক্ষা

মরিস জলের গোলকধাঁধা পরীক্ষাটি 45 সেমি গভীরতা এবং 90 সেমি ব্যাসযুক্ত একটি গোলাকার পুলে সঞ্চালিত হয়েছিল। রুডিগার এস, এট আল দ্বারা বর্ণিত প্রোটোকল। (2011) [55] এবং Wood RA, et al. (2018) [56] এখানে নিযুক্ত ছিল। পুলের জলের গভীরতা ছিল 30 সেমি, এবং জলের তাপমাত্রা ছিল 20±1 ডিগ্রি সেলসিয়াস। প্ল্যাটফর্মটি 6 সেমি ব্যাস এবং 1 সেমি পানির নিচে ছিল। প্রশিক্ষণ এবং পরীক্ষার জন্য প্রতিটি সময় ছিল 60 সেকেন্ড। প্রশিক্ষণের জন্য, আমরা প্রতিদিন একটি লুকানো প্ল্যাটফর্মের সাহায্যে 60 সেকেন্ডের চারটি ট্রায়াল করেছি পাঁচটি দিন ধরে। যদি 60 সেকেন্ডে ইঁদুরের দ্বারা প্ল্যাটফর্মটি আবিষ্কৃত না হয় তবে তাদের প্ল্যাটফর্মের দিকে পরিচালিত করা হয়েছিল এবং 5 সেকেন্ডের জন্য প্ল্যাটফর্মে স্থাপন করা হয়েছিল। পরীক্ষার পর্যায়ে, প্রশিক্ষণ এবং প্রোবের ট্রায়াল সেশনে লুকানো প্ল্যাটফর্মে পৌঁছানোর বিলম্বতা, সরানো প্ল্যাটফর্মের অবস্থানের উপর দিয়ে ক্রসিংয়ের সংখ্যা এবং লক্ষ্য (প্ল্যাটফর্ম) চতুর্ভুজে ব্যয় করা সময় রেকর্ড করা হয়েছিল এবং বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।

ELISA assays

IL-2(), IL-4, IL-10, এবং TNF-এর মতো প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি সাইটোকাইনের সিরাম স্তরগুলি সাংহাই ইয়ি লি থেকে কেনা ELISA কিটগুলি ব্যবহার করে প্রতিটি ইঁদুরের জন্য বিশ্লেষণ করা হয়েছিল জৈবিক প্রযুক্তি কোং, লিমিটেড (সাংহাই, চীন) প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে। নানজিং জিয়ানচেং বায়োইঞ্জিনিয়ারিং ইনস্টিটিউট (নানজিং, চীন) থেকে কেনা অ্যাস কিট দ্বারা ইঁদুরের প্রতিটি গ্রুপের সিরামে অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এনজাইম, সুপারঅক্সাইড ডিসম্যুটেজ (এসওডি), এবং লিপিড পারক্সিডেশন পণ্য, ম্যালন্ডিয়ালডিহাইড (এমডিএ) এর মাত্রা বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। . মুরিন হিপ্পোক্যাম্পাস নমুনাগুলিতে উন্নত অক্সিডেশন প্রোটিন পণ্যের মাত্রা (AOPP) নির্মাতার নির্দেশ অনুসারে সাংহাই ই লি বায়োলজিক্যাল টেকনোলজি কোং লিমিটেড (সাংহাই, চীন) এর একটি ELISA কিট ব্যবহার করে অনুমান করা হয়েছিল।

মুরিন মস্তিষ্কে অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের অনুমান

১ বেয়োটাইম বায়োটেকনোলজি, সাংহাই, চীন)। লিপিড পারক্সিডেশন (LPO) এবং ম্যালন্ডিয়ালডিহাইড (MDA), এবং হিপ্পোক্যাম্পাস নমুনাগুলিতে GSH-Px এবং SOD-এর ক্রিয়াকলাপগুলি প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে নানজিং জিয়ানচেং বায়োইঞ্জিনিয়ারিং ইনস্টিটিউট (নানজিং, চীন) থেকে কিট ব্যবহার করে কালারমিট্রি দ্বারা বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।

Cistanche সম্পূরক: স্মৃতিশক্তি উন্নত করে

অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা রচনা

সমস্ত ইঁদুরের কাছ থেকে মল নমুনা সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং অবিলম্বে -80 ডিগ্রি সেলসিয়াসে সংরক্ষণ করা হয়েছিল৷ 16S rRNA জিনের V3 প্লাস V4 অঞ্চলটি Illumina MiSeq (Beijing Novogene Co. Ltd., Beijing, China) ব্যবহার করে সিকোয়েন্স করা হয়েছিল এবং QIIME ব্যবহার করে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল৷ অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা প্রোফাইলগুলি নির্ধারণের জন্য খোলা প্ল্যাটফর্ম।

সিরাম মেটাবোলাইটের এলসি/এমএস বিশ্লেষণ

সিরামের নমুনাগুলিকে 10 মিনিটের জন্য প্রি-চিল্ড মিথানল দিয়ে 1:3 অনুপাতে প্রোটিনগুলিকে ঢেলে দেওয়া হয়েছিল৷ নমুনাগুলিকে 12000r/মিনিট 15 মিনিটের জন্য 4 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডে সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল। সুপারনাট্যান্টগুলি থার্মো সায়েন্টিফিক ডিওনেক্স আল্টিমেট3000 র্যাপিড রেজোলিউশন লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি এবং QExactive ভর স্পেকট্রাম দ্বারা বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। ক্রোমাটোগ্রাফিক অবস্থাগুলি সারণি 1 এ দেখানো হয়েছে। বিশ্লেষকগুলিকে একটি XBridge BEH Amide ক্রোমাটোগ্রাফিক কলামে (2.1×100 mm; Waters Co., Milford, MA, USA) মোবাইল ফেজ A এবং B হিসাবে 0.1 শতাংশ ফরমিক অ্যাসিড এবং অ্যাসিটোনিট্রিল ব্যবহার করে আলাদা করা হয়েছিল। , যথাক্রমে। প্রবাহের হার 0.4 মিলি / মিনিটে সেট করা হয়েছিল, ইনজেকশনের পরিমাণ ছিল 5 μl, এবং কলামের তাপমাত্রা 25 ডিগ্রি সেলসিয়াসে সেট করা হয়েছিল (সারণী 1)। ইতিবাচক এবং নেতিবাচক আয়ন স্ক্যানিং মোড ব্যবহার করে ভর বর্ণালী সংকেত প্রাপ্ত করা হয়েছিল। আয়ন স্প্রে ভোল্টেজ এবং অন্যান্য নির্দিষ্ট MS পরামিতি সারণি 2 এ দেখানো হয়েছে।

পরিসংখ্যান সংক্রান্ত বিশ্লেষণ

Statistical analysis was performed using the SPSS 13.0 software (SPSS Inc., Chicago, Illinois, USA). The data plots were generated using GraphPad Prism 8.0.1 (GraphPad Software, La Jolla, California, USA). Partial least squares discriminant analysis (OPLS-DA) of SIMCA-P+13.0 (Umetrics, AB, Umeå, Sweden) and Principal Components Analysis (PCA) were used to assess normalized GC-MS spectral data. Variable Influence on Projection (VIP) values were used to identify significant variables with VIP values >১।{1}} এবং পৃ< 0.05.="" these="" significant="" variables="" were="" used="" to="" identify="" the="" spectral="" peaks.="" the="" student's="" t-test="" was="" used="" to="" analyze="" the="" differences="" between="" two="" groups="" of="" data.="" the="" taxonomic="" rank="" differential="" between="" groups="" was="" determined="" using="" student's="" test="" (v3.1.2;="" r="" programming="" language).="" the="" correlation="" between="" genera="" abundance="" and="" mouse="" behavior="" was="" calculated="" using="" spearman="" correlation="" coefficients="" (r="" language).="" p="" <="" 0.05="" was="" considered="" statistically="" significant.="" the="" data="" are="" presented="" as="">