অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, অ্যান্টি-এজিং এবং সিস্টানচে থেকে মোট স্যাপোনিনের অঙ্গ প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব
May 19, 2023
উপসংহার: TSAT হল অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এবং অ্যান্টি-এজিং বৈশিষ্ট্য সহ একটি উচ্চ-মানের প্রাকৃতিক পণ্য যা ইঁদুরের ডি-গাল-প্ররোচিত বার্ধক্যজনিত ক্ষতি কমাতে পারে।
কীওয়ার্ড:Cistanche মোট saponins, ডি-গ্যালাকটোজ, অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট,বিরোধী পক্বতা

অ্যান্টি-এজিং এর জন্য Cistanche সাপ্লিমেন্ট পেতে এখানে ক্লিক করুন
ভূমিকা
একবিংশ শতাব্দী থেকে, বার্ধক্যের বৈশ্বিক প্রবণতা এবং বিশ্বজুড়ে জীবনযাত্রার মান উন্নয়নের সাথে সাথে, বার্ধক্যজনিত স্বাস্থ্য সমস্যা এবং বার্ধক্যজনিত রোগগুলি ক্রমবর্ধমানভাবে বিশিষ্ট হয়ে উঠেছে। বার্ধক্য এবং বার্ধক্যজনিত রোগের ঘটনা একটি জনপ্রিয় গবেষণা বিষয় হয়ে উঠেছে। বার্ধক্য হল একটি অপরিবর্তনীয় এবং জটিল অবক্ষয়মূলক শারীরবৃত্তীয় প্রক্রিয়া যা শরীরের সমস্ত অংশে ঘটে, যা টিস্যু এবং অঙ্গগুলির গঠনগত এবং কার্যকরী অবনতির দিকে পরিচালিত করে এবং বিভিন্ন দীর্ঘস্থায়ী রোগের ঝুঁকি বাড়ায়, যেমন উচ্চ রক্তচাপ, ডায়াবেটিস, নিউরোডিজেনারেটিভ রোগ এবং ত্বকের মেলানোসিস। .2 বেশ কয়েকটি প্রতিবেদনে দেখানো হয়েছে যে বার্ধক্যের ফ্রি র্যাডিক্যাল তত্ত্ব, সবচেয়ে জনপ্রিয় তত্ত্বগুলির মধ্যে একটি, বার্ধক্য প্রক্রিয়ার কারণে জীবের ক্ষতি ব্যাখ্যা করতে পারে। সিঙ্গলেট অক্সিজেন (1 O2), সুপারঅক্সাইড অ্যানিয়ন (•O2-), হাইড্রোক্সিল র্যাডিকেল (HO•), এবং হাইড্রোজেন পারক্সাইড (H2O2) সহ।4,5 একবার এই ফ্রি র্যাডিকেল, যা জোড়াবিহীন এবং অত্যন্ত প্রতিক্রিয়াশীল ইলেকট্রন ধারণ করে, অতিরিক্ত পরিমাণে উত্পাদিত হয়, তারা সরাসরি অক্সিডেটিভ স্ট্রেস এবং প্রোইনফ্ল্যামেটরি প্রতিক্রিয়ার দিকে পরিচালিত করে, তারপরে রেডক্স ভারসাম্যহীনতা, প্রোটিন এবং লিপিড পারক্সিডেশনের দিকে পরিচালিত করে, সেইসাথে মাইটোকন্ড্রিয়াল এবং ডিএনএ ক্ষতির দিকে পরিচালিত করে, শেষ পর্যন্ত পরিবর্তিত কোষ এবং টিস্যু ফাংশন এবং প্যাথলজিকাল অবস্থার দিকে নিয়ে যায় বার্ধক্য ত্বরান্বিত করার জন্য .6,7 মজার বিষয় হল, মানব/স্তন্যপায়ী সিস্টেমে প্রাকৃতিক অন্তঃসত্ত্বা অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট সিস্টেম বিদ্যমান, যার মধ্যে রয়েছে SOD, CAT এবং GSH-Px, সেইসাথে অ্যাসকরবিক অ্যাসিড এবং ক্যারোটিনয়েডের মতো ননএনজাইম্যাটিক অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, ফ্রি র্যাডিকেলের মধ্যে সঠিক ভারসাম্য বজায় রাখার জন্য ডিজাইন করা হয়েছে। এবং অ্যান্টিঅক্সিডেন্টস। অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট (যেমন, বিএইচটি এবং বিএইচএ) দীর্ঘমেয়াদী ব্যবহারে অন্তঃস্রাবী ব্যাঘাত, প্রজনন ব্যাধি এবং এমনকি কার্সিনোজেনেসিস সৃষ্টি করতে দেখা গেছে। সুরক্ষা.
সিস্তানচে আরালিয়া এলাটা (মিক।) সীমের মতো একই বংশের একটি উদ্ভিদ প্রজাতি। এটি পশ্চিম চীনের কিনবা পর্বতমালায় ব্যাপকভাবে বিতরণ করা হয় এবং এটি একটি ঔষধি ও ভোজ্য উদ্ভিদ। সিস্তানচে মূলের ছালের নির্যাস দীর্ঘদিন ধরে চীনে ডায়াবেটিসের চিকিৎসার জন্য একটি লোক ওষুধ হিসেবে ব্যবহৃত হয়ে আসছে এবং এর প্রধান সক্রিয় উপাদান হল ট্রাইটারপেন স্যাপোনিন।১৪ এতে অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, অ্যান্টিহাইপারগ্লাইসেমিক এবং অ্যান্টিহাইপারলিপিডেমিক প্রভাব রয়েছে বলে প্রমাণিত হয়েছে।১৪-১৬ অনেক গবেষণায় দেখা গেছে যে ট্রাইটারপেন স্যাপোনিন যেমন এশিয়াটিকোসাইড বি, মেডক্যাসোসাইড এবং পার্কসাইড এ ফ্রি র্যাডিক্যালের সাথে প্রতিক্রিয়া করতে পারে এবং ফ্রি র্যাডিক্যাল চেইন প্রতিক্রিয়ার আরও বিকাশ রোধ করতে পারে, এইভাবে অ্যান্টি-অক্সিডেন্ট প্রভাব প্রয়োগ করে। স্যাপোনিন, সেইসাথে ইঁদুরের যকৃতের মাইক্রোসোমে লিপিড পারক্সিডেশনের বিরুদ্ধে ভাল অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা, এবং জিনসেং, শিসান্দ্রা এবং অন্যান্য স্যাপোনিনগুলিতে উচ্চতর অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট প্রভাব রয়েছে বলে দেখানো হয়েছে। এর অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট প্রভাবের মাধ্যমে ইঁদুর। ১৯ আরও গঠন-প্রভাব সম্পর্ক গবেষণায় পরামর্শ দেওয়া হয়েছে যে এই ধরনের স্যাপোনিনগুলিতে সি-3-এ অলিগোস্যাকারাইড চেইনের বিভাগ এবং ক্রম-এর মতো কাঠামোগত পার্থক্যগুলি ডায়াবেটিস মেলিটাস-সম্পর্কিত ক্ষেত্রে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে। অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এবং অ্যান্টিগ্লাইকেশন কার্যক্রম।20

ডি-গ্যাল একটি সাধারণভাবে ব্যবহৃত পরীক্ষামূলক বার্ধক্য প্রবর্তক। প্রমাণের ক্রমবর্ধমান পরিমাণ পরামর্শ দেয় যে বার্ধক্যজনিত ফিনোটাইপগুলি যেমন অত্যধিক ফ্রি র্যাডিক্যাল গঠন, জ্ঞানীয় কর্মহীনতা, রোগ প্রতিরোধ ক্ষমতা হ্রাস এবং অঙ্গের আঘাত দীর্ঘমেয়াদী ডি-গাল উদ্দীপনার অধীনে লক্ষ্য করা যায়। এবং ইঁদুরের মধ্যে স্বীকৃতি মেমরি, যেমনটি লক্ষ্য প্ল্যাটফর্মগুলি খুঁজে পেতে অসুবিধার ক্ষেত্রে দুর্বল কর্মক্ষমতা এবং মরিস জলের গোলকধাঁধা পরীক্ষায় লক্ষ্য প্ল্যাটফর্ম অতিক্রম করার সংখ্যা হ্রাস দ্বারা প্রদর্শিত হয়েছে। এবং বার্ধক্যজনিত স্মৃতিশক্তি হ্রাস, রেডক্স ভারসাম্যহীনতা এবং অঙ্গের আঘাত।
TSAT এর জৈবিক ক্রিয়াকলাপের উপর পূর্ববর্তী গবেষণার ভিত্তিতে, বিশ্বাস করার কারণ রয়েছে যে এই ঔষধি এবং খাদ্যতালিকাগত উদ্ভিদটির অ্যান্টি-এজিং ক্ষেত্রে প্রয়োগের যথেষ্ট সম্ভাবনা রয়েছে। যাইহোক, এই ট্রাইটারপেনয়েড স্যাপোনিন নির্যাস দ্বারা ফ্রি র্যাডিক্যালের ইন-ভিট্রো স্ক্যাভেঞ্জিং-এর উপর শুধুমাত্র একটি গবেষণা রয়েছে এবং ফ্রি র্যাডিক্যাল স্ক্যাভেঞ্জিং-এর অন্যান্য শারীরবৃত্তীয় প্রাসঙ্গিক বৈশিষ্ট্যের অভাব রয়েছে। তদ্ব্যতীত, ডি-গাল-প্ররোচিত সাবঅ্যাকিউট বার্ধক্য মডেলে স্মৃতিশক্তি হ্রাস, রেডক্স ভারসাম্যহীনতা এবং অঙ্গের আঘাতের বিরুদ্ধে TSAT-এর প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব সম্পর্কে জ্ঞান সীমিত। তাই, এই গবেষণাটি DPPH, ABTS, HO•, •O2- এবং টাইরোসিনেজ কার্যকলাপকে বাধা দিয়ে TSAT-এর অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট বৈশিষ্ট্যগুলিকে ভিট্রোতে একত্রিত করেছে। অধিকন্তু, আচরণগত পরীক্ষা, অক্সিডেটিভ স্ট্রেস প্যারামিটারের পরিমাপ, এবং ইঁদুরের প্রধান অঙ্গগুলির হিস্টোপ্যাথোলজিকাল অবস্থাগুলি ডি-গাল-প্ররোচিত সাবঅ্যাকিউট অক্সিডেটিভ এবং বার্ধক্যজনিত ক্ষতি কমানোর জন্য TSAT-এর ক্ষমতার উপর অতিরিক্ত তথ্য প্রদানের জন্য মূল্যায়ন করা হয়েছিল, এর প্রত্যাশিত ফার্মাকোলজিকাল বৈশিষ্ট্যগুলিকে একীভূত করে।
উপকরণ এবং পদ্ধতিসমূহ
সিস্তানচে এর মূলের ছাল চীনের শানসি প্রদেশের কিনবা পর্বত থেকে সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং ডাঃ জিতাও ওয়াং (শানসি ইউনিভার্সিটি অফ চাইনিজ মেডিসিন) দ্বারা বোটানিক্যালি সনাক্ত করা হয়েছিল। একটি ভাউচার নমুনা (SUCM, নং 20201003) চীনা মেডিসিনের শানসি বিশ্ববিদ্যালয়ের হার্বেরিয়ামে জমা করা হয়েছিল। তারাসাপোনিন IV
DPPH (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), ABTS (Maclin Biochemical Co., Ltd, Shanghai, China), মাশরুম টাইরোসিনেস (Yuan Ye Biotechnology Co., Ltd, Shanghai, China), L{{1} },4-ডাইহাইড্রোক্সিফেনিল্যালানাইন (L-DOPA) এবং D-gal (Yuan Ye Biotechnology Co., Ltd, Shanghai, China) কেনা হয়েছিল৷ সুপারঅক্সাইড অ্যানিয়ন (আইটেম নম্বর: A052-1-1), হাইড্রক্সিল ফ্রি র্যাডিক্যাল (আইটেম নম্বর: A018-1-1), BCA (আইটেম নম্বর: A045-4-2), SOD (আইটেম নম্বর: A{{ 8}}), GSH-Px (আইটেম নম্বর: A005-1-1), CAT (আইটেম নম্বর: A007-1-1), MDA (আইটেম নম্বর: A003-1-2), T-AOC ( আইটেম নম্বর: A015-2-1), AST (আইটেম নম্বর: C010-2-1) এবং ALT (আইটেম নম্বর: C009-2-1) অ্যাস কিটগুলি নানজিং জিয়ানচেং বায়োইঞ্জিনিয়ারিং ইনস্টিটিউট (নানজিং, চীন) থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল . ব্যবহৃত সমস্ত রাসায়নিক এবং অন্যান্য রিএজেন্ট বিশ্লেষণাত্মক গ্রেড ছিল।

সিস্টানচে মূলের ছাল ডাবল পাতিত জল দিয়ে ধুয়ে শুকিয়ে 60 ডিগ্রিতে চূর্ণ করা হয়। পরীক্ষার আগে, পাউডারটি একটি শীতল এবং শুকনো জায়গায় স্থাপন করা হয়েছিল। পাউডার (3 কেজি) রিফ্লাক্সের অধীনে তিনবার 70 শতাংশ ইথানল দিয়ে বের করা হয়েছিল। সমাধানগুলি একত্রিত করা হয়েছিল এবং উচ্চ-গতির সেন্ট্রিফিউগেশন এবং পরিস্রাবণ দ্বারা সুপারন্যাট্যান্ট প্রাপ্ত হয়েছিল। সুপারনাট্যান্টকে HPD300 ম্যাক্রোপোরাস রজন কলামে লোড করে এবং তারপর 70 শতাংশ ইথানল দিয়ে বিশুদ্ধ করা হয়েছিল। যে দ্রবণটি 70 শতাংশ ইথানলের সাথে নির্গত হয়েছিল তা ভ্যাকুয়াতে দ্রাবক অপসারণের পরে একটি অবশিষ্টাংশ (356 গ্রাম) পেতে বাষ্পীভূত হয়েছিল। TSAT-এর ফলন ছিল 11.87 শতাংশ (w/w) এবং আরও ব্যবহারের জন্য একটি রেফ্রিজারেটরে সংরক্ষিত ছিল।
গ্রাফিক কলাম (4.6 ID×250 মিমি)। মোবাইল ফেজে অ্যাসিটোনিট্রিল (দ্রাবক A) nd 0.1 শতাংশ ফসফরিক অ্যাসিড জলীয় দ্রবণ (V/V) (দ্রাবক বি) নিয়ে গঠিত। গ্রেডিয়েন্ট প্রোগ্রামটি নিম্নরূপ ছিল: 0–10 মিনিট, 5–20 শতাংশ A; 10-25 মিনিট 20-28 শতাংশ A; 25-35 মিনিট, 28-33 শতাংশ A; 35-45 মিনিট, 33-38 শতাংশ A; 45-55 মিনিট, 38-46 শতাংশ A; 55-60 মিনিট, 46-60 শতাংশ A; 60-70 মিনিট 60-75 শতাংশ A; 70-80 মিনিট, 75-45 শতাংশ A; 80-90 মিনিট, 45-5 শতাংশ A. যন্ত্রটির অপারেটিং অবস্থা ছিল 30 ডিগ্রি তাপমাত্রা এবং প্রবাহের হার 0.8 মিলি/মিনিট। মান এবং নমুনার ইনজেকশন ভলিউম ছিল 10 μL। সনাক্তকরণ তরঙ্গদৈর্ঘ্য 203 এনএম। ইনজেকশনের আগে, সমস্ত নমুনা একটি 0.22 μm ফিল্টারের মাধ্যমে পাস করা হয়েছিল। স্ট্যান্ডার্ডের সাথে মিলে যাওয়ার পরে, পিকটি ধরে রাখার সময় দ্বারা নির্ধারিত হয়। মান নির্ধারণের জন্য রৈখিক ক্রমাঙ্কন বক্ররেখা ব্যবহার করা হয়েছিল।
ভিট্রোতে অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপ
DPPH অ্যাস ডিপিপিএইচ অ্যাস পূর্ববর্তী রিপোর্ট থেকে সামান্য পরিবর্তিত হয়েছে। 23 অ্যানহাইড্রাস ইথানল (100 μL), DPPH দ্রবণ (100 μL, 0.2 mM) এবং নমুনা (100 μL, 0.01) এর মিশ্রণ - 1 mg/L) জোরে ঝাঁকানো হয়েছিল এবং অন্ধকারে (25 ডিগ্রি, 30 মিনিট) রাখা হয়েছিল। ভিসি একটি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল শোষণ (517 এনএম) পরিমাপ করা হয়েছিল। ডিপিপিএইচ রেডি
ক্যাল স্ক্যাভেঞ্জিং হার নিম্নরূপ গণনা করা হয়েছিল:

যেখানে A0 নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণের শোষণকে প্রতিনিধিত্ব করে (DPPH প্লাস পরম ইথানল); A1 নমুনা (DPPH প্লাস TSAT) ধারণকারী পরীক্ষা পদ্ধতির প্রতিনিধিত্ব করে; এবং A2 হল ফাঁকা সিস্টেমের শোষণ (TSAT প্লাস পরম ইথানল)। DPPH ফ্রি র্যাডিকাল স্ক্যাভেঞ্জিং রেট এর 50 শতাংশ ইনহিবিশন কনসেন্ট্রেশন ভ্যালু (IC50) গণনা করা হয়েছিল, যা TSAT-এর অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতাকে প্রতিনিধিত্ব করে। সমস্ত অপারেশন তিনবার সমান্তরালভাবে সঞ্চালিত হয়।
ABTS প্লাস অ্যাসে ABTS নির্ধারণ করা হয়েছিল রফিক এট আল-এর পদ্ধতি ব্যবহার করে সামান্য পরিবর্তনের মাধ্যমে।24 প্রথমে, TSAT (0।{12}}1– 1 mg/mL) সমাধানের একটি সিরিজ প্রস্তুত করা হয়েছিল। 7 মিমি এর একটি ABTS সমাধান এবং 2.45 মিমি এর একটি K2S2O8 সমাধান প্রস্তুত করা হয়েছিল। একই ভলিউমে মিশ্রিত হওয়ার পরে, অন্ধকারে প্রতিক্রিয়া (12-16 h) করে ABTS প্লাস প্রাপ্ত হয়েছিল। প্রস্তুত ABTS প্লাসকে 734 nm এ 0.7 ± 0.05 এর শোষণে ডবল পাতিত জল দিয়ে মিশ্রিত করা হয়েছিল। তারপরে, 180 μL মিশ্রিত ABTS প্লাস দ্রবণ এবং 20 μL নমুনার মিশ্রণটি অন্ধকারে প্রতিক্রিয়া দেখায় (25 ডিগ্রি, 10 মিনিট)। ভিসি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। শোষণ (734 এনএম) পরিমাপ করা হয়েছিল। ABTS প্লাস স্ক্যাভেঞ্জিং ক্ষমতা নিম্নলিখিত সূত্র দ্বারা গণনা করা হয়েছিল:

যেখানে A0 নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণের শোষণকে প্রতিনিধিত্ব করে (ABTS প্লাস প্লাস ডবল পাতিত জল); A1 নমুনা (ABTS প্লাস প্লাস TSAT) ধারণকারী পরীক্ষা পদ্ধতির প্রতিনিধিত্ব করে; এবং A2 হল ফাঁকা সিস্টেমের শোষণ (TSAT প্লাস ডবল পাতিত জল)। ABTS প্লাস স্ক্যাভেঞ্জিং রেট এর IC50 মান তখন গণনা করা হয়েছিল। সমস্ত অপারেশন তিনবার সমান্তরালভাবে সঞ্চালিত হয়েছিল।
মাশরুম টাইরোসিনেজ ইনহিবিশন অ্যাক্টিভিটি নির্ধারণ mg/mL, 50 শতাংশ DMSO) সমাধানগুলি যথাক্রমে 100 μL PBS বাফার (0.1 M, pH 6.8) এবং 50 μL টাইরোসিনেজ (100 U/mL) সমন্বিত প্রতিক্রিয়া সিস্টেমে যোগ করা হয়েছিল, এবং 15 মিনিটের জন্য 25 ডিগ্রিতে প্রতিক্রিয়া করেছিল . তারপরে, 50 μL L L-DOPA (3.5 mM) দ্রবণটি প্রতিক্রিয়া সিস্টেমে যোগ করা হয়েছিল এবং 10 মিনিটের জন্য 37 ডিগ্রিতে ইনকিউবেট করা হয়েছিল। শোষণ (475 এনএম) নির্ধারিত হয়েছিল। ভিসি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। TSAT এর নিষেধাজ্ঞা কার্যকলাপ গণনা করা হয়েছিলনিম্নলিখিত সূত্র দ্বারা:

TSAT এর টাইরোসিনেজ প্রতিরোধমূলক কার্যকলাপ নির্দেশ করে। সমস্ত অপারেশন তিনবার সমান্তরালভাবে সঞ্চালিত হয়েছিল।
ফেন্টন প্রতিক্রিয়া হল সবচেয়ে সাধারণ রাসায়নিক বিক্রিয়া যা হাইড্রক্সিল র্যাডিকেল তৈরি করে। এই পরীক্ষাটি হাইড্রোক্সিল র্যাডিকাল অ্যাস কিটের নির্দেশ অনুসারে করা হয়েছিল। TSAT এর বিভিন্ন ঘনত্ব (0.01–1 mg/mL) পর্যায়ক্রমে বিকারকগুলির সাথে মিশ্রিত করা হয়েছিল এবং 20 মিনিটের জন্য ঘরের তাপমাত্রায় রেখে দেওয়া হয়েছিল। শোষণ (550 এনএম) পরিমাপ করা হয়েছিল এবং ভিসি একটি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। স্ক্যাভেঞ্জিং রেট ( শতাংশ) নিম্নরূপ গণনা করা হয়েছিল:


সুপারঅক্সাইড র্যাডিক্যাল (•O2-) স্ক্যাভেঞ্জিং অ্যাস

নমুনা ধারণকারী পরীক্ষা সিস্টেম; এবং A2 হল ফাঁকা সিস্টেমের শোষণ। IC50 মান তখন গণনা করা হয়েছিল। সমস্ত অপারেশন তিনবার সমান্তরালভাবে সঞ্চালিত হয়েছিল।
ভিভোতে অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপ
প্রাণী এবং চিকিত্সা
পুরুষ স্প্রাগ-ডাউলি ইঁদুর (200-230 গ্রাম) চেংডু ডসি এক্সপেরিমেন্টাল অ্যানিমালস কো., লিমিটেড (চেংডু, চীন, সার্টিফিকেট নং SCXK2020-030) দ্বারা সরবরাহ করা হয়েছিল। সমস্ত প্রাণী পরীক্ষা-নিরীক্ষা ল্যাবরেটরি প্রাণীদের যত্ন এবং ব্যবহারের জন্য স্বাস্থ্য নির্দেশিকা জাতীয় ইনস্টিটিউট অনুসারে করা হয়েছিল এবং চীনা মেডিসিনের শানসি বিশ্ববিদ্যালয়ের প্রাতিষ্ঠানিক প্রাণী নীতিশাস্ত্র কমিটি দ্বারা অনুমোদিত হয়েছিল। এই ইঁদুরগুলিকে একটি জলবায়ু নিয়ন্ত্রণ কক্ষে (24-25 ডিগ্রি) একটি 12 ঘন্টা আলো/12 ঘন্টা অন্ধকার সময়সূচী অনুসারে উত্থিত করা হয়েছিল এবং তাদের খাবার এবং জলের বিনামূল্যে অ্যাক্সেস ছিল। পরীক্ষা শুরু করার আগে সমস্ত ইঁদুরকে এক সপ্তাহের জন্য মানিয়ে নেওয়ার অনুমতি দেওয়া হয়েছিল। ইঁদুরগুলো ছিল এলোমেলোভাবে
6টি গ্রুপে বিভক্ত (প্রতিটি গ্রুপে n=8): স্বাভাবিক গ্রুপ; মডেল গ্রুপ; ভিসি চিকিত্সা গ্রুপ (100 মিলিগ্রাম/কেজি); এবং TSAT উচ্চ (TSAT-H)-, মাঝারি (TSAT-M)- এবং নিম্ন (TSAT-L)-ডোজ চিকিত্সা গ্রুপ (200 mg/kg, 100 mg/kg, 50 mg/kg)।
সাধারণ গ্রুপ ব্যতীত সমস্ত পাঁচটি গ্রুপকে ডি-গাল (200 মিগ্রা/কেজি) দিয়ে ইন্ট্রাপেরিটোনলি ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল, যা 0.9 শতাংশ NaCl (10 শতাংশ, w/v) দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল। ট্রিটে ইঁদুর
ফাংশন (3500 rpm, 15 মিনিট, 25 ডিগ্রি)। থাইমাস, হার্ট, লিভার, প্লীহা, ফুসফুস, কিডনি এবং টেস্টিকুলার টিস্যুগুলিকে দ্রুত আলাদা করা হয়েছিল, বরফের 0.9 শতাংশ NaCl দ্রবণ দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয়েছিল এবং নিম্নলিখিত বিশ্লেষণের জন্য সঠিকভাবে ওজন করা হয়েছিল।
মরিস ওয়াটার মেজ (MWM) পরীক্ষা
মরিস ওয়াটার মেজ (MWM) পরীক্ষাটি সামান্য পরিবর্তনের সাথে পূর্বের বর্ণনা অনুসারে সম্পাদিত হয়েছিল। 26 সংক্ষেপে, ইঁদুরগুলিকে পাঁচটি চলমান দিন (6 ট্রায়াল/প্রতিদিন) জন্য প্রশিক্ষিত করা হয়েছিল পালিয়ে যাওয়া প্ল্যাটফর্মটি খুঁজে বের করার জন্য, যেটি পানিতে 1 সেন্টিমিটার লুকানো ছিল। (জলের তাপমাত্রা, 25 ±1 ডিগ্রী) সুইমিং পুলের বাইরে একটি নির্দিষ্ট অ্যারে ব্যবহার করে (ব্যাস 160 সেমি, উচ্চতা 60 সেমি)। সুইমিং পুলটি চারটি সমান চতুর্ভুজে বিভক্ত ছিল। পুরো প্রশিক্ষণ এবং পরীক্ষার সময় জুড়ে পুলের চারপাশে তীরচিহ্নগুলি একই স্থানে রাখা হয়েছিল। পাঁচ দিনের প্রশিক্ষণের পরে, প্রতিটি ইঁদুরকে 120 সেকেন্ড সাঁতার কাটতে দেওয়া হয়েছিল। প্ল্যাটফর্মটি খুঁজে পাওয়ার পরে, ইঁদুরগুলিকে 15 সেকেন্ডের জন্য সেখানে থাকতে দেওয়া হয়েছিল। এর বাইরে, যে ইঁদুরটি নির্ধারিত সময়ের মধ্যে (120 সেকেন্ড) প্ল্যাটফর্মটি সনাক্ত করতে ব্যর্থ হয়েছিল তাকে 15 সেকেন্ডের জন্য স্থাপন করা হয়েছিল। এই ইঁদুরগুলির পালানোর বিলম্ব 120 সেকেন্ড হিসাবে রেকর্ড করা হয়েছিল। পরে, প্ল্যাটফর্মটি সরানো হয়েছিল, এবং ইঁদুরগুলিকে চতুর্ভুজটিতে স্থাপন করা হয়েছিল, যা লক্ষ্য চতুর্ভুজের বিপরীত ছিল এবং 120 সেকেন্ডের জন্য অবাধে সাঁতার কাটতে দেওয়া হয়েছিল। প্ল্যাটফর্ম চতুর্ভুজ ক্রসিং সংখ্যা লক্ষ্য চতুর্ভুজ মধ্যে রেকর্ড করা হয়েছে. একটি স্বয়ংক্রিয় ট্র্যাকিং সিস্টেম দ্বারা ডেটা বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।
জৈব রাসায়নিক বিশ্লেষণ
মস্তিষ্ক, ফুসফুস, যকৃত, প্লীহা, হৃৎপিণ্ড এবং কিডনি টিস্যুগুলি বরফ-ঠান্ডা 0.9 শতাংশ NaCl দ্রবণে (10 শতাংশ , w/v) দ্রুত একত্রিত হয়েছিল৷ সেন্ট্রিফিউগেশনের পরে (3500 rpm, 15 মিনিট, 25 ডিগ্রি), জৈব রাসায়নিক বিশ্লেষণের জন্য সুপারনাট্যান্ট সংগ্রহ করা হয়েছিল। বোভাইন সিরাম অ্যালবুমিনকে মান হিসাবে ব্যবহার করে, টিস্যু প্রোটিনের ঘনত্ব নির্ধারণ করা হয়েছিল। ইঁদুরের সিরামে এসওডি, জিএসএইচ-পিএক্স, ক্যাট, এমডিএ এবং টি-এওসির মাত্রা এবং মস্তিষ্ক, হৃদপিণ্ড, ফুসফুস, প্লীহা এবং কিডনি হোমোজেনেটগুলি কিটের মানক পদ্ধতি অনুসারে এবং লিভারের ALT এবং AST স্তরগুলি নির্ধারণ করা হয়েছিল। কিট নির্দেশাবলী অনুযায়ী নির্ধারিত হয়.
হিস্টোপ্যাথোলজিকাল বিশ্লেষণ
মস্তিষ্ক, হার্ট, ফুসফুস, কিডনি, লিভার এবং প্লীহা টিস্যুগুলি দ্রুত অপসারণ করা হয়েছিল এবং 4 শতাংশ প্যারাফর্মালডিহাইডে স্থির করা হয়েছিল। 24 ঘন্টা পরে, প্যারাফিন এম্বেডিং সঞ্চালিত হয়েছিল।
বিভাগগুলি অনুদৈর্ঘ্যভাবে 4 µm পুরুত্বে ভাগ করা হয়েছিল, হাইড্রেটেড এবং হেমাটোক্সিলিন-ইওসিন (H&E) দিয়ে দাগযুক্ত। হিস্টোমরফোলজি মাইক্রোস্কোপিকভাবে পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল।
পরিসংখ্যান সংক্রান্ত বিশ্লেষণআচরণ পরীক্ষার ফলাফল, অঙ্গ সূচক এবং এনজাইম ক্রিয়াকলাপগুলিকে ± SD হিসাবে প্রকাশ করা হয়। উপাত্তগুলি ভ্যারিয়েন্স (ANOVA) এর একমুখী বিশ্লেষণের মাধ্যমে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল এবং পোস্ট-হক বিশ্লেষণের জন্য টুকির পরীক্ষা দ্বারা অনুসরণ করা হয়েছিল। অভিনব বস্তুর স্বীকৃতির জন্য, একটি জোড়া নমুনা পরীক্ষা দ্বারা পরিসংখ্যানগত মূল্যায়ন করা হয়েছিল। পরিসংখ্যানগত তাত্পর্য p এ সেট করা হয়েছিল<0 05.






