Cistanche Deserticola Polysaccharide ইঁদুর এবং RANKL-প্ররোচিত অস্টিওক্ল্যাস্টোজেনেসিস ওভিএক্স-প্ররোচিত হাড়ের ক্ষয়কে বাধা দেয়

অনুগ্রহ করে যোগাযোগ করুনoscar.xiao@wecistanche.comআরও তথ্যের জন্য

বিমূর্ত

অস্টিওপোরোসিস একটি গুরুতর হাড়ের রোগ যা বয়স্ক জনসংখ্যাকে প্রভাবিত করে। Cistanche deserticola (CD), চীনে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত একটি টনিক এবং ঔষধি খাদ্য, অস্টিওপরোসিসের কার্যকর চিকিৎসা প্রদান করে বলে প্রমাণিত হয়েছে। Cistanche deserticola পলিস্যাকারাইড (CDP), CD থেকে আহরিত, বিভিন্ন ফার্মাকোলজিক্যাল বৈশিষ্ট্যের অধিকারী, কিন্তু এর ভূমিকাঅস্টিওক্লাস্টিকগঠন এবং কার্যকারিতা, সেইসাথে অস্টিওপরোসিস, অজানা থেকে যায়। এই অধ্যয়নের উদ্দেশ্য ছিল অস্টিওপরোসিসের উপর এর সম্ভাব্য প্রক্রিয়াটি আরও অন্বেষণ করার জন্য সিডিপিকে নিষ্কাশন করা এবং বিশুদ্ধ করা। ফলাফলগুলি দেখায় যে সিডিপি চিকিত্সা OVX-প্ররোচিত অস্টিওপরোসিস প্রতিরোধ করে এবং অস্টিওক্লাস্ট কার্যকলাপ এবং কার্যকারিতা দমন করে হাড়ের ক্ষয় কমিয়ে দেয়। অধিকন্তু, সিডিপি চিকিত্সা উল্লেখযোগ্যভাবে RANKL-প্ররোচিত অস্টিওক্ল্যাস্টোজেনেসিস, হাড়ের রিসোর্পশন এবং অস্টিওক্লাস্ট-নির্দিষ্ট জিনের প্রকাশকে বাধা দেয়। যান্ত্রিকভাবে, CDP RANKL-প্ররোচিত NF-κB এবং MAPKs সিগন্যালিং পাথওয়ে অ্যাক্টিভেশনকে বাধা দেয় এবং ফলস্বরূপ ডাউনস্ট্রিম NFATc1 অ্যাক্টিভেশনকে প্রভাবিত করে। এই সমীক্ষার ফলাফলগুলি পরামর্শ দেয় যে সিডিপি অস্টিওপোরোসিসের চিকিত্সার জন্য একটি সম্ভাব্য নিরাপদ ওষুধ।

আরো জানতে এখানে ক্লিক করুন

ভূমিকা

অস্টিওপোরোসিস - হাড়ের ভর হ্রাস, অস্বাভাবিক হাড়ের টিস্যু মাইক্রোস্ট্রাকচার, হাড়ের ভঙ্গুরতা বৃদ্ধি এবং ফ্র্যাকচার দ্বারা চিহ্নিত একটি রোগ (ডি মার্টিনিস, ডি বেনেডেটো, মেঙ্গোলি, এবং গিনাল্ডি, 2006)- বর্তমানে বিশ্বব্যাপী 200 মিলিয়নেরও বেশি লোককে প্রভাবিত করে এবং একটি উল্লেখযোগ্য চিকিৎসা এবং উপস্থাপন করে। আধুনিক সমাজের উপর আর্থ-সামাজিক বোঝা (স্ট্রম এট আল।, 2011)। অস্টিওপোরোসিসের ক্লিনিকাল চিকিত্সা মূলত হরমোন প্রতিস্থাপনের উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করে,বিসফসফোনেট, অথবা denosumab থেরাপি। এই পদ্ধতিগুলি কার্যকর কিন্তু দীর্ঘমেয়াদী পার্শ্বপ্রতিক্রিয়া সৃষ্টি করে যেমন স্তন ক্যান্সারের সম্ভাব্য ঝুঁকি এবং অ্যাটিপিকাল ফিমার ফ্র্যাকচার (ব্ল্যাক, বাউয়ার, শোয়ার্টজ, কামিংস, এবং রোজেন, 2012; রাচনার, খোসলা, এবং হফ বাউর, 2011)। তাই, এমন ওষুধগুলি অন্বেষণ করার জরুরী প্রয়োজন রয়েছে যা শুধুমাত্র অস্টিওপরোসিসকে বাধা দিতে পারে না কিন্তু কম অবাঞ্ছিত পার্শ্বপ্রতিক্রিয়াও রাখে। Cistanche deserticola (CD), একটি টনিক এবং ঔষধি খাবার যা চীনে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়, যা "মরুভূমির জিনসেং" নামে পরিচিত, এটি সি. ডেসার্টিকোলা ওয়াইসি মা (গু, ইয়াং এবং হুয়াং, 2016) এর স্কেল পাতা সহ শুকনো রসালো কান্ড এবং এর বৈচিত্র্য রয়েছে এবং কার্যকর ফার্মাকোলজিক্যাল ক্রিয়াকলাপ, যেমন ইমিউন নিয়ন্ত্রণ,অ্যান্টি-অক্সিডেশন, এবং অস্টিওপরোসিস-বিরোধী বৈশিষ্ট্য (Hu et al., 2020; Li et al., 2012; Zhang et al., 2014)। অস্টিওপোরোসিস চিকিত্সার সিডির সক্রিয় পদার্থের উপর পূর্ববর্তী গবেষণাগুলি মূলত ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইডের উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করে (লি, জিয়াং, এবং গু, 2018; জু, ঝাং, ওয়াং, ইয়াও, এবং মা, 2017)। যাইহোক, সিডিতে অন্যান্য কার্যকরী উপাদান যেমন ইরিডয়েডস, লিগনানস, পলিস্যাকারাইড (ওয়াং, ঝাং, এবং জি, 2012) রয়েছে। চিরাচরিত চাইনিজ মেডিসিন (TCM) এর ক্লিনিকাল প্রয়োগ মূলত পানির ডিকোকটিং। পলিস্যাকারাইড হল জলে দ্রবণীয় উপাদান এবং সম্ভবত TCM এর প্রধান ফার্মাকোডাইনামিক উপাদান। টিসিএম থেকে নিষ্কাশিত পলিস্যাকারাইডগুলির একটি অ্যান্টি-অস্টিওপরোসিস প্রভাব এবং কিছু অবাঞ্ছিত পার্শ্বপ্রতিক্রিয়া রয়েছে বলে জানা গেছে, যা সাধারণত ক্লিনিকগুলিতে ব্যবহৃত হয় (যেমন, পলিস্যাকারাইডগুলি থেকে নিষ্কাশিতEpimedium brevicornum(Zheng, He, Wu, Cai, & Wei, 2020), Achyranthes bidentata (Zhang, Zhang, Zhang, Wang, & Yan, 2018), এবং Morinda officinalis (Yan et al., 2019))। অতএব, আমরা যে অনুমানCistanche deserticola পলিস্যাকারাইডসিডি থেকে বের করা (CDP) অস্টিওপরোসিসের চিকিৎসার জন্য একটি সম্ভাব্য নিরাপদ ওষুধ হতে পারে। সাধারণত, হাড়ের রিসোর্পশন এবং হাড়ের গঠন অস্টিওক্লাস্ট সহ বিভিন্ন ধরণের কোষের সাথে সমন্বয় করে হাড়ের পুনর্নির্মাণের সময় একটি গতিশীল ভারসাম্য বজায় রাখে।অস্টিওব্লাস্ট, হাড়ের আস্তরণের কোষ, এবং অস্টিওসাইট (কুলার, টিকনার, চিম, এবং জু, 2012)। এই ভারসাম্য ভেঙ্গে যাওয়ার ফলে অস্টিওপরোসিস (ঝু এট আল।, 2018) এবং অস্টিওস্ক্লেরোসিস (Ihde et al., 2011) এর মতো বিভিন্ন ধরনের হাড়ের বিপাকীয় রোগ হতে পারে। অস্টিওক্লাস্ট, মনোনিউক্লিয়ার/ম্যাক্রোফেজ বংশ থেকে প্রাপ্ত শেষ বিভেদ কোষ হিসাবে, হাড়ের রিসোর্পশন ফাংশন সহ একমাত্র কোষ (টিটেলবাম, 20{{106}}0)। দুটি মূল সাইটোকাইন রয়েছে যা অস্টিওক্লাস্ট পার্থক্য এবং পরিপক্কতায় অংশগ্রহণ করে (কোগা এট আল।, 2004): ম্যাক্রোফেজ কলোনি-স্টিমুলেটিং ফ্যাক্টর (M-CSF) এবং নিউক্লিয়ার ফ্যাক্টর κB (NF-κB) ligand (RANKL) এর রিসেপ্টর অ্যাক্টিভেটর। এম-সিএসএফ অস্টিওক্লাস্ট প্রোজেনিটারে হেমাটোপয়েটিক স্টেম সেলের পার্থক্যের মধ্যস্থতা করে এবং RANK রিসেপ্টরের অভিব্যক্তিকে আপগ্রেগুলেট করে অস্টিওক্লাস্টের পার্থক্যকে প্রচার করে (টাকায়ানাগি, 2007)। অস্টিওক্লাস্ট কোষের পৃষ্ঠে RANKL এবং RANK এর বাঁধনের ফলে নিম্নলিখিতগুলি ঘটে: (1) সংকেত অ্যাডাপ্টার অণু নিয়োগ যেমন TNF রিসেপ্টর-সম্পর্কিত ফ্যাক্টর 6 (TRAF6); (2) NF- κB এবং মাইটোজেন-অ্যাক্টিভেটেড প্রোটিন কাইনেস (MAPKs) সহ একাধিক ডাউনস্ট্রিম লক্ষ্যগুলির সক্রিয়করণ; এবং (3) সক্রিয় টি-কোষ, সাইটোপ্লাজমিক 1 (NFATc1) (Liu et al., 2019; Yamashita et al., 2007) এর নিউক্লিয়ার ফ্যাক্টরের এক্সপ্রেশন লেভেলের আপ-রেগুলেশন। এই সিগন্যালিং পাথওয়ের সক্রিয়করণ সরাসরি অস্টিওক্লাস্ট জিনের অভিব্যক্তিকে নিয়ন্ত্রণ করে, যার মধ্যে রয়েছে অ্যাসিড ফসফেটেস 5 (Acp5) [এনকোডিং টার্টরেট-প্রতিরোধী অ্যাসিড ফসফেটেস (TRAcP)], ম্যাট্রিক্স মেটালোপ্রোটিনেস 9 (MMP9), এবং ক্যাথেপসিন কে (CTSK, Simleonoy) , এবং লেসি, 2003)। অতএব, RANKL-প্ররোচিত অস্টিওক্লাস্ট ডিফারেন্সিয়েশন-সম্পর্কিত সিগন্যালিং পথের বাধা অস্টিওপোরোসিসের জন্য একটি সম্ভাব্য থেরাপিউটিক পদ্ধতি। এই গবেষণায়, আমরা অস্টিওক্লাস্ট-নির্দিষ্ট জিনের প্রকাশ এবং সক্রিয়করণের উপর ফোকাস সহ ভিভোতে ওভারিয়েক্টোমাইজড (ওভিএক্স)-প্ররোচিত অস্টিওপরোসিস মাউস মডেল এবং ভিট্রোতে RANKL-প্ররোচিত অস্টিওক্লাস্ট কার্যকলাপের উপর সিডিপি চিকিত্সার প্রভাবগুলি নির্ধারণ করার লক্ষ্য রেখেছিলাম। NFATc1 এবং NF-κB এবং MAPKs সিগন্যালিং পাথওয়ের। আমাদের অনুসন্ধানগুলি অস্টিওপরোসিসের চিকিত্সার জন্য একটি নিরাপদ এবং কার্যকর ওষুধ হিসাবে সিডিপির সম্ভাব্যতার নতুন অন্তর্দৃষ্টি প্রদান করতে পারে। 2. উপাদান এবং পদ্ধতি 2.1. রাসায়নিক ও নমুনা সংগ্রহের সিডি (নং 180801) আনহুই জিশুন ট্র্যাডিশনাল চাইনিজ মেডিসিন কোং, লিমিটেড (আনহুই, চায়না) থেকে কেনা হয়েছিল এবং চিনের গুয়াংঝু ইউনিভার্সিটি অফ চাইনিজ মেডিসিন, ফার্মাসিউটিক্যাল সায়েন্সেস স্কুলের অধ্যাপক হাইবো হুয়াং দ্বারা শনাক্ত করা হয়েছিল। . Estradiol valerate ট্যাবলেটগুলি Bayer (Leverkusen, North-Rhine Westphalia, Germany) থেকে কেনা হয়েছিল। আলফা-সংশোধিত ন্যূনতম অপরিহার্য মাধ্যম (-MEM) এবং ভ্রূণ বোভাইন সিরাম (FBS) Gibco (থার্মো ফিশার সায়েন্টিফিক, ওয়ালথাম, এমএ, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র) থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল। পেনিসিলিন/স্ট্রেপ্টোমাইসিন এবং TRAcP স্টেনিং কিট সোলারবিও (বেইজিং, চীন) থেকে অর্জিত হয়েছিল। রিকম্বিন্যান্ট মাউস M-CSF এবং রিকম্বিন্যান্ট মাউস RANKL R&D সিস্টেম (Minneapolis, MN, USA) থেকে সংগ্রহ করা হয়েছিল। কর্নিং লাইফ সায়েন্সেস (সেন্ট লোয়েল, এমএ, ইউএসএ) থেকে হাইড্রোক্সাপাটাইট-প্রলিপ্ত প্লেট কেনা হয়েছিল। NFATc1 এবং CTSK-এর প্রাথমিক অ্যান্টিবডি (সান্তা ক্রুজ বায়োটেকনোলজি, সান্তা ক্রুজ, CA, USA); IκB- , p65, P-p65, p38, P-p38, ERK1/2, P-ERK1/2, JNK, এবং P-JNK (সেল সিগন্যালিং প্রযুক্তি, ড্যান ভার্স, এমএ, ইউএসএ); এবং -অ্যাক্টিন (CWBIO, বেইজিং, চীন)ও প্রাপ্ত হয়েছিল। এই গবেষণায় ব্যবহৃত অন্যান্য রিএজেন্টগুলি বিশ্লেষণাত্মক গ্রেডের ছিল এবং মিলি-কিউ জল পরিশোধন ব্যবস্থা (মিলিপুর, বেডফোর্ড, এমএ, ইউএসএ) দ্বারা জল বিশুদ্ধ করা হয়েছিল। 2.2। সিডিপি নিষ্কাশন সিডিটি একটি সূক্ষ্ম পাউডারে মাটিতে তৈরি করা হয়েছিল এবং একে পরাজিত করতে তিনবার পেট্রোলিয়াম ইথারের সাথে মিশ্রিত করা হয়েছিল। কঠিন অবশিষ্টাংশ পরিস্রাবণ দ্বারা সংগ্রহ করা হয় এবং তারপর ঘরের তাপমাত্রায় শুকানো হয়। পলিস্যাকারাইডগুলি পূর্ব-চিকিত্সা করা নমুনাগুলি থেকে 2 ঘন্টার জন্য জল দিয়ে তিনবার বের করা হয়েছিল, ঘনীভূত, 80 শতাংশ (v/v) এর চূড়ান্ত ঘনত্বে অ্যানহাইড্রাস ইথানল যোগ করার দ্বারা প্ররোচিত হয়েছিল এবং 24 ঘন্টার জন্য 4 ◦C তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা হয়েছিল। 20 মিনিটের জন্য 3000 rpm-এ সেন্ট্রিফিউগেশনের মাধ্যমে অবক্ষেপগুলি সংগ্রহ করা হয়েছিল, পাতিত জলে দ্রবীভূত করা হয়েছিল এবং সেবাগ পদ্ধতি ব্যবহার করে বিশুদ্ধ (মুক্ত প্রোটিন অপসারণ) করা হয়েছিল (ঝাও এট আল।, 2019)। উদ্ধারকৃত পলিস্যাকারাইডগুলি পরবর্তী ব্যবহার না হওয়া পর্যন্ত ডায়ালাইজ করা, শুকানো এবং সংরক্ষণ করা হয়েছিল। অধিকন্তু, রাসায়নিক গঠনের ফলাফলে দেখা গেছে যে CDP-এর মোট চিনি, ইউরোনিক অ্যাসিড, সালফেট এবং প্রোটিনের পরিমাণ ছিল 67.63 ± 0.98 শতাংশ, 21.05 ± 0.49 শতাংশ, 1.90 ± 0.24 শতাংশ এবং 8.81 ± 0.36 শতাংশ। মোনোস্যাকারাইড কম্পোজিশন এবং সিডিপির ফুরিয়ার ট্রান্সফর্ম ইনফ্রারেড বিশ্লেষণ পরিপূরক চিত্র 1 এবং 2. 2.3 এ দেখানো হয়েছে। OVX-প্ররোচিত অস্টিওপরোসিস মাউস মডেল সমস্ত প্রাণীর পরীক্ষাগুলি গুয়াংঝো ইউনিভার্সিটি অফ চাইনিজ মেডিসিনের অ্যানিমাল এথিক্স কমিটি দ্বারা অনুমোদিত হয়েছিল (অনুমোদিত SYXK 2019-0202)৷ ত্রিশটি 6-সপ্তাহ বয়সী মহিলা C57BL/6 ইঁদুর গুয়াংজু ইউনিভার্সিটি অফ চাইনিজ মেডিসিনের এক্সপেরিমেন্ট অ্যানিমাল সেন্টার দ্বারা সরবরাহ করা হয়েছিল৷ 1 সপ্তাহের জন্য মানিয়ে নেওয়ার পরে, ইঁদুরের একটি দলকে একটি শ্যাম অপারেশন (শাম গ্রুপ) দেওয়া হয়েছিল, বাকি ইঁদুরগুলিকে ওভারিয়েক্টমি অপারেশন (ওভিএক্স গ্রুপ) করা হয়েছিল। অস্ত্রোপচারের পরে, ইঁদুরগুলিকে 1- সপ্তাহের জন্য পুনরুদ্ধার করার অনুমতি দেওয়া হয়েছিল। তারপর, সফলভাবে মডেল করা ইঁদুরগুলিকে এলোমেলোভাবে 5টি গ্রুপে ভাগ করা হয়েছিল, প্রতি গ্রুপে 6টি ইঁদুরের সাথে: (1) শাম গ্রুপ: পাতিত জল দিয়ে চিকিত্সা করা হয়, (2) OVX গ্রুপ: পাতিত জল দিয়ে চিকিত্সা করা হয়, (3) OVX প্লাস E2 গ্রুপ (E2) : 0.13 mg/kg estradiol Valerate ট্যাবলেট দিয়ে চিকিত্সা করা হয়, (4) OVX প্লাস CDP লো ডোজ গ্রুপ (CDP-L): 300 mg/kg CDP দিয়ে চিকিত্সা করা হয়, (5) OVX প্লাস CDP হাই ডোজ গ্রুপ (CDP H): চিকিত্সা করা হয় 600 mg/kg CDP সহ। পাতিত জল, E2, বা CDP প্রতিদিন একবার গ্যাভেজ দ্বারা পরিচালিত হত। সমস্ত ইঁদুরকে 12- সপ্তাহের চিকিত্সার সময়কালের (চিত্র 1A) পরে বলি দেওয়া হয়েছিল। জরায়ু সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং ওজন করা হয়েছিল এবং বাম টিবিয়াস পরবর্তী পরীক্ষার জন্য সংগ্রহ করা হয়েছিল। সম্পূর্ণ রক্তের নমুনা সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং 5000 rpm-এ 4 ◦C তাপমাত্রায় 15 মিনিটের জন্য সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল। পরবর্তী বিশ্লেষণ না হওয়া পর্যন্ত সিরাম সুপারনাট্যান্টগুলি উচ্চাকাঙ্খিত এবং −80 ◦C তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা হয়েছিল। 2.4। মাইক্রো-কম্পিউটেড টমোগ্রাফি (মাইক্রো-সিটি) বিশ্লেষণ এবং হাড়ের হিস্টোমরফোমেট্রি বাম টিবিয়াকে 4 শতাংশ প্যারাফর্মালডিহাইড দিয়ে 48 ঘন্টার জন্য স্থির করা হয়েছিল এবং পরবর্তীতে স্বাভাবিক স্যালাইনযুক্ত সেন্ট্রিফিউজ টিউবগুলিতে স্থাপন করা হয়েছিল। স্থির নমুনাগুলি নিম্নলিখিত সেটিংস ব্যবহার করে Skyscan 1172 মাইক্রো-CT যন্ত্র (Bruker micro-CT, Skyscan, Kontich, Belgium) দিয়ে স্ক্যান করা হয়েছিল: ভোল্টেজ, 80 kV; উৎস বর্তমান, 100 μA; আল, 0.5 মিমি ফিল্টার; পিক্সেল আকার, 9.76 μm; এবং ঘূর্ণন ধাপ, 0.6◦। হাড়ের খনিজ ঘনত্ব (BMD), হাড়ের ভলিউম ভগ্নাংশ (BV/TV), হাড়ের পৃষ্ঠ প্রতি মোট আয়তন (BS/TV), ট্র্যাবেকুলার নম্বর (Tb. N), এবং ট্র্যাবেকুলার স্পেসিং (Tb.Sp) সহ ট্র্যাবেকুলার হাড়ের বেশ কয়েকটি পরামিতি ) CT Analyser® সফ্টওয়্যার (Bruker micro-CT, Skyscan) ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিল। CTVol সফ্টওয়্যার (Bruker micro-CT. Skyscan) ব্যবহার করে ত্রিমাত্রিক ছবি তৈরি করা হয়েছিল। মাইক্রো-সিটি বিশ্লেষণের পরে, বাম টিবিয়াস 14 শতাংশ EDTA দ্রবণে ডিক্যালসিফাইড করা হয়েছিল এবং বিভাগ করার জন্য প্যারাফিনে এমবেড করা হয়েছিল। হেমাটোক্সিলিন এবং ইওসিন (H&E) এবং TRAcP স্টেনিং পরীক্ষার আগে একটি মাইক্রোটোম ব্যবহার করে নমুনাগুলিকে 5 µm বিভাগে কাটা হয়েছিল। দাগযুক্ত বিভাগগুলি Olympus CX 31 মাইক্রোস্কোপ (Olympus Optical Co., Ltd, Tokyo, Japan) ব্যবহার করে পরীক্ষা এবং নথিভুক্ত করা হয়েছিল। 2.5। সিরাম বিশ্লেষণ ক্যালসিয়াম (Ca) এবং ফসফরাস (P) ঘনত্ব নানজিং জিয়ানচেং বায়োইঞ্জিনিয়ারিং ইনস্টিটিউট (নানজিং, চীন) দ্বারা ডিজাইন করা কিট নির্দেশাবলী অনুসারে নির্ধারিত হয়েছিল। সিরামে TRAcP{{146}b এবং RANKL স্তরগুলি যথাক্রমে TRAcP-5b ELISA কিট (CUSABIO, Wuhan, China) এবং RANKL ELISA কিট (Cloud-CloneCorp., Wuhan, China) ব্যবহার করে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল৷

রাসায়নিক এবং নমুনা সংগ্রহের সিডি (নং 180801) আনহুই জিশুন ট্র্যাডিশনাল চাইনিজ মেডিসিন কোং, লিমিটেড (আনহুই, চীন) থেকে কেনা হয়েছিল এবং স্কুল অফ দ্য স্কুল থেকে অধ্যাপক হাইবো হুয়াং দ্বারা শনাক্ত করা হয়েছিল ফার্মাসিউটিক্যাল সায়েন্স, গুয়াংঝু ইউনিভার্সিটি অফ চাইনিজ মেডিসিন, গুয়াংজু, চীন। Estradiol valerate ট্যাবলেটগুলি Bayer (Leverkusen, North-Rhine Westphalia, Germany) থেকে কেনা হয়েছিল। আলফা-সংশোধিত ন্যূনতম অপরিহার্য মাধ্যম (-MEM) এবং ভ্রূণ বোভাইন সিরাম (FBS) Gibco (থার্মো ফিশার সায়েন্টিফিক, ওয়ালথাম, এমএ, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র) থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল। পেনিসিলিন/স্ট্রেপ্টোমাইসিন এবং TRAcP স্টেনিং কিট সোলারবিও (বেইজিং, চীন) থেকে অর্জিত হয়েছিল। রিকম্বিন্যান্ট মাউস M-CSF এবং রিকম্বিন্যান্ট মাউস RANKL R&D সিস্টেম (Minneapolis, MN, USA) থেকে সংগ্রহ করা হয়েছিল। কর্নিং লাইফ সায়েন্সেস (সেন্ট লোয়েল, এমএ, ইউএসএ) থেকে হাইড্রোক্সাপাটাইট-প্রলিপ্ত প্লেট কেনা হয়েছিল। NFATc1 এবং CTSK-এর প্রাথমিক অ্যান্টিবডি (সান্তা ক্রুজ বায়োটেকনোলজি, সান্তা ক্রুজ, CA, USA); IκB- , p65, P-p65, p38, P-p38, ERK1/2, P-ERK1/2, JNK, এবং P-JNK (সেল সিগন্যালিং প্রযুক্তি, ড্যান ভার্স, এমএ, ইউএসএ); এবং -অ্যাক্টিন (CWBIO, বেইজিং, চীন)ও প্রাপ্ত হয়েছিল। এই গবেষণায় ব্যবহৃত অন্যান্য রিএজেন্টগুলি বিশ্লেষণাত্মক গ্রেডের ছিল এবং মিলি-কিউ জল পরিশোধন ব্যবস্থা (মিলিপুর, বেডফোর্ড, এমএ, ইউএসএ) দ্বারা জল বিশুদ্ধ করা হয়েছিল। 2.2। সিডিপি নিষ্কাশন সিডিটি একটি সূক্ষ্ম পাউডারে মাটিতে তৈরি করা হয়েছিল এবং একে পরাজিত করতে তিনবার পেট্রোলিয়াম ইথারের সাথে মিশ্রিত করা হয়েছিল। কঠিন অবশিষ্টাংশ পরিস্রাবণ দ্বারা সংগ্রহ করা হয় এবং তারপর ঘরের তাপমাত্রায় শুকানো হয়। পলিস্যাকারাইডগুলি পূর্ব-চিকিত্সা করা নমুনাগুলি থেকে 2 ঘন্টার জন্য জল দিয়ে তিনবার বের করা হয়েছিল, ঘনীভূত, 80 শতাংশ (v/v) এর চূড়ান্ত ঘনত্বে অ্যানহাইড্রাস ইথানল যোগ করার মাধ্যমে প্রস্রাব করা হয়েছিল এবং 4 ◦C তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা হয়েছিল। 24 ঘন্টার জন্য 3000 rpm-এ 20 মিনিটের জন্য সেন্ট্রিফিউগেশনের মাধ্যমে অবক্ষেপগুলি সংগ্রহ করা হয়েছিল, পাতিত জলে দ্রবীভূত করা হয়েছিল এবং সেবাগ পদ্ধতি ব্যবহার করে বিশুদ্ধ করা হয়েছিল (মুক্ত প্রোটিন অপসারণ) (ঝাও এট আল।, 2019)। উদ্ধারকৃত পলিস্যাকারাইডগুলি পরবর্তী ব্যবহার না হওয়া পর্যন্ত ডায়ালাইজ করা, শুকানো এবং সংরক্ষণ করা হয়েছিল। অধিকন্তু, রাসায়নিক গঠনের ফলাফলে দেখা গেছে যে CDP-এর মোট চিনি, ইউরোনিক অ্যাসিড, সালফেট এবং প্রোটিনের পরিমাণ ছিল 67.63 ± 0.98 শতাংশ, 21.05 ± 0.49 শতাংশ, 1.90 ± 0.24 শতাংশ এবং 8.81 ± 0.36 শতাংশ। মোনোস্যাকারাইড কম্পোজিশন এবং সিডিপির ফুরিয়ার ট্রান্সফর্ম ইনফ্রারেড বিশ্লেষণ পরিপূরক চিত্র 1 এবং 2. 2.3 এ দেখানো হয়েছে। OVX-প্ররোচিত অস্টিওপরোসিস মাউস মডেল সমস্ত প্রাণী পরীক্ষাগুলি গুয়াংঝো ইউনিভার্সিটি অফ চাইনিজ মেডিসিনের অ্যানিমাল এথিক্স কমিটি দ্বারা অনুমোদিত হয়েছিল (অনুমোদিত SYXK 2019-0202)৷ ত্রিশটি 6-সপ্তাহ বয়সী মহিলা C57BL/6 ইঁদুর গুয়াংজু ইউনিভার্সিটি অফ চাইনিজ মেডিসিনের এক্সপেরিমেন্ট অ্যানিমাল সেন্টার দ্বারা সরবরাহ করা হয়েছিল৷ 1 সপ্তাহের জন্য মানিয়ে নেওয়ার পরে, ইঁদুরের একটি দলকে একটি শ্যাম অপারেশন (শাম গ্রুপ) দেওয়া হয়েছিল, বাকি ইঁদুরগুলিকে ওভারিয়েক্টমি অপারেশন (ওভিএক্স গ্রুপ) করা হয়েছিল। অস্ত্রোপচারের পরে, ইঁদুরগুলিকে 1- সপ্তাহের জন্য পুনরুদ্ধার করার অনুমতি দেওয়া হয়েছিল। তারপর, সফলভাবে মডেল করা ইঁদুরগুলিকে এলোমেলোভাবে 5টি গ্রুপে ভাগ করা হয়েছিল, প্রতি গ্রুপে 6টি ইঁদুরের সাথে: (1) শাম গ্রুপ: পাতিত জল দিয়ে চিকিত্সা করা হয়, (2) OVX গ্রুপ: পাতিত জল দিয়ে চিকিত্সা করা হয়, (3) OVX প্লাস E2 গ্রুপ (E2) : 0.13 mg/kg estradiol Valerate ট্যাবলেট দিয়ে চিকিত্সা করা হয়, (4) OVX প্লাস CDP লো ডোজ গ্রুপ (CDP-L): 300 mg/kg CDP দিয়ে চিকিত্সা করা হয়, (5) OVX প্লাস CDP হাই ডোজ গ্রুপ (CDP H): চিকিত্সা করা হয় 600 mg/kg CDP সহ। পাতিত জল, E2, বা CDP প্রতিদিন একবার গ্যাভেজ দ্বারা পরিচালিত হত। সমস্ত ইঁদুরকে 12- সপ্তাহের চিকিত্সার সময়কালের (চিত্র 1A) পরে বলি দেওয়া হয়েছিল। জরায়ু সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং ওজন করা হয়েছিল এবং বাম টিবিয়াস পরবর্তী পরীক্ষার জন্য সংগ্রহ করা হয়েছিল। সম্পূর্ণ রক্তের নমুনা সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং 5000 rpm-এ 4 ◦C তাপমাত্রায় 15 মিনিটের জন্য সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল। পরবর্তী বিশ্লেষণ না হওয়া পর্যন্ত সিরাম সুপারনাট্যান্টগুলি উচ্চাকাঙ্খিত এবং −80 ◦C তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা হয়েছিল। 2.4। মাইক্রো-কম্পিউটেড টমোগ্রাফি (মাইক্রো-সিটি) বিশ্লেষণ এবং হাড়ের হিস্টোমরফোমেট্রি বাম টিবিয়াকে 4 শতাংশ প্যারাফর্মালডিহাইড দিয়ে 48 ঘন্টার জন্য স্থির করা হয়েছিল এবং পরবর্তীতে স্বাভাবিক স্যালাইনযুক্ত সেন্ট্রিফিউজ টিউবগুলিতে স্থাপন করা হয়েছিল। স্থির নমুনাগুলি নিম্নলিখিত সেটিংস ব্যবহার করে Skyscan 1172 মাইক্রো-CT যন্ত্র (Bruker micro-CT, Skyscan, Kontich, Belgium) দিয়ে স্ক্যান করা হয়েছিল: ভোল্টেজ, 80 kV; উৎস বর্তমান, 100 μA; আল, 0.5 মিমি ফিল্টার; পিক্সেল আকার, 9.76 μm; এবং ঘূর্ণন ধাপ, 0.6◦। হাড়ের খনিজ ঘনত্ব (BMD), হাড়ের ভলিউম ভগ্নাংশ (BV/TV), হাড়ের পৃষ্ঠ প্রতি মোট আয়তন (BS/TV), ট্র্যাবেকুলার নম্বর (Tb. N), এবং ট্র্যাবেকুলার স্পেসিং (Tb. Sp) সহ ট্র্যাবেকুলার হাড়ের বেশ কয়েকটি পরামিতি। ) CT Analyser® সফ্টওয়্যার (Bruker micro-CT, Skyscan) ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিল। CTVol সফ্টওয়্যার (Bruker micro-CT. Skyscan) ব্যবহার করে ত্রিমাত্রিক ছবি তৈরি করা হয়েছিল। মাইক্রো-সিটি বিশ্লেষণের পরে, বাম টিবিয়াস 14 শতাংশ EDTA দ্রবণে ডিক্যালসিফাইড করা হয়েছিল এবং বিভাগ করার জন্য প্যারাফিনে এমবেড করা হয়েছিল। হেমাটোক্সিলিন এবং ইওসিন (H&E) এবং TRAcP স্টেনিং পরীক্ষার আগে একটি মাইক্রোটোম ব্যবহার করে নমুনাগুলিকে 5 µm বিভাগে কাটা হয়েছিল। দাগযুক্ত বিভাগগুলি Olympus CX 31 মাইক্রোস্কোপ (Olympus Optical Co., Ltd, Tokyo, Japan) ব্যবহার করে পরীক্ষা এবং নথিভুক্ত করা হয়েছিল। 2.5। সিরাম বিশ্লেষণ ক্যালসিয়াম (Ca) এবং ফসফরাস (P) ঘনত্ব নানজিং দ্বারা ডিজাইন করা কিট নির্দেশাবলী অনুসারে নির্ধারিত হয়েছিল

জিয়ানচেং বায়োইঞ্জিনিয়ারিং ইনস্টিটিউট (নানজিং, চীন)। TRAcP{0}}b এবং RANKL স্তরগুলি TRAcP-5b ELISA kit (CUSABIO, Wuhan, China) এবং RANKL ELISA কিট (Cloud-CloneCorp., Wuhan, China) ব্যবহার করে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল , যথাক্রমে। 2.6। ইন ভিট্রো অস্টিওক্ল্যাস্টোজেনেসিস অ্যাসে বিএমএমগুলিকে 6- সপ্তাহ বয়সী মহিলা C57BL/6 ইঁদুরের টিবিয়া এবং ফিমার থেকে বিচ্ছিন্ন করা হয়েছিল। বিচ্ছিন্ন কোষগুলিকে 25 ng/mL M-CSF, 10 শতাংশ FBS এবং 1 শতাংশ পেনিসিলিন/স্ট্রেপ্টোমাইসিন সমন্বিত -MEM মিডিয়ামে সংষ্কৃত করা হয়েছিল। সঙ্গমে পৌঁছানোর পর, BMMs (1 × 104 কোষ/কূপ) 96-কূপ প্লেটে বীজ করা হয়েছিল এবং 50 ng/mL RANKL এর উপস্থিতিতে CDP দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল। মাঝারি এবং সিডিপি প্রতি 2 দিনে প্রতিস্থাপিত হয়েছিল। 7 দিন পরে, কোষগুলিকে 4 শতাংশ প্যারাফর্মালডিহাইড দিয়ে স্থির করা হয়েছিল এবং ট্রেসের উপস্থিতির জন্য দাগ দেওয়া হয়েছিল। অস্টিওক্লাস্টের সংখ্যা, তিন বা ততোধিক নিউক্লিয়াস সহ TRAcP পজিটিভ কোষ হিসাবে সংজ্ঞায়িত, একটি হালকা মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার করে গণনা এবং নথিভুক্ত করা হয়েছিল। 2.7। কোষের বিস্তার পরীক্ষা BMMs (1 × 104 কোষ/কূপ) একটি 96-কূপ প্লেটে বীজ করা হয়েছিল এবং রাতারাতি ইনকিউব করা হয়েছিল। এর পরে, কোষগুলিকে 48 ঘন্টার জন্য CDP (0, 0.625, 1.25, 2.5, 5, 10, 20, এবং 40 µg/mL) এর বিভিন্ন ঘনত্বের সাথে চিকিত্সা করা হয়েছিল। IncuCyte ZOOM® (Essen BioScience, Ann Arbor, MI, USA), একটি দীর্ঘমেয়াদী, রিয়েল-টাইম ডাইনামিক লাইভ সেল ইমেজিং সিস্টেম ব্যবহার করে কোষের সঙ্গম সনাক্ত এবং বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। 2.8। হাইড্রোক্সাপাটাইট রিসোর্পশন অ্যাস বিএমএমগুলি (1 × 104 কোষ/কূপ) একটি হাইড্রোক্সাপাটাইট-কোটেড প্লেটে বীজ করা হয়েছিল, নির্দেশিত ঘনত্বে (0, 5 এবং 10 µg/mL) সিডিপি দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল, এবং 25 এনজি/সমৃদ্ধ -এমইএম-এ সম্পূর্ণরূপে সংস্কৃত করা হয়েছিল। mL M-CSF এবং 50 ng/mL RANKL। 7 দিন পরে, কোষের উপাদানগুলি অপসারণের জন্য 10 শতাংশ ব্লিচ দ্রবণ দিয়ে কোষগুলি ধুয়ে ফেলা হয়। হাইড্রোক্স্যাপাটাইট রিসোর্পশন এলাকার চিত্রগুলি IncuCyte ZOOM® ব্যবহার করে ক্যাপচার করা হয়েছিল এবং ImageJ সফ্টওয়্যার (NIH, Bethesda, MD, USA) (Abramoff, Magelhaes, & Ram, 2003) ব্যবহার করে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। 2.9। RNA বিচ্ছিন্নতা এবং রিয়েল-টাইম রিভার্স ট্রান্সক্রিপশন-পরিমাণগত PCR (RT-qPCR) বিশ্লেষণ BMMs (1 × 105 কোষ/কূপ) একটি 6-কূপ প্লেটে বীজ করা হয়েছিল এবং RANKL এবং M-CSF এর উপস্থিতিতে উদ্দীপিত হয়েছিল 5 দিনের জন্য বিভিন্ন ঘনত্বে (0, 5 এবং 10 µg/mL) CDP। TRIzol রিএজেন্ট (সিগমা অ্যালড্রিচ) ব্যবহার করে মোট আরএনএ কোষ বা ইঁদুরের হাড়ের টিস্যু থেকে বিচ্ছিন্ন করা হয়েছিল। একটি বিপরীত ট্রান্সক্রিপ্টেজ কিট (ট্রান্সজেন বায়োটেক, বেইজিং, চীন) ব্যবহার করে 2 µg মোট RNA থেকে পরিপূরক ডিএনএ সংশ্লেষিত হয়েছিল। RT-qPCR প্রতিক্রিয়াগুলি PerfectStart™ Green qPCR SuperMix (TransGen Biotech) ব্যবহার করে প্রস্তুত করা হয়েছিল এবং ABI 7500 সিস্টেম (অ্যাপ্লাইড বায়োসিস্টেম, থার্মো ফিশার সায়েন্টিফিক, Inc., Waltham, MA, USA) দ্বারা সনাক্ত করা হয়েছিল। পিসিআর-এর জন্য সাইক্লিং প্যারামিটারগুলি নিম্নরূপ সেট করা হয়েছিল: 5 মিনিটের জন্য 95 ◦C, 15 সেকেন্ডের জন্য 95 ◦C এর 40টি চক্র এবং 30 সেকেন্ডের জন্য 60 ◦C। ব্যবহৃত নির্দিষ্ট প্রাইমারগুলি সারণি 1 এ দেখানো হয়েছে এবং প্রতিটি লক্ষ্য জিনের পরিমাণ GAPDH (অভ্যন্তরীণ নিয়ন্ত্রণ) এ স্বাভাবিক করা হয়েছিল।

2.10। ওয়েস্টার্ন ব্লট বিশ্লেষণ BMMs (5 × 105 কোষ/কূপ) একটি 6-ওয়েল প্লেটে বীজ করা হয়েছিল। সংক্ষিপ্ত সময়ের পরীক্ষা-নিরীক্ষার জন্য, কোষগুলিকে 1 ঘন্টার জন্য CDP (0, 5, এবং 10 µg/mL) এর বিভিন্ন ঘনত্বের সাথে প্রাক-ইনকিউবেট করা হয়েছিল, এবং তারপরে 5{{ দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল। 58} ng/mL RANKL 30 মিনিটের জন্য। দীর্ঘ সময়ের জন্য, CDP (0, 5, এবং 10 μg/mL) এর উপস্থিতিতে 3, 5 এবং 7 দিনে কোষগুলিকে 50 ng/mL RANKL দিয়ে উদ্দীপিত করা হয়েছিল। RIPA লাইসিস বাফার (CWBIO) ব্যবহার করে মোট প্রোটিন বের করা হয়েছিল। প্রোটিনগুলি 10 শতাংশ SDS-PAGE দ্বারা পৃথক করা হয়েছিল এবং PVDF ঝিল্লিতে স্থানান্তরিত হয়েছিল। 2 ঘন্টার জন্য ঘরের তাপমাত্রায় 5 শতাংশ স্কিম মিল্ক দিয়ে ঝিল্লিগুলিকে অবরুদ্ধ করা হয়েছিল, প্রাথমিক অ্যান্টিবডি দিয়ে রাতারাতি 4 ◦C তাপমাত্রায় এবং তারপরে 1.5 ঘন্টার জন্য সংশ্লিষ্ট সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডি দিয়ে ইনকিউব করা হয়েছিল। ঝিল্লিগুলি ইসিএল রিএজেন্ট (মিলিপুর কর্পোরেশন, বিলেরিকা, এমএ, ইউএসএ) ব্যবহার করে তৈরি করা হয়েছিল এবং ট্যানন 5200 কেমিলুমিনেসেন্স ইমেজিং সিস্টেম (ট্যানন সায়েন্স অ্যান্ড টেকনোলজি, সাংহাই, চীন) ব্যবহার করে ছবি তোলা হয়েছিল। 2.11। ইমিউনোফ্লুরোসেন্স পরীক্ষা ব্যবহার করে NFATc1 ট্রান্সলোকেশন সনাক্তকরণ বিএমএমগুলিকে 12-ওয়েল কভারস্লিপগুলিতে বীজ দেওয়া হয়েছিল, RANKL এবং M-CSF দিয়ে উদ্দীপিত করা হয়েছিল এবং 5 দিনের জন্য 10 μg/mL CDP দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল। কোষগুলিকে 15 মিনিটের জন্য 4 শতাংশ প্যারাফর্মালডিহাইড দিয়ে স্থির করা হয়েছিল, পিবিএস দিয়ে তিনবার ধুয়ে ফেলা হয়েছিল এবং 10 মিনিটের জন্য 0.1 শতাংশ ট্রাইটন এক্স-100 দিয়ে ভেদ করা হয়েছিল৷ কোষগুলিকে 10 শতাংশ ছাগলের সিরাম (CWBIO) এর সাথে মিশ্রিত করা হয়েছিল এবং 2 ঘন্টার জন্য ইনকিউব করা হয়েছিল। পরবর্তীকালে, কোষগুলিকে প্রাথমিক অ্যান্টিবডি দিয়ে রাতারাতি 4 ◦C তাপমাত্রায় এবং তারপরে আলেক্সা ফ্লুর 488 ছাগল-বিরোধী মাউস সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডি (অ্যাবক্যাম, কেমব্রিজ, এমএ, ইউএসএ) দিয়ে 1 ঘন্টার জন্য অন্ধকারে ইনকিউব করা হয়েছিল। কভারস্লিপগুলি পিবিএস দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয়েছিল, 4′, 6-ডায়ামিডিনো-2-ফিনাইল ইন-ডোল (ডিএপিআই) (সোলার) সহ প্রলং গোল্ড অ্যান্টিফেড রিএজেন্টে মাউন্ট করা হয়েছিল, এবং এয়ারস্ক্যান কনফোকাল মাইক্রোস্কোপ দিয়ে Zeiss LSM 800 ব্যবহার করে পরিদর্শন করা হয়েছিল ( কার্ল জেইস, ওবারকোচেন, জার্মানি)। 2.12। পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণ সমস্ত পরীক্ষামূলক তথ্য SPSS 25.0 পরিসংখ্যানগত সফ্টওয়্যার (IBM Corporation, Armonk, NY, USA) ব্যবহার করে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। প্রাণী এবং কোষ অধ্যয়নের জন্য ডেটা যথাক্রমে ± SEM এবং মানে ± SD হিসাবে প্রকাশ করা হয়। ফলাফল ভিন্নতা বা ছাত্রের টি-পরীক্ষার একমুখী বিশ্লেষণ ব্যবহার করছে। p <0.05 এর="" মানগুলি="" পরিসংখ্যানগতভাবে="" তাৎপর্যপূর্ণ="" বলে="" বিবেচিত="" হয়েছিল।="" 3.="" ফলাফল="" 3.1।="" সিডিপি="" ভিভোতে="" ওভিএক্স-প্ররোচিত="" হাড়ের="" ক্ষয়="" রোধ="" করে="" আমরা="" ভিভোতে="" অস্টিওপরোসিসে="" সিডিপি="" চিকিত্সার="" প্রভাবগুলি="" তদন্ত="" করতে="" একটি="" ovx-প্ররোচিত="" অস্টিওপরোসিস="" মাউস="" মডেল="" ব্যবহার="" করেছি।="" শ্যাম="" গ্রুপের="" সাথে="" তুলনা="" করে,="" ovx="" ইঁদুরের="" শরীরের="" ওজন="" উল্লেখযোগ্যভাবে="" বৃদ্ধি="" পেয়েছে="" যেখানে="" জরায়ু="" সূচক="" হ্রাস="" পেয়েছে,="" যা="" নির্দেশ="" করে="" যে="" অস্টিওপরোসিস="" মডেলটি="" সফলভাবে="" নির্মিত="" হয়েছে="" (চিত্র="" 1b="" এবং="" d)।="" ovx="" গ্রুপের="" টিবিয়াসের="" মাইক্রো-সিটি="" বিশ্লেষণে="" হাড়ের="" ব্যাপক="" ক্ষয়="" দেখা="" গেছে।="" ওভিএক্স="" গ্রুপের="" সাথে="" তুলনা="" করে,="" সিডিপি-এল="" গ্রুপে="" হাড়ের="" ট্র্যাবিকুলার="" সংখ্যা="" বৃদ্ধি="" পেয়েছে,="" যখন="" সিডিপি-এইচ="" এবং="" ই="" 2="" গ্রুপের="" বৃদ্ধি="" বেশি="" তাৎপর্যপূর্ণ="" ছিল="" এবং="" পরবর্তী="" দুটি="" গ্রুপের="" ট্র্যাবিকুলাই="" মোটা="" হয়ে="" গেছে="" এবং="" ব্যবধান="" ছোট="" হয়ে="" গেছে="" (="" চিত্র="" 1c)।="" পরিমাণগত="" বিশ্লেষণ="" নিশ্চিত="" করেছে="" যে="" bmd,="" bv/tv,="" bs/tv,="" এবং="" tb="" সহ="" বেশ="" কয়েকটি="" হাড়ের="" হিস্টোমরফোমেট্রিক="" পরামিতি।="" n="" এর="" মান="" উল্লেখযোগ্যভাবে="" বৃদ্ধি="" পেয়েছে,="" যেখানে="" tb.="" এসপি="" সিডিপি-এইচ="" গ্রুপে="" কমে="" যাওয়া="" মান="" দেখিয়েছে="" (চিত্র="" 1ই="" এবং="" এফ)।="" h&e="" স্টেনিং="" ব্যবহার="" করে="" তার="" প্যাথলজিক্যাল="" পরীক্ষায়="" দেখা="" গেছে="" যে="" cdp-h="" এবং="" e2="" গ্রুপে="" হাড়ের="" ট্র্যাবিকুলার="" সংখ্যা="" ovx="" গ্রুপের="" তুলনায়="" উল্লেখযোগ্যভাবে="" বেশি="" ছিল="" যখন="" cdp-l="" গ্রুপে="" (চিত্র="" 1g)="" কোনো="" উল্লেখযোগ্য="" উন্নতি="" হয়নি।="" উপরন্তু,="" tracp="" স্টেনিং="" দেখায়="" যে="" ovx="" গ্রুপে="" অস্টিওক্লাস্টের="" সংখ্যা="" উল্লেখযোগ্যভাবে="" বৃদ্ধি="" পেয়েছে="" কিন্তু="" cdp-h="" এবং="" e2="" গ্রুপে="" (চিত্র="" 1h)="" কমেছে।="" সিডিপি-এল,="" সিডিপি-এইচ,="" এবং="" ই="" 2="" গ্রুপগুলি="" পি="" কন্টেন্টের="" ওভিএক্স-প্ররোচিত="" বৃদ্ধিকে="" বাধা="" দেয়="" তবে="" রক্তের="" সিরামে="" ca="" সামগ্রী="" বাড়িয়েছে।="" হাড়ের="" শোষণ="" চিহ্নিতকারী,="" rankl="" এবং="" tracp-5="" cdp-l-এ="" একটি="" হ্রাস="" প্রবণতা="">

একটি পরিসংখ্যানগত পার্থক্য ছাড়াই গ্রুপ, যখন তারা CDP-H গ্রুপে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে (চিত্র 1I)। তদ্ব্যতীত, আমরা RT-qPCR দ্বারা হাড়ের টিস্যুতে অস্টিওক্লাস্ট মার্কার জিনের অভিব্যক্তিতে CDP-এর প্রভাব পরীক্ষা করেছি। OVX গ্রুপে NFATc1, Acp5, Mmp9, এবং CTSK-এর mRNA মাত্রা শাম গ্রুপের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল। CDP-H গ্রুপগুলি OVX গ্রুপের তুলনায় NFATc1, Acp5, এবং CTSK-এর mRNA স্তর 1.{10}}, 170- এবং 2৷{14}}গুণ কমিয়েছে (চিত্র 1জে)। 3.2। সিডিপি ভিট্রোতে RANKL-প্ররোচিত অস্টিওক্ল্যাস্টোজেনেসিসকে দমন করে আমরা একটি দীর্ঘমেয়াদী রিয়েল-টাইম ডায়নামিক লাইভ সেল ইমেজিং বিশ্লেষক ব্যবহার করে সিডিপি-চিকিত্সা করা বিএমএমগুলির কোষের বিস্তার পর্যবেক্ষণ করেছি। কন্ট্রোল গ্রুপের তুলনায়, সিডিপি-চিকিত্সা করা গ্রুপগুলিতে কোষের সংগম একটি ডোজ এ পরিবর্তিত হয়নি<10 µg/ml,="" but="" was="" significantly="" reduced="" at="" the="" 20="" and="" 40="" µg/ml="" dosages="" (fig.="" 2a).="" to="" investigate="" the="" effect="" of="" cdp="" on="" ranklinduced="" osteoclastogenesis,="" bmms="" were="" stimulated="" with="" rankl="" and="" mcsf="" in="" the="" presence="" of="" cdp="" for="" 7="" days.="" tracp,="" a="" characteristic="" enzyme="" of="" osteoclasts,="" is="" considered="" as="" an="" indicator="" of="" osteoclast="" function="" (minkin,="" 1982).="" tracp="" staining="" showed="" that="" the="" osteoclasts="" treated="" with="">1.25 µg/mL CDP উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাসকৃত আকার এবং সংখ্যা দেখিয়েছে (চিত্র 2B এবং C)। এই ফলাফলগুলি দেখিয়েছে যে সিডিপি কোষের কার্যক্ষমতাকে প্রভাবিত না করেই প্রত্যাশিত RANKL-প্ররোচিত অস্টিওক্ল্যাস্টোজেনেসিসকে কার্যকরভাবে বাধা দেয়। 3.3। সিডিপি RANKL-প্ররোচিত অস্টিওক্লাস্টিক রিসোর্পশন কার্যকলাপ এবং অস্টিওক্লাস্ট-নির্দিষ্ট জিনের প্রকাশকে বাধা দেয়। আমরা হাইড্রোক্সাপাটাইট-কোটেড প্লেট ব্যবহার করে অস্টিওক্লাস্টের হাড়ের রিসোর্পশন কার্যকলাপের উপর সিডিপি চিকিত্সার প্রভাবগুলি আরও নির্ধারণ করেছি। অস্টিওক্লাস্টের কার্যকলাপ এবং ক্ষমতা পরিমাপের জন্য হাড়ের রিসোর্পশন হল প্রধান কাজ এবং মান (নোভাক এবং ফ্যাসিও, 2011)। ফলাফলগুলি দেখিয়েছে যে সিডিপি ডোজ-নির্ভর পদ্ধতিতে অস্টিওক্লাস্টের হাড়-সংশোধনকারী এলাকাকে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করতে পারে, এটি নির্দেশ করে যে সিডিপি RANKL (চিত্র 3A এবং B) দ্বারা প্ররোচিত হাড়ের রিসোর্পশন কার্যকলাপকে বাধা দেয়। বিশেষ করে, 10 µg/mL CDP-এর সাথে চিকিত্সার পরে অস্টিওক্লাস্টিক হাড়-রিসোর্প্টিভ এলাকা প্রায় 6.3 শতাংশে হ্রাস পেয়েছে। অস্টিওক্লাস্টোজেনেসিসে সিডিপি-এর বাধাকে আরও ভালভাবে বের করার জন্য, আমরা অস্টিওক্লাস্ট-সম্পর্কিত জিনের ট্রান্সক্রিপশন স্তরগুলি পরিমাপ করেছি। CDP-র সাথে চিকিত্সা ছাড়াই, RANKL-এর সাথে আনয়ন NFATc1, CTSK, Acp5, Atp6v0d2, এবং Mmp9 জিনের প্রকাশকে উন্নীত করে। বিপরীতে, CDP এবং RANKL-এর একযোগে প্রয়োগ এই পাঁচটি জিনকে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেছে (চিত্র 3C এবং D)।

3.4। CDP RANKL-প্ররোচিত NFATc1 অ্যাক্টিভেশনকে বাধা দেয় TRAcP স্টেনিং থেকে জানা যায় যে CDP চিকিত্সা 3-7 দিনের জন্য RANKL উদ্দীপনার পরে পরিপক্ক অস্টিওক্লাস্টের সংখ্যার প্রত্যাশিত বৃদ্ধিকে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেছে (চিত্র 4A এবং B)। তদ্ব্যতীত, আমরা তদন্ত করেছি যে সিডিপি চিকিত্সা কার্যকরভাবে NFATc1 এক্সপ্রেশনকে বাধা দিয়ে অস্টিওক্লাস্ট পার্থক্যকে দুর্বল করতে পারে। ফলাফলগুলি দেখায় যে 5 দিনের জন্য RANKL উদ্দীপনার পরে NFATc1 অত্যন্ত প্রকাশ করা হয়েছিল, যা CDP চিকিত্সার পরে উল্লেখযোগ্যভাবে বাধা দেওয়া হয়েছিল (চিত্র 4C এবং D)। উপরন্তু, CDP চিকিত্সা CTSK-এর অভিব্যক্তি স্তরকে দমন করে, একটি প্রোটিন যা স্বাভাবিক অস্টিওক্লাস্ট গঠন এবং কার্যকারিতার জন্য প্রয়োজনীয় (Bossard et al., 1996) (চিত্র 4E এবং F)। আমরা NFATc1 ট্রান্সলোকেশনে 10 µg/mL CDP চিকিত্সার প্রভাব আরও তদন্ত করতে 5 দিনের জন্য RANKL উদ্দীপনার একটি পয়েন্ট-ইন-টাইম উপস্থাপনা নির্বাচন করেছি। প্রত্যাশিত হিসাবে, CDP চিকিত্সা উল্লেখযোগ্যভাবে RANKL-প্ররোচিত NFATc1 পারমাণবিক ট্রান্সলোকেশনকে বাধা দেয় (চিত্র 4G এবং H)।

চিত্র 4. CDP RANKL-প্ররোচিত NFATc1 সক্রিয়করণকে দমন করে। (A) বিএমএমগুলিকে একটি 6-কূপ প্লেটে বীজ দেওয়া হয়েছিল এবং CDP (0, 5, এবং 10 µg/mL) এর উপস্থিতিতে RANKL এবং M-CSF দিয়ে উদ্দীপিত করা হয়েছিল নির্দেশিত দিনগুলি। TRAcP-পজিটিভ মাল্টিনিউক্লিয়েটেড কোষগুলি দেখানো প্রতিনিধিত্বমূলক চিত্রগুলি৷ ম্যাগনিফিকেশন, ×100। স্কেল বার {{10}} μm। (B) TRAcP- পজিটিভ মাল্টিনিউক্লিয়েটেড কোষের পরিমাণ নির্ধারণ (নিউক্লিয়াস 3 এর চেয়ে বড় বা সমান)। (CF) BMMs-এ NFATc1 এবং CTSK প্রোটিন এক্সপ্রেশনের ওয়েস্টার্ন ব্লট বিশ্লেষণ, CDP-এর উপস্থিতিতে 3-7 দিনের জন্য M CSF এবং RANKL-এর সাথে উদ্দীপিত। (জি) বিএমএমগুলিকে 10 ug/mL CDP দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল এবং M-CSF এবং RANKL দ্বারা 5 দিনের জন্য উদ্দীপিত করা হয়েছিল, তারপর NFATc1 (সবুজ) এবং DAPI (নীল) দিয়ে ইমিউনোস্টেইন করা হয়েছিল এবং একটি কনফোকাল মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার করে পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল। ম্যাগনিফিকেশন, ×200. স্কেল বার=20 μm। (এইচ) ইমেজ-প্রো প্লাস ব্যবহার করে ফ্লুরোসেন্স তীব্রতা বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। মান ± SD (n=3) হিসাবে প্রকাশ করা হয়। *p < 0.05,="" **p="">< 0.01,="" ***p="">< 0.001="" বনাম="" নিয়ন্ত্রণ="" গ্রুপ;="" #p="">< 0.05,="" ##p="">< 0.01,="" ###p="">< 0.001="" বনাম="" rankl="" গ্রুপ।="" 3.5।="" cdp="" nf-κb="" এবং="" mapks="" সংকেত="" পথের="" rankl-প্ররোচিত="" অ্যাক্টিভেশনকে="" বাধা="" দেয়="" অস্টিওক্লাস্ট="" পার্থক্যের="" cdp-প্ররোচিত="" প্রতিরোধের="" সাথে="" জড়িত="" প্রক্রিয়াগুলি="" ব্যাখ্যা="" করার="" জন্য,="" আমরা="" nf-κb="" এবং="" mapks="" পাথওয়েতে="" cdp="" চিকিত্সার="" প্রভাব="" পরীক্ষা="" করেছি।="" ফলাফল="" প্রকাশ="" করেছে="" যে="" সিডিপি="" চিকিত্সার="" ডোজ-নির্ভর="" পদ্ধতিতে="" iκb-="" অবক্ষয়="" এবং="" p65="" ফসফোরিলেশনের="" উপর="" দমনমূলক="" প্রভাব="" রয়েছে="" (চিত্র="" 5a="" এবং="" b)।="" তিনটি="" mapk="" পরিবারের="" সদস্যদের="" ফসফোরিলেশন,="" বিশেষত="" এক্সট্রা="" সেলুলার="" সিগন্যাল-নিয়ন্ত্রিত="" কিনেস="" (erk),="" সি-জুন="" এন-টার্মিনাল="" কিনেস="" (jnk),="" এবং="" p38="" আপ-রেগুলেট="" করা="">

আলোচনা

অস্টিওপোরোসিস একটি সাধারণ এবং ক্ষয়জনিত হাড়ের রোগ। বর্তমানে, অস্টিওপোরোসিসের ক্লিনিকাল চিকিৎসায় অনেক রাসায়নিক সংশ্লেষণের ওষুধ ব্যবহার করা হয়, যেমন ইস্ট্রোজেন এবং বিসফসফোনেট। যাইহোক, এই ওষুধগুলির দীর্ঘমেয়াদী ব্যবহার ধীরে ধীরে ক্লিনিকাল কার্যকারিতাকে দুর্বল করে দেবে এবং এমনকি ডিম্বাশয়, স্তন এবং এন্ডোমেট্রিয়াল ক্যান্সার এবং চোয়ালের অস্টিওনেক্রোসিসের ঝুঁকি সহ অনেক গুরুতর পার্শ্ব প্রতিক্রিয়া সৃষ্টি করবে (বেরাল, 2003 ; খান এট আল।, 2009; লেসি এট আল।, 2002)। এই গবেষণায় থাকাকালীন, আমরা থেরাপিউটিক এজেন্ট হিসাবে সিডিপি, সিডি থেকে নিষ্কাশিত একটি কার্যকর উপাদান নির্বাচন করেছি এবং দেখিয়েছি যে সিডিপি OVX ইঁদুরের হাড়ের ক্ষয়ের বিরুদ্ধে একটি প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব ফেলেছিল এবং RANKL-প্ররোচিত অস্টিওক্লাস্ট গঠন এবং কার্যকারিতাকে বাধা দেয়। এদিকে, "কিডনি নিয়ন্ত্রণকারী হাড়" ঐতিহ্যগত চীনা ওষুধ তত্ত্ব অনুসারে, হাড়ের ক্ষয় কিডনির ঘাটতির জন্য দায়ী। কিডনি-টনিফাইং মেডিক্যাল খাবার হিসেবে, সিডি অস্টিওপোরোসিসের জন্য কার্যকর চিকিৎসা প্রদান করে প্রমাণিত হয়েছে (ফ্যান এট আল।, 2019; জিয়াং, ওয়াং, লি, এবং ঝাং, 2016)। এইভাবে, এই প্রাকৃতিক ভেষজ থেকে আহরিত সিডিপি একটি ভাল এবং নিরাপদ ওষুধের বিকল্প। বর্তমানে, OVX মাউস মডেলটি মহিলাদের মধ্যে মেনোপজ-পরবর্তী হাড় ক্ষয়ের একটি ক্লাসিক মডেল, হাড় ক্ষয়ের কারণ অনুসন্ধান করে এবং হস্তক্ষেপ পরিচালনা করে (Wehrle et al., 2015)। তদনুসারে, আমরা একটি অস্টিওপরোসিস মডেল তৈরি করতে C57BL/6J মহিলা ইঁদুরগুলিতে দ্বিপাক্ষিক oophorectomy করেছি। পূর্ববর্তী গবেষণায়, প্রাণীদের দেওয়া সিডিপি ডোজ ছিল 50-200 মিলিগ্রাম/কেজি (কম ডোজ) এবং 1800 মিলিগ্রাম/কেজি (উচ্চ ডোজ) (গুও এট আল।, 2016; ঝাং এট আল।, 2018)। এখানে, ইঁদুরে সিডিপির উচ্চ মাত্রা ছিল 600 মিলিগ্রাম/কেজি, যা ক্বাথের 30 গ্রাম সিডির উচ্চ ক্লিনিকাল ডোজের উপর ভিত্তি করে ছিল; সুতরাং, এটি বর্তমান ক্লিনিকাল অনুশীলনের অনুরূপ। এই সমীক্ষায়, CDP-এর সাথে চিকিত্সা উল্লেখযোগ্যভাবে OVX-প্ররোচিত শরীরের ওজন বৃদ্ধিকে বাধা দেয়, যা OVX ইঁদুরে পরিলক্ষিত একটি সাধারণ ঘটনা (ডেভিস এট আল।, 2019)। মাইক্রো-সিটি স্ক্যানিং এবং 3D পুনর্গঠন ব্যবহার করে, আমরা দেখতে পেলাম যে OVX BMD, BV/TV, BS/TV, এবং Tb.N-এ লক্ষণীয় হ্রাস এবং Tb.Sp বৃদ্ধির দিকে পরিচালিত করেছে, যখন CDP চিকিত্সা এই সমস্ত পরিবর্তনগুলিকে বিপরীত করেছে। . বিশেষ করে, ইতিবাচক ওষুধের সাথে তুলনা করে, CDP উল্লেখযোগ্যভাবে OVX ইঁদুরের BMD উন্নত করতে পারে, যা হাড়ের মানের একটি গুরুত্বপূর্ণ চিহ্নিতকারী এবং অস্টিওপোরোসিসের মাত্রা প্রতিফলিত করতে ব্যবহৃত হয় (Fuggle et al., 2019), যা নির্দেশ করে যে CDP এর একটি সুবিধা রয়েছে। বিএমডি উন্নতিতে ইতিবাচক ওষুধের উপরে। অধিকন্তু, হিস্টোলজিকাল ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে সিডিপি চিকিত্সা OVX দ্বারা প্ররোচিত TRAcP- পজিটিভ অস্টিওক্লাস্টের বর্ধিত পরিমাণ হ্রাস করতে পারে। এই ফলাফলগুলি পরামর্শ দেয় যে সিডিপি প্রশাসন কার্যকরভাবে OVX-প্ররোচিত অস্টিওপোরোসিসে হাড়ের ক্ষয় কমিয়েছে, সম্ভবত অস্টিওক্লাস্ট গঠনে বাধা দিয়ে। উপরের ফলাফলের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ, আমরা CDP ডোজ-নির্ভরভাবে RANKL-প্ররোচিত অস্টিওক্লাস্টিক গঠন এবং ফাংশনকে বাধা পেয়েছি, যখন CDP আমাদের ইন ভিট্রো পরীক্ষায় এম-সিএসএফ-প্ররোচিত অস্টিওক্লাস্ট পূর্ববর্তী কোষের বিস্তারের উপর সামান্য প্রভাব ফেলেছিল। RANKL এবং RANK-এর আবদ্ধতা TRAF6 নিয়োগের দিকে নিয়ে যেতে পারে এবং পরবর্তীতে বেশ কয়েকটি ডাউনস্ট্রিম সিগন্যালিং পাথওয়ে সক্রিয় করতে পারে, যেমন NF-κB এবং MAPKs (বয়েল এট আল।, 2003; হুয়াং এট আল।, 2006)। NF-κB সিগন্যালিং পাথওয়ে অস্টিওক্লাস্ট পার্থক্য নিয়ন্ত্রণে একটি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে, এবং এই পথের মূল প্রোটিনের জন্য জিন কোডিং এর নীরবতা অস্বাভাবিক হাড়ের বিকাশের দিকে নিয়ে যেতে পারে (লিব্ব্র্যান্ড এবং পেনিঙ্গার, 2008)। এটা সুপ্রতিষ্ঠিত যে NF-κB IκB সহ একটি কমপ্লেক্সে উদ্দীপিত কোষের সাইটোপ্লাজমে উপস্থিত কিন্তু দ্রুত RANKL উদ্দীপনার পরে নিউক্লিয়াসে প্রবেশ করে (বয়েল এট আল।, 2003)। প্রকাশিত IκB তারপরে দ্রুত অবনমিত হয়, যেখানে NF-κB নির্দিষ্ট জিন ট্রান্সক্রিপশন সক্রিয় করে, ফলস্বরূপ অস্টিওক্লাস্ট পার্থক্য, পরিপক্কতা এবং অ্যাপোপটোসিস প্রচার করে (Abdelmagid et al., 2015)। এই সমীক্ষায়, ফলাফলগুলি দেখায় যে CDP চিকিত্সা RANKL-কে NF-κB সংকেত পথের সক্রিয়করণকে দমন করে, যেমন ডোজ-নির্ভর পদ্ধতিতে IκB এর অবক্ষয় এবং p65-এর ফসফোরিলেশন প্রতিরোধের দ্বারা প্রদর্শিত হয়, যা এর অ্যান্টি-অস্টিওক্লাস্টোজেনিক প্রভাবের সাথে জড়িত হতে পারে। . উপরন্তু, ERK, JNK, এবং p38 সহ MAPKs সিগন্যালিং পাথওয়ে, RANKL-প্ররোচিত অস্টিওক্ল্যাস্টোজেনেসিস (লি এট আল।, 2002) এর সাথে ঘনিষ্ঠভাবে জড়িত। অধিকন্তু, p38 এবং JNK-এর প্রভাবশালী ইনহিবিটররা RANKL-প্ররোচিত অস্টিওক্লাস্টোজেনেসিস প্রতিরোধ করতে পারে (চ্যাং এট আল।, 2008; কিম এট আল।, 2019), যেখানে ERK অস্টিওক্লাস্ট বেঁচে থাকার ক্ষেত্রে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে (মিয়াজাকি এট আল।, 200)। এটা সুপ্রতিষ্ঠিত যে RANKL ERK, JNK, এবং p38 (Mizukami et al., 2002) এর ফসফোরিলেশন বাড়িয়ে MAPK-এর সিগন্যালিং পাথওয়েকে সক্রিয় করে। আমাদের গবেষণায়, আমরা দেখিয়েছি যে সিডিপি এমএপিকে সিগন্যালিং পাথওয়েতে মূল প্রোটিনের RANKL-প্ররোচিত ফসফোরিলেশনকে দমন করেছে। একসাথে নেওয়া, এই ফলাফলগুলি ইঙ্গিত দেয় যে NF-κB এবং MAPKs সংকেত পথগুলির সক্রিয়করণকে বাধা দেওয়া অস্টিওক্ল্যাস্টোজেনেসিসের বিরুদ্ধে CDP-এর প্রতিরোধমূলক প্রভাবে অবদান রাখে। NF-κB এবং MAPKs সিগন্যালিং পাথওয়ের সক্রিয়করণ সেলুলার অনকোজিন ফস, অ্যাক্টিভেটর প্রোটিন 1, এবং NFATc1 (Huang et al., 2006; Wagner & Matsuo, 2003) এর মতো কয়েকটি মূল ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টরগুলির প্রকাশকে উৎসাহিত করে। NFATc1, NFAT পরিবারের একটি গুরুত্বপূর্ণ সদস্য, একটি মাস্টার ট্রান্সক্রিপশনাল রেগুলেটর হিসাবে টার্মিনাল অস্টিওক্লাস্ট পার্থক্যের সাথে জড়িত (আসাগিরি এট আল।, 2005)। এটি রিপোর্ট করা হয়েছে যে NFATc1- ঘাটতি ভ্রূণের স্টেম কোষগুলি RANKL এর উদ্দীপনার অধীনে অস্টিওক্লাস্টে পার্থক্য করতে পারে না এবং NFATc1 এর একটোপিক অভিব্যক্তির কারণে পূর্ববর্তী কোষগুলি RANKL সংকেতকে বাইপাস করে পার্থক্যের মধ্য দিয়ে যায়, যা পরামর্শ দেয় যে NFATc1-এর একটি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা রয়েছে। অস্টিওক্লাস্ট পার্থক্য (তাকায়ানাগি এট আল।, 2002)। আমাদের গবেষণার ফলাফলগুলি NFATc1 এক্সপ্রেশন এবং এর নিম্নলিখিত প্রোটিন CTSK-এর উপর CDP-এর দমনমূলক প্রভাব দেখিয়েছে। মজার বিষয় হল, আমরা লক্ষ্য করেছি যে NFATc1 এর প্রোটিন এক্সপ্রেশন স্তরটি প্রথমে বৃদ্ধি পায় এবং তারপরে হ্রাস পায়, RANKL উদ্দীপনার পরে 5 তম দিনে সর্বোচ্চ স্তরে পৌঁছেছে। এটি Baek et al এর ফলাফলের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ ছিল। (2014), যিনি Src kinase-নির্ভর পদ্ধতিতে NFATc1-এর সিবিএল-প্ররোচিত সর্বজনীনতার মাধ্যমে শেষ পর্যায়ে অস্টিওক্ল্যাস্টোজেনেসিস চলাকালীন M-CSF প্ররোচিত NFATc1 অবক্ষয় পর্যবেক্ষণ করেছেন। ইমিউনোফ্লোরোসেন্স অ্যাসের ফলাফলগুলি ধারাবাহিকভাবে NFATc1 ট্রান্সক্রিপশনাল অ্যাক্টিভেশনে CDP-এর প্রতিরোধমূলক প্রভাবকে সমর্থন করে। অধিকন্তু, CTSK, Acp5, Mmp9 এবং Atp6v0d2 সহ অস্টিওক্লাস্ট-নির্দিষ্ট জিনগুলি সরাসরি NFATc1 দ্বারা নিয়ন্ত্রিত হয় (Y. Kim et al., 2005), CDP দ্বারা দমন করা হয়েছিল। এই ফলাফলগুলি ব্যাখ্যা করে যে NFATc1 হল NF-κB এবং MAPK-এর সিগন্যালিং পাথওয়েতে CDP-এর প্রতিরোধমূলক প্রভাবের লক্ষ্য।

উপসংহার

সংক্ষেপে, আমরা সিডি থেকে সক্রিয় পলিস্যাকারাইড বের করে শুদ্ধ করেছি এবং দেখিয়েছি যে সিডিপি OVX-প্ররোচিত অস্টিওপোরোসিসের উপর একটি প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব প্রদর্শন করেছে এবং অস্টিওক্লাস্ট কার্যকলাপ এবং ফাংশনকে দমন করে হাড়ের ক্ষয় কমিয়েছে। অধিকন্তু, CDP NF-κB এবং MAPKs সিগন্যালিং পাথওয়েতে হস্তক্ষেপ করে এবং ফলস্বরূপ ডাউনস্ট্রিম NFATc1 অ্যাক্টিভেশনকে প্রভাবিত করে RANKL প্ররোচিত অস্টিওক্লাস্ট পার্থক্য এবং ফাংশনকে বাধা দিতে পারে। উপসংহারে, আমাদের অনুসন্ধানগুলি অস্টিওপরোসিসের চিকিত্সায় সিডিপির সম্প্রসারণ এবং প্রয়োগের ভিত্তি প্রদান করে।

এই নিবন্ধটি সায়েন্সডাইরেক্ট জার্নাল অফ ফাংশনাল ফুডস জার্নাল হোমপেজে উপলব্ধ বিষয়বস্তুর তালিকা থেকে এসেছে: www.elsevier.com/locate/jff