অটোসোমাল ডমিন্যান্ট পলিসিস্টিক কিডনি রোগের জন্য সৌনা কি উপকারী বা ক্ষতিকারক? মডেল মাউস দিয়ে পরীক্ষা

বিমূর্ত পটভূমি: 

হিট শক প্রোটিন (এইচএসপিএস), যার অভিব্যক্তি তাপ চিকিত্সা দ্বারা প্ররোচিত হয়, কিডনির সুরক্ষায় কাজ করেঅ্যাপোপটোসিস দমনএবংরেনাল টিউবুলার কার্যক্ষমতা বজায় রাখা. অধিকন্তু, সম্প্রতি, এটি ইঙ্গিত করা হয়েছে যে Hsps-এর অভিব্যক্তি অটোসোমালের জন্য একটি থেরাপিউটিক লক্ষ্য হতে পারেপ্রভাবশালীপলিসিস্টিক কিডনি রোগ(ADPKD)। আমরা শুষ্ক সনা থেরাপির প্রভাব তদন্ত করেছিADPKDমডেল ইঁদুর।

কিডনির কার্যকারিতার জন্য 25% ইচিনাকোসাইড এবং 9% অ্যাকটিওসাইড সহ প্রাকৃতিক জৈব সিস্টানচে নির্যাস পেতে এখানে ক্লিক করুন

ইমেল:Wallence.Suen@Wecistanche.Com

Whatsapp/টেল:+86 15292862950

আরও স্পেসিফিকেশন বিশদ বিবরণের জন্য কেনাকাটা করুন:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

পদ্ধতি এবং ফলাফল:

ইঁদুরগুলিকে (পুরুষ DBA/2FG-পে ইঁদুর) তিনটি গ্রুপে শ্রেণীবদ্ধ করা হয়েছিল: নিয়ন্ত্রণ, TS: pcy ইঁদুরগুলি 4% সুক্রোজযুক্ত প্রশাসিত জলের সাথে দীর্ঘায়িত সৌনার শিকার, SW: pcy ইঁদুরগুলি 4% সুক্রোজযুক্ত জল দিয়ে। টিএস গ্রুপটি চার সপ্তাহের জন্য সপ্তাহে দুবার সনা সেশনের শিকার হয়েছিল। টিএস গ্রুপটি প্রায় 39।{5}} ডিগ্রী রেকটাল তাপমাত্রায় অর্জন করেছে এবং রক্ষণাবেক্ষণ করা হয়েছে, যতক্ষণ না সেগুলি দূরবর্তী ইনফ্রারেড-রশ্মি ডিভাইস থেকে সাবধানে সরানো হয়। সনা চিকিত্সার 4 সপ্তাহ পরে, ক্রিয়েটিনিন এবং রক্তে-ইউরিয়া-নাইট্রোজেন (BUN) স্তরগুলি একটি এনজাইমেটিক পদ্ধতি দ্বারা নির্ধারিত হয়েছিল। হিট শক প্রোটিন (এইচএসপি) বা কোষের বৃদ্ধি এবং আকার-সম্পর্কিত প্রোটিনগুলি ওয়েস্টার্ন ব্লটিং দ্বারা বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। টিএস গ্রুপ নিয়ন্ত্রণ এবং SW গ্রুপের তুলনায় সামান্য উচ্চ ক্রিয়েটিনিন এবং BUN স্তর প্রদর্শন করেছে, তবে পার্থক্যগুলি উল্লেখযোগ্য ছিল না। যাইহোক, টিএস গ্রুপে সিস্টের বৃদ্ধি নিয়ন্ত্রণ গ্রুপের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে। HSP90 এক্সপ্রেশন টিএস এবং এসডব্লিউ গ্রুপে কন্ট্রোল গ্রুপের সাপেক্ষে সামান্য হ্রাস পেয়েছে (p < 0।{16}}1 বা p <0.001, বনাম নিয়ন্ত্রণ), যেমনটি ছিল Erk এক্সপ্রেশন , যা সিস্টের বিকাশ এবং বিস্তারের সাথে যুক্ত (p <0.05, TS বনাম নিয়ন্ত্রণ)। SW গ্রুপে Hsp27 এক্সপ্রেশন এবং ফসফোরিলেশন স্তর নিয়ন্ত্রণ গ্রুপের সাথে তুলনীয় ছিল। যাইহোক, টিএস গ্রুপ Hsp27 এবং ফসফোরিলেশন (NS) এর মাত্রা বাড়িয়েছে। TS গ্রুপে প্রো-ক্যাসপেসের অভিব্যক্তি-3 কন্ট্রোল গ্রুপের তুলনায় সামান্য কম ছিল। যাইহোক, সমস্ত গ্রুপে ক্যাসপেসের কার্যকলাপ-3 কোনো পার্থক্য দেখায়নি।

উপসংহার: এই গবেষণার ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে 4 সপ্তাহের sauna চিকিত্সা ক্ষণস্থায়ী ডিহাইড্রেশন এবং সম্পর্কিত রেনাল কর্মহীনতার কারণ হতে পারে এবং Hsp27 এক্সপ্রেশন বৃদ্ধির দ্বারা সিস্টের বৃদ্ধিকে উদ্দীপিত করার ঝুঁকির দিকে পরিচালিত করে। অধিকন্তু, আমরা উপসংহারে পৌঁছেছি যে ডিহাইড্রেশন এবং সিস্টের বৃদ্ধি রোধ করা যেতে পারে সরাসরি সানা চিকিত্সার পরে উপযুক্ত পরিমাণে জল গ্রহণ করে।

কীওয়ার্ড:অটোসোমাল প্রভাবশালী পলিসিস্টিককিডনি রোগ, sauna, জল খাওয়া, Hsp90, Hsp27

সূচনা

অটোসোমাল প্রভাবশালীপলিসিস্টিক কিডনি রোগ(ADPKD) একটি জেনেটিক ব্যাধি যা উভয় কিডনিতে অসংখ্য সিস্টের বৃদ্ধি দ্বারা চিহ্নিত করা হয়। ADPKD প্রধানত মধ্যে মিউটেশন দ্বারা সৃষ্ট হয়পলিসিস্টিক কিডনি রোগ1 (PKD1) এবং PKD2 জিন, যা যথাক্রমে পলিসিস্টিন 1 (PC1) এবং PC2 এনকোড করে। রোগের দশক-দীর্ঘ কোর্সে, রোগীদের বড় তরল-ভরা রেনাল সিস্ট তৈরি হয় যা কিডনির কার্যকারিতা নষ্ট করে। বর্তমানে, জাপানে ADPKD আক্রান্ত রোগীর সংখ্যা 31,000, যা সমস্ত ডায়ালাইসিস রোগীর প্রায় 3-5%)। ADPKD আক্রান্ত রোগীদের প্রায় 50% 602 বছর বয়সের মধ্যে শেষ পর্যায়ে কিডনি রোগে আক্রান্ত হয়)। Tolvaptan, একটি ভাসোপ্রেসিন রিসেপ্টর 2 (V2) বিরোধী, ADPKD-এর জন্য প্রথম থেরাপিউটিক এজেন্ট হিসাবে অনুমোদিত হয়েছিল এবং এর ক্লিনিকাল ব্যবহার মে 2014 সালে জাপানে শুরু হয়েছিল)। যদিও এটি একটি কার্যকর ওষুধ যা সিস্টের বৃদ্ধির হার কমায়, বর্তমানে ADPKD এর কোনো প্রতিকার নেই এবং কিডনিতে সিস্ট গঠন বন্ধ করা সম্ভব নয়।

থার্মাল থেরাপি, সহbalneotherapy(বিটি) এবংস্পা থেরাপি(ST), প্রায়শই বিশ্বব্যাপী ফিজিওথেরাপি বা বিকল্প থেরাপি হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছে। ক্লিনিকাল সেটিংসে, থার্মাল থেরাপির প্রধান উদ্দেশ্য হল স্বাভাবিক টিস্যু ক্ষতি না করে কার্যকরী চিকিত্সার ফলাফল অর্জন করা। একটি সাম্প্রতিক পদ্ধতিগত পর্যালোচনা দেখায় যে BT এবং ST পেশীবহুল সিস্টেম বা সংযোগকারী টিস্যুর দীর্ঘস্থায়ী রোগে উল্লেখযোগ্য ব্যথা উপশম এবং জীবনযাত্রার মান উন্নত করে)। তাপ উদ্দীপনা তাপ শক প্রোটিন (Hsps) প্ররোচিত করে যা প্রোটিন চ্যাপেরোন হিসাবে তাদের কার্যের মাধ্যমে কোষের বেঁচে থাকার জন্য অপরিহার্য। কিডনি স্বাস্থ্য এবং রোগের ক্ষেত্রে Hsps এর ভূমিকা পরিবর্তনশীল। Hsps আনয়ন কিডনির জন্য উপকারী বা ক্ষতিকর হতে পারে, নির্দিষ্ট Hsps, কোষের ধরন এবং প্রসঙ্গের উপর নির্ভর করে)। কিডনি টিস্যুতে, এইচএসপিএস হল অন্তঃকোষীয় প্রতিরক্ষা ব্যবস্থার একটি গুরুত্বপূর্ণ অংশ, যা বিভিন্ন ধরণের সেলুলার স্ট্রেস দ্বারা সক্রিয় হয়। কোষের অভ্যন্তরে বিভিন্ন Hsps কোষের গঠনকে স্থিতিশীল করে এবং অ্যাপোপটোসিস এবং নেক্রোসিসের বিরুদ্ধে কোষের প্রতিরোধ ক্ষমতা বাড়ায়6), 7)। সাম্প্রতিক বছরগুলিতে, এটি রিপোর্ট করা হয়েছে যে এইচএসপিএস ADPKD-তে একটি ক্ষতিকারক ভূমিকা পালন করে এবং তাই থেরাপিউটিক লক্ষ্যগুলি 8), 9)। তাই, আমরা ADPKD মডেলের প্রাণীদের উপর saunas-এর প্রভাব তদন্ত করার লক্ষ্য রেখেছিলাম, যখন তাপ লোড যা মলদ্বারের তাপমাত্রা প্রায় 2 ডিগ্রী বাড়িয়ে দেয় এবং প্রায় 30 মিনিটের জন্য এটি বজায় রাখে তখন পুনরাবৃত্তি হয়।

II উপকরণ এবং পদ্ধতি

1. অটোসোমাল ডমিনেন্ট পলিসিস্টিক কিডনি ডিজিজ (ADPKD) মডেল মাউস কুমামোটো হেলথ সায়েন্স ইউনিভার্সিটি (নং 18-07) দ্বারা অনুমোদিত ল্যাবরেটরি প্রাণীদের যত্ন ও ব্যবহারের নির্দেশিকা অনুসারে সমস্ত প্রাণী পদ্ধতি পরিচালিত হয়েছিল৷ পুরুষ DBA/2FG-pcy (pcy) ইঁদুর 10), 11) (8 সপ্তাহ বয়সী, n=12) (Kyudo, Kumamoto, Japan) প্রাথমিক শরীরের ওজন 20.9±0.7 গ্রাম হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল এই পরীক্ষায় ADPKD মডেল ইঁদুর। ADPKD মাউস মডেলের রেফারেন্স হিসাবে পুরুষ DBA ইঁদুর (8 সপ্তাহ, n=3) ব্যবহার করা হয়েছিল। চিত্র 1 pcy ইঁদুরের সাধারণ উদাহরণ হিসাবে চেহারা এবং এক্সাইজড কিডনি দেখায় (চিত্র 1A, B)। সমস্ত প্রাণীকে 12:{17}}ঘণ্টার আলো/অন্ধকার চক্রের সাথে নিয়ন্ত্রিত আর্দ্রতা এবং তাপমাত্রার অধীনে রাখা হয়েছিল এবং স্ট্যান্ডার্ড মাউস চাউ এবং ট্যাপের জলে বিনামূল্যে অ্যাক্সেস দেওয়া হয়েছিল।

নয়টি পিসি ইঁদুর (8 সপ্তাহের বয়সী) এলোমেলোভাবে নিম্নলিখিত তিনটি গ্রুপে বিভক্ত ছিল- নিয়ন্ত্রণ গ্রুপ: নিয়ন্ত্রণ হিসাবে pcy ইঁদুর (n=3), TS গ্রুপ: pcy ইঁদুরগুলি বারবার সিস্টেমিক তাপীয় উদ্দীপনার সংস্পর্শে আসে (n {{3}) }); এবং SW গ্রুপ: pcy ইঁদুর যেগুলিকে 4% সুক্রোজ (n=3) ধারণকারী জল সরবরাহ করা হয়েছিল। ডিহাইড্রেশন প্রতিরোধ করার জন্য সিস্টেমিক তাপীয় উদ্দীপনা অনুসরণ করে টিএস গ্রুপের ইঁদুরগুলিকে রাতারাতি 4% সুক্রোজযুক্ত জল সরবরাহ করা হয়েছিল। পূর্ববর্তী একটি গবেষণায়, আমরা দেখেছি যে সিস্টেমিক থার্মাল স্টিমুলেশনের পরে শরীরের ওজন হ্রাস প্রায় 3-4% ছিল)। যখন pcy ইঁদুরকে 4% সুক্রোজ জল দেওয়া হয়েছিল, তখন খাওয়া জলের পরিমাণ উল্লেখযোগ্যভাবে বেড়েছে 5.6 ± 0.6 মিলি থেকে 7.4 ± 0.7 মিলি (p < 0.001) , চিত্র 1C)। রাতারাতি 4% সুক্রোজ জল গ্রহণ প্রকৃতপক্ষে শরীরের ওজনের 14 ± 7% এর সমতুল্য উচ্চতর তরল গ্রহণ ছিল। এসডব্লিউ গ্রুপ টিএস গ্রুপের মতো একই ফ্রিকোয়েন্সিতে রাতারাতি জল খেয়েছিল।

2. সিস্টেমিক থার্মাল স্টিমুলেশন (সনা)

sauna এর তাপের তীব্রতা পূর্ববর্তী গবেষণায় সেট করা হয়েছিল13)। যাইহোক, সাধারণ DBA ইঁদুর এবং 129X1/SvJ ইঁদুরের তুলনায় তাদের শরীরের আয়তন ছোট হওয়ায় কিছু pcy ইঁদুরের মলদ্বারের তাপমাত্রা 42 ডিগ্রি ছাড়িয়ে গেছে। অতএব, মলদ্বারের তাপমাত্রা 1 ডিগ্রি বাড়ানোর চেষ্টা করা হয়েছিল, কিন্তু দূরবর্তী ইনফ্রারেড-রে ড্রাই সনা সিস্টেমের (কাগোশিমা বিশ্ববিদ্যালয় দ্বারা সরবরাহিত) নিয়ন্ত্রণের সীমাবদ্ধতার কারণে, মলদ্বারের তাপমাত্রা প্রায় 39 ডিগ্রিতে বাড়ানোর জন্য সেট করা হয়েছিল। ADPKD এর জন্য সাউ নাসের ফ্রিকোয়েন্সি সম্পর্কে কোন রিপোর্ট পাওয়া যায়নি; অতএব, লাউকানেন এট আল.১৪ দ্বারা সনা স্নান এবং কার্ডিওভাসকুলার রোগ এবং মৃত্যুর অন্যান্য কারণগুলির মধ্যে সম্পর্কের উপর একটি গবেষণায় প্রতিষ্ঠিত ন্যূনতম কার্যকর সনা ফ্রিকোয়েন্সি (দুইবার/সপ্তাহ) গৃহীত হয়েছিল। বিশেষত, ইঁদুরগুলি মলদ্বারের তাপমাত্রা 37.1 ± 0.1 ডিগ্রি থেকে 39.3 ± 0.3 ডিগ্রিতে উন্নীত করার জন্য দশ মিনিটের জন্য 43 ডিগ্রিতে এবং তারপরে 37 ডিগ্রিতে 35 মিনিটের জন্য সনা চিকিত্সা গ্রহণ করে। দূর অবলোহিত রশ্মি শুকনো sauna সিস্টেম. ইঁদুরের মলদ্বারের তাপমাত্রা প্রায় 39৷{20}} ডিগ্রীতে রক্ষণাবেক্ষণ করা হয়েছিল যতক্ষণ না তাদের sauna ডিভাইস থেকে বের করা হয়৷ টিএস গ্রুপটি সপ্তাহে দুবার চার সপ্তাহের জন্য সনাতে উন্মুক্ত ছিল।

3. বিশ্লেষণাত্মক পদ্ধতি

চার সপ্তাহের অধ্যয়ন সময়ের শেষে সমস্ত ইঁদুর থেকে শারীরবৃত্তীয় ডেটা প্রাপ্ত হয়েছিল। বিপাকীয় খাঁচায় চব্বিশ ঘন্টা প্রস্রাবের নমুনা সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং তরল গ্রহণ নির্ধারণ করা হয়েছিল। নিম্নতর ভেনা কাভা থেকে রক্তের নমুনা সংগ্রহ করা হয়েছিল, এবং প্লাজমা ক্রিয়েটিনিন এবং রক্তের ইউরিয়া নাইট্রোজেন (BUN) এর মাত্রা হিটাচি 7180 বায়োকেমিস্ট্রি স্বয়ংক্রিয় বিশ্লেষক (হিটাচি হাই-টেকনোলজি কর্পোরেশন, টোকিও, জাপান) অ্যাকোয়া-অটো কাইনোস সিআরই-এর সাহায্যে পরিমাপ করা হয়েছিল। -II টেস্ট কিট বা UN-II টেস্ট কিট (কাইনোস, টোকিও, জাপান) এনজাইমেটিক পদ্ধতি ব্যবহার করে।

4. হিস্টোলজিকাল স্টাডিজ

কিডনিগুলিকে 4% প্যারাফর্মালডিহাইড ফসফেট বাফার দ্রবণ দিয়ে স্থির করা হয়েছিল এবং প্যারাফিনে এম্বেড করা হয়েছিল। কিডনির নমুনাগুলিকে 2-µm ব্যবধানে ভাগ করা হয়েছিল এবং হেমাটোক্সিলিন এবং ইওসিন (H&E) দিয়ে দাগ দেওয়া হয়েছিল, এবং ইমেজজে (ন্যাশনাল ইনস্টিটিউট অফ হেলথ, বেথেসডা, মেরিল্যান্ড,) ব্যবহার করে টিউবুলের সিস্টগুলি 2 টি বিভাগ/মাউস (ডান কিডনি) এ পরিমাপ করা হয়েছিল। আমেরিকা). টিস্যু টিয়ার এবং বুদবুদ সহ এলাকাগুলি যা উচ্চতর বিবর্ধন (× 40) এ চিহ্নিত করা হয়েছিল বিশ্লেষণ থেকে বাদ দেওয়া হয়েছিল, যেমন পূর্বে রিপোর্ট করা হয়েছিল15)।

5. ওয়েস্টার্ন ব্লটিং

সোডিয়াম ডোডেসিল সালফেট-পলিঅ্যাক্রিলামাইড জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস (এসডিএস-পেজ) এবং ব্লটিং স্ট্যান্ডার্ড পদ্ধতি ব্যবহার করে সঞ্চালিত হয়েছিল। 15 µg প্রোটিন ধারণকারী অ্যালিকোটগুলি SDS-PAGE এর অধীন ছিল। নিম্নলিখিত প্রোটিনগুলির বিরুদ্ধে উত্থাপিত অ্যান্টিবডিগুলি ব্যবহার করা হয়েছিল: Hsp27 (1:1,000, sc-9012, সান্তা ক্রুজ বায়োটেকনোলজি), ফসফোএইচএসপি27 (1:1,000, #2401S, সেল সিগন্যালিং প্রযুক্তি), মোট-আক্ট (1:1,000, #9272, সেল সিগন্যালিং প্রযুক্তি), ফসফো-আক্ট (1:1,000, #9275, সেল সিগন্যালিং প্রযুক্তি), Erk1/2 (1:1,000, #9102, সেল সিগন্যালিং প্রযুক্তি), ফসফো-এর্ক1/2 (1:1,000, #9101, সেল সিগন্যালিং প্রযুক্তি), mTOR (1:1,{ {39}}, #2972, সেল সিগন্যালিং প্রযুক্তি), phospho-mTOR (1:1,000, #2971, সেল সিগন্যালিং প্রযুক্তি), ক্যাসপেস 3 (1:500, ab4051, Abcam, Cambridge, UK) , ক্লিভড ক্যাসপেস-3 (1:1,000, #9661, সেল সিগন্যালিং প্রযুক্তি), এবং -অ্যাক্টিন (1:1,000, sc-130656, সান্তা ক্রুজ বায়োটেকনোলজি)। প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে ইসিএল প্রাইম ওয়েস্টার্ন ব্লটিং ডিটেকশন সিস্টেম (জিই হেলথকেয়ার, ইউকে) ব্যবহার করে ব্লটগুলি সনাক্ত করা হয়েছিল। ডেটা -অ্যাক্টিনের বিরুদ্ধে আপেক্ষিক পরিমাণ দেখায়, যা একটি অভ্যন্তরীণ নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল।

6. পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণ

পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণের জন্য, টিএস এবং এসডাব্লু গ্রুপের মধ্যে ডেটা মান-হুইটনি ইউ পরীক্ষা ব্যবহার করে তুলনা করা হয়েছিল। পার্থক্য শনাক্ত করার জন্য টুকির পরীক্ষা অনুসরণ করে ভিন্নতা (ANOVA) এর একমুখী বিশ্লেষণ ব্যবহার করে গ্রুপগুলির তুলনা করা হয়েছিল। পার্থক্যগুলি p < 0.05 এ পরিসংখ্যানগতভাবে তাৎপর্যপূর্ণ বলে বিবেচিত হয়েছিল। ডেটাকে গড় ± স্ট্যান্ডার্ড ডেভিয়েশন (SD) বা গড় ± স্ট্যান্ডার্ড এরর অফ দ্য গড় (SEM) হিসাবে প্রকাশ করা হয়। গ্রাফপ্যাড প্রিজম 6 (গ্রাফপ্যাড সফ্টওয়্যার, সান দিয়েগো, CA, USA) পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহৃত হয়েছিল।