পরিবেশগত চাপের বিরুদ্ধে ভারতীয় চন্দন তেলের অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এবং অ্যান্টি-এজিং সম্ভাবনা
Aug 31, 2022
অনুগ্রহ করে যোগাযোগ করুনoscar.xiao@wecistanche.comআরও তথ্যের জন্য
বিমূর্ত:স্যান্টালম অ্যালবামের হার্টউড থেকে নিঃসৃত, ভারতীয় চন্দন তেল একটি অপরিহার্য তেল যা ঐতিহাসিকভাবে প্রসাধনীতে একটি প্রাকৃতিক সক্রিয় উপাদান হিসেবে ব্যবহার করা হয়েছে ত্বকের অবস্থা ও উজ্জ্বল করার জন্য। এটি অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, অ্যান্টি-ইনফ্ল্যামেটরি এবং অ্যান্টি-প্রলিফারেটিভ ক্রিয়াকলাপ প্রদর্শনের জন্য নথিভুক্ত করা হয়েছে। এখানে, আমরা HaCaI কোষে এবং অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের সংস্পর্শে আসার পরে মানুষের ত্বকের এক্সপ্ল্যান্টে স্ক্যাভেঞ্জিং রিঅ্যাকটিভ অক্সিজেন প্রজাতি (ROS) তে ভারতীয় চন্দন তেলের প্রতিরক্ষামূলক এবং অ্যান্টি-এজিং প্রভাবগুলি তদন্ত করেছি। একটি প্রোব DCFH-DA ব্যবহার করে, 412nm এবং 450 nm বা সিগারেটের ধোঁয়ায় নীল আলোর সংস্পর্শে আসার পরে ভারতীয় চন্দন তেলের অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল। কোলাজেনেস স্তরের (MMP-1) মূল্যায়নের মাধ্যমে চন্দন তেলের অ্যান্টি-বার্ধক্য প্রভাবও মানুষের ত্বকের এক্সপ্ল্যান্টে অন্বেষণ করা হয়েছিল। আমরা রিপোর্ট করেছি যে ভারতীয় চন্দন তেলে অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট সম্ভাবনা রয়েছে যা একটি ফ্রি র্যাডিক্যাল জেনারেটিং কম্পাউন্ড (AAPH) দ্বারা উত্পন্ন ROS কে মেরে ফেলতে পারে। পরবর্তীকালে পরিবেশগত চাপের সংস্পর্শে আসা থেকে জানা যায় যে ভারতীয় চন্দন তেল ভিটামিন ই (আলফা-টোকোফেরল) এর তুলনায় উচ্চতর অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপের অধিকারী। মানুষের ত্বকের এক্সপ্ল্যান্ট ব্যবহার করে, এই সমীক্ষায় প্রমাণিত হয়েছে যে ভারতীয় চন্দন তেল MMP-এর দূষণ-প্ররোচিত স্তরকেও বাধা দিতে পারে{10}}।bioflavonoidsফলাফলগুলি ইঙ্গিত দেয় যে ভারতীয় চন্দন তেল পরিবেশগত চাপের বিরুদ্ধে প্রসাধনী এবং চর্মবিদ্যায় একটি প্রতিরক্ষামূলক এবং বার্ধক্য বিরোধী সক্রিয় উপাদান হিসাবে কাজ করতে পারে।

কীওয়ার্ড:exposomes; প্রাক্তন ভিভো; ইন ভিট্রো; অক্সিডেটিভ স্ট্রেস; বার্ধক্য; ভারতীয় চন্দন তেল
1। পরিচিতি
অত্যাবশ্যকীয় তেল এবং উদ্ভিদের প্রয়োজনীয় তেলের অংশগুলি মানব স্বাস্থ্যের উপর ইতিবাচক প্রভাব ফেলতে সক্ষম হওয়ার জন্য দীর্ঘকাল ধরে মূল্যবান। অত্যাবশ্যকীয় তেলগুলিকে বিস্তৃতভাবে টারপেন হিসাবে শ্রেণীবদ্ধ করা হয় এবং তাদের মনো-অক্সিজেনযুক্ত অ্যানালগগুলিকে টারপেন হিসাবে শ্রেণীবদ্ধ করা হয়। এই অণুগুলি প্রকৃতির অনেক গাছপালা দ্বারা উত্পাদিত হয় যেখানে দুটি প্রধান ধরণের টারপেন পাওয়া যায়: মনোটারপেনস, একটি C10 কার্বন ফ্রেম সহ অণু এবং একটি C15 কার্বন ফ্রেম সহ সেসকুইটারপেনস।
ভারতীয় চন্দন তেল হল স্যান্টালম অ্যালবামের সুগন্ধি হার্টউডের বাষ্প পাতনের মাধ্যমে প্রাপ্ত অপরিহার্য তেল, যা মূলত সেসকুইটারপেন দ্বারা গঠিত। তেলটি তার ঘ্রাণজনিত বৈশিষ্ট্যের জন্য বিখ্যাত, এটি একটি নরম, উষ্ণ এবং কাঠের গন্ধযুক্ত। এই গন্ধের ফলস্বরূপ, তেলটি সুগন্ধি, আতর এবং ধূপের মতো অনেকগুলি প্রয়োগে তার পথ খুঁজে পেয়েছে [2]।
ভারতীয় চন্দন তেলের প্রধান উপাদান হল আইসোমারের একটি গ্রুপ যা সোটালল নামে পরিচিত, (জা-স্যান্টালল, জেড- -সোটালল, ট্রান্স- -বার্গামট এবং এপি- -স্যান্টালল)। এগুলি ফার্নেসিন পাইরোফসফেটের উপর কাজ করে সেসকুইটারপেন সিন্থেসের দ্বারা উত্পাদিত হয় যার পরে পি450-নির্ভর মনোঅক্সিজেনেস দ্বারা অক্সিডেশন হয়।cistanche কিনুনদ্বিতীয় গ্রুপের সেসকুইটারপেনলও ফার্নেসিন পাইরোফসফেটের (বিসাবোলোলস, কারকিউমিন-12-ওএলএস, এবং ল্যান্সোল) [৩,৪] উপর মনোটারপিন সিন্থেসের ক্রিয়া দ্বারা উত্পাদিত হয়।

Cistanche বিরোধী বার্ধক্য করতে পারেন
ভারতীয় চন্দন তেলের উপাদানগুলি ভালভাবে বর্ণনা করা হয়েছে এবং তাদের গঠনগুলি ব্যাখ্যা করা হয়েছে [5]। উপাদানগুলির বিশ্লেষণ একটি রুটিন বিশ্লেষণ হিসাবে শিখা আয়নকরণ সনাক্তকরণ (GC FID) সহ গ্যাস ক্রোমাটোগ্রাফি দ্বারা করা যেতে পারে [3]। এটি লগ স্বীকৃত হয়েছে যে ভারতীয় চন্দন কাঠের একটি প্রসাধনী এবং ঔষধি উপাদান হিসাবে অ্যাপ্লিকেশন রয়েছে। প্রকৃতপক্ষে, এটি প্রাচীনতম স্বীকৃত প্রসাধনী উপাদানগুলির মধ্যে একটি, 500 খ্রিস্টপূর্বাব্দ পর্যন্ত নথিভুক্ত ব্যবহার যেখানে চন্দন কাঠ প্রসাধনী এবং স্বাস্থ্যের উদ্দেশ্যে ব্যবহৃত হত এবং ভারতীয় ও চীনা ঐতিহ্যবাহী ওষুধগুলিতে অন্তর্ভুক্ত ছিল [6]। ক্লিওপেট্রা, যার খ্যাতি আধুনিক সময়ে তার আগে অব্যাহত রয়েছে, কথিতভাবে এর প্রসাধনী সুবিধার জন্য চন্দন কাঠ ব্যবহার করেছিলেন। চন্দনযুক্ত প্রসাধনী সূত্রের বিস্তারিত গ্রন্থ ভারতের গুপ্ত যুগে এবং চীনের তাং রাজবংশের [2,6] মধ্যে লেখা হয়েছিল।
আয়ুর্বেদিক চিকিৎসা ব্যবস্থায় চন্দনকে বিশেষভাবে ত্বকের স্বাস্থ্যের জন্য একটি পদার্থ হিসেবে তালিকাভুক্ত করা হয়েছে, যা সুগন্ধি হিসেবে বিবেচিত সুগন্ধের বাইরে এর ক্রিয়াকলাপকে তুলে ধরে। ট্র্যাডিশনাল চাইনিজ মেডিসিন (TCM) এবং আয়ুর্বেদ [7,8] উভয় ক্ষেত্রেই চন্দন কাঠ অভ্যন্তরীণভাবে রক্ত পরিশোধন ও শক্তি প্রদানের ওষুধ হিসেবে ব্যবহৃত হয়। আজ, ভারতীয় চন্দন ভারতের আয়ুর্বেদিক ফার্মাকোপিয়া, চায়না ফার্মাকোপিয়াতে পাওয়া যায় এবং এটি সম্প্রতি ব্রিটিশ ফার্মাকোপিয়াতে যুক্ত করা হয়েছে।

পূর্ববর্তী গবেষকরা তেলের ফার্মাকোলজিকাল বৈশিষ্ট্যগুলিও দেখেছেন যেমন অ্যান্টিমাইক্রোবিয়াল, অ্যান্টি-ইনফ্লেমেটরি, অ্যান্টি-ভাইরাল এবং অ্যান্টি-প্রলিফারেশনের মতো গুণাবলী নিয়ে তদন্ত করা হচ্ছে [9]। উদাহরণস্বরূপ, মোহনকুমার এবং অন্যান্য। অক্সিডেটিভ নিউরোডিজেনারেশনের উপর প্রভাব স্থাপন করার জন্য মানব নিউরোব্লাস্ট সেল লাইনে ভারতীয় চন্দন তেলের অ্যান্টি-অক্সিডেটিভ বৈশিষ্ট্যগুলি রিপোর্ট করেছে [10]। ভারতীয় চন্দন তেলের প্রদাহ-বিরোধী বৈশিষ্ট্য শর্মা এট আল দ্বারা রিপোর্ট করা হয়েছিল। [১১] ডার্মাল ফাইব্রোব্লাস্ট কোষের জন্য যখন ব্যাকটেরিয়া লিপোপলিস্যাকারাইড দ্বারা উদ্দীপিত হয় [১১,১২]।cistanchএটি ছিল: রিপোর্ট করা হয়েছে যে ভারতীয় চন্দন তেলের থেরাপিউটিক মান প্রাকৃতিক সেসকুইটারপিনে এর উচ্চ উপাদানের সাথে সম্পর্কিত, যথা আলফা-স্যান্টালল (তেল গঠনের 50 শতাংশ) এবং বিটা-স্যান্টালল (তেলের গঠনের 20 শতাংশ)[13,14 ]যদিও সাম্প্রতিক বছরগুলিতে ভারতীয় চন্দন কাঠের ফার্মাকোলজিক্যাল প্রভাব নিয়ে গবেষণা ব্যাপক হয়েছে, ভারতীয় চন্দন কাঠের প্রসাধনী গুণাবলী নিয়ে গবেষণা ততটা বিস্তৃত হয়নি।
ত্বক হল বৃহত্তম অঙ্গ এবং শরীরের বাইরেরতম বাধা প্রায়শই সরাসরি এবং ঘন ঘন পরিবেশ দূষণকারীর সংস্পর্শে আসে। এটি সমস্যাযুক্ত, যেহেতু ত্বকের প্রাথমিক কাজটি পরিবেশগত চাপ থেকে রক্ষা করা, এটি তাদের প্রতি খুব সংবেদনশীল। ক্ষতিকারক পদার্থ যেমন দূষণ এবং সূর্যের ক্ষতিকারক সমন্বয় ত্বকের অবস্থার দিকে নিয়ে যেতে পারে যেমন প্রদাহ, অক্সিডেটিভ স্ট্রেস এবং ত্বকে দুর্বল বিপাকীয় ক্রিয়াকলাপ [১৫]। সাম্প্রতিক প্রসাধনী প্রবণতাগুলি দূষণ, অতিবেগুনি বিকিরণ (UV) এবং সূর্য এবং ডিজিটাল স্ক্রিন থেকে দৃশ্যমান আলোর সংস্পর্শে এলে ত্বকের স্বাস্থ্য বজায় রাখা এবং ত্বকের ইতিবাচক বার্ধক্য প্রচারের লক্ষ্য করা হয়েছে[16]। চর্মরোগবিদ্যার ক্ষেত্রে অগ্রগতি UV এবং দৃশ্যমান আলোর ত্বকের প্রভাবগুলি তদন্ত করে একাধিক গবেষণার জন্ম দিয়েছে [17]। সাম্প্রতিক বছরগুলিতে, সাহিত্যের একটি নতুন শাখা দেখায় যে UV ছাড়াও, দৃশ্যমান বর্ণালীর 400-470 nm অঞ্চলে উচ্চ-শক্তি দৃশ্যমান (HEV) আলো, বা নীল আলোর মতো অন্যান্য চাপও বায়ুমণ্ডলীয় দূষণকারী, ত্বকের স্তরে জৈবিক প্রক্রিয়াগুলিকে ট্রিগার করতে পারে এবং ত্বকের অকাল বার্ধক্যের দিকে পরিচালিত করতে পারে। 19]আগে দেখা গেছে যে সূর্য থেকে আসা নীল আলো, বায়ুমণ্ডলীয় দূষণকারী যেমন কণা পদার্থ, সিগারেটের ধোঁয়া এবং ওজোনের সাথে, উল্লেখযোগ্য অক্সিডেটিভ স্ট্রেস, প্রদাহ, অ্যাপোপটোসিস এবং কোলাজেন অবক্ষয় প্ররোচিত করে ত্বকের আণবিক গঠনকে প্রভাবিত করে, এমএমপি-1 এবং ডিএনএ ক্ষতির মতো ম্যাট্রিক্স মেটালোপ্রোটিনেসেস আনয়নের মাধ্যমে [২০]।

যে পদার্থগুলি সক্রিয়ভাবে উপরের এক্সপোসোমগুলি থেকে ত্বককে রক্ষা বা মেরামত করে সেগুলি অ্যাডাপ্টোজেন হিসাবে পরিচিত [২১]। এই গবেষণায়, ভারতীয় চন্দন তেলের অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এবং অ্যান্টি-কোলাজেনেজ ক্ষমতা পরিমাণগতভাবে প্রদর্শন করার জন্য নীল আলো (412 এনএম এবং 450 এনএম), সিগারেটের ধোঁয়া এবং ওজোনকে পরিবেশগত চাপ হিসাবে নির্বাচিত করা হয়েছিল।cistanche অস্ট্রেলিয়াপ্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতির (ROS) উপর ভারতীয় চন্দন তেলের স্ক্যাভেঞ্জিং কার্যকলাপ পরিমাপ করে অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা অন্বেষণ করা হয়েছিল। তারপর, এমপি-1-এ ভারতীয় চন্দন তেলের প্রতিরোধ ক্ষমতা পরিমাপ করে অ্যান্টি-এজিং প্রভাবের তদন্ত করা হয়েছিল। প্রাপ্ত ডেটা ভারতীয় চন্দন তেলের কসমেটিক এবং চর্মরোগ সংক্রান্ত যত্নে উপযুক্ত অ্যাডাপ্টোজেন হওয়ার ক্ষমতার উপর আলোকপাত করতে সাহায্য করবে ভিট্রোতে কোষ এবং ত্বকের এক্স ভিভোতে একটি প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব প্রয়োগ করে।
2। সামগ্রী ও পদ্ধতি
2.1.পরীক্ষা এবং নিয়ন্ত্রণ পদার্থ
ভারতীয় চন্দন তেল কুইন্টিস স্যান্ডালউড (পার্থ, WA, অস্ট্রেলিয়া) দ্বারা সরবরাহ করা হয়েছিল। এই তেলটি সান্তালম অ্যালবামের সুগন্ধযুক্ত হার্টউড থেকে বাষ্পীভূত করা হয়েছিল, যা পশ্চিম অস্ট্রেলিয়ার কুনুনুরাতে অবস্থিত বাগানে জন্মানো হয়েছিল। তেল পরীক্ষা করা হয়েছে এবং ISO 3518 মেনে চলার বিষয়টি নিশ্চিত করা হয়েছে[22]। ISO 3518-এ বিশদ পদ্ধতি ব্যবহার করে GC FID দ্বারা উপাদান বিশ্লেষণ সারণি 1-এ দেখা যেতে পারে। Quercetin Gigma-Aldrich, St.Louis, MO, USA) এবং আলফা-টোকোফেরল (ভিটামিন ই) (সিগমা-অলড্রিচ, সেন্ট লুইস, এমও) , USA) ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল।

2.2.কোষ এবং বিকারক
মানুষের অমর হয়ে যাওয়া কেরাটিনোসাইট সেল লাইন, HaCaT (ATCC&Manassas, VA, USA) ডালবেকোর মডিফাইড ঈগলস মিডিয়াম (DMEM) (থার্মো সায়েন্টিফিক, ওয়ালথাম, এমএ, ইউএসএ) তে সংষ্কৃত হয়েছিল এবং 100 ug/m থেকে পরিপূরক হয়েছিল 10 U/mL পেনিসিলিন (পেন-স্ট্রেপ), 2 মিমি এল-গ্লুটামিন, 10 শতাংশ তাপ-নিষ্ক্রিয় FBS, এবং 0.25 শতাংশ সোডিয়াম বাইকার্বোনেট (সিগমা-অলড্রিচ, সেন্ট লুইস, MO, USA)। সেল লাইনটি 37 ডিগ্রিতে বজায় রাখা হয়েছিল 5 শতাংশ CO2 সহ। সেলগুলিকে ক্রমিকভাবে 70-80 শতাংশ সঙ্গমে পাস করা হয়েছিল৷ পরীক্ষা-নিরীক্ষা করার সময়, HaCaT কোষগুলি 100 শতাংশ সংমিশ্রণের কাছাকাছি বৃদ্ধি পেয়েছিল এবং সমস্ত চিকিত্সা একই মাধ্যমে সঞ্চালিত হয়েছিল।
2.3.মানুষের ত্বক ব্যাখ্যার প্রস্তুতি
ম্যামোপ্লাস্টির পরে অবশিষ্ট ত্বক থেকে গবেষণার সম্মতিতে মানব ত্বকের ব্যাখ্যা প্রাপ্ত করা হয়েছিল এবং যে কোনও ত্বকের নিচের চর্বি অপসারণের জন্য ছাঁটাই করা হয়েছিল। একটি জীবাণুমুক্ত ডার্মাল বায়োপসি পাঞ্চ (কাই মেডিকেল, ডালাস, টিএক্স, ইউএসএ) ব্যবহার করে ডার্মিস এবং এপিডার্মিসের সমন্বয়ে গঠিত ত্বক থেকে আট-মিলিমিটার ত্বকের বায়োপসি নেওয়া হয়েছিল এবং দ্রুত একটি 24-কূপ প্লেটে স্থাপন করা হয়েছিল। তারপরে, গ্লুটামিন বা ফেনল রেড (থার্মো ফিশার, ওয়ালথাম, এমএ, ইউএসএ) ছাড়াই ত্বক সংস্কৃতির মাধ্যম, GibcoTM DMEM-এ বায়ু-তরল ইন্টারফেস সংস্কৃতির অবস্থার অধীনে ত্বক বজায় রাখা হয়েছিল। পর্যাপ্ত অভিযোজন সময়ের জন্য ত্বক 5 শতাংশ COZ বায়ুমণ্ডলে 37 ডিগ্রিতে বজায় রাখা হয়েছিল।
2.4.পরীক্ষামূলক নকশা
পরীক্ষামূলক নকশা চিত্র 1 এ দেখানো হয়েছে।

2.5.পরিবেশগত চাপ (নীল আলোর এক্সপোজার (412/450 এনএম) এবং সিগারেটের ধোঁয়া)
2.5.1.নীল আলোর উৎস
প্রতিটি নীল আলোর বাতি (412nm এবং 450 nm) 10 টি অভিন্ন LEDs (Honglitronic, Guangzhou, China) দ্বারা গঠিত একটি প্রতিফলকের মধ্যে অবিরত দৃশ্যমান বিকিরণ নির্গত করে, যা একটি স্বচ্ছ কাচের জানালা দ্বারা আবৃত ছিল। বাতিগুলির জন্য সর্বোচ্চ 412 এনএম বা 450 এনএম তরঙ্গদৈর্ঘ্য সহ একটি একক শিখর পর্যবেক্ষণ করা যেতে পারে। আলোর উৎসের অ্যাপারচার ছিল 4.5 সেমি × 4.5 সেমি। আলোর উৎস থেকে আনুমানিক 5 সেমি দূরত্বে এক্সপোজারের পৃষ্ঠের অ্যারেটি ছিল প্রায় 10 সেমি × 10 সেমি। একটি থার্মোপাইল ডিটেক্টর (জেন্টেক ইও ইউএসএ ইনক।, লেক ওসওয়েগো, বা, ইউএসএ) তদন্ত সাইটের স্তরে ওয়াট/সেমি²-এ আলোর উত্সের সুনির্দিষ্ট তীব্রতা পরিমাপ করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। 1 J/cm2 নীল আলো তদন্তের সাইটে পৌঁছে দেওয়া হয়েছে তা নিশ্চিত করার জন্য এক্সপোজারের সময় সামঞ্জস্য করা হয়েছিল। 2.5.2.সিগারেটের ধোঁয়া
একটি স্বচ্ছ এক্সপোজার চেম্বার এবং একটি বায়ু পাম্পের সাথে সংযুক্ত একটি সিগারেট ওয়েল প্লেটগুলিকে মিটমাট করার জন্য ডিজাইন করা হয়েছে (টারসন, কলকাতা, ভারত)। 30 মিনিটের এক্সপোজারের সময়, তিনটি সিগারেট ব্যবহার করা হয়েছিল। সিগারেটটি একটি পাম্পের সাথে সংযুক্ত ছিল যা ধূমপায়ীর উচ্চাকাঙ্ক্ষার অনুকরণ করে এবং চেম্বারে নির্গত ধোঁয়াটি নিঃশ্বাসের ধোঁয়ার সাথে মিলে যায়। এক্সপোজারের শুরুতে একটি সিগারেট জ্বালানো হয়েছিল এবং তারপর প্রতি 10 মিনিটে 30 মিনিটের এক্সপোজারে মোট তিনটি সিগারেটের জন্য।
2.6.ওজোন এক্সপোজার
ওজোন একটি ওজোন জেনারেটর ব্যবহার করে উত্পাদিত হয়েছিল। স্কিন এক্সপ্লান্টগুলি 30 মিনিটের মোট এক্সপোজার সময়ের জন্য প্রতি মিলিয়ন (পিপিএম) 1.6 অংশে উন্মুক্ত হয়েছিল।
2.7.MTT (3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-Diphenyltetrazolium Bromide) কোষের কার্যক্ষমতা এবং বিস্তারের জন্য অ্যাস
HaCaT সেল লাইনে ইন ভিট্রো কোষের কার্যকারিতা মূল্যায়ন করা হয়েছিল যার মাধ্যমে 1 x 104টি সম্পূর্ণ মাঝারি কোষ সমতল-নিচের কূপের প্রতিটি কূপে যোগ করা হয়েছিল এবং 16 ঘন্টার জন্য আর্দ্রতাযুক্ত 5 শতাংশ CO2-এ 37 ডিগ্রিতে ইনকিউব করা হয়েছিল ইনকিউবেশন কোষগুলিকে 37 ডিগ্রিতে 24 ঘন্টা বা 48 ঘন্টার জন্য ইথানলে ভারতীয় চন্দন তেলের বিভিন্ন ঘনত্বের সাথে চিকিত্সা করা হয়েছিল। সুপারন্যাট্যান্টগুলি সরানো হয়েছিল, এবং 3-(4)5-ডাইমেথি1-2-থিয়াজোলিল)-2,5-ডিফেনি!-2এইচ-টেট্রাজোলিয়াম ব্রোমাইড ( MTT) (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) সমাধান (DMEM-এ 1mg/mL) প্রতিটি কূপে যোগ করা হয়েছে। কোষগুলি 37 ডিগ্রিতে দুই ঘন্টার জন্য incubated ছিল। ইনকিউবেশনের পরে, এমটিআই দ্রবণটি সরানো হয়েছিল, এবং ফরমাজান স্ফটিকগুলি দ্রবীভূত করতে আইসোপ্রোপ্যানল যোগ করা হয়েছিল। তারপরে, সিনার্জি এইচটিএক্স মাল্টিমোড মাইক্রোপ্লেট রিডার (বায়োটেক, উইনোস্কি, ভিটি, ইউএসএ) ব্যবহার করে শোষণটি 570 এনএম পরিমাপ করা হয়েছিল। 2.8.সেলুলার অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট অ্যাস
প্রথমে, 1 × 10একটি কূপ প্লেটের প্রতিটি কূপে সম্পূর্ণ মাঝারি 5টি কোষ যোগ করা হয়েছিল এবং 16 ঘন্টা ইনকিউবেশনের জন্য একটি আর্দ্রতাযুক্ত 5 শতাংশ CO2-এ 37 ডিগ্রীতে ইনকিউব করা হয়েছিল। সাইটোটক্সিসিটি এবং দ্রবণীয়তা পরীক্ষা থেকে প্রাপ্ত তথ্যের উপর ভিত্তি করে, ভারতীয় চন্দন তেলের সর্বোত্তম ঘনত্ব আটটি ভিন্ন ঘনত্বে ভারতীয় চন্দন তেল পরীক্ষা করে নির্ধারণ করা হয়েছিল: যথা,0.2 শতাংশ ,0.1 শতাংশ ,0৷{15}}৭ শতাংশ ,0৷{20}5 শতাংশ ,0৷{27}}25 শতাংশ ,{ {29}}৷{31}}1 শতাংশ,005 শতাংশ, এবং 0.001 শতাংশ৷ একটি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে, quercetin (Sigma-Aldrich, St.Louis,MO,USA) এই পরীক্ষায় 0.0075 শতাংশ, 0.00375 শতাংশ, 0.001875 শতাংশ, 0.0009375 শতাংশ, 0.0020375 শতাংশ এবং .0047 শতাংশের ছয়টি ভিন্ন ঘনত্বে পরীক্ষা করা হয়েছিল। তারপর, HaCaT কোষগুলিকে 1 মিমি নন-ফ্লুরোসেন্ট প্রোব, 21,7'-ডিক্লোরোফ্লুরেসসিন ডায়াসেটেট (ডিসিএফএইচ-ডিএ) (সিগমা, সেন্ট লুইস, এমও, ইউএসএ) 37 ডিগ্রি এবং 5 শতাংশ CO2-তে তিন ঘন্টা ধরে চিকিত্সা করা হয়েছিল। . DCFH এর জারণ বিক্রিয়া শুরু হয়েছিল 600 uM AAPH (2,2'-azobis(2-amidinopropane) dihydrochloride) (Sigma, St. Louis, MO, USA) যোগ করে। লাইসিস বাফার (পিবিএস-এ 2 শতাংশ ট্রাইটন এক্স-100) কূপগুলিতে যোগ করা হয়েছিল। তারপর, ফ্লুরোসেন্স পরিমাপ করা হয়েছিল। Synergy HTX মাল্টিমোড মাইক্রোপ্লেট রিডার (BioTek, Winooski, VT, USA) ব্যবহার করে 485/88 এনএম এবং নির্গমন 528/30 এনএম উত্তেজনার তরঙ্গদৈর্ঘ্য পরিমাপ করা হয়েছিল।
2.9.আন্তঃকোষীয় প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতি (ROS) স্ক্যাভেঞ্জিং অ্যাকটিভিটি অ্যাসে
আনুমানিক 1×10 ডিগ্রী HaCaT কোষগুলি বিভিন্ন 24-কূপ প্লেটে প্রতি কূপে বীজ করা হয়েছিল। 37 ডিগ্রীতে 16 ঘন্টার অভিযোজন ইনকিউবেশন পিরিয়ডের পর, ভারতীয় চন্দন তেল তিনটি ভিন্ন ঘনত্বে কোষে যোগ করা হয়েছিল (0.2 শতাংশ, 0.1 শতাংশ, এবং 0 .05 শতাংশ) 24 ঘন্টার জন্য 37 ডিগ্রীতে এবং 5 শতাংশ CO2 এর সাথে সম্পূরক। ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ আলফা-টোকোফেরল (ভিটামিন ই) (সিগমা-অলড্রিচ, সেন্ট লুইস, এমও, ইউএসএ) তিনটি ভিন্ন ঘনত্বেও পরীক্ষা করা হয়েছিল: যথা, 15 ইউনিট (2 শতাংশের সাথে সম্পর্কিত), 7.5 ইউনিট (1 শতাংশের সাথে সম্পর্কিত) , এবং 3.75 ইউনিট (0.5 শতাংশের সাথে সম্পর্কিত)। তারপর, কোষগুলিকে DCFH-DA (সিগমা, সেন্ট লুইস, MI, USA) দিয়ে 37 ডিগ্রি এবং 5 শতাংশ CO2-তে তিন ঘন্টা ধরে চিকিত্সা করা হয়েছিল। DCFH-DA চিকিত্সার পরে, কোষগুলি 1X PBS দিয়ে তিনবার ধুয়ে ফেলা হয়েছিল। তারপর, 96-কূপ প্লেটগুলিকে 1J/cm2 এ 412 nm এবং 450 nm নীল আলোতে বা পরিবেশগত চাপ হিসাবে সিগারেটের ধোঁয়ায় উন্মুক্ত করা হয়েছিল এবং নিয়ন্ত্রণ হিসাবে অন্ধকার পরিবেশে অপ্রকাশিত রেখে দেওয়া হয়েছিল। এক্সপোজারের পরে, সমস্ত 96 টি কূপে লাইসিস দ্রবণ (2 শতাংশ ট্রাইটন X-100 সহ) যোগ করা হয়। তারপরে, কূপ প্লেটগুলি ঝাঁকুনি দেওয়া হয়েছিল, এবং ফ্লুরোসেন্স (485/88 এনএম এবং নির্গমন 528/30 এনএম উত্তেজনার তরঙ্গদৈর্ঘ্য) সিনার্জি এইচটিএক্স মাল্টিমোড মাইক্রোপ্লেট রিডার (বায়োটেক, উইনোস্কি, ভিটি, ইউএসএ) ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিল।
2.10। ম্যাট্রিক্স মেটালোপ্রোটিনেসের মাধ্যমে কোলাজেনেস ইনহিবিশন অ্যাস-1(MP-1)
ত্বকের বায়োপসি এবং অভিযোজন সময় অনুসরণ করে, পরীক্ষার আইটেমটি 24হ্যাট37 ডিগ্রি এবং 5 শতাংশ CO2 এর জন্য প্রয়োগ করা হয়েছিল এবং ইনকিউব করা হয়েছিল। তারপর,24-কূপ প্লেটগুলি 30 মিনিটের জন্য সিগারেটের ধোঁয়া বা ওজোন (1.6 পিপিএম) এর সংস্পর্শে আসে। অবশিষ্ট প্লেটগুলি নিয়ন্ত্রণ হিসাবে অন্ধকার পরিবেশে অপ্রকাশিত রেখে দেওয়া হয়েছিল।cistanche সুবিধাতারপরে, সুপারনাট্যান্টকে একটি অ্যান্টিবডি-কোটেড ওয়েল প্লেটে স্থানান্তরিত করা হয়েছিল ম্যাট্রিক্স মেটালোপ্রোটিনেস-1 (এমপি-1) এর স্তরের মূল্যায়ন করার জন্য মানব MMP-1 ELISA কিট (সিগমা) এর নির্মাতার নির্দেশ অনুসরণ করে , সেন্ট লুইস, MI, USA)। রঙের তীব্রতার বৃদ্ধি 450 এনএম (বায়োটেক, উইনোস্কি, VI, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র) স্পেকট্রোমেট্রি দ্বারা পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল। 2.11.পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণ
পরীক্ষাগুলি স্বাধীনভাবে জৈবিক ট্রিপ্লিকেটের মধ্যে পুনরাবৃত্তি হয়েছিল। গ্রাফিকাল ডেটাতে ত্রুটি বারগুলি গড় (SEM) এর একটি আদর্শ অনুমান উপস্থাপন করে। সফ্টওয়্যার গ্রাফপ্যাড প্রিজম সংস্করণ 7 (গ্রাফপ্যাড সফ্টওয়্যার ইনক., সান ডিয়েগো, CA, USA) ব্যবহার করে পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণের জন্য একটি একমুখী আনোভা ব্যবহার করা হয়েছিল এবং যখন p-মান {{3} এর চেয়ে কম ছিল তখন একটি পরিসংখ্যানগত তাত্পর্য দাবি করা হয়েছিল }.01 (পৃ<>
3। ফলাফল
3.1.MTT(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-Diphenyltetrazolium Bromide) কোষের কার্যক্ষমতা এবং বিস্তারের জন্য অ্যাস
HaCaT কোষে অক্সিডেটিভ স্ট্রেস থেকে রক্ষা করার জন্য ভারতীয় চন্দন তেলের কার্যকারিতা নির্ধারণের আগে, চন্দন তেলের সর্বোত্তম ঘনত্ব প্রতিষ্ঠার জন্য একটি MTI পরীক্ষা করা হয়েছিল যা কোষ চক্র বা কোষের বিষাক্ততায় কোনো ত্রুটি সৃষ্টি করবে না। এইভাবে, HaCaT কোষগুলিকে 24 ঘন্টা বা 48 ঘন্টা (চিত্র 2A, B) জন্য ভারতীয় চন্দন তেলের বিভিন্ন ঘনত্বের সাথে চিকিত্সা করা হয়েছিল।

24 ঘন্টা পরে চিকিত্সায়, ভারতীয় চন্দন তেলের সর্বোচ্চ ঘনত্ব পরীক্ষা করা হয়েছে (10 শতাংশ ,2 শতাংশ, 0.6 শতাংশ ,0.5 শতাংশ ,{{1{{13 }}}}.4 শতাংশ , এবং {{20}.3 শতাংশ ) শুধুমাত্র সেল কালচার মিডিয়ার মাধ্যমে চিকিত্সা করা কোষগুলির তুলনায় 70 শতাংশের কম কোষের কার্যকারিতা গণনা প্রকাশ করেছে৷ ভারতীয় চন্দন তেলের 0.2 শতাংশের কম বা সমান ঘনত্বে, 70 শতাংশের বেশি কোষের কার্যক্ষমতা লক্ষ্য করা যায়। সমান্তরালভাবে, ভারতীয় চন্দন কাঠের তেল দিয়ে 48 ঘন্টা ধরে চিকিত্সা করা HaCaT কোষের কোষের সংখ্যাও মূল্যায়ন করা হয়েছিল (চিত্র 2B)। 10 শতাংশ ,2 শতাংশ ,0.6 শতাংশ ,0.5 শতাংশ ,0.4 শতাংশ এবং 0.3 শতাংশ ঘনত্বে , কোষের সংখ্যা 70 শতাংশের কম হ্রাস লক্ষ্য করা যেতে পারে। যাইহোক, 0.2 শতাংশ ভারতীয় চন্দন তেল দিয়ে চিকিত্সা করা কোষগুলি বা তার কম কোষের সংখ্যার ফলাফল দেখায় যা 70 শতাংশেরও বেশি কোষের কার্যকারিতা দেখায়, যা পূর্বে 24 ঘন্টার চিকিত্সার সময় পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল তা স্মরণ করিয়ে দেয়। এই ফলাফলগুলির উপর ভিত্তি করে, HaCaT কোষগুলিতে সম্পাদিত পরবর্তী সমস্ত কার্যকারিতা পরীক্ষা এবং ভারতীয় চন্দন তেলের সাথে 24 ঘন্টা বা 48 ঘন্টা চিকিত্সার প্রয়োজন 0.2 শতাংশ সর্বোচ্চ ঘনত্ব হিসাবে সঞ্চালিত হয়েছিল।
3.2.সেলুলার অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট অ্যাস
তারপরে, পেরক্সিল ইনিশিয়েটর AAPH দ্বারা প্ররোচিত অক্সিডেটিভ স্ট্রেস থেকে রক্ষা করার জন্য ভারতীয় চন্দন তেলের সম্ভাব্যতা HaCaT কোষগুলিতে পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল। এমটিটি পরীক্ষায় নির্ধারিত, ভারতীয় চন্দন তেলের সর্বোচ্চ ঘনত্ব ছিল {{0}}.2 শতাংশ, এবং সর্বনিম্ন ঘনত্ব ছিল 0৷{6}}01 শতাংশ। Quercetin, একটি পরিচিত অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, একটি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। ব্যবহৃত সর্বোচ্চ ঘনত্ব ছিল 0.0075 শতাংশ, যেখানে ব্যবহৃত সর্বনিম্ন ঘনত্ব ছিল 0.00023 শতাংশ (চিত্র 3A,B)।

ভারতীয় চন্দন তেল পরীক্ষা করা পাঁচটি সর্বোচ্চ ঘনত্বে অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট সম্ভাব্যতা দেখিয়েছে ({{0}.2 শতাংশ, 0.1 শতাংশ,0৷{8}}৭ শতাংশ ,{ {11}}। ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ quercetin. এই ফলাফলগুলি পরামর্শ দিয়েছে যে 0.2 শতাংশ ঘনত্ব, ভারতীয় চন্দন তেলে একটি অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপ রয়েছে যা 0.0075 শতাংশ পজিটিভ কন্ট্রোল কোয়ারসেটিনের অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপের মতো শক্তিশালী। ICso নির্ধারণ ভারতীয় চন্দন তেলের জন্য 0.03 শতাংশ এবং quercetin (চিত্র 3B) এর জন্য 0.002 শতাংশ পাওয়া গেছে। 3.3.আন্তঃকোষীয় প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতি (ROS) স্কেভেঞ্জিং অ্যাকটিভিটি অ্যাসে
পরিবেশগত চাপ দ্বারা প্ররোচিত অক্সিডেটিভ স্ট্রেস থেকে রক্ষা করার জন্য ভারতীয় চন্দন তেলের অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট সম্ভাবনা পরবর্তীকালে পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল। এই গবেষণায় তিনটি ভিন্ন পরিবেশ-মানসিক চাপ ব্যবহার করা হয়েছিল যথা 412 nm-এ নীল আলো, 450 nm-এ নীল আলো, এবং সিগারেটের ধোঁয়া৷ নীল আলোর উভয় তরঙ্গদৈর্ঘ্য 1J/cm2 ডোজ এ পরীক্ষা করা হয়েছিল। এমটিআই অ্যাস থেকে ভাল সেলুলার অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকারিতা দেখানো ভারতীয় চন্দন তেলের তিনটি ঘনত্ব এই পরীক্ষার জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল: যথা,0।{9}}5 শতাংশ,0.1 শতাংশ এবং 0.2 শতাংশ। আলফা-টোকোফেরল, একটি লিপোফিলিক অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, 0.5 শতাংশ এবং 2 শতাংশ (চিত্র 4) ঘনত্বে ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল।

মাত্রা বা ROS-এ একটি তীক্ষ্ণ আবেশ লক্ষ্য করা যেতে পারে যখন চিকিত্সা না করা HaCaT কোষগুলি স্ট্রেসারের সংস্পর্শে আসে: 412 nm-এ নীল আলো, 450 nm-এ নীল আলো, এবং সিগারেটের ধোঁয়া। যখন HaCaT কোষগুলিকে ভারতীয় চন্দন তেলের তিনটি ঘনত্ব (0৷{6}}5 শতাংশ ,0.1 শতাংশ এবং 0.2 শতাংশ) দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল, তখন নীল আলোর দ্বারা প্ররোচিত অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের একটি উল্লেখযোগ্য হ্রাস (412) nm বা 450 nm) বা সিগারেটের ধোঁয়া লক্ষ্য করা যায়। প্রকৃতপক্ষে, 66 শতাংশ (p<0.0001),73%>0.0001),73%><0.0001),and>0.0001),and><0001) decreases="" in="" the="" level="" of="" ros="" could="" be="" observed="" in="" cells="" treated="" with="" 0.05%,0.1%,="" and="" 0.2%="" of="" indian="" sandalwood="" oil,="" respectively="" prior="" to="" exposure="" to="" blue="" light="" at="" 412="" nm.="" in="" cells="" exposed="" to="" blue="" light="" at="" 450="" nm,="" a="" similar="" trend="" could="" be="" observed="" where="" 60%(p="0.0012),68%(p=0.0005),and" 75%(p="0.0002)decreases" could="" be="" observed="" for="" similar="" concentrations="" of="" indian="" sandalwood="" oil,="" respectively.="" moreover,="" in="" hacat="" cells="" that="" were="" exposed="" to="" cigarette="" smoke,="" indian="" sandalwood="" oil="" was="" observed="" to="" significantly="" protect="" against="" the="" ros="" induced,="" although="" the="" decrease="" was="" more="" modest="" in="" comparison="" to="" blue="" light="" at="" 412="" nm="" and="" 450="" nm.="" thus,="" at="" the="" highest="" concentration="" (0.2%)="" of="" indian="" sandalwood="" oil,="" only="" a="" 28%(p="0.001)" decrease="" in="" the="" level="" of="" ros="" was="">0001)>
যদিও পজিটিভ কন্ট্রোলের তিনটি ঘনত্ব (0.5 শতাংশ ,1 শতাংশ এবং 2 শতাংশ), আলফা-টোকোফেরল, নীল আলো 450 এনএম দ্বারা প্রবর্তিত ROS কে উল্লেখযোগ্যভাবে কমাতে পারে, শুধুমাত্র দুটি সর্বোচ্চ ঘনত্ব আলফা- টোকোফেরল (1 শতাংশ এবং 2 শতাংশ) চিকিত্সা না করা নমুনার তুলনায় সিগারেটের ধোঁয়া দ্বারা প্ররোচিত ROS-এর মাত্রাগুলির বিরুদ্ধে একটি প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব তৈরি করতে পারে। যাইহোক, আলফা-টোকোফেরলের জন্য পরীক্ষিত তিনটি ঘনত্বের কোনোটিই নীল আলো 412 এনএম দ্বারা প্ররোচিত ROS কে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করতে পারেনি। মজার বিষয় হল, ব্লু লাইট 412 এনএম এক্সপোজারের আগে আলফা-টোকোফেরলের সর্বোচ্চ ঘনত্বের সাথে চিকিত্সা করা HaCaT কোষগুলিতে, চিকিত্সা না করা কিন্তু উন্মুক্ত কোষের তুলনায় ROS-এর মাত্রা বৃদ্ধি লক্ষ্য করা যায়। এটি পরামর্শ দেয় যে ডিসিএফএইচ-ডিএ অ্যাস, আলফা-টোকোফেরল এবং 412 এনএম-এ নীল আলোর মধ্যে হস্তক্ষেপ ঘটতে পারে।
3.4। কোলাজেনেস ইনহিবিশন অ্যাস (MMP-1)
যেহেতু পরিবেশগত স্ট্রেস দ্বারা প্ররোচিত অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের বিরুদ্ধে ভারতীয় চন্দন তেলের প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব প্রদর্শন করা হয়েছিল, তাই ভারতীয় চন্দন তেল একটি ডাউনস্ট্রিম ইফেক্টর, MMP-1 নিরীক্ষণের মাধ্যমে দূষণের ক্ষতিকারক প্রভাব থেকে রক্ষা করতে পারে কিনা তার মূল্যায়নও তদন্ত করা হয়েছিল। (চিত্র 5)।

পরিবেশগত চাপের সংস্পর্শে আসা অপরিশোধিত নমুনায় এমপি{{0}}-এর মাত্রা ব্যাপকভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে যখন চিকিত্সা না করা এবং অপ্রকাশিত নমুনার তুলনায়। ওজোনের সংস্পর্শে এলে, ভারতীয় চন্দন তেল MMP-1 এর প্রকাশকে 88 শতাংশ (p <0.0001) দ্বারা="" বাধা="" দেয়।="" ভারতীয়="" চন্দন="" তেলও="" সিগারেটের="" ধোঁয়ার="" সংস্পর্শে="" আসার="" সময়="" mmp-1="" মাত্রার="" উপর="" একটি="" প্রতিরোধক="" প্রভাব="" প্রদর্শন="" করে।="" এই="" এক্সপোজারের="" জন্য,="" চিকিত্সা="" না="" করা="" এবং="" চিকিত্সা="" করা="" নমুনার="" মধ্যে="" পার্থক্য="" ছিল="" 70="" শতাংশ="" (p="0.0003)," যা="" পরিসংখ্যানগতভাবে="">0.0001)>
4। আলোচনা
ভারতীয় চন্দন কাঠ 2500 বছরেরও বেশি সময় ধরে ব্যবহার করা হচ্ছে, এবং এর বাণিজ্যিক ব্যবহার 300 BCE [2,6] থেকে শুরু হয়েছে। এটি পূর্বে এর অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, অ্যান্টি-টাইরোসিনেজ, অ্যান্টি-ইনফ্লেমেটরি, অ্যান্টি-প্রলিফারেটিভ এবং অ্যান্টি-মাইক্রোবিয়াল বৈশিষ্ট্যের জন্য রিপোর্ট করা হয়েছে [10-12,23,24]। চন্দন কাঠের ফার্মাকোলজিক্যাল ক্রিয়াকলাপের রিপোর্ট সত্ত্বেও, শুধুমাত্র কয়েকটি গবেষণায় প্রসাধনী উপাদান হিসাবে এর উপকারিতা মূল্যায়ন করা হয়েছে। বিশেষ করে, পরিবেশগত চাপের ক্ষতিকর প্রভাবের বিরুদ্ধে ত্বককে রক্ষা করার জন্য ভারতীয় চন্দন তেলের সম্ভাব্য সুবিধার কথা কখনও জানানো হয়নি। এই সমীক্ষায়, আমরা দেখিয়েছি যে ভারতীয় চন্দন তেল ত্বকের বিস্ফোরণে সিগারেটের ধোঁয়া এবং ওজোনের মতো দূষণকারীগুলির বিরুদ্ধে একটি উল্লেখযোগ্য প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব দেখিয়েছে। নীল আলো এবং সিগারেটের ধোঁয়া উভয়ের দ্বারা পরিবেশগত উস্কানি দ্বারা প্ররোচিত অক্সিডেটিভ স্ট্রেস থেকে HaCaT কোষগুলিকে রক্ষা করতে ভারতীয় চন্দন তেলকেও দেখানো হয়েছিল। আমরা আরও দেখিয়েছি যে ভারতীয় চন্দন তেল ত্বকের এক্সপ্ল্যান্টে কোলাজেনেস MMP{11}} মাত্রা হ্রাস করে। ভারতীয় চন্দন কাঠের তেলের প্রতিরোধক প্রভাব প্রকাশ করে সেলুলার অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট অ্যাস করা হয়েছিল। এই গবেষণায়, 2,2'-অ্যাজোবিস (2-এমিডিনোপ্রোপেন) ডাইহাইড্রোক্লোরাইড (AAPH) একটি মুক্ত র্যাডিক্যাল উৎপন্ন যৌগ হিসেবে ব্যবহার করা হয়েছিল যা HaCaT কোষে অক্সিডেটিভ স্ট্রেসকে নকল করতে পারে। এটি র্যাডিক্যাল প্রজন্মের একটি ধ্রুবক হারকে প্ররোচিত করতে ব্যবহৃত হয়েছিল, যা মুক্ত-র্যাডিক্যাল-স্ক্যাভেঞ্জিং কার্যকলাপের মূল্যায়ন করার জন্য পর্যাপ্ত সময় দেয় [25]। Quercetin ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে বেছে নেওয়া হয়েছিল। আমাদের গবেষণায় দেখা গেছে যে ভারতীয় চন্দন তেলের প্রতিষ্ঠিত অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কোয়ারসেটিনের সমান অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা রয়েছে, যেখানে উভয় পরীক্ষা পণ্যের জন্য ব্যবহৃত সর্বোচ্চ ঘনত্বে ROS-এর স্তরে 95-85 শতাংশ হ্রাস লক্ষ্য করা যেতে পারে।
তারপরে, HaCaT কোষগুলি পরিবেশগত অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের শিকার হয়েছিল, সিগারেটের ধোঁয়া এবং পরবর্তীকালে নীল আলোর দুটি স্বতন্ত্র তরঙ্গদৈর্ঘ্য ব্যবহার করে। ব্যবহৃত নীল আলোর দুটি তরঙ্গদৈর্ঘ্যের তুলনায় সিগারেটের ধোঁয়া HaCaT কোষে অনেক বেশি চাপ দেয়। প্রকৃতপক্ষে, সিগারেটের ধোঁয়া রাসায়নিকভাবে সক্রিয় দূষণকারীর সাথে মানুষের এক্সপোজারের উত্স হিসাবে সর্বব্যাপী পরিবেশগত বিপদ তৈরি করে। প্রাক্তন ভিভো পরীক্ষায় ওজোন একইভাবে ব্যবহার করা হয়েছিল। উভয় স্ট্রেসর হাইড্রোক্সিল র্যাডিকাল এবং হাইড্রোজেন পারক্সাইড সহ উচ্চ মাত্রার ROS তৈরি করেছে, যা ত্বকে ক্ষতিকারক রোগগত প্রক্রিয়াগুলির সাথে যুক্ত হতে পারে [26,27]। নীল আলোর তুলনায় সিগারেটের ধোঁয়ার সংস্পর্শে আসা কোষগুলিতে ভারতীয় চন্দন তেলের প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব বেশি ছিল। এটি ব্যাখ্যা করা যেতে পারে যে এই গবেষণায় সম্পাদিত বিভিন্ন পরীক্ষায়, সিগারেটের ধোঁয়া নীল আলোর চেয়ে প্রায় দ্বিগুণ বেশি ROS প্ররোচিত করে। এইভাবে, এমনকি ভারতীয় চন্দন তেলের সর্বোচ্চ ঘনত্ব পরীক্ষা করা (0.2 শতাংশ), সেইসাথে 2 শতাংশ (15 ইউনিট) আলফা-টোকোফেরল নিয়ন্ত্রণে, তারা সম্ভবত ROS-এর উচ্চ পরিমাণে অভিভূত হয়েছিল প্ররোচিত
UV-এর এক্সপোজার, বার্ধক্যজনিত কারণে প্রাকৃতিক কার্যকরী পরিবর্তনের সাথে মিলিত হয়ে, ডার্মাল ফাইব্রোব্লাস্টগুলি MMP-এর উৎপাদন বাড়ায়-1 [২৮,২৯]। ম্যাট্রিক্স মেটালোপ্রোটিনেস-1 (এমএমপি-1) হল একটি জিঙ্ক এবং ক্যালসিয়াম-নির্ভর এন্ডোপেপ্টিডেস যা সিন-থিসাইজড এবং ডার্মাল ফাইব্রোব্লাস্ট এবং কেরাটিনোসাইট উভয় থেকে মুক্তি পায়। এটি এক্সট্রা সেলুলার ম্যাট্রিক্সে (ECM) পাওয়া কোলাজেনকে ভেঙে কাজ করে। তারপর, এমএমপি-1 একটি নিষ্ক্রিয় প্রোএনজাইম হিসাবে মুক্তি পায়, যা পরবর্তীতে প্রোটিওলাইটিক ক্লিভেজের মাধ্যমে সক্রিয় হয়, যার ফলে এটির সক্রিয় ফর্ম মুক্তি পায়। একটি আপগ্র্যুলেশনের কারণে সৃষ্ট এর কার্যকলাপের একটি উন্নত অভিব্যক্তি বহির্মুখী ম্যাট্রিক্সের অবনতির সাথে জড়িত এবং মানুষের ত্বকের অকাল ফটোগ্রাফির পাশাপাশি ত্বকের ক্যান্সারের দিকে পরিচালিত করে [30]।
ত্বকের টিস্যু বা কালচারড ফাইব্রোব্লাস্টে, MMP-1-এর সক্রিয় এবং নিষ্ক্রিয় রূপ উভয়ই কালচার মিডিয়াতে প্রকাশিত হয় [২৮]। যাইহোক, এটি লক্ষ করা উচিত যে উচ্চ-থ্রুপুট ELISA অ্যাস ব্যবহার করা হয়েছে শুধুমাত্র প্রো-ডোমেন এবং MMP এর সক্রিয় ফর্মের পরিমাপ করা হয়েছে-1 কিন্তু MMP এর নিষ্ক্রিয় ফর্মের পরিমাপ করেনি-1 [২৮]। উল্লেখযোগ্যভাবে, ভারতীয় চন্দন তেল প্রাক্তন ভিভো ত্বকে ম্যাট্রিক্স মেটালোপ্রোটিনেজ-1 (MP-1) এর মাত্রা উল্লেখযোগ্য পরিমাণে কমাতে সক্ষম হয়েছিল। যেমন, আমরা এমপি-1 ভারতীয় চন্দন তেলের উল্লেখযোগ্য হ্রাস দেখিয়ে এমএমপি-1 এনজাইমের সক্রিয় ফর্মের উপর কাজ করে বলে ধারণা করতে পারি। এইভাবে, এটা উপসংহারে পৌঁছানো যেতে পারে যে ভারতীয় চন্দন তেল কার্যকরভাবে অন্তত MMP সক্রিয় ফর্মের কার্যকলাপ বৃদ্ধিতে বাধা দেয়-1। ভবিষ্যতে, ভারতীয় চন্দন তেল দ্বারা MMP{12}}-এর কার্যকলাপ ব্যাহত হওয়ার পথগুলি আরও অন্বেষণ করার জন্য আরও গবেষণা করা যেতে পারে।
এটি ভালভাবে নথিভুক্ত করা হয়েছে যে পরিবেশগত কারণগুলি ত্বকের দুর্বলতায় অবদান রাখে এবং এর ফলে ত্বকের অকাল বার্ধক্য হয় [16]। ত্বরান্বিত ত্বকের বার্ধক্যের জন্য দায়ী কারণগুলি মূলত ROS-এর অত্যধিক অভিব্যক্তি এবং MMPs এর আপগ্র্যুলেশন দ্বারা অবদান রাখে [16]। প্রকৃতপক্ষে, ত্বকের বয়স বাড়ার সাথে সাথে এবং মুক্ত র্যাডিকেলের অভিব্যক্তিতে ভারসাম্যহীনতার কারণে, এপিডার্মিসের কেরাটিনোসাইটের টার্নওভার নানবার কমে যায়। এটি ত্বকে পাওয়া কোলাজেনের পরবর্তী হ্রাসের দিকে পরিচালিত করে। এই পরিবর্তনগুলি লুপ ব্যাক এবং ফ্রি র্যাডিকেলগুলিতে উত্পাদন বৃদ্ধিতে অবদান রাখার জন্য রিপোর্ট করা হয়েছিল [31]। এছাড়াও, ত্বকের অকাল বার্ধক্যের আরেকটি কারণ হল MMP-এর বর্ধিত অভিব্যক্তি এবং এর ইনহিবিটরস (TIMP) স্তরের হ্রাস। এগুলি ROS এর আপগ্র্যুলেশনের সাথে সম্পর্কিত বলে পাওয়া গেছে[32]। অতএব, ত্বকে প্ররোচিত ROS-এর স্তর অকাল ত্বকের বার্ধক্যের দিকে প্রতিক্রিয়াগুলিতে কেন্দ্রীয় ভূমিকা পালন করে।
এখানে, আমরা দেখিয়েছি যে ভারতীয় চন্দন তেল 412 এনএম এবং 450 এনএম এএনসিডিতে নীল আলো দ্বারা সৃষ্ট অক্সিডেশনের বিরুদ্ধে সুরক্ষিত থাকে এবং কেরাটিনোসাইটের উপর সিগারেটের ধোঁয়ার প্রভাবের সাথে নীল আলোর সাথে পর্যবেক্ষণ করা ROS কার্যকলাপে আনুমানিক 75 শতাংশ হ্রাস পায় এবং আনুমানিক হ্রাস পায়। ROS কার্যকলাপে 30 শতাংশ সিগারেটের ধোঁয়ার জন্য পর্যবেক্ষণ করা হয়েছে। ROS এবং MMP-1-এর এই হ্রাস প্রস্তাব করেছে যে ভারতীয় চন্দন তেল সম্ভবত ত্বকের বার্ধক্য প্রতিরোধী বৈশিষ্ট্যের অধিকারী। দূষণকারী দ্বারা প্রভাবিত এই ত্বকের উপাদানগুলিকে প্রারম্ভিক ত্বকের বার্ধক্য রোধে ভারতীয় চন্দন তেলের মতো প্রসাধনী উপাদান দ্বারা লক্ষ্য করা যেতে পারে। পরিশেষে, পরিবেশগত চাপের কারণে ত্বকের বার্ধক্য ভালো ত্বকের স্বাস্থ্য বজায় রাখার জন্য বিবেচনা করা একটি গুরুত্বপূর্ণ উপাদান।
Velasco et al দ্বারা রিপোর্ট করা হয়েছে। একটি আদর্শ প্রসাধনী গঠন অর্জনের জন্য, উভয় বৈশিষ্ট্যই ব্যাপকভাবে চাওয়া হয়। এগুলি প্রসাধনী পণ্যগুলির জন্ম দেবে যা প্রদাহের মতো স্বল্পমেয়াদী ক্ষতি কমাতে পারে এবং বিপাকীয় ক্রিয়াকলাপ এবং কোষের পার্থক্য বাড়াতে সিগন্যালিং পথকে আপগ্রেড করতে পারে [15]। এই সমীক্ষায়, আমরা ভারতীয় চন্দন তেলের প্রতিরক্ষামূলক এবং বার্ধক্য বিরোধী প্রভাবকে প্রমাণ করে প্রতিশ্রুতিশীল প্রাথমিক ফলাফলের রিপোর্ট করেছি। এইভাবে, একটি প্রসাধনী উপাদান হিসাবে একজন সফল প্রার্থী হওয়ার জন্য, ভারতীয় চন্দন তেলের কার্যকরী বৈশিষ্ট্যের আরও মূল্যায়ন করার জন্য আরও কার্যকারিতা পরীক্ষা করা উচিত। তদ্ব্যতীত, পরিবেশগত এক্সপোসোমের দীর্ঘমেয়াদী এবং স্বল্পমেয়াদী প্রভাবগুলি পরীক্ষা করার জন্য তেলের ত্বক সংক্রান্ত কার্যকলাপ এবং ব্যবহারের মাত্রার ভিভো মূল্যায়ন করা বাকি রয়েছে।
5। উপসংহার
আমরা এই গবেষণায় ভারতীয় চন্দন তেলের একটি অভিনব বৈশিষ্ট্যকে ভিট্রোতে এবং মানব ত্বকের এক্স ভিভোতে পরিবেশগত চাপের ক্ষতিকর প্রভাবের বিরুদ্ধে একটি প্রতিরক্ষামূলক সক্রিয় উপাদান হিসাবে বর্ণনা করেছি।
একটি সেলুলার অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট অ্যাস ব্যবহার করে ভারতীয় চন্দন তেলের অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকারিতা অন্বেষণ করা হয়েছিল যেখানে পরীক্ষার পদার্থটি পেরোক্সিল ইনিশিয়েটর AAPH দ্বারা প্ররোচিত ROS এর স্তরকে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেছে। পরবর্তী ফলাফলের কথা মনে করিয়ে দেয়, ভারতীয় চন্দন তেল পরবর্তীকালে 412 এনএম এবং 450 এনএম এ নীল আলো এবং সিগারেটের ধোঁয়ার মতো পরিবেশগত চাপ দ্বারা প্ররোচিত অক্সিডেটিভ স্ট্রেস থেকে HaCaT কোষকে রক্ষা করতেও দেখানো হয়েছিল।
দূষণের (সিগারেটের ধোঁয়া এবং ওজোন) ক্ষতিকারক প্রভাবের বিরুদ্ধে ভারতীয় চন্দন তেলের প্রতিরক্ষামূলক প্রভাবও মানুষের ত্বক এক্সপ্ল্যান্টের আরও জটিল মডেল ব্যবহার করে পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল। আমাদের ফলাফলগুলি দেখিয়েছে যে ভারতীয় চন্দন তেল সিগারেটের ধোঁয়া বা ওজোন দ্বারা প্ররোচিত MMP-1 মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করতে সক্ষম।
এই সমীক্ষায় উপস্থাপিত ফলাফলগুলি পরামর্শ দিয়েছে যে ভারতীয় চন্দন তেলের ইতিমধ্যে বিদ্যমান সুগন্ধি এবং অ্যারোমাথেরাপি অ্যাপ্লিকেশনগুলি ছাড়াও পরিবেশগত চাপের বিরুদ্ধে সুরক্ষার জন্য চর্মবিদ্যায় একটি সক্রিয় উপাদান হিসাবে কাজ করার সম্ভাবনা রয়েছে, আরও গভীরভাবে অধ্যয়নের পরে, ভারতীয় চন্দন তেলও পরিবেশন করতে পারে। প্রসাধনী যত্নে একটি বহুমুখী উপাদান হিসাবে এর ব্যবহারে প্রতিশ্রুতিশীল প্রার্থী হিসাবে।
এই নিবন্ধটি প্রসাধনী 2021, 8, 53 থেকে নেওয়া হয়েছে। https://doi.org/10.3390/cosmetics8020053 https://www.mdpi.com/journal/cosmetics






