বিটা-গ্লুকান নিউক্যাসেল ডিজিজ ভ্যাকসিনের প্রতি বর্ধিত ইমিউন প্রতিক্রিয়া এবং মুরগির প্লীহার এমআরএনএ এক্সপ্রেশন পরিবর্তন করেছে

বিমূর্ত

নিউক্যাসল ডিজিজ ভাইরাস (এনডিভি)-নির্দিষ্ট হেমাগ্লুটিনেশন ইনহিবিশন (এইচআই) টাইটার, লিম্ফোসাইট প্রসারণ এবং ইস্টের কোষ প্রাচীর থেকে প্রাপ্ত একটি পণ্য বি-গ্লুকান (G70) এর মৌখিক প্রশাসনের প্রভাব তদন্ত করার জন্য বর্তমান গবেষণাটি করা হয়েছিল। লাইভ এনডিভি ভ্যাকসিন দিয়ে চিকিত্সা করা মুরগির টি লিম্ফোসাইট উপ-জনসংখ্যার ভূমিকা। এছাড়াও, প্ল্যানিক জিন এক্সপ্রেশনে বি-গ্লুকানের প্রভাব ট্রান্সক্রিপ্টোম সিকোয়েন্সিং দ্বারা তদন্ত করা হয়েছিল। ফলাফলগুলি প্রকাশ করেছে যে বি-গ্লুকানের পরিপূরক সিরাম এনডিভি এইচআই-এর টাইটারকে বাড়িয়েছে পেরিফেরাল রক্ত ​​এবং অন্ত্রের ট্র্যাক্টে লিম্ফোসাইটের এনডিভি উদ্দীপনা সূচক বাড়িয়েছে এবং টি লিম্ফোসাইটের সিডি4+ টি কোষে পার্থক্যকে উন্নীত করেছে। RNA সিকোয়েন্সিং (RNA-seq) বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে G70 জি-প্রোটিন যুগল রিসেপ্টর এবং MHC ক্লাস I পলিপেপটাইডের সাথে সম্পর্কিত mRNA এক্সপ্রেশনগুলিকে উন্নীত করেছে এবং ক্যাথেলিসিডিন এবং বিটাডেফেনসিন সম্পর্কিত mRNA এক্সপ্রেশনগুলিকে কম করেছে। G70 এর ইমিউনোমোডুলেটরি প্রভাব মাইটোজেন-অ্যাক্টিভেটেড প্রোটিন কিনেস সিগন্যালিং পাথওয়ের মাধ্যমে কাজ করতে পারে। সংক্ষেপে, G70 মুরগির লাইভ এনডিভি ভ্যাকসিনের ইমিউনোলজিক্যাল কার্যকারিতা বাড়াতে পারে এবং পোল্ট্রি শিল্পে সম্ভাব্য সহায়ক প্রার্থী হিসাবে প্রয়োগ করা যেতে পারে।

cistanche tubulosa - ইমিউন সিস্টেম উন্নত

কীওয়ার্ড: নিউক্যাসল রোগের ভ্যাকসিন, বিটা-গ্লুকান, সহায়ক, কালো-হাড়ের মুরগি, আরএনএ-সেক

ভূমিকা

খামির কোষ প্রাচীর পলিস্যাকারাইডগুলি সরাসরি স্যাকারোমাইসিস সেরেভিসিয়ার কোষ প্রাচীর থেকে উদ্ভূত হয় এবং উৎপাদন ও স্বাস্থ্যের উন্নতির জন্য পোল্ট্রিতে বৃদ্ধির প্রবর্তক, অ্যান্টিমাইক্রোবিয়াল এজেন্ট বা ইমিউনোমোডুলেটর হিসাবে ব্যাপকভাবে ব্যবহার করা হয় (Schiavone et al., 2017; Hasted et al.21,)। পূর্বে, PW220 নামক একটি পণ্য, যার মধ্যে ইস্ট সেল ওয়াল পলিস্যাকারাইড রয়েছে, নিউক্যাসল ডিজিজ ভাইরাস (NDV) দ্বারা প্ররোচিত রোগ প্রতিরোধ ক্ষমতা বাড়াতে এবং মৌখিক প্রশাসনের দ্বারা মুরগির সিকামের জীবাণু সম্প্রদায়কে পরিবর্তন করার জন্য প্রদর্শিত হয়েছিল (Bi et al., 2020) ) ইস্ট সেল ওয়াল পলিস্যাকারাইডগুলি প্রাথমিকভাবে বি-গ্লুকান এবং মান্নান-অলিগোস্যাকারাইড (ওয়াং এট আল।, 2018) দিয়ে গঠিত। বর্তমান গবেষণায়, বি-গ্লুকান মুরগির এনডিভি ভ্যাকসিনের প্রতিরক্ষা প্রতিক্রিয়ার উপর এর প্রভাবের জন্য তদন্ত করা হয়েছিল। ইমিউন প্রতিক্রিয়া শুরু করার জন্য প্লীহা একটি গুরুত্বপূর্ণ অঙ্গ। সাম্প্রতিক একটি সমীক্ষায় ইঙ্গিত দেওয়া হয়েছে যে PW220, যা একটি খামির কোষ প্রাচীরের পণ্য, মুরগির প্লীহাতে TGF-b, IL-6, TLR5, GATA-3, এবং T-বেটের mRNA এক্সপ্রেশনকে উন্নীত করেছে ( Bi et al., 2022)। যাইহোক, নির্দিষ্ট প্রক্রিয়াটি ব্যাখ্যা করা দরকার। RNA সিকোয়েন্সিং (RNA-seq) হল উচ্চ থ্রুপুট প্রযুক্তিগুলির মধ্যে একটি যা পরিমাণগত জিনের অভিব্যক্তি পরীক্ষায় প্রয়োগ করা যেতে পারে এবং সম্পূর্ণ ট্রান্সক্রিপ্টোমের স্তরে বিভিন্ন এক্সপ্রেশন প্রোফাইলের বিশ্লেষণ প্রদান করে (ঝাও এট আল।, 2018)। উচ্চ সংবেদনশীলতা এবং কম খরচের সুবিধার সাথে, RNA-seq ব্যাপকভাবে প্রাণিসম্পদ এবং হাঁস-মুরগির গবেষণায় নিযুক্ত করা হয়েছে (Teixeira et al., 2019; Yuan et al., 2020)। এইভাবে, এই গবেষণায়, এনডিভি-নির্দিষ্ট হেমাগ্গ্লুটিনেশন ইনহিবিশন (এইচআই) টাইটার, লিম্ফোসাইটের বিস্তার এবং এনডিভি ভ্যাকসিনের মাধ্যমে মৌখিকভাবে টিকা দেওয়া মুরগিতে টি-লিম্ফোসাইট উপ-জনসংখ্যার উপর বি-গ্লুকান পরিচালনার প্রভাব মূল্যায়ন করা হয়েছিল। তদ্ব্যতীত, ট্রান্সক্রিপ্টোম বিশ্লেষণটি মুরগির প্লীহায় জিনের অভিব্যক্তি এবং অন্তর্নিহিত সংকেত ট্রান্সডাকশন পথের উপর বি-গ্লুকানের প্রভাব মূল্যায়ন করতে ব্যবহৃত হয়েছিল।

cistanche tubulosa - ইমিউন সিস্টেম উন্নত

Cistanche Enhance Immunity পণ্য দেখতে এখানে ক্লিক করুন

【আরো জন্য জিজ্ঞাসা করুন】 ইমেল:cindy.xue@wecistanche.com / Whats অ্যাপ: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

প্রাণী

একদিনের পুরনো বাণিজ্যিক কালো হাড়ের মুরগি (পুরুষ) Guizhou Yushun Poultry Co., Ltd. (Anshun, China) থেকে অর্জিত হয়েছিল। মুরগিগুলিকে তারের খাঁচায় বিভক্ত করা হয়েছিল যা বিনামূল্যে খাবার এবং জলের অ্যাক্সেসের অনুমতি দেয়। প্রথম 7 ডি-এ, ঘরের তাপমাত্রা 33 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেড থেকে 35 ডিগ্রি ক্যান্ডে বজায় রাখা হয়েছিল তারপর ধীরে ধীরে 27 ডিগ্রি সেলসিয়াস পর্যন্ত প্রতি 2 দিনের জন্য 1 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেড কমেছে। সমস্ত মুরগি সাউথওয়েস্ট ইউনিভার্সিটি অ্যানিমেল কেয়ার দ্বারা প্রতিষ্ঠিত মান দ্বারা প্রক্রিয়া করা হয়েছিল এবং কমিটি ব্যবহার করুন (এথিক্স সার্টিফিকেট নম্বর: IAC-2021-0057)। অধ্যয়নের শেষে সমস্ত পরীক্ষামূলক পাখিকে CO2 দিয়ে euthanized করা হয়েছিল।

পুরুষদের জন্য cistanche উপকারিতা-প্রতিরোধ ক্ষমতা শক্তিশালী করে

টিকা

NDV (স্ট্রেন লা সোটা) এর লাইভ ভ্যাকসিন Qingdao YEBIO Bioengineering Co., Ltd. (Qingdao, China) দ্বারা সরবরাহ করা হয়েছিল।

বিকারক 

ইস্ট সেল ওয়াল প্রোডাক্ট (YP) G70 ইস্ট সেল (Saccharomyces cerevisiae) প্রাচীর থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল, যাতে বি-গ্লুকান (70% এর চেয়ে বেশি বা সমান) (AngelG70, QB/T4572, Angel Yeast, Yichang, China) রয়েছে। এনডিভি-নির্দিষ্ট এইচআই টাইটার পরিমাপের জন্য অ্যান্টিজেন এবং ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ সেরা উভয়ই কিংডাও রেজেন ডায়াগনস্টিকস ডেভেলপমেন্ট সেন্টার (কিংডাও, চীন) থেকে কেনা হয়েছিল। অ্যান্টি-চিকেন CD3-APC (C2818-T9580), CD4-FITC (D0117-WA78E), এবং CD8- PE (L{{14) নানজিং জেউইল বায়োলজিক্যাল টেকনোলজি কোং লিমিটেড (নানজিং, চীন) দ্বারা ইঁদুরে TH49T) অফার করা হয়েছে।

পরীক্ষামূলক অলঙ্করণ

5 দিন বয়সে আটচল্লিশটি কালো হাড়ের মুরগিকে এলোমেলোভাবে 3টি গ্রুপে (সারণী 1) বরাদ্দ করা হয়েছিল এবং তাদের হয় বেসাল ডায়েট (সারণী 2) বা 0.1% G7{{10} সহ বেসাল ডায়েট দেওয়া হয়েছিল } (বি-গ্লুকান, 0.7 গ্রাম/কেজি) বর্তমান গবেষণার সময়কালের জন্য পরিপূরক। গ্রুপ H (G70 + ভ্যাকসিন) এবং C (ভ্যাকসিন) যথাক্রমে 14 এবং 28 তারিখে NDV ভ্যাকসিন দিয়ে মৌখিকভাবে টিকা দেওয়া হয়েছিল। গ্রুপ এস (সাইলনে) কে সমান পরিমাণ স্যালাইন দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল। HI টাইটার পরীক্ষা করার জন্য 5, 7, 14, 21, 28, 35, এবং 42 d বয়সে উইং ভেনিপাংচারের মাধ্যমে রক্তের নমুনা সংগ্রহ করা হয়েছিল। বুস্টার টিকা দেওয়ার সাত দিন পর, প্রতিটি কলামে 8টি মুরগি এলোমেলোভাবে বাছাই করা হয়েছিল এবং CO2 ব্যবহার করে শ্বাসরোধের মাধ্যমে বলি দেওয়া হয়েছিল। লিম্ফোসাইট প্রসারণ এবং প্রবাহ সাইটোমেট্রি বিশ্লেষণ সঞ্চালনের জন্য পেরিফেরাল রক্ত ​​এবং জেজুনাম উভয় থেকে লিম্ফোসাইটগুলিকে আলাদা করা হয়েছিল। জেজুনাল স্যাম্পলিংয়ের ক্ষেত্রে, ডিওডেনাল সাসপেনসারি লিগামেন্টটি জেজুনামের শুরুর বিন্দু ছিল এবং জেজুনামের শুরুর বিন্দু থেকে একটি 5 সেমি লম্বা অংশ সংগ্রহ করা হয়েছিল। প্লীহাটি তরল নাইট্রোজেনে দ্রুত হিমায়িত হয়েছিল এবং তারপর RT-qPCR এবং সিকোয়েন্স প্রোফাইলিংয়ের জন্য -80 ডিগ্রিতে সংরক্ষণ করা হয়েছিল।

সারণী 1. পরীক্ষামূলক নকশা

সারণী 2. 1 পরীক্ষামূলক ব্রয়লার বেসাল ডায়েটের রচনা এবং পুষ্টি উপাদান।

HI অধ্যয়ন

সিরামে এনডিভি-নির্দিষ্ট এইচআই টাইটারগুলির জন্য অ্যাস পূর্বের বর্ণনা অনুসরণ করে সম্পাদিত হয়েছিল (বল এট আল।, 2019)। সংক্ষেপে, ভি-বটম 96-ওয়েল মাইক্রোটাইটার প্লেটে 1:2 থেকে 1:1,024 পর্যন্ত ফসফেট-বাফারযুক্ত স্যালাইন (PBS) দিয়ে সিরাম মিশ্রিত করা হয়েছিল। তারপরে, প্রতি কূপে 25 মিলি এনডিভি ডাইলিউশন যোগ করা হয়েছিল এবং 30 মিনিটের জন্য 37 ডিগ্রিতে ইনকিউব করা হয়েছিল। এর পরে, প্রতিটি কূপে 1% মোরগ এরিথ্রোসাইট সাসপেনশনের 25 এমএল যোগ করা হয়েছিল এবং 30 মিনিটের জন্য 37 ডিগ্রিতে ইনকিউব করা হয়েছিল। সমস্ত নমুনা দুবার পরীক্ষা করা হয়েছিল এবং প্রতিটি প্লেটে ইতিবাচক এবং নেতিবাচক উভয় নিয়ন্ত্রণ অন্তর্ভুক্ত করা হয়েছিল। HI টাইটারগুলি সর্বশ্রেষ্ঠ তরলীকরণের উপর ভিত্তি করে তৈরি করা হয়েছিল যার ফলস্বরূপ হেম্যাগ্লুটিনেশন সম্পূর্ণরূপে বাধা দেয়। গড় HI টাইটার এবং স্ট্যান্ডার্ড ত্রুটি (SE) প্রতি গ্রুপে পরিমাপ করা হয়েছিল।

পেরিফেরাল রক্ত ​​থেকে লিম্ফোসাইটের বিচ্ছিন্নতা

লিম্ফোসাইট বিচ্ছিন্ন এবং লিম্ফোসাইট সেপারেশন মিডিয়াম কিট (তিয়ানজিন হাওয়াং বায়োলজিক্যাল ম্যানুফ্যাকচার কোং লিমিটেড, তিয়ানজিন, চীন) ব্যবহার করে পেরিফেরাল রক্তের লিম্ফোসাইট থেকে সংগ্রহ করা হয়েছিল। তারপর, লিম্ফোসাইটগুলি RPMI 1640 মাঝারি (সোলারবিও, বেইজিং, চীন) সহ 5% ভ্রূণ বাছুরের সিরাম এবং 25 মিমি HEPES (pH 7.0) সহ সাসপেনশনে সংরক্ষণ করা হয়েছিল।

জেজুনাম থেকে লিম্ফোসাইটের বিচ্ছিন্নতা

অ্যাসাইনমেন্ট প্রক্রিয়াটি পূর্ববর্তী বর্ণনা অনুসারে এবং সামান্য পরিবর্তনের সাথে সম্পাদিত হয়েছিল (ইউয়ান এট আল।, 2020)। সংক্ষেপে, অন্ত্রকে 4 মিলি কোল্ড পিবিএসে বিভক্ত করতে একটি 70 মিমি সেল ফিল্টার ব্যবহার করুন। এর পরে, নমুনা কোষগুলির সাসপেনশন 4,500 rpm-এ 12 মিনিটের জন্য সুপারনাট্যান্ট অপসারণের সাথে সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল। তারপরে, RPMI 1640 (Sijiqing Co., Hangzhou, China) তে 5% ভ্রূণের বোভাইন সিরাম (FBS) সমন্বিত একটি পূর্ণ মাধ্যমের (Solarbio Co., Beijing, China) উপর অন্ত্রের কোষগুলিকে পুনরায় স্থগিত করুন। শেষ পর্যন্ত, মুরগির লিম্ফোসাইট বিচ্ছিন্নতা কিট (তিয়ানজিন হাওয়াং বায়োলজিক্যাল ম্যানুফ্যাকচার কোং লিমিটেড) লিম্ফোসাইটকে আলাদা করতে। একটি 70 মিমি সেল ফিল্টার ব্যবহার করে অন্ত্রের টিস্যুকে 4 মিলি ঠান্ডা পিবিএসে বিভক্ত করা হয়েছিল। এরপরে, নমুনা কোষগুলির সাসপেনশনটি 12 মিনিটের জন্য 4,500 আরপিএম-এ সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল এবং সুপারনাট্যান্টটি বাতিল করা হয়েছিল। এর পরে, অন্ত্রের কোষগুলিকে RPMI 1640 (Solarbio Co.) তে 5% FBS (Sijiqing Co.) ধারণ করে পুনরায় সাসপেন্ড করা হয়। অবশেষে, চিকেন লিম্ফোসাইট আইসোলেশন কিট (Tianjin Haoyang Biological Manufacture Co. Ltd.) ব্যবহার করে লিম্ফোসাইটগুলি আলাদা করা হয়েছিল।

লিম্ফোসাইটের বিস্তার 

কোষগুলিকে 96-কূপ প্লেটে (প্রতি কূপে 5£105), 4টি হেম্যাগ্লুটিনেশন ইউনিট বা সমান পরিমাণ স্যালাইনের জন্য নিষ্ক্রিয় NDV-এর অ্যান্টিজেন দ্বারা উদ্দীপিত করা হয়েছিল। প্রতিটি নমুনা 3টি প্রতিলিপিতে পরীক্ষা করা হয়েছিল। কোষ এবং অ্যান্টিজেন 5% CO2-তে 37 ডিগ্রীতে 44 ঘন্টার জন্য ইনকিউবেট করা হয়েছিল এবং তারপর 50 মিলি মিথাইল থিয়াজোলিল টেট্রাজোলিয়াম (এমটিটি) (2 মিলিগ্রাম/এমএল) প্রতিটি কূপে যোগ করা হয়েছিল এবং আরও 4 ঘন্টার জন্য ইনকিউব করা হয়েছিল। গৃহমধ্যস্থ তাপমাত্রায় 8 মিনিটের জন্য নমুনাগুলিকে 1,200 £ g তে কেন্দ্রীভূত করা হয়েছিল। পরবর্তীতে, সুপারনাট্যান্টটি সাবধানে সরানো হয়েছিল এবং প্রতিটি কূপে 100 মিলি ডিএমএসও যোগ করা হয়েছিল। স্ফটিকগুলিকে সম্পূর্ণরূপে দ্রবীভূত করার জন্য প্লেটগুলিকে 8 মিনিটের জন্য নাড়ানো হয়েছিল। অবশেষে, গড় অপটিক্যাল ঘনত্ব (OD) 570 nm এ রেকর্ড করা হয়েছিল। উদ্দীপনা সূচক (SI) সমীকরণ ব্যবহার করে প্রাপ্ত হয়েছিল: উদ্দীপিত কূপের OD মান/ উদ্দীপিত কূপের OD মান (Cui et al., 2020)।

পুরুষদের জন্য cistanche উপকারিতা-প্রতিরোধ ক্ষমতা শক্তিশালী করে

টি-লিম্ফোসাইট উপ-জনসংখ্যার ফ্লো সাইটোমেট্রি বিশ্লেষণ

লিম্ফয়েড সেল সাসপেনশনগুলি বিচ্ছিন্ন করা হয়েছিল এবং পিবিএস দিয়ে দুবার ধুয়ে ফেলা হয়েছিল। কোষের ঘনত্ব 106 /mL এ পরিবর্তিত হয়েছিল এবং তারপরে বরফের উপর রাখা হয়েছিল। প্রতিটি নমুনাকে 2 মিলি ইঁদুর-বিরোধী মুরগির সিডি3-এপিসি, সিডি4- এফআইটিসি, এবং র‍্যাট অ্যান্টি-চিকেন সিডি8-পিই 30 মিনিটের জন্য হালকা-প্রুফ অবস্থায় দাগ দেওয়া হয়েছিল, অনুসরণ করা হয়েছিল দ্বারা 2 পিবিএস সঙ্গে ধোয়া. ফ্লো সাইটোমিটারে (বিডি বায়োসায়েন্স, সান জোসে, সিএ) ফ্লো সাইটোমেট্রি বিশ্লেষণের মাধ্যমে কোষগুলি পরীক্ষা করা হয়েছিল।

RT-qPCR বিশ্লেষণ

প্রস্তুতকারকের নির্দেশিকা অনুসারে TRIzol রিএজেন্ট (টাকারা, শিগা, জাপান) ব্যবহার করে প্লীহা থেকে মোট আরএনএ নেওয়া হয়েছিল এবং তারপরে একটি T100 থার্মাল সাইক্লারে প্রাইমস্ক্রিপ্ট আরটি মাস্টার মিক্স (টাকারা, দালিয়ান, চীন) ব্যবহার করে সিডিএনএতে রূপান্তরিত হয়েছিল (বায়ো-র্যাড, হারকিউলিস, CA)। মুরগির বিটা-অ্যাক্টিন একটি অভ্যন্তরীণ নিয়ন্ত্রণ জিন হিসাবে নিযুক্ত ছিল। নির্বাচিত জিনের RT-qPCR একটি মাল্টিপল রিয়েল-টাইম পিসিআর সিস্টেমে (AB, Carlsbad, CA) SYBR Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Takara) সহ করা হয়েছিল। আপেক্ষিক পরিমাণগত পদ্ধতি (244CT) পরিমাণগত প্রকরণ মূল্যায়ন করার জন্য সঞ্চালিত হয়েছিল (Bi et al., 2022)। প্রাইমার সিকোয়েন্সগুলি সারণি 3 এ তালিকাভুক্ত করা হয়েছে।

আরএনএ নিষ্কাশন

গ্রুপ এইচ (জি70 +টিকা) এবং গ্রুপ সি (ভ্যাকসিন) থেকে 3টি প্লীহা নমুনার প্রত্যেকটি TRIzol রিএজেন্ট (টাকারা) সহ RNA-seq-এর জন্য ব্যবহৃত হয়েছিল। এর পরে, RNA 1% অ্যাগারোজ জেল দিয়ে দূষণ এবং অবক্ষয়ের জন্য পরীক্ষা করা হয়েছিল এবং RNA বিশুদ্ধতা একটি ন্যানোফোটোমিটার স্পেকট্রোফোটোমিটার (IMPLEN, Westlake Village, CA) ব্যবহার করে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। কিউবিট 2-এ কিউবিট আরএনএ অ্যাসে কিট ব্যবহার করে আরএনএর ঘনত্ব নির্ধারণ করা হয়েছিল। বায়োঅ্যানালাইজার 2100 সিস্টেমের (Agilent Technologies, Santa Clara, CA) RNA Nano 6000 Assay Kit ব্যবহার করে RNA অখণ্ডতা পরিমাপ করা হয়েছিল। ফলাফলগুলি দেখায় যে আরএনএ সম্পূর্ণ এবং ডিএনএ দূষণ ছাড়াই ছিল।

ট্রান্সক্রিপ্টোম বিশ্লেষণ

ট্রান্সক্রিপ্টোম সিকোয়েন্সিং, সিকোয়েন্স অ্যাসেম্বলি, এবং ডেটা অ্যানালাইসিস নোভোজিন বায়োইনফরমেটিক্স টেকনোলজি কোং লিমিটেড (বেইজিং, চীন) দ্বারা সরবরাহ করা হয়েছে। ট্রান্সক্রিপ্টোমের প্রধান পদ্ধতিগুলি নিম্নরূপ তালিকাভুক্ত করা হয়েছিল: 1) মোট আরএনএ থেকে এমআরএনএ পরিশোধন পলি-টি অলিগো-সংযুক্ত চৌম্বকীয় জপমালা ব্যবহার করে সঞ্চালিত হয়েছিল। উচ্চ তাপমাত্রায় NEB নেক্সট ফার্স্ট স্ট্র্যান্ড সিন্থেসিস রিঅ্যাকশন বাফার (5X) তে দ্বিভাজন ক্যাটেশনের সাহায্যে ফ্র্যাগমেন্টেশন করা হয়েছিল। 2) ফার্স্ট-স্ট্র্যান্ড সিডিএনএ র্যান্ডম হেক্সামার প্রাইমার এবং মোলোনি মুরিন লিউকেমিয়া ভাইরাস (M-MuLV) রিভার্স ব্যবহার করে সংশ্লেষিত হয়েছিল। দ্বিতীয় স্ট্র্যান্ড সিডিএনএ সংশ্লেষণ তখন ডিএনএ পলিমারেজ I এবং RNase H ব্যবহার করে সংশ্লেষিত হয়েছিল। একটি হেয়ারপিন লুপ স্ট্রাকচার NEB নেক্সট অ্যাডাপ্টারকে তখন ডিএনএ টুকরোগুলির 3' প্রান্তের এডিনিলেশনের পরে হাইব্রিডাইজেশনের জন্য প্রস্তুত করার জন্য বন্ধ করা হয়েছিল। 4) প্রায় 250 থেকে 300 bp cDNA খণ্ড প্রাপ্ত হয়েছিল এবং লাইব্রেরিটি বেকম্যান কাল্টারের AMPure XP সিস্টেম (Beckman Coulter, Beverly, MA) ব্যবহার করে বিশুদ্ধ করা হয়েছিল। তারপরে 3 mL NEBU SER এনজাইম (Thermo Fisher, Hillsboro, OR) মাপ-নির্বাচিত, অ্যাডাপ্টর-লিগেটেড সিডিএনএ 15 মিনিটের জন্য 37 ডিগ্রি সেলসিয়াসে প্রয়োগ করা হয়েছিল এবং 95 ডিগ্রিতে 5 মিনিট অনুসরণ করা হয়েছিল। ফিউশন হাই-ফিডেলিটি ডিএনএ পলিমারেজ দিয়ে পিসিআর পরিবর্ধন করা হয়েছিল। শেষ পর্যন্ত, পিসিআর পণ্যগুলিকে বিশুদ্ধ করা হয়েছিল (AMPure XP সিস্টেম) এবং Agilent Bioanalyzer 2100 সিস্টেম ব্যবহার করে লাইব্রেরির গুণমান অনুমান করা হয়েছিল। ইনডেক্স-কোডেড নমুনাগুলির ক্লাস্টারিং TruSeq PE ক্লাস্টার কিট v3-cBot-HS (ইলুমিনা, সান দিয়েগো, CA) এ সম্পাদিত হয়েছিল। তারপরে, সিকোয়েন্সিংটি একটি ইলুমিনা নোভাসেক প্ল্যাটফর্মে সঞ্চালিত হয়েছিল এবং 150 bp পেয়ারড-এন্ড রিড তৈরি হয়েছিল। রেফারেন্স জিনোম এবং জিন মডেল টীকা ফাইলগুলি জিনোম ওয়েবসাইট (ftp://ftp.ensembl.org/pub/release- 98/fasta/gallus_gallus/ এবং ftp://ftp থেকে ডাউনলোড করা হয়েছিল৷ ensembl.org/ pub/re-lease-98/gtf/gallus_gallus/)। HISAT2 (v2.0.5) ব্যবহার করে রেফারেন্স জিনোমের একটি সূচক প্রতিষ্ঠিত হয়েছিল এবং পেয়ারড-এন্ড ক্লিন রিডগুলি রেফারেন্স জিনোমের সাথে সারিবদ্ধ করা হয়েছিল। প্রতিটি জিনে ম্যাপ করা রিডের সংখ্যা এবং জিনের দৈর্ঘ্যের উপর ভিত্তি করে প্রতিটি জিনের জন্য ফ্র্যাগমেন্টস পার কিলোবেস প্রতি মিলিয়ন (FPKM) এবং জিনে ম্যাপ করা রিডের সংখ্যা বৈশিষ্ট্য গণনা v1.5 ব্যবহার করে গণনা করা হয়েছিল৷{38} } p3। DESeq2 R প্যাকেজ (1.16.1) ব্যবহার করে গ্রুপ H (G70 + ভ্যাকসিন) এবং গ্রুপ C (ভ্যাকসিন) এর মধ্যে পার্থক্য প্রকাশ করা হয়েছিল। P <0.05 এবং |log2 (ভাঁজ পরিবর্তন)| সহ জিন > 1 ডিফারেনশিয়াল এক্সপ্রেশন জিন (DEGs) হিসাবে সংজ্ঞায়িত করা হয়েছিল।

সারণী 3. RT-qPCR-এর জন্য প্রাইমারের ক্রম।

রিয়েল-টাইম পরিমাণগত পিসিআর বৈধতা 

গ্রুপ H ( G70 + ভ্যাকসিন) বনাম গ্রুপ C (ভ্যাকসিন) এর তুলনাতে দুটি আপ-নিয়ন্ত্রিত ডিইজি এবং 4টি ডাউন-নিয়ন্ত্রিত ডিইজি RT-qPCR দ্বারা ট্রান্সক্রিপ্টোম সিকোয়েন্সিং ফলাফল নিশ্চিত করার জন্য বেছে নেওয়া হয়েছিল। T100 থার্মাল সাইক্লারে (Bio-Rad) প্রাইমস্ক্রিপ্ট আরটি মাস্টার মিক্স (টাকারা) ব্যবহার করে আরএনএকে সিডিএনএ-তে রূপান্তরিত করা হয়েছিল। প্রাইমার সিকোয়েন্সগুলি সারণি 3 এ তালিকাভুক্ত করা হয়েছে। চিকেন বি-অ্যাক্টিন অভ্যন্তরীণ নিয়ন্ত্রণ জিন হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। নির্বাচিত জিনগুলির RT-qPCR একাধিক রিয়েল-টাইম পিসিআর সিস্টেমে (অ্যাপ্লাইড বায়োসিস্টেম, কার্লসব্যাড, CA) SYBR প্রিমিক্স এক্স Taq II (Tli RNaseH Plus) (Takara) এর সাথে সম্পাদিত হয়েছিল। একটি আপেক্ষিক পরিমাণগত পদ্ধতি (244CT) পরিমাপের পরিবর্তনের মূল্যায়ন করার জন্য প্রয়োগ করা হয়েছিল। সমস্ত নমুনা বিশ্লেষণের জন্য তিন প্রতিলিপিতে সম্পাদিত হয়েছিল।

পরিসংখ্যান সংক্রান্ত বিশ্লেষণ

SPSS সফ্টওয়্যার (সংস্করণ 21৷{2}}, SPSS Inc., Chicago, IL) ব্যবহার করে দলের মধ্যে একাধিক তুলনার জন্য ডানকান পোস্ট হক পরীক্ষার সাথে একমুখী ANOVA ব্যবহার করা হয়েছিল৷ ডেটাকে গড় § SE হিসাবে প্রকাশ করা হয়। P < 0.05 এর একটি মান পরিসংখ্যানগতভাবে তাৎপর্যপূর্ণ হিসাবে বিবেচিত হয়েছিল।

সিরাম অ্যান্টিবডি টাইটারগুলিতে বি-গ্লুকানের ফলাফলের প্রভাব

চিত্র 1-এ দেখানো হয়েছে, এনডিভি-নির্দিষ্ট এইচআই টাইটারগুলি টিকা দেওয়ার আগে সমস্ত গ্রুপে হ্রাস পেয়েছে এবং টিকা দেওয়ার পরে এইচ (জি70+টিকা) এবং সি (ভ্যাকসিন) গ্রুপগুলিতে বৃদ্ধি পেয়েছে। মজার বিষয় হল, গ্রুপ H (G70+ভ্যাকসিন) এ 21 (P > 0৷{8}}5), 28 (P < 0) উচ্চতর HI টাইটারগুলি পরিলক্ষিত হয়েছে৷ 14}}5), 35 (P > 0.05), এবং 42 (P > 0.05) ডি গ্রুপ সি (ভ্যাকসিন) এর চেয়ে বয়স।

লিম্ফোসাইট বিস্তারের উপর বি-গ্লুকানের প্রভাব

পেরিফেরাল ব্লাড লিম্ফোসাইটের বিস্তারের উপর G70 এর প্রভাব চিত্র 2A-তে দেখানো হয়েছে। ভ্যাকসিন গ্রুপের সাথে তুলনা করার সময় 7 ডি (পি < 0.05) বুস্টার ইমিউনাইজেশনে G70 (G70 + ভ্যাকসিন) এর সাথে সম্পূরক পাখিদের রক্তের লিম্ফোসাইটের SI বৃদ্ধি করা হয়েছিল। অধিকন্তু, ভ্যাকসিন গ্রুপের (চিত্র 2B) সাথে তুলনা করলে জেজুনাল লিম্ফোসাইটের এসআই উল্লেখযোগ্যভাবে 7 ডি (পি <0.05) পোস্ট-বুস্টার ইমিউনাইজেশনে বৃদ্ধি পেয়েছে।

পেরিফেরাল রক্তে সিডি4 + / সিডি8 + টি কোষের অনুপাতের উপর বি-গ্লুকানের প্রভাব 

চিত্র 3A এবং 3B লিম্ফোসাইট এবং CD3 + কোষের গেটিং নির্দেশ করে এবং চিত্র 3C থেকে 3E G7-এ CD4 + /CD8 + T কোষের অনুপাত দেখায়0, ভ্যাকসিন, এবং স্যালাইন গ্রুপ, যথাক্রমে। চিত্র 3F-তে দেখানো হয়েছে, বুস্টার ইমিউনাইজেশন (P > 0.05) এর পরে ভ্যাকসিন গ্রুপ এবং স্যালাইন গ্রুপের মধ্যে কোন উল্লেখযোগ্য পার্থক্য ছিল না, যেখানে CD4 + /CD{{12} } টি কোষ স্পষ্টতই ভ্যাকসিন গ্রুপের তুলনায় G70 (G70 + ভ্যাকসিন) গ্রুপে বেশি ছিল (P <0.05)।

চিত্র 1. এনডিভি ভ্যাকসিনের সিরাম অ্যান্টিবডি টাইটারগুলিতে বি-গ্লুকানের মৌখিক প্রশাসনের প্রভাব। ডেটা গড় § SE হিসাবে প্রকাশ করা হয়।

সম্পর্কিত জিন এক্সপ্রেশন

চিত্র 4-এ যেমন দেখানো হয়েছে, TGF-b (P < 0৷{5}}5), IL-6 (P < 0) ​​এর উল্লেখযোগ্যভাবে mRNA এক্সপ্রেশন বৃদ্ধি পেয়েছে৷{13} }5), এবং TLR5 (P < 0।{19}}5) ভ্যাকসিন গ্রুপের তুলনায় G70 (G70 + ভ্যাকসিন) দিয়ে চিকিত্সা করা মুরগির প্লীহায় সনাক্ত করা হয়েছিল। IFN-g (P > 0.05), TLR4 (P > 0.05), এবং TLR3 (P > 0.05) এর mRNA এক্সপ্রেশনে G70 (G70 + ভ্যাকসিন) এবং ভ্যাকসিনের মধ্যে প্লীহায় কোনো উল্লেখযোগ্য পার্থক্য পাওয়া যায়নি। গ্রুপ

আরএনএ সিকোয়েন্সিং ডেটা বিশ্লেষণ 

8টি প্লীহা লাইব্রেরি থেকে আরএনএর সিকোয়েন্সিং পরিপূরক উপাদানের সারণি S1-এ উপস্থাপিত হিসাবে 24.1 G কাঁচা ডেটা পেয়েছে। CN মানে গ্রুপ ভ্যাকসিন, আর HN মানে গ্রুপ G70 + ভ্যাকসিন। লাইব্রেরি C1, C2, C3, C4, H1, H2, H3, এবং H4 যথাক্রমে 45,591,492, 47,424,782, 46,193,492, 54,403,376, 47,118,476, 45,48, 45,48, 45,48, 04,438টি মূল পড়া হয়েছে। 44,050,198, 45,449,884, 44,261,112, 52,097,846, 45,542,404, 44,542,404, 44,542,404, 44,542,404, 44,542,404, 44,516,426,49,426,44,050,198, 45,449,884 রেখে, aptamer অনুসরণ করে, অস্পষ্ট ক্রম এবং নিম্ন-মানের ক্রমগুলি সরানো হয়েছিল 60টি পরিষ্কার পড়া। 96% এরও বেশি ক্লিন রিডগুলি আসল রিডগুলির মধ্যে ছিল এবং 8টি লাইব্রেরি HISAT2 ব্যবহার করে গ্যালাস জিনোম সমন্বিত একটি রেফারেন্স ডাটাবেসের বিপরীতে পাঠের অনুক্রমের জন্য মিলিত হয়েছিল। আরও, 95% এরও বেশি ক্ষেত্রে ক্লিন রিডগুলি এই ডাটাবেসে ম্যাপ করা হয়েছিল। C1, C2, C3, C4, H1, H2, H3, এবং H4 থেকে লাইব্রেরিগুলির জন্য নির্দিষ্ট ছিল 40,921,384 (92.9%), 41,302,100 (90.87%), 40,771,075 (92.11%), 46,771,075 (92.11%), 46,941,495 (46,941,495) .2 %), 40,213,444 (90.23%), 40,922,895 (92.77%), এবং 40,971,972 (93.06%) রিড যথাক্রমে রেফারেন্স ডাটাবেসে অনন্যভাবে বরাদ্দ করা হয়েছিল।

ভিন্নভাবে প্রকাশিত জিন

চিত্র 5A-তে নির্দেশিত হিসাবে, 47টি আপ-নিয়ন্ত্রিত জিন এবং 151টি ডাউন-নিয়ন্ত্রিত জিন সহ মোট 198টি ভিন্নভাবে প্রকাশিত জিন সনাক্ত করা হয়েছিল। ডিইজিগুলি পরিপূরক উপাদান সারণি এস 2 এ বিশদভাবে বর্ণনা করা হয়েছিল। চিত্র 5B ইঙ্গিত করে যে ডিইজিগুলির চিকিত্সার ভাল প্রজননযোগ্যতা রয়েছে।

জিন অন্টোলজি ক্লাসিফিকেশন এবং জিন এবং জিনোম সমৃদ্ধকরণের কিয়োটো এনসাইক্লোপিডিয়া বিশ্লেষণ

ভিন্নভাবে প্রকাশ করা জিনগুলিকে জিন অন্টোলজি (GO) শ্রেণিবিন্যাস পদ্ধতির উপর ভিত্তি করে 3টি প্রধান কার্যকরী বিভাগে শ্রেণীবদ্ধ করা হয়েছিল: জৈবিক প্রক্রিয়া, সেলুলার উপাদান এবং আণবিক ফাংশন। 3টি বিভাগে শীর্ষ 10টি GO পদগুলি চিত্র 6-এ উপস্থাপন করা হয়েছে৷ "হিউমারাল ইমিউনের প্রতিক্রিয়া," "কেমোকাইন প্রতিক্রিয়া," "অ্যান্টিমাইক্রোবিয়াল হিউমারালের প্রতিক্রিয়া," "ব্যাকটেরিয়ামের বিরুদ্ধে প্রতিরক্ষা প্রতিক্রিয়া," এর সাথে জড়িত জিনের প্রাধান্য ছিল। ""অ্যান্টিমাইক্রোবিয়াল পেপটাইড দ্বারা মধ্যস্থতাকারী অ্যান্টিমাইক্রোবিয়াল হিউমারের প্রতিরক্ষা প্রতিক্রিয়া," "গ্রাম-নেতিবাচক ব্যাকটেরিয়ামের বিরুদ্ধে প্রতিরক্ষা প্রতিক্রিয়া," এবং "গ্রাম-পজিটিভ ব্যাকটেরিয়ামের বিরুদ্ধে প্রতিরক্ষা প্রতিক্রিয়া" জৈবিক প্রক্রিয়াগুলির বিভাগে। উপরন্তু, আণবিক ফাংশনের বিভাগে, জিনের একটি উল্লেখযোগ্য অনুপাত "সিসি মোটিফ কেমোকাইন রিসেপ্টর (সিসিআর) কেমোকাইন রিসেপ্টর বাইন্ডিং," "কেমোকাইন রিসেপ্টর বাইন্ডিং," এবং "লাইপোপলিস্যাকারাইড বাইন্ডিং" এর সাথে সম্পর্কিত ছিল। তদুপরি, "মাইটোকন্ড্রিয়াল রেসপিরেটরি চেইন কমপ্লেক্স I," "NADH ডিহাইড্রোজেনেস কমপ্লেক্স," এবং "শ্বাসযন্ত্রের চেইন" ছিল কোষের উপাদান বিভাগে সবচেয়ে প্রভাবশালী সমৃদ্ধ পদ। কিয়োটো এনসাইক্লোপিডিয়া অফ জিনস এবং জিনোম পাথওয়ে বিশ্লেষণও ভিন্নভাবে প্রকাশিত জিনের উপর সঞ্চালিত হয়েছিল। ফলাফলে পরামর্শ দেওয়া হয়েছে যে জিনগুলিকে প্রধানত 7টি পথের মধ্যে বিভক্ত করা হয়েছে যার মধ্যে রয়েছে "নিউরোঅ্যাকটিভ লিগ্যান্ড-রিসেপ্টর মিথস্ক্রিয়া," "গ্যাপ জংশন," "মাইটোজেন-অ্যাক্টিভেটেড প্রোটিন কিনেস (এমএপিকে) সিগন্যালিং পাথওয়ে," "এবিসি ট্রান্সপোর্টারস," "অ্যামিনো অ্যাসিডের জৈব সংশ্লেষণ," "ড্রাগ মেটাবলিজম," এবং "প্রোটিন রপ্তানি।"

চিত্র 2. লিম্ফোসাইট স্টিমুলেটিং ইনডেক্সে (এসআই) বি-গ্লুকানের মৌখিক প্রশাসনের প্রভাব। (ক) পেরিফেরাল রক্তের লিম্ফোসাইট; (খ) অন্ত্রের লিম্ফোসাইট। ডেটা গড় § SE হিসাবে প্রকাশ করা হয়।

চিত্র 3. পেরিফেরাল রক্তের CD4+/ CD8+ কোষের অনুপাতের উপর বি-গ্লুকানের মৌখিক প্রশাসনের প্রভাব। (ক) লিম্ফোসাইটের উপর গেট; (খ) সিডি3+ টি কোষের গেট; (C) G70+ ভ্যাকসিন গ্রুপে CD3+ CD4 + CD8 + T কোষের ফ্রিকোয়েন্সি; (D) ভ্যাকসিন গ্রুপে CD3+ CD4 + CD8 + T কোষের ফ্রিকোয়েন্সি; (ঙ) স্যালাইন গ্রুপে সিডি3+ সিডি4 + সিডি8 + টি কোষের ফ্রিকোয়েন্সি; (F) বারডায়াগ্রাম CD4+/CD8+ অনুপাতের প্রতিনিধিত্ব করে। ডেটা গড় § SE হিসাবে প্রকাশ করা হয়।

চিত্র 4. মুরগির প্লীহাতে এমআরএনএ এক্সপ্রেশনে বি-গ্লুকানের মৌখিক প্রশাসনের প্রভাব। ডেটা গড় § SE হিসাবে প্রকাশ করা হয়।

চিত্র 5. RNA-Seq ডেটার সারাংশ। (A) ভিন্নভাবে প্রকাশিত জিনের তালিকা, (B) DEG-এর ক্লাস্টারিং মানচিত্র।

RT-qPCR দ্বারা ভিন্নভাবে প্রকাশ করা জিনের যাচাইকরণ

6টি ডিইজি যেগুলি আপ- বা ডাউন-নিয়ন্ত্রিত ছিল তা রিয়েল-টাইম পরিমাণগত পিসিআর দ্বারা নিশ্চিত করা হয়েছিল। ফলাফলটি পরামর্শ দিয়েছে যে RT-qPCR ডেটা সাধারণত সাধারণভাবে RNA-seq ডেটা অনুসারে ছিল, যা একটি নির্ভরযোগ্য সিকোয়েন্সিং ফলাফল নির্দেশ করে (চিত্র 7)। MAPK পাথওয়ে অ্যাসোসিয়েটেড জিনের mRNA এর অভিব্যক্তি যেমন চিত্র 8 এ দেখানো হয়েছে, FAS (P < 0।{11}}5) এবং CACNA2 (P < 0.05) এর mRNA এক্সপ্রেশন উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে। ভ্যাকসিন গ্রুপের সাথে তুলনা করলে G70 গ্রুপের (G70 + ভ্যাকসিন) মুরগির প্লীহায় সনাক্ত করা হয়। এছাড়াও, DUSP5 এবং DUSP4-এর সংখ্যাগতভাবে mRNA এক্সপ্রেশন বৃদ্ধি পেয়েছে এবং ভ্যাকসিন গ্রুপ (P > 0.05) এর সাথে তুলনা করার সময় G70 গ্রুপে (G70 + ভ্যাকসিন) p38, JNK এবং ERK-এর সংখ্যাগতভাবে কমে যাওয়া mRNA এক্সপ্রেশন সনাক্ত করা হয়েছে। .

আলোচনা

লাইভ এনডি ভ্যাকসিনটি মুরগির খামারগুলিতে ব্যাপকভাবে টিকা দেওয়া হয় এবং এখনও ইমিউনাইজড পোল্ট্রি ফ্লক্সে নিউক্যাসল রোগের বিক্ষিপ্ত প্রাদুর্ভাব রয়েছে (ঝাং এট আল।, 2022)। সর্বোত্তম ভ্যাকসিনগুলি সেলুলার এবং মিউকোসাল অনাক্রম্যতা এবং সেইসাথে কার্যকর হিউমারাল অনাক্রম্যতাকে উদ্দীপিত করার জন্য সংজ্ঞায়িত করা হয়েছে (শান এট আল।, 2019)। অতএব, সহায়কদের প্রতি আরও বেশি মনোযোগ দেওয়া হয়েছিল যা মিউকোসাল এবং সেইসাথে সেলুলার ইমিউন প্রতিক্রিয়া প্রদান করতে পারে (চেন এট আল।, 2014; ইউ এট আল।, 2015)। ইনজেকশন রুটের সাথে তুলনা করে, মৌখিক প্রশাসন একটি সহজ পদ্ধতি যা খরচ কমায় এবং ব্রয়লার মুরগির জন্য কম চাপ সৃষ্টি করে (বয়াকা এট আল।, 2003; ঝাং এট আল।, 2008)। এই গবেষণার ফলাফলগুলি দেখিয়েছে যে বি-গ্লুকানের সাথে সম্পূরক একটি খাদ্য মুরগির সিরামে এনডিভি-নির্দিষ্ট এইচআই টাইটারের মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি করেছে, যা পূর্ববর্তী প্রতিবেদনের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ (হর্স্ট এট আল।, 2019)। এনডিভি সংক্রমণ থেকে মুরগিকে রক্ষা করার জন্য হিউমারাল ইমিউন প্রতিক্রিয়ার বিকাশের জন্য এনডিভি-নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডি অপরিহার্য (মার্টিনেজ এট আল।, 2018; লি এট আল।, 2020)। বি লিম্ফোসাইটগুলি অ্যান্টিবডি তৈরি করে এবং টি লিম্ফোসাইটগুলি মাইটোজেনের প্রতিক্রিয়াতে প্রসারিত হয় (বোহাকোভা এট আল।, 2021)। বর্তমান গবেষণায়, জি 70 গ্রুপের এনডিভিতে মুরগির পেরিফেরাল ব্লাড লিম্ফোসাইটের উদ্দীপনা সূচকটি ভ্যাকসিন গ্রুপের তুলনায় স্পষ্টতই বেশি ছিল, যা নির্দেশ করে যে আরও টি লিম্ফোসাইট সক্রিয় হয়েছে। টি লিম্ফোসাইটের প্রধান উপ-জনসংখ্যা হল CD4 + এবং CD8 + টি কোষ (Cui et al., 2020)। সিডি4 + টি কোষগুলি মূলত সাইটোকাইন তৈরি করে এবং বি কোষের পরিপক্কতাকে উন্নীত করে, যেখানে সিডি8 + টি কোষগুলি লক্ষ্য কোষগুলিকে হত্যা করার সাথে জড়িত (ঝাং এট আল।, 2021বি)। এই গবেষণায়, G70 গ্রুপে শনাক্ত করা CD4 +/CD8 + T কোষগুলির অনুপাত স্পষ্টভাবে বৃদ্ধি পেয়েছিল, যা পরামর্শ দেয় যে G70 পেরিফেরাল রক্ত ​​থেকে আরও CD4 + টি কোষ সক্রিয় করতে পারে৷ উপরন্তু, আমরা ভ্যাকসিন গ্রুপের তুলনায় G70 গ্রুপে একটি উল্লেখযোগ্যভাবে উচ্চতর অন্ত্রের লিম্ফোসাইট উদ্দীপনা সূচক লক্ষ্য করেছি, যা নিশ্চিত করেছে যে বি-গ্লুকান অন্ত্রের লিম্ফোসাইটকেও উদ্দীপিত করতে পারে। আমাদের পূর্ববর্তী পরীক্ষাগুলি নিশ্চিত করেছে যে খামির কোষ প্রাচীরের নির্যাস PW220 উল্লেখযোগ্যভাবে অন্ত্র-নির্দিষ্ট sIgA এবং IgA + কোষ বৃদ্ধি করেছে (Bi et al., 2020)। অর্থাৎ, b-glucan G70 এবং PW220 উভয়ই অন্ত্রের মিউকোসাল অনাক্রম্যতা বৃদ্ধিতে কার্যকর।

পুরুষদের জন্য cistanche উপকারিতা-প্রতিরোধ ক্ষমতা শক্তিশালী করে

বি-গ্লুকান ব্যবহার করে পশুদের অনাক্রম্যতা বৃদ্ধির কথা আগেই জানা গেছে। গুও এট আল। (2003) নিশ্চিত করেছে যে বি-গ্লুকান প্রশাসন মুরগির বুর্সা এবং এনডিভি-নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডিগুলির সূচকের উন্নতি করেছে। লেভিন এট আল। (2018) পরামর্শ দিয়েছে যে বি-গ্লুকান সাপ্লিমেন্টেশন অন্ত্রের MHC Ⅱকে আপ-নিয়ন্ত্রিত করতে পারে এবং অন্ত্রের আঘাত কমাতে CD45 + কোষের সংখ্যা বাড়াতে পারে।

লি এট আল। (2005) প্রকাশ করেছে যে খাদ্যতালিকাগত বি-গ্লুকান শূকরের অন্ত্রের ট্র্যাক্টে IL-8 এবং TGF-b-এর mRNA এক্সপ্রেশন স্তরগুলিকে উন্নীত করতে পারে। বি-গ্লুকানের ইমিউনোমোডুলেটরি প্রভাবের প্রক্রিয়াটি স্পষ্ট নয়। কিম এট আল। (2010) দেখিয়েছে যে বি-গ্লুকান CD40, CD80, এবং CD86 এর অভিব্যক্তিকে আপ-নিয়ন্ত্রিত করে ডেনড্রাইটিক কোষের পরিপক্কতাকে উন্নীত করেছে৷ এছাড়াও, Lee and Kim (2014) এবং Su et al. (2020) রিপোর্ট করেছে যে বি-গ্লুকান অ্যাক্টিভেটেড প্যাটার্ন রিকগনিশন রিসেপ্টর যেমন ডেকটিন{14}} রিসেপ্টর, টোল-লাইক রিসেপ্টর, এবং CR3 (Baert et al., 2015)। ইমিউন প্রতিক্রিয়া শুরু করার জন্য প্লীহা একটি গুরুত্বপূর্ণ অঙ্গ এবং এটি সহজাত এবং অর্জিত অনাক্রম্যতা উভয় ক্ষেত্রেই অপরিহার্য ভূমিকা পালন করে (Bronte and Pittet, 2013)। যাইহোক, খামির পলিস্যাকারাইডের প্লীহা-উত্তর মৌখিক প্রশাসনে mRNA এক্সপ্রেশনের RNA-seq বিশ্লেষণের উপর ভিত্তি করে সামান্য গবেষণা রয়েছে। বর্তমান গবেষণায়, জিন এবং জিনোম পাথওয়ে বিশ্লেষণের কিয়োটো এনসাইক্লোপিডিয়া পরামর্শ দিয়েছে যে এই জিনগুলিকে প্রাথমিকভাবে 2টি পথের মধ্যে বিভক্ত করা হয়েছে, যার মধ্যে রয়েছে "নিউরোঅ্যাকটিভ লিগ্যান্ড-রিসেপ্টর মিথস্ক্রিয়া" এবং "এমএপিকে সিগন্যালিং পাথওয়ে"। বি-গ্লুকানকে লক্ষ্য করে প্যাটার্ন স্বীকৃতির জন্য রিসেপ্টরগুলি ইমিউন কোষগুলির পৃষ্ঠে সমৃদ্ধ হয়েছিল (গুডরিজ এট আল।, 2009)। বি-গ্লুকান স্বীকৃতির পরে, টাইরোসিন কিনেস এবং নিউক্লিয়ার ফ্যাক্টর কাপ্পাবি (এনএফ-কাপ্পাবি) এই রিসেপ্টরগুলি দ্বারা উদ্দীপিত হয়েছিল, যার ফলে প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি সাইটোকাইন নিঃসরণ এবং ইমিউন প্রতিক্রিয়া সক্রিয় করা হয়েছিল (কাঙ্ককুনেন এট আল।, 2010; মাসউডেট আল; ., 2012; জু এট আল।, 2016; বোডে এট আল।, 2019)। MAPK, সেরিন-থ্রোনাইন প্রোটিন কাইনেসের একটি পরিবার হিসাবে, মুরগির প্রদাহ এবং সাইটোকাইন উৎপাদনে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে। Byun এট আল. (2016) দেখিয়েছে যে বি-গ্লুকান ইন্টারফেরন-জি এবং ইন্টারলিউকিন-2 এর উত্পাদনকে উন্নত করেছে এবং পেরিটোনিয়াল ম্যাক্রোফেজে MAPK p38-এর ফসফোরিলেশনের উল্লেখযোগ্যভাবে বৃহত্তর স্তরকে ট্রিগার করেছে। ওয়াং এট আল। (2014) রিপোর্ট করেছে যে b-glucan p38 MAPK অ্যাক্টিভেশনকে বাধা দিয়ে THP-1 কোষে প্রদাহজনক প্রতিক্রিয়া কমিয়ে দেয়। এই সমীক্ষায়, DUSP4, CACNA2D1, PDGFD, PTPRR, ENSGALG00000006351, FAS, MAP2K3, MYC, DUSP5, MAX, SRF, PRKCB, এবং EGFR সহ 13টি ডিইজি MAPK-তে চিহ্নিত করা হয়েছিল, যা b-pathmunglucan প্রতিক্রিয়া ইমপ্যাথওয়ের ইঙ্গিত দিতে পারে। মুরগির মধ্যে MAPK এর মাধ্যমে প্লীহা। MAPK হল কোষে Ser/Thr kinases এর একটি সংরক্ষিত শ্রেণী যা মূলত সেলুলার প্রতিক্রিয়া যেমন ইমিউন রেসপন্স, অ্যাপোপটোসিস এবং বিস্তারের সাথে জড়িত। MAPK পরিবারে অন্তত 3টি সাবফ্যামিলি রয়েছে: c-Jun N-টার্মিনাল kinase (JNK), p38 MAPK, এবং এক্সট্রা সেলুলার সিগন্যাল-রেগুলেটেড কিনেস (ERK) (Hong et al., 2020; Zhang et al., 2021a)। DUSP4 এবং DUSP5 হল দ্বৈত-বিশিষ্ট ফসফেটেস যা P38, JNK এবং ERK-এর মতো MAPK পরিবারের সদস্যদের কার্যকলাপকে বিশেষভাবে বাধা দেয়, প্রদাহজনক অত্যধিক প্রতিক্রিয়া প্রতিরোধে এবং শরীরে প্রদাহের রিগ্রেশন প্রচারে একটি গুরুত্বপূর্ণ নিয়ামক ভূমিকা পালন করে (ইমাসাটো এট আল ., 2002; তালরেজা এট আল।, 2021)। উপরন্তু, gga-miR-200a-3p নামের একটি ছোট নন-কোডিং আরএনএ প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি ফ্যাক্টরগুলির প্রকাশকে দমন করার জন্য রিপোর্ট করা হয়েছে এবং এইভাবে MAPK পথকে নেতিবাচকভাবে নিয়ন্ত্রণ করে হোস্ট অটোইমিউন প্রতিক্রিয়া নিয়ন্ত্রণ করে। এবং এর ডাউনস্ট্রিম সিগন্যালিং অণু (ফাম এট আল।, 2017)। বর্তমান সমীক্ষায়, RT-qPCR বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে P38, JNK এবং ERK-এর mRNA এক্সপ্রেশন কমেছে এবং বি-গ্লুকান (G70) খাওয়ানো মুরগিতে DUSP4 এবং DUSP5-এর mRNA এক্সপ্রেশন বেড়েছে। এই ফলাফলগুলি পরামর্শ দেয় যে নিউক্যাসল রোগের ভ্যাকসিনে বি-গ্লুকান (G70) এর প্রতিরোধ ক্ষমতা বৃদ্ধিকারী প্রভাব MAPK-এর মাধ্যমে মধ্যস্থতাকারী প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি কারণগুলির নেতিবাচক প্রতিক্রিয়া নিয়ন্ত্রণের সাথে সম্পর্কিত হতে পারে। উপরন্তু, এফএএস একটি অপরিহার্য পদার্থ যা অ্যাপোপটোসিসকে মধ্যস্থতা করে এবং ইমিউন হোমিওস্টেসিসের জন্য অত্যাবশ্যক (ক্রুগার এট আল।, 2003; গুয়েগান এবং লেজেমব্রে, 2018)। এদিকে, CACNA2 হল একটি ভোল্টেজ-নির্ভর ক্যালসিয়াম চ্যানেল সাবুনিট, যা কোষের বিস্তার, স্থানান্তর এবং আক্রমণের উপর প্রচারমূলক প্রভাব ফেলে (সান এট আল।, 2020)। এই গবেষণায়, বি-গ্লুকান (G70) এর সাথে সম্পূরক মুরগির মধ্যে FAS এবং CACNA2 উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে, যা নির্দেশ করে যে বি-গ্লুকান (G70) প্রধানত ইমিউন সেল অ্যাপোপটোসিসকে বাধা দিয়ে এবং অটোইমিউনিটি ভারসাম্য করে রোগ প্রতিরোধ ক্ষমতা বৃদ্ধিকারী প্রভাব প্রয়োগ করে। এই ফলাফলগুলি ক্লিনিকাল সেটিংসে ইমিউন বর্ধক হিসাবে বি-গ্লুকান (G70) ব্যবহারের জন্য একটি তাত্ত্বিক রেফারেন্স প্রদান করে। যাইহোক, MAPK পাথওয়ের নেতিবাচক প্রতিক্রিয়া প্রভাবের মাধ্যমে বি-গ্লুকান প্রতিরোধ ক্ষমতা বাড়ানোর প্রক্রিয়াটির আরও প্রমাণ প্রয়োজন। এটি লক্ষ্য করা আকর্ষণীয় যে CATH3, CATH1, CATH2, এবং AvBD6, AvBD7, AvBD1 এবং AvBD4 সহ জিন এনকোডিং বি-ডিফেনসিন সমন্বিত ক্যাথেলিসিডিন এনকোডিং জিনগুলি H (গ্রুপ G{104} ভ্যাকসিন) তুলনাতে উল্লেখযোগ্যভাবে নিম্ন-নিয়ন্ত্রিত ছিল বনাম নিয়ন্ত্রণ (গ্রুপ ভ্যাকসিন)। হোস্ট ডিফেন্স পেপটাইডস (এইচডিপি) হল ইফেক্টর অণু যা সহজাত ইমিউন সিস্টেমে একটি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা রাখে (কিউপেরাস এট আল।, 2013)। এই পেপটাইডগুলি স্তন্যপায়ী থেকে পাখি পর্যন্ত বিভিন্ন প্রাণী প্রজাতির মধ্যে আবিষ্কৃত হয়েছে। CATH1, CATH2, CATH3 এবং CATHB1 সমন্বিত ছানাগুলিতে 4টি ক্যাথেলিসিডিন রয়েছে, যা কার্যকরভাবে বিভিন্ন ব্যাকটেরিয়াকে মেরে ফেলে (হামাদ এট আল।, 2017)। এভিয়ান বিটা-ডিফেনসিন (এভিবিডি), বিকল্পভাবে গ্যালিনেসিয়ান নামে পরিচিত, ছোট ক্যাটানিক পেপটাইড যা তাদের সিস্টাইনের অবশিষ্টাংশের মধ্যে 3টি সিস্টাইন ডাইসালফাইড বন্ধন এবং সহজাত প্রতিরোধ ব্যবস্থায় গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে (ইয়োশিমুরা, 2015)। ক্যাথেলিসিডিন এবং বিটা-ডিফেনসিনের প্রকাশের হ্রাস সম্ভবত প্রতিক্রিয়া নিয়ন্ত্রণ দ্বারা ব্যাখ্যা করা হয়েছিল, যেখানে ব্যাকটেরিয়া এবং প্যারাব্যাকটেরিয়াল জনসংখ্যা খামির কোষ প্রাচীর পলিস্যাকারাইড দ্বারা হ্রাস করা হয়েছিল (Bi et al., 2020)। অন্যান্য গবেষণায় অনুরূপ ফলাফল প্রকাশিত হয়েছে। শাও এট আল। (2016) দেখিয়েছে যে ব্রয়লার মুরগিতে খামির বি-গ্লুকানের পরিপূরক সালমোনেলা সংক্রমণকে দমন করে এবং পরিমাণগত রিয়েল-টাইম পিসিআর বিশ্লেষণের মাধ্যমে এইচডিপি-এর অভিব্যক্তি হ্রাস করে। এই সমীক্ষায়, প্রধানত বি-গ্লুকান দ্বারা গঠিত একটি পণ্য G70 সিরামে এনডিভি-নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডির মাত্রা বাড়িয়েছে, পেরিফেরাল রক্তের লিম্ফোসাইট এবং অন্ত্রের লিম্ফোসাইটের এনডিভি উদ্দীপনা সূচক বাড়িয়েছে এবং পেরিফেরাল রক্তের টি লিম্ফোসাইটের পার্থক্যকে উন্নীত করেছে 123}} টি কোষ। উপরন্তু, RNA-seq বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে G70 জি-প্রোটিন কাপলড সেরোটোনিন রিসেপ্টর এবং MHC ক্লাস I পলিপেপটাইড সম্পর্কিত mRNA এক্সপ্রেশনগুলিকে নিয়ন্ত্রণ করেছে এবং ক্যাথেলিসিডিন এবং বিটা-ডিফেনসিন সম্পর্কিত mRNA এক্সপ্রেশনগুলিকে কমিয়েছে। মুরগির এনডি ভ্যাকসিনের উপর G70 এর বর্ধিত প্রভাব বিবেচনা করে, অন্যান্য পোল্ট্রি ভ্যাকসিন যেমন এভিয়ান ইনফ্লুয়েঞ্জা ভ্যাকসিনের উপর G70 এর প্রভাব আরও অধ্যয়ন করা যেতে পারে।

চিত্র 6. কেইজিজি পাথওয়ে বিশ্লেষণ।

চিত্র 7. নির্বাচিত ডিইজি প্রার্থীদের RT-qPCR নিশ্চিতকরণ। ডেটা গড় § SE হিসাবে প্রকাশ করা হয়।

চিত্র 8. প্লীহায় আপেক্ষিক mRNA অভিব্যক্তি। প্লীহা থেকে মোট আরএনএ বের করা হয়েছিল। মুরগির বি-অ্যাক্টিন অভ্যন্তরীণ নিয়ন্ত্রণ জিন হিসাবে পরিবেশন করা হয়েছিল। ডেটা গড় § SE হিসাবে প্রকাশ করা হয়।

তথ্যসূত্র

Baert, K., E. Sonck, BM Goddeeris, B. Devriendt, এবং E. Cox. 2015. পোরসিন সহজাত ইমিউন কোষে বি-গ্লুকান স্বীকৃতি এবং সংকেত দেওয়ার ক্ষেত্রে কোষের প্রকার-নির্দিষ্ট পার্থক্য। দেব। Comp. ইমিউনল। 48:192-203।

বল, সি., এ. ফরেস্টার, এ. হারম্যান, এস. লেমিয়ের এবং কে. গণপতি। 2019. তুলনামূলক প্রতিরক্ষামূলক অনাক্রম্যতা নিউক্যাসল ডিজিজ ভাইরাস বা এভিয়ান মেটাপনিউমোভাইরাসের লাইভ ভ্যাকসিন দ্বারা সরবরাহ করা হয় যখন দিনের বয়সী ব্রয়লার ছানাগুলিতে সংক্রামক ব্রঙ্কাইটিস ভাইরাসের শাস্ত্রীয় এবং বৈকল্পিক স্ট্রেনের সাথে সহ-প্রশাসিত হয়। টিকা। 37:7566–7575।

Bi, S., J. Zhang, Y. Qu, B. Zhou, X. He, এবং J. Ni. 2020. খামির কোষ প্রাচীর পণ্য অন্ত্রের IgA প্রতিক্রিয়া উন্নত করেছে এবং মুরগির মৌখিক টিকা দেওয়ার পরে সেকাম মাইক্রোফ্লোরা প্রজাতির পরিবর্তন করেছে। পোল্ট বিজ্ঞান 99:6576–6585।

Bi, S., J. Zhang, L. Zhang, K. Huang, J. Li, এবং L. Cao. 2022. ইস্ট সেল প্রাচীর নিউক্যাসল ডিজিজ ভাইরাস ভ্যাকসিনের জন্য কোষ-মধ্যস্থতা প্রতিরোধী প্রতিক্রিয়াগুলিকে নিয়ন্ত্রণ করে। পোল্ট বিজ্ঞান 101:101712–101721।

বোডে, কে., এফ. বুজুপি, সি. লিংক, টি. হেইন, এস. জিমারম্যান, ডি. পেইরিস, ভি. জ্যাকেট, বি. লেপেনিস, এইচ. ওয়েইড, এবং পিএইচ ক্র্যামার। 2019. ডেকটিন-1 অ্যাপোপটোটিক কোষে অ্যানেক্সিনের সাথে আবদ্ধ হওয়া NADPH অক্সিডেসের মাধ্যমে পেরিফেরাল ইমিউন সহনশীলতাকে প্ররোচিত করে-2। সেল। Rep. 29:4435–4446.

বোহাকোভা, পি., জে. কোসল, এম. হাজকোভা, বি. হারমানকোভা, ভি. হোলান, এবং ই. জাভোরকোভা। 2021. R-phycoerythrin-conjugated অ্যান্টিবডিগুলির অ-নির্দিষ্ট বাঁধনে মাইটোজেন-উদ্দীপিত B এবং T কোষের মধ্যে পার্থক্য। জে. ইমিউনল। পদ্ধতি। 493:113013–113023।

Boyaka, PN, A. Tafaro, R. Fischer, K. Fujihashi, E. Jirillo, এবং JR McGhee। 2003. ইমিউন সিস্টেমের থেরাপিউটিক ম্যানিপুলেশন: সহজাত এবং অভিযোজিত মিউকোসাল অনাক্রম্যতা বৃদ্ধি। কার ফার্ম। ডিজাইন। 9:1965-1972।

ব্রোন্ট, ভি., এবং এমজে পিটেট। 2013. অনাক্রম্যতার স্থানীয় এবং পদ্ধতিগত নিয়ন্ত্রণে প্লীহা। রোগ প্রতিরোধ ক্ষমতা। 39:806-818।

ব্যুন, ই., এস. পার্ক, বি. জ্যাং, এন. সুং এবং ই. বায়ুন। 2016. গামা-বিকিরণিত বি-গ্লুকান MAPK এবং NF-kB পথের মাধ্যমে ইমিউনোমোডুলেশন এবং অ্যান্টিক্যান্সার কার্যকলাপকে প্ররোচিত করে। J. Sci. খাদ্য. কৃষি 96:695-702।

চেন, এক্স., এক্স. চেন, এস. কিউ, ওয়াই হু, সি. জিয়াং, ডি. ওয়াং, কিউ. ফ্যান, সি. ঝাং, ওয়াই হুয়াং, ওয়াই. ইউ, এইচ. ইয়াং, সি. লিউ, জেড গাও, আর. হাউ, এবং এক্স লি। 2014. মুরগির মিউকোসাল অনাক্রম্যতার উপর এপিমিডিয়াম পলিস্যাকারাইড-প্রপোলিস ফ্ল্যাভোন ওরাল লিকুইডের প্রভাব। int. জে. বিওল। ম্যাক্রোমল। 64:6-10।

কুই, এক্স., ওয়াই ওয়াং, আর. গুয়ান, এম. লু, এল. ইউয়ান, ডব্লিউ জু এবং এস. হু। 2020. একটি উদ্ভিজ্জ তেল সহকারীতে ইমালসিফাইড হু ভেড়া থেকে পা-ও-মুখ রোগের ভ্যাকসিনের সিরাম প্রোটিওমিক বিশ্লেষণের সাথে বর্ধিত প্রতিরোধ ক্ষমতা। টিকা. 8:180-197

কিউপেরাস, টি., এম. কুরেন্স, এ. ভ্যান ডাইক এবং এইচপি হ্যাগসম্যান। 2013. এভিয়ান হোস্ট প্রতিরক্ষা পেপটাইড। দেব। Comp. ইমিউনল। 41:352-369।

গুডরিজ, এইচএস, এজে উলফ এবং ডিএম আন্ডারহিল। 2009. সহজাত ইমিউন সিস্টেম দ্বারা বিটা-গ্লুকান স্বীকৃতি। ইমিউনল। রেভ. 230:38-50।

গুইগান, জে., এবং পি. লেগেমব্রে। 2018. ইমিউন রেসপন্সে Fas/ CD95 এর নোনাপোপ্টোটিক ফাংশন। FEBS J 285:809–827।

গুও, ওয়াই., আরএ আলী, এবং এম এ কোরেশি। 2003. ব্রয়লার ছানাদের রোগ প্রতিরোধ ক্ষমতার উপর বিটা-গ্লুকানের প্রভাব। ইমিউনোফার্ম। ইমিউনল। 25:461-472।

হামাদ, এসকে, এস. কিম, এসডব্লিউ এল-কাদি, ইএ ওং এবং আরএ ডালউল। 2017. টার্কি পোল্টে হোস্ট ডিফেন্স পেপটাইডের তুলনামূলক অভিব্যক্তি। পোল্ট বিজ্ঞান 96:2083–2090।

হেস্টেড, টি., এস. শরীফ, পি. বোয়েরলিন, এবং এমএস ডায়রা। 2021. পোল্ট্রিতে ফল এবং তাদের নির্যাসের ইমিউনোস্টিমুলেটরি সম্ভাবনা। সামনে। ইমিউনল। 12:641696।

Hong, Y., J. Lee, TH Vu, S. Lee, HS Lillehoj, এবং YH Hong. 2020. চিকেন এভিয়ান বি-ডিফেনসিন 8 একটি মুরগির ম্যাক্রোফেজ সেল লাইনে মাইটোজেন-অ্যাক্টিভেটেড প্রোটিন কিনেস সিগন্যালিং পাথওয়ের মাধ্যমে ইমিউন রেসপন্স মডিউল করে। পোল্ট বিজ্ঞান 99:4174–4182।

হর্স্ট, জি., আর. লেভিন, আর. চিক, এবং সি. হোফাক্রে। 2019. ব্রয়লার মুরগিতে টিকা দেওয়ার প্রতিক্রিয়ার উপর বিটা- 1,3-গ্লুকান (AletaTM) এর প্রভাব। পোল্ট বিজ্ঞান 98:1643–1647।

ইমাসাতো, এ., সি. ডেসবোইস-মাউথন, জে. হান, এইচ. কাই, এসিবি ক্যাটো, এস. আকিরা, এবং জে. লি। 2002. এমএপিকে ফসফেটেস ইনডাকশনের মাধ্যমে গ্লুকোকোর্টিকয়েড দ্বারা p38 MAPK-এর বাধা-1 টোল-সদৃশ রিসেপ্টরের ননটাইপযোগ্য হিমোফিলাস প্রভাব-প্ররোচিত অভিব্যক্তিকে বাড়িয়ে তোলে 2. জে. বায়োল। কেম। 277:47444–47450।

কাঙ্ককুনেন, পি., এল. তেরিলা, জে. রিন্টাহাকা, এইচ. অ্যালেনিয়াস, এইচ. উলফ এবং এস. মাটিকাইনেন। 2010. (1,3)-বিটা-গ্লুকান মানব ম্যাক্রোফেজে ডেকটিন-1 এবং NLRP3 ইনফ্ল্যামাসোম উভয়কেই সক্রিয় করে। জে. ইমিউনল। 184:6335–6342।

কিম, এইচএস, জেওয়াই কিম, এইচকে লি, এমএস কিম, এসআর লি, জেএস ক্যাং, এইচএম কিম, কে. লি, জেটি হং, ওয়াই কিম এবং এস. হান। 2010. umbilicaria esculenta থেকে বিচ্ছিন্ন গ্লুকান দ্বারা ডেনড্রাইটিক কোষ সক্রিয়করণ। ইমিউন। Netw. 10:188-197।

ক্রুগার, এ., এসসি ফাস, এস. বাউম্যান এবং পিএইচ ক্রামার। 2003. পেরিফেরাল টি-সেল অ্যাপোপটোসিস নিয়ন্ত্রণে CD95 এর ভূমিকা। ইমিউনল। রেভ. 193:58-69।