স্পাইনাল কনট্যুশন ইনজুরির মাউস মডেলে পলির (প্রো-17 এস্ট্রাডিওল) তীব্র ডোজ-নির্ভর নিউরোপ্রোটেক্টিভ প্রভাব

বিমূর্ত

17 -Estradiol (E2) মেরুদণ্ডের আঘাতের প্রাক-ক্লিনিকাল মডেলগুলিতে নিউরোপ্রোটেকশন প্রদান করে যখন পদ্ধতিগতভাবে পরিচালনা করা হয়। এই অধ্যয়নের লক্ষ্য ছিল পলি (প্রো-ই 2) ফিল্ম বায়োমেটেরিয়াল ব্যবহার করে টেকসই সময়ের জন্য আহত মেরুদণ্ডের কর্ডে স্থানীয়ভাবে E2 প্রয়োগ করা।

মানুষ যখন মেরুদণ্ডের আঘাত সম্পর্কে আরও বেশি শিখছে, আমরা মানুষের শারীরিক এবং মানসিক স্বাস্থ্যের উপর এর প্রভাব বুঝতে শুরু করেছি। যদিও মেরুদন্ডের আঘাতের কারণে অনেক প্রতিকূল প্রভাব পড়তে পারে, ভাগ্যক্রমে, স্মৃতিতে তাদের প্রভাব নিয়ন্ত্রণ করা যায়।

প্রথমত, আমাদের মেরুদণ্ডের আঘাত কী তা স্পষ্ট করতে হবে। স্পাইনাল কর্ড হল মেরুদণ্ডে সুরক্ষিত একটি স্নায়ু যা মস্তিষ্ক থেকে শরীরের বিভিন্ন অংশে নির্দেশাবলী প্রেরণের জন্য দায়ী। মেরুদন্ডে আঘাত লাগলে, শরীরের কিছু অংশ মস্তিষ্কের সাথে ভাল সংযোগ হারাবে, যার ফলে অঙ্গ-প্রত্যঙ্গের নড়াচড়া, সংবেদন এবং স্বায়ত্তশাসিত নিয়ন্ত্রণ ক্ষতিগ্রস্ত হবে।

স্পাইনাল কর্ড ইনজুরি মানুষের স্মৃতিতে একটি নির্দিষ্ট প্রভাব ফেলতে পারে, বিশেষ করে মেরুদণ্ডের আঘাতে আক্রান্ত রোগীদের পুনর্বাসনের প্রাথমিক পর্যায়ে। মেরুদন্ডের আঘাতের কারণে একজন ব্যক্তির মনোযোগ, কাজের স্মৃতিশক্তি এবং মানসিক প্রক্রিয়াকরণ ক্ষমতার অবনতি ঘটতে পারে, যা একজন ব্যক্তির স্মৃতিশক্তিকে প্রভাবিত করবে।

যাইহোক, রোগীদের পুনর্বাসন চিকিত্সার মধ্য দিয়ে এই নেতিবাচক প্রভাবগুলি ধীরে ধীরে হ্রাস পাবে। মেমরি গেম এবং অন্যান্য জ্ঞানীয় প্রশিক্ষণে অংশগ্রহণ করে রোগীরা তাদের স্মৃতিশক্তি উন্নত করতে পারে। একই সময়ে, শারীরিক পুনর্বাসন শরীরের মোটর এবং সংবেদনশীল ফাংশন পুনরুদ্ধার করার জন্যও সহায়ক, যার ফলে মানসিক এবং জ্ঞানীয় ফাংশনগুলি উন্নত হয়।

আমাদের মেরুদণ্ডের আঘাতে আক্রান্ত রোগীদের পুনর্বাসন চিকিত্সায় সক্রিয়ভাবে অংশগ্রহণ করতে এবং শারীরিক ও মানসিক স্বাস্থ্যের উন্নতির জন্য পুনর্বাসন প্রশিক্ষণে অবিরত থাকতে উত্সাহিত করা উচিত। দয়া করে বিশ্বাস করুন যে সঠিক জ্ঞান এবং অপারেশন পরবর্তী চিকিত্সার সাহায্যে, রোগীরা স্মৃতিতে মেরুদণ্ডের আঘাতের প্রভাব কাটিয়ে উঠতে পারে এবং একটি সক্রিয় জীবনযাপন চালিয়ে যেতে পারে। এটা দেখা যায় যে আমাদের মেমরির উন্নতি করতে হবে, এবং Cistanche উল্লেখযোগ্যভাবে স্মৃতিশক্তি উন্নত করতে পারে কারণ Cistanche এছাড়াও নিউরোট্রান্সমিটারের ভারসাম্য নিয়ন্ত্রণ করতে পারে, যেমন অ্যাসিটাইলকোলিনের মাত্রা বৃদ্ধি এবং বৃদ্ধির কারণ, যা স্মৃতি এবং শেখার জন্য খুবই গুরুত্বপূর্ণ। এছাড়াও, Cistanche রক্ত ​​​​প্রবাহকে উন্নত করতে পারে এবং অক্সিজেন সরবরাহকে উন্নীত করতে পারে, যা নিশ্চিত করতে পারে যে মস্তিষ্ক পর্যাপ্ত পুষ্টি এবং শক্তি পায়, যার ফলে মস্তিষ্কের জীবনীশক্তি এবং সহনশীলতা উন্নত হয়।

মেমরি উন্নত করতে সম্পূরকগুলি জানুন ক্লিক করুন

প্রাপ্তবয়স্ক পুরুষ ইঁদুরের মেরুদণ্ডের আঘাতের পরে, পলি (প্রো-ই2) ফিল্মগুলি সাবডুরালি রোপণ করা হয়েছিল, এবং আঘাত এবং ইমপ্লান্টেশনের 7 দিন পরে ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি ব্যবহার করে নিউরোপ্রোটেকশন মূল্যায়ন করা হয়েছিল। এই গবেষণায়, পলি (প্রো-ই2) ফিল্মগুলি প্রতিক্রিয়াকে প্রভাবিত না করেই নিউরোফ্লেমেটরির পরিমিত উন্নতি করেছে। আহত নিয়ন্ত্রণের সাথে তুলনা করলে।

মুক্তি পাওয়া E2 ডোজ বাড়ানোর জন্য, বলস-রিলিজিং পলি(প্রো-ই2) ফিল্মগুলি পলি(প্রোই2) ফিল্মে আনবাউন্ড E2 যুক্ত করে তৈরি করা হয়েছিল।

যাইহোক, আহত নিয়ন্ত্রণের তুলনায়, বলাস-রিলিজিং পলি(প্রো-ই2) ফিল্মগুলি আঘাতের পরে 7 বা 21 দিনের মধ্যে নিউরোপ্রোটেকশন বা প্রদাহকে সীমিত করেনি। ভবিষ্যতের কাজগুলি পলি (প্রো-ই2) বায়োমেটেরিয়াল তৈরি করতে সক্ষম হবে। আরো সুনির্দিষ্টভাবে E2 এর থেরাপিউটিক ডোজ প্রকাশ করে।

ভূমিকা

ট্রমাটিক স্পাইনাল কর্ড ইনজুরি (SCI) একটি দুর্বল অবস্থা যা মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রে প্রতি বছর 18,000 জনের বেশি মানুষকে প্রভাবিত করে, যেখানে SCI-এর বিশ্বব্যাপী প্রসার প্রতি মিলিয়নে 236 এবং 1009-এর মধ্যে অনুমান করা হয়।2

এসসিআই দ্বারা প্রভাবিত রোগীদের গুরুতর স্নায়বিক ঘাটতি হয় যার মধ্যে রয়েছে সংবেদন হারানো, অন্ত্র/মূত্রাশয়ের কার্যক্ষমতা নষ্ট হওয়া এবং পক্ষাঘাত। 3,4 মেরুদন্ডের উপর প্রাথমিক প্রভাবের ফলে আঘাতের স্থানে নিউরোনাল মৃত্যু ঘটে যা অ্যাস্ট্রোসাইট এবং ম্যাক্রোফেজ জড়িত বিভিন্ন সেকেন্ডারি ইনজুরি ক্যাসকেড দ্বারা আরও বেড়ে যায়। .

সময়ের সাথে সাথে, এই অ্যাস্ট্রোসাইটগুলি একটি গ্লিয়াল দাগ তৈরি করে যা ক্ষত প্রান্তের বাইরে অ্যাক্সনগুলির সম্প্রসারণকে বাধা দেয়। 5 SCI-এর চিকিত্সার জন্য আজ পর্যন্ত কোনও FDA-অনুমোদিত নিউরোপ্রোটেক্টিভ ওষুধ নেই।

কয়েক দশক ধরে বিস্তৃত গবেষণাটি সেকেন্ডারি ইনজুরির কারণে নিউরোনাল ক্ষয় রোধ করতে এবং/অথবা অ্যাক্সোনাল রিজেনারেশনকে উন্নীত করার জন্য বায়োমোলিকুলের পদ্ধতিগত প্রশাসনের উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করেছে, যা শেষ পর্যন্ত হারানো ফাংশন পুনরুদ্ধারের দিকে পরিচালিত করে। সেক্স হরমোন, 17 -এস্ট্রাডিওল(E2)।

E2 প্রশাসন কেন্দ্রীয় স্নায়ুতন্ত্রের জন্য ব্যাপকভাবে উপকারী প্রদাহ হ্রাস করে, 7-9 গ্লিয়াল সেল প্রতিক্রিয়া হ্রাস করে, 10 অক্সিডেটিভ স্ট্রেস সীমিত করে, 11-14 এবং গ্লুটামেট-প্ররোচিত এক্সিটোটক্সিক নিউরোনাল ডেথ হ্রাস করে। 15 E2 বিভিন্ন SCI মডেলের কার্যকরী পুনরুদ্ধারের উন্নতি করে। 16,17 মজার বিষয় হল, E2 এর একাধিক-ডোজ পদ্ধতিগত প্রশাসন কার্যকরী পুনরুদ্ধারকে আরও দ্রুত 18,19 প্ররোচিত করে শুধুমাত্র একটি ডোজ গ্রহণকারী প্রাণীদের তুলনায়।

যেহেতু E2 একাধিক-ডোজ পদ্ধতির মাধ্যমে কার্যকরী পুনরুদ্ধারকে আরও কার্যকরভাবে প্রচার করে, তাই আমাদের লক্ষ্য ছিল E2 এর একাধিক ডোজ/সিস্টেমিক ইনজেকশন থেকে উদ্ভূত সমস্যা দূর করতে আঘাতের জায়গায় (কোনও অফ-টার্গেট প্রভাব প্রতিরোধ করার জন্য) স্থানীয়ভাবে E2 ছেড়ে দেওয়া।

সেই লক্ষ্যে, আমরা একটি পলি (প্রোড্রাগ) বায়োমেটেরিয়াল কৌশল নিযুক্ত করেছি যেখানে নেটিভ ড্রাগ (E2) প্রথমে প্রতিক্রিয়াশীল অ্যালিল গ্রুপগুলির সাথে কার্যকরী করা হয়েছিল এবং তারপরে ফটোইনিশিয়েটেডথিওল-এনি র্যাডিকাল যোগের মাধ্যমে একটি নমনীয় অলিগো-(ইথিলিন গ্লাইকোল) ডিথিওলের মাধ্যমে পলিমারাইজ করা হয়েছিল, যেমনটি পূর্বে বর্ণিত হয়েছে। .20 আমরা উচ্চ আণবিক ওজনের পলিমার চেইন পেয়েছি, যা পলিমারের মধ্যে পুনরাবৃত্তিকারী একক হিসাবে একটি E2prodrug নিয়ে গঠিত।

হাইড্রোলাইটিক অবক্ষয়ের পরে, পলিমার ধীরে ধীরে পার্শ্ববর্তী মিডিয়াতে E2 প্রকাশ করে। মুক্তির অন্যান্য উপজাতগুলি হল কার্বন ডাই অক্সাইড এবং অলিগো (ইথিলিন গ্লাইকল) (ওইজি) (চিত্র 1)। ফিল্ম বা মাইক্রোফাইবারগুলিতে গড়া পলি (প্রো-ই2) চেইনগুলি কয়েক মাস থেকে বছরের সময়ের স্কেলে ভিট্রোতে ন্যানোমোলার ঘনত্বে E2 ছেড়ে দিতে পারে। .20

এই পলি (প্রো-ই2) স্ক্যাফোল্ডগুলি থেকে নিঃসৃত E2 হল বায়োঅ্যাকটিভ, এবং এই স্ক্যাফোল্ডগুলি হাইড্রোজেন পারক্সাইড-প্ররোচিত অক্সিডেটিভ স্ট্রেস থেকে নিউরনগুলিকে রক্ষা করে ভিট্রোতে নিউরোট্রফিজম এবং নিউরোপ্রোটেকশন প্রচার করে। এখানে, আমরা আঘাতের পরে অবিলম্বে আঘাতের পরে এসসিআই-এর একটি মুরিন মডেলে পলি (প্রো-ই 2) ফিল্মগুলি প্রয়োগ করেছি এবং ভিভোতে তাদের নিউরোপ্রোটেক্টিভ ক্ষমতা মূল্যায়ন করেছি।

আমাদের প্রাথমিক পলি (প্রো-ই 2) ফিল্ম ডিজাইন প্রদাহজনক প্রতিক্রিয়াকে প্রভাবিত না করে আঘাতের জায়গায় তীব্রভাবে (7 দিন আঘাতের পরে) নিউরোপ্রোটেকশন বাড়িয়েছে। যেহেতু পলি(প্রো-E2) ফিল্মগুলি প্রতিদিন E2 এর ন্যানোগ্রাম প্রকাশ করে, তাই আমরা আরেকটি রিলিজ কৌশল তৈরি করেছি যেখানে পলি(প্রো-ই2) ম্যাট্রিক্সে আনবাউন্ডE2 যুক্ত করা হয়েছিল। আমরা অনুমান করেছি যে আনবাউন্ড E2 এর বোলাস রিলিজ অতিরিক্ত নিউরোপ্রোটেক্টিভ সুবিধা প্রদান করতে পারে।

Poly(pro-E2) ফিল্মগুলি E2 একটি বিস্ফোরিত পদ্ধতিতে প্রকাশ করে এবং তারপরে নিম্ন ঘনত্বে পলিমার থেকে E2 এর টেকসই মুক্তি। ইমিউনোহিস্টোলজিক্যাল স্টেনিং মূল্যায়ন করেছে নিউরন, অ্যাস্ট্রোসাইট, এবং ম্যাক্রোফেজ/মাইক্রোগ্লিয়া আঘাতের স্থানে তীব্রভাবে (7 দিন আঘাতের পরে) এবং দীর্ঘস্থায়ীভাবে (21 দিন-পরবর্তী-আঘাত) SCI-এর পরে এই বোলাস-রিলিজিং পলি (প্রো-ই2) ফিল্মগুলির উপস্থিতিতে।

ফলাফল এবং আলোচনা

পলি(প্রো-ই2) ফিল্মগুলি ন্যানোমোলার ঘনত্বে E2 প্রকাশ করে, ডোরসাল রুট গ্যাংলিয়ন থেকে নিউরোনাল আউটগ্রোথকে উন্নীত করে এবং ভিট্রোতে হাইড্রোজেন পারক্সাইড-প্ররোচিত অক্সিডেটিভ স্ট্রেস থেকে নিউরনকে রক্ষা করে। কনটুশন এসসিআই-এর একটি মুরিন মডেল ব্যবহার করে ভিভোতে নিউরোপ্রোটেকশন প্রদানের জন্য ফিল্ম।

প্রাপ্তবয়স্ক পুরুষ ইঁদুরগুলিতে এসসিআই প্ররোচিত হয়েছিল এবং অবিলম্বে আঘাতের পরে, পলি (প্রো-ই 2) ফিল্মগুলি সরাসরি আঘাতের উপরে স্থাপন করা হয়েছিল (চিত্র 2A)। ইমপ্লান্টেশনের পরে পলি (প্রো-ই 2) ফিল্মগুলি রয়ে গেছে তা নিশ্চিত করার জন্য, রোডামাইন বি সহ লোড করা পলি (প্রো-ই2) ফিল্মগুলি আহত প্রাণীদের মেরুদন্ডে বসানো হয়েছিল। সাত দিনের পরে-ইমপ্লান্টেশন, মেরুদণ্ডের কর্ডগুলি সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং একটি হালকা মাইক্রোস্কোপ (চিত্র 2 বি) ব্যবহার করে চিত্রিত করা হয়েছিল। সমস্ত প্রাণীর মধ্যে, ইমপ্লান্ট করা রোডামাইন বি-লোডেড পলি (প্রো-ই 2) ফিল্মগুলি ইমপ্লান্টেশন প্রোটোকলকে স্থানান্তরিত করে।

নিউরোপ্রোটেকশন এবং প্রদাহ উপশম করার জন্য পলি (প্রো-ই2) ফিল্মগুলির ক্ষমতা পরীক্ষা করার জন্য, মেরুদন্ডের আঘাতের পরে পলি (প্রো-ই 2) ফিল্মগুলি (রোডামাইন বি ছাড়া) রোপন করা হয়েছিল এবং আঘাত এবং ইমপ্লান্টেশনের 7 দিন পরে মেরুদণ্ডের কর্ডগুলি সংগ্রহ করা হয়েছিল। অনুদৈর্ঘ্য বিভাগগুলি (10 μm পুরু) কাটা হয়েছিল, আঘাতের কেন্দ্রস্থলের চারপাশে কেন্দ্রীভূত হয়েছিল, এবং মেরুদন্ডে নিউরন এবং ম্যাক্রোফেজগুলি কল্পনা করার জন্য ইমিউনোলেবেলযুক্ত ছিল (চিত্র 3)।

নিউরোনাল উপস্থিতি মূল্যায়ন করার জন্য বিভাগগুলিকে NeuN-এর জন্য লেবেল করা হয়েছিল, এবং দাগের পরিমাণগত বিশ্লেষণে প্রকাশ করা হয়েছিল যে পলি (প্রো-E2) ফিল্মগুলি ফিল্ম ইমপ্লান্টগুলি গ্রহণ করেনি এমন আহত নিয়ন্ত্রণগুলির তুলনায় আঘাতের কেন্দ্রস্থলের চারপাশে NeuN পজিটিভ এলাকাকে উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি করেছে (চিত্র 3A; p=0.0002)। এনএফএইচ (নিউরোফিলামেন্ট হেভিচেন) ব্যবহার করে অ্যাক্সনগুলির জন্য অতিরিক্ত দাগও ইমপ্লান্ট করা পলি(প্রো-ই2) ফিল্মগুলির তীব্র নিউরোপ্রোটেক্টিভ প্রভাব (চিত্র 3B; p=0.0017) প্রকাশ করেছে।

আমরা লক্ষ্য করেছি যে নিউরোপ্রোটেকশনের এই পরিবর্তনটি আঘাতের স্থানে অ্যাপোপটোসিস (ক্যাসপেস 3) পরিবর্তনের কারণে হয়নি (সাপোর্টিং ফিগার S1; p=0.9966)। সক্রিয় ম্যাক্রোফেজগুলির জন্য দাগ (CD68)ও কোনও প্রকাশ করেনি। পলি(প্রো-ই2) ফিল্ম-চিকিত্সা করা প্রাণী এবং চিকিত্সা না করা প্রাণীর মধ্যে উল্লেখযোগ্য পার্থক্য (চিত্র 3C; p= 0.7207)।

একত্রে নেওয়া, পলি(প্রো-ই2) ফিল্মগুলি প্রদাহজনক প্রতিক্রিয়া পরিবর্তন না করেই তীব্রভাবে নিউরোপ্রোটেকশন বাড়ায়৷ পলি (প্রো-ই2) ফিল্মগুলি প্রায় 20% দ্বারা তীব্রভাবে নিউরোনাল ঘনত্ব বৃদ্ধি করে, কিন্তু ফিল্মগুলিতে কোনও সুস্পষ্ট প্রদাহ-বিরোধী প্রভাব ছিল না (পরিমাণ নির্ধারণের উপর ভিত্তি করে) সক্রিয় ম্যাক্রোফেজ দ্বারা দখলকৃত এলাকা) (চিত্র 3)।

প্রদাহ হ্রাসের এই অভাব ইঙ্গিত করতে পারে যে E2-এর প্রদাহ-বিরোধী এবং নিউরোপ্রোটেক্টিভ ডোজগুলি আলাদা এবং উভয়ই বর্তমান ফিল্ম ফর্মুলেশনের মাধ্যমে অর্জন করা হয়নি।20 আমরা অনুমান করেছি যে পলি (প্রো-ই2) ফিল্মগুলি থেকে E2 রিলিজ বৃদ্ধি তীব্রভাবে প্রদাহ কমাতে পারে। এবং আরও শক্তিশালী নিউরোপ্রোটেক্টিভ প্রতিক্রিয়া সক্ষম করে।

তীব্রভাবে মুক্তি পাওয়া E2 এর ডোজ বাড়ানোর জন্য, থিপলি (প্রো-ই2) ফিল্মগুলিকে সংশোধন করা হয়েছিল যাতে ইমপ্লান্টেশনের পরপরই বোলাস E2 প্রকাশ ঘটতে পারে। E2 এর বোলাস রিলিজের পরে, পলিমারের অবক্ষয় পূর্বের মতো একই ঘনত্বে E2 মুক্তির জন্য অনুসরণ করবে। উপরে বর্ণিত পরীক্ষাটি এই বোলাস-রিলিজিং পলি (প্রো-ই 2) ফিল্মগুলিকে বারবার ব্যবহার করে এবং নিউরোপ্রোটেকশন এবং প্রদাহ 7 দিনের আঘাতের পরে (ডিপিআই) মূল্যায়ন করা হয়েছিল।

যাইহোক, একটি অতিরিক্ত সুবিধার পরিবর্তে, বলিসরিলিজিং পলি(প্রো-ই2) ফিল্মগুলি আহত, চিকিত্সাবিহীন নিয়ন্ত্রণগুলির তুলনায় NeuN পজিটিভ এলাকাকে উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি করেনি (চিত্র 4A; p=0.6770)। বোলাস-রিলিজিং পলি(proE2) ফিল্মগুলি CD68 এক্সপ্রেশন বাড়িয়েছে, কিন্তু বৃদ্ধি পরিসংখ্যানগতভাবে আলাদা ছিল না (p= 0.1780)।

GFAP (অ্যাস্ট্রোসাইট) এবং Iba1 (মাইক্রোগ্লিয়া) এক্সপ্রেশন বৃদ্ধির কারণে বোলাস-রিলিজিং পলি (প্রো-ই2) ফিল্মের উপস্থিতিতে গ্লিয়াল রিঅ্যাকটিভিটি এবং মাইক্রোগ্লিয়াল প্রদাহের ক্রমবর্ধমান প্রবণতাও পরিলক্ষিত হয়েছে; যাইহোক, এই বৃদ্ধিগুলি পরিসংখ্যানগতভাবে আহত, চিকিত্সাবিহীন নিয়ন্ত্রণে যা পরিলক্ষিত হয়েছিল তার চেয়ে বেশি ছিল না (যথাক্রমে p=0.3233 এবং p=0.3053)। একসাথে নেওয়া, বোলাস-রিলিজিং পলি(প্রো-ই2) ফিল্মগুলি নিউরোপ্রোটেকশনকে উন্নত করেনি, এবং অ্যাস্ট্রোসাইট প্রতিক্রিয়াশীলতা এবং ম্যাক্রোফেজ/মাইক্রোগ্লিয়া উপস্থিতি প্রাথমিকভাবে অনুমান করা হিসাবে হ্রাস করা হয়নি।

যেহেতু আহত, চিকিত্সা না করা প্রাণী এবং আহত, বলিস-রিলিজিং পলি(proE2) ফিল্ম-চিকিত্সা করা প্রাণীর মধ্যে পার্থক্য তীব্র, 7 ডিপিআই টাইম পয়েন্টে পরিলক্ষিত হয়নি, তাই পলি (প্রো-ই2) ফিল্মগুলি থেকে আরও তদন্তের জন্য একটি দীর্ঘস্থায়ী সময়পয়েন্ট নির্বাচন করা হয়েছিল। ই 2 দীর্ঘমেয়াদী মুক্তি দিতে পারে।20 উপরে বর্ণিত পরীক্ষাটি বোলাস-রিলিজিংপলি(প্রো-ই2) ফিল্মগুলির সাথে পুনরাবৃত্তি হয়েছিল, কিন্তু প্রাণীগুলিকে 21 ডিপিআই (চিত্র 5) এ ক্রমাগতভাবে মূল্যায়ন করা হয়েছিল।

স্পাইনালকর্ডগুলিকে পূর্বে বর্ণিত একই ধরণের কোষের জন্য লেবেল করা হয়েছিল। বিশ্লেষণের পর, আহত, চিকিত্সাবিহীন প্রাণীর তুলনায় বোলাস-রিলিজিং পলি (প্রো-ই2) ফিল্ম-ইমপ্লান্ট করা প্রাণীতে NeuN এর ক্ষেত্রফলের বৃদ্ধির দিকে প্রবণতা ছিল (চিত্র 5A; p=0.0897) এছাড়াও, প্রবণতা পরিলক্ষিত হয়েছে যেখানে বলস-রিলিজিং পলি(প্রো-ই2) ফিল্মগুলি চিকিত্সাবিহীন, আহত প্রাণী নিয়ন্ত্রণের ডেটার তুলনায় CD68 এবং GFAP এক্সপ্রেশনের ক্ষেত্রফলকে হ্রাস করেছে (চিত্র 5B, C; p=0.0859 এবং p)=0.2780)।

যাইহোক, কোন প্রবণতা পরিসংখ্যানগতভাবে ভিন্ন ছিল না। অন্যদিকে, Iba1 লেবেলযুক্ত টিস্যু বিভাগ থেকে বোলাস-রিলিজিং পলি(প্রো-ই2) চিকিত্সা করা প্রাণীরা চিকিত্সা না করা, আহত নিয়ন্ত্রণ (p < 0.0001) থেকে প্রাপ্ত ডেটার তুলনায় বর্ধিত অভিব্যক্তি প্রদর্শন করে। আমাদের আগের কাজ দেখায় যে পলি(প্রো-প্রো -E2) 15 মিমি × 15 মিমি কভারস্লিপগুলিতে কাস্ট করা ফিল্মগুলি প্রতিদিন প্রায় 266 এনজি E2 প্রকাশ করে, 20 যা এখানে ব্যবহৃত ফিল্মগুলি থেকে (1 মিমি × 1.8 মিমি) প্রতিদিন প্রায় 2 এনজি E2 তে অনুবাদ করে। বোলাস-রিলিজিং পলি (প্রো-ই2) ফিল্মগুলি ইমপ্লান্টেশনের পর তীব্রভাবে 40 ইউজি আনবাউন্ড E2 রিলিজ করে।

রডেন্ট এসসিআই মডেলগুলিতে E2-এর ব্যবহারের উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করা গবেষণা দেখায় যে কম-ডোজ ইস্ট্রোজেন (10 ug/kg) অন্তঃসত্ত্বাভাবে রিঅ্যাক্টিভ গ্লিওসিসকে কমিয়ে দেয় এবং প্রদাহজনক ঘটনাগুলি হ্রাস করার সময় নিউরোপ্রোটেকশন প্রদান করে, অ্যাপোপটোসিসকে বাধা দেয় এবং অ্যাঞ্জিওজেনেসিস বৃদ্ধি করে। প্রতিকূল প্রভাব যার মধ্যে রয়েছে গভীর ভেনথ্রম্বোসিস এবং ক্যান্সারের বৃদ্ধির হার 22,23 এবং পুরুষদের মধ্যে মেয়েলি শারীরিক বৈশিষ্ট্যের বিকাশ। এটি লক্ষণীয় কারণ E2 গবেষণার বেশিরভাগই E2 সিস্টেমিকভাবে শিরাপথে বা ইন্ট্রাপেরিটোন্যালি বিতরণের উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করেছে।

পদ্ধতিগতভাবে E2 এর উচ্চ মাত্রার ব্যবহারে নিরাপত্তা সংক্রান্ত উদ্বেগ বিবেচনা করে, পার্শ্বপ্রতিক্রিয়া প্রতিরোধের জন্য আহত মেরুদন্ডে স্থানীয় প্রসবের জন্য E2 ঘনত্ব অপ্টিমাইজ করা গুরুত্বপূর্ণ। আজ অবধি, শুধুমাত্র একটি গবেষণায় E2 (2.5 ug বা 25 ug) ফোকালভাবে বিতরণ করার জন্য ন্যানো পার্টিকেল ব্যবহার করে একটি বায়োমেটেরিয়াল থেকে E2 বিতরণ করা হয়েছে। ন্যানো পার্টিকেল থেকে রিলিজ একটি ইঁদুরের ইঁদুরের মডেলে দ্রুত প্রদাহ কমেছে toomuch E2 (40 ug) তীব্রভাবে মুক্তি পাচ্ছে যখন খুব কম (2 ng) দীর্ঘস্থায়ীভাবে মুক্তি পাচ্ছে।

যদিও আমরা এই ডেটা থেকে যা পর্যবেক্ষণ করি তা হল শালীন প্রবণতা, এই গবেষণাটি ভিভোতে নিউরোপ্রোটেকশন প্রচার করতে E2 ডোজিংয়ের গুরুত্ব তুলে ধরে। E2 এর প্রাথমিক ডোজ কমানো এবং পলি (প্রো-ই2) বায়োমেটেরিয়ালের অবক্ষয় গতিবিদ্যা সামঞ্জস্য করা এই সমস্যাটি উপশম করতে এবং সম্ভাব্যভাবে আরও ভাল নিউরোপ্রোটেক্টিভ ফলাফল প্রদান করতে পারে।

যদিও এই অধ্যয়নটি শুধুমাত্র পুরুষদের মধ্যে সম্পাদিত হয়েছিল, তবে এই বায়োমেটেরিয়ালের জন্য একটি বৈধ অনুবাদের সম্ভাবনা স্থাপন করতে উভয় লিঙ্গের মধ্যে থাসপলি (প্রো-ই2) ফিল্মগুলির প্রভাব মূল্যায়ন করা অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ। গবেষণায় দেখা গেছে যে SCI অনুসরণ করে, মহিলাদের মধ্যে ইস্ট্রোজেনের মাত্রা বৃদ্ধি পুরুষের তুলনায় তাদের উন্নত কার্যকরী ফলাফলের জন্য আংশিকভাবে দায়ী হতে পারে৷ 24 যেহেতু মহিলাদের মধ্যে ইস্ট্রোজেনের উপস্থিতি বৃদ্ধি পেয়েছে, তাই ইস্ট্রোজেন ব্যবহার করে যে কোনও জৈব উপাদান কৌশল এই বর্ধিত স্তরটিকে বিবেচনায় নিতে হবে এবং উপাদানটিকে পরিবর্তন করতে হবে৷ প্রদত্ত ডোজটি পুরুষ এবং মহিলাদের জন্য একই থাকে তা নিশ্চিত করার জন্য গতিবিদ্যা অনুসারে প্রকাশ করুন।

পদ্ধতি

পলি(প্রো-ই2) ফিল্মস ফ্যাব্রিকেশন।

পলি(প্রো-ই2) পলিমার P1 সংশ্লেষিত হয়েছিল এবং পূর্বে বিশদভাবে বর্ণনা করা হয়েছে।20 জেল পারমিয়েশন ক্রোমাটোগ্রাফি (GPC) অনুসারে পলিমারটির ওজন-গড় আণবিক ওজন MW ~ 80 kDa এবং Đ ~ 3 এর বিচ্ছুরণ রয়েছে। পলি(প্রো-ই2) ফিল্মগুলি ক্লোরোফর্ম (5 wt %/wt; পলিমার/ক্লোরোফর্ম) এ পলিমার দ্রবীভূত করে, 15 মিমি × 15 মিমি কাচের কভারস্লিপে (প্রতি কভারস্লিপে 100 μL দ্রবণ) ড্রপ-কাস্ট করে এবং সেগুলিকে রেখে দিয়ে তৈরি করা হয়েছিল। ভ্যাকুয়ামের নিচে রাতারাতি শুকানো (<100 mTorr) at room temperature (RT). In a subset of experiments, the polymer solution was supplemented with rhodamine B (0.005 wt %/wt; rhodamine B/chloroform) (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) to verify the presence of the poly(pro-E2) films in animals post-implantation.
আনবাউন্ড E2 সহ পলি(প্রো-E2) ফিল্ম তৈরি করতে, ড্রপ-কাস্টিংয়ের আগে পলিমার দ্রবণে (0.0625 wt %/wt; E2/ক্লোরোফর্ম) আনবাউন্ড E2(Abcam, Cambridge, MA) যোগ করে ফিল্মগুলি তৈরি করা হয়েছিল কভারস্লিপগুলিতে সমাধান। ইমপ্লান্টেশনের আগে, ফিল্ম সহ কভারস্লিপগুলি 30 মিনিটের জন্য অতিবেগুনী (UV) বিকিরণ ব্যবহার করে জীবাণুমুক্ত করা হয়েছিল এবং একটি জীবাণুমুক্ত জৈব নিরাপত্তা ক্যাবিনেটে কভারস্লিপগুলি থেকে ফিল্মগুলি খোসা ছাড়ানো হয়েছিল। পলি (প্রো-ই2) ফিল্মগুলিকে তারপরে 1 মিমি × 1.8 মিমি টুকরো টুকরো করা হয়েছিল, যা নীচে বর্ণিত হিসাবে একটি প্রাপ্তবয়স্ক মাউসে ইমপ্লান্টেশনের জন্য উপযুক্ত।

কনটুশন স্পাইনাল কর্ড ইনজুরি এবং পলি (প্রো-ই2) ফিল্মস ইমপ্লান্টেশন।

সমস্ত অস্ত্রোপচার এবং পোস্টোপারেটিভ কেয়ার পদ্ধতি রেনসেলার পলিটেকনিক ইনস্টিটিউট এবং ওহিও স্টেট ইউনিভার্সিটি ইনস্টিটিউশনাল অ্যানিমাল কেয়ার অ্যান্ড ইউজ কমিটি (IACUC) দ্বারা অনুমোদিত হয়েছিল। জ্যাকসন ল্যাবরেটরি (স্টক নং 000664; বার হারবার, ME) থেকে ক্রয় করা প্রাপ্তবয়স্ক পুরুষ C57BL/6 ইঁদুর (10- থেকে 12-সপ্তাহ-বয়সী), একটি ইন্ট্রাপেরিটোনিয়াল ইনজেকশন দিয়ে চেতনানাশক করা হয়েছিল। কেটামাইন (80 মিলিগ্রাম/কেজি) এবং জাইলাজিন (10 মিলিগ্রাম/কেজি)। 70% ইথানল এবং বেটাডিন ব্যবহার করে প্রাণীদের পিঠ কামানো এবং অ্যাসেপ্টিকভাবে প্রস্তুত করা হয়েছিল।

37 ডিগ্রিতে রক্ষণাবেক্ষণ করা একটি হিটিং প্যাডে প্রাণীটিকে বসানোর পরে, মেরুদণ্ডের কলামটি উন্মুক্ত করার জন্য ত্বক এবং পেশীর স্তরগুলি খোলা হয়েছিল এবং মেরুদণ্ডের কর্ডটি উন্মুক্ত করার জন্য থোরাসিক নবম (T9) কশেরুকার উপর একটি ডোরসাল ল্যামিনেক্টমি করা হয়েছিল। একটি মাঝারি (75 kdyn) কনটুশনSCI একটি ইনফিনিট হরাইজনস ইম্প্যাক্টর (প্রিসিসন সিস্টেমস অ্যান্ড ইন্সট্রুমেন্টেশন, লেক্সিংটন, কেওয়াই) ব্যবহার করে এই স্তরে প্ররোচিত হয়েছিল।

হেমোস্ট্যাসিস অর্জনের পর, ডুরা খোলা হয়েছিল (চিত্র 2) এবং পলি (প্রো-ই2) ফিল্ম বা একটি বোলাস-রিলিজিং পলি (প্রো-ই2) ফিল্ম (1 মিমি × 1.8 মিমি) ডুরার নীচে এবং মেরুদন্ডের উপরে স্থাপন করা হয়েছিল। আঘাতের স্থান। নিয়ন্ত্রণ প্রাণীদের মধ্যে, ডুরা খোলা হয়েছিল কিন্তু পলি (প্রো-ই 2) ফিল্ম রোপণ করা হয়নি। পেশী স্তরগুলি জীবাণুমুক্ত সেলাই ব্যবহার করে বন্ধ করা হয়েছিল এবং জীবাণুমুক্ত ধাতব ক্ষত ক্লিপ ব্যবহার করে ত্বক বন্ধ করা হয়েছিল।

ইঁদুরগুলি 2 মিলি জীবাণুমুক্ত স্যালাইন সাবকুটেনিওস ইনজেকশনের জন্য পেয়েছিল এবং তাদের খাঁচায় ফিরিয়ে দেওয়া হয়েছিল এবং রাতারাতি 37 ডিগ্রি উষ্ণ স্লাইডে রাখা হয়েছিল। সঠিক হাইড্রেশন নিশ্চিত করতে এবং সংক্রমণ প্রতিরোধ করার জন্য, আঘাতের পর প্রথম 5 দিন (ডিপিআই) জন্য প্রতিদিন 1-2 মিলি জীবাণুমুক্ত স্যালাইন এবং জেন্টোসিন (1 মিলিগ্রাম/কেজি) দিয়ে ইঁদুরগুলিকে ত্বকের নিচে ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল। পরীক্ষার সময়কালের জন্য মূত্রাশয়গুলি দিনে দুবার ম্যানুয়ালি প্রকাশ করা হয়েছিল। সমস্ত প্রাণীকে একটি 12-ঘন্টা আলো-অন্ধকার চক্রে প্রচলিত অবস্থার অধীনে খাদ্য ও জলের অবাধ প্রবেশাধিকার সহ বাসস্থান করা হয়েছিল৷

টিস্যু সংগ্রহ।

7 বা 21 ডিপিআই-এর নির্ধারিত টার্মিনাল টাইম পয়েন্টে, ইঁদুরগুলিকে কেটামাইন/জাইলাজিন (1.5× সার্জিকাল ডোজ) এর একটি প্রাণঘাতী ডোজ দিয়ে ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল এবং ট্রান্সকার্ডিয়ালভাবে 0.1 এমফসফেট-বাফারযুক্ত স্যালাইন (PBS; pH 7.4) দিয়ে পারফিউজ করা হয়েছিল। এর পরে 4% প্যারাফর্মালডিহাইড (PFA; pH 7.4)। মেরুদণ্ডের কর্ডগুলি সরানো হয়, 4% PFA-তে 2 ঘন্টার জন্য পোস্ট-স্থির করা হয়, এবং তারপর রাতারাতি 0.2M ফসফেট বাফারে (PB; pH 7.4) স্থানান্তরিত হয়।

মেরুদণ্ডের কর্ডগুলিকে 4 ডিগ্রিতে 48 ঘন্টার জন্য 30% সুক্রোজে ক্রায়োপ্রোটেক্ট করা হয়েছিল এবং তারপরে 10 মিমি অংশে আঘাতের স্থানের চারপাশে কেন্দ্রীভূত ডোরসাল কলামগুলি মুখোমুখি হয়েছিল। এই বিভাগগুলি একটি টিস্যু-টেক সর্বোত্তম তাপমাত্রার মাধ্যম (VWR ইন্টারন্যাশনাল, Radnor, PA) এ এমবেড করা হয়েছিল এবং শুষ্ক বরফের উপর দ্রুত হিমায়িত হয়েছিল৷ সমস্ত মেরুদণ্ডের কর্ডগুলি একটি মাইক্রোম HM505E ক্রায়োস্ট্যাটে 10 μm এ বিভাগ করা হয়েছিল, যা কালারফ্রস্ট প্লাস স্লাইডগুলিতে স্থাপন করা হয়েছিল। Waltham, MA), এবং তারপর −20 ডিগ্রিতে সংরক্ষণ করা হয় যতক্ষণ না ইমিউনোস্টেইনিংয়ের জন্য ব্যবহার করা হয়।

ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি এবং কোয়ান্টিফিকেশন।

স্লাইডগুলিকে 1 ঘণ্টার জন্য উষ্ণ স্লাইডে গলানো হয় এবং তারপর 0.1 MPBS-এ 3 বার ধুয়ে ফেলা হয়৷ RT-এ 15 মিনিটের জন্য মিথানলে মিশ্রিত 6% H2O2 স্লাইডগুলিকে ইনকিউবেশন করে এন্ডোজেনাস পারক্সিডেস কার্যকলাপ নিভিয়ে ফেলা হয়েছিল। 0.1 এম পিবিএস-এ 3 বার ধোয়ার পরে, বিভাগগুলিকে 4% BSA এবং 0.1% ট্রাইটন এক্স-100 0.1 এম পিবিএস-এ 1-এর জন্য ইনকিউব করা হয়েছিল 4 ডিগ্রী বা RT (সারণী 1) এ প্রাথমিক অ্যান্টিবডিগুলির রাতারাতি ইনকিউবেশনের পরে h।

স্লাইডগুলি 1 ঘন্টার জন্য RT-এ উপযুক্ত বায়োটিনিলেটেড সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডি (1:1000; ভেক্টর ল্যাবরেটরিজ, বার্লিংগেম, CA) দিয়ে ইনকিউব করা হয়েছিল। আবদ্ধ অ্যান্টিবডি কল্পনা করার জন্য, স্লাইডগুলিকে 1 ঘন্টার জন্য Vectasttain Elite-ABC (ভেক্টর ল্যাবরেটরিজ) দিয়ে ইনকিউব করা হয়েছিল এবং ImmPACT3,3′-ডায়ামিনোবেনজিডিন (DAB) বা ভেক্টর SG সাবস্ট্রেট (ভেক্টর ল্যাবরেটরিজ) দিয়ে 10 মিনিটের জন্য তৈরি করা হয়েছিল।

70% এবং 90% ইথানলে অনুক্রমিক 2 × 2 মিনিটের ইনকিউবেশনের মাধ্যমে এই বিভাগগুলি ডিহাইড্রেট করা হয়েছিল, 100% ইথানলে 2 × 3 মিনিট, হিস্টোক্লিয়ারে 3 × 3 মিনিটের পরে, এবং অবশেষে পারমাউন্ট (থার্মোফিশার সায়েন্টিফিক) দিয়ে কভার করা হয়েছিল। পশু প্রতি ছয়টি বিভাগ, আহত মেরুদন্ডের মধ্যে 100 μm ব্যবধানে, পরিমাপ বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল।

ইমিউনোলেবেলযুক্ত বিভাগগুলি একটি AxioCamdigital ক্যামেরা এবং AxioVision সংস্করণ 4.8.2 সফ্টওয়্যার (Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany) এবং একটি 5× উদ্দেশ্য দিয়ে সজ্জিত একটি Axioplan 2 ইমেজিং মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার করে চিত্রিত করা হয়েছিল।

প্রতিটি বিভাগে পজিটিভ পিক্সেলের সংখ্যা MIPAR ইমেজ অ্যানালাইসিস সফ্টওয়্যার (MIPAR, Worthington, OH) ব্যবহার করে প্রতি বিভাগে শতাংশ পজিটিভ এলাকার ভগ্নাংশ গণনা করা হয়েছে। প্রতিটি দাগের জন্য পশু প্রতি ছয়টি বিভাগের গড় শতাংশ ইতিবাচক এলাকা গণনা করা হয়েছিল এবং রিপোর্ট করা হয়েছিল।

পরিসংখ্যান বিশ্লেষণ।

সমস্ত ডেটা গড় ± স্ট্যান্ডার্ড বিচ্যুতি হিসাবে রিপোর্ট করা হয়। গ্রাফপ্যাড প্রিজম 9 পরিসংখ্যানগত সফ্টওয়্যার (গ্রাফপ্যাড সফ্টওয়্যার, সান দিয়েগো, CA) ব্যবহার করে পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। সমস্ত পরীক্ষায়, 5-6 টি প্রাণী প্রতি গোষ্ঠীতে ব্যবহৃত হয়েছিল, যা কমপক্ষে দুটি ভিন্ন প্রাণীর লট থেকে উদ্ভূত হয়েছিল। কন্ট্রোল এবং পলি (প্রো-ই2) ফিল্ম গ্রুপের মধ্যে পার্থক্য পরীক্ষা করতে, ছাত্রদের টি-টেস্ট (চিত্র 3, 4, এবং 5) ব্যবহার করা হয়েছিল। তাত্পর্য প্রতিষ্ঠিত হয়েছিল p এর থেকে কম বা এর সমান 0.05৷

সম্পূরক উপাদান

সম্পূরক উপাদানের জন্য PubMed Central-এ ওয়েব সংস্করণ পড়ুন।

স্বীকৃতি

লেখকরা মাউস সার্জারিতে সহায়তার জন্য ওয়েনমিন লাইকে ধন্যবাদ জানিয়েছেন।

অর্থায়ন

এই কাজটি ক্রেগ এইচ. নীলসেন ফাউন্ডেশন ফেলোশিপ (গ্রান্ট 468116) এবং প্যারালাইজড ভেটেরানসফ আমেরিকা রিসার্চ ফাউন্ডেশন ফেলোশিপ (গ্রান্ট 3171) থেকে MKG এবং NIH R01 (গ্রান্ট NS092754) এবং নিউ ইয়র্ক স্টেট স্পাইনাল কর্ড ইনজুরি রিভিউ বোর্ড থেকে সমর্থন পেয়েছে। NINDS গ্রান্ট P30NS104177 দ্বারা সমর্থিত ওহিও স্টেট ইউনিভার্সিটি নিউরোসায়েন্স ডিপার্টমেন্ট সার্জিক্যাল কোরের সহায়তায় সমস্ত পশুর কাজ করা হয়েছিল।

তথ্যসূত্র

(1)। ন্যাশনাল স্পাইনাল কর্ড ইনজুরি স্ট্যাটিস্টিক্যাল সেন্টার। (2020) স্পাইনাল কর্ড ইনজুরি ফ্যাক্টস অ্যান্ড ফিগারস অ্যাট অ্যাল্যান্স, ইউনিভার্সিটি অফ আলাবামা অ্যাট বার্মিংহাম, বার্মিংহাম, AL।

(2)। Cripps RA, Lee BB, Wing P, Weerts E, MacKay J, and Brown D (2011) A Global Map for Traumatic Spinal Cord Injury Epidemiology: Towards a Living Data Repository for Injury Prevention. স্পাইনাল কর্ড। 49, 493-501। [পাবমেড: 21102572]

(3)। Donovan WH (2007) স্পাইনাল কর্ড ইনজুরি - অতীত, বর্তমান এবং ভবিষ্যত। জার্নাল অফ স্পাইনাল কর্ড মেডিসিন 30, 85-100।

(4)। পিকেলসিমার ই, শিরোমা ইজে, এবং উইলসন ডিএ (2010) মেরুদণ্ডের আঘাতে আক্রান্ত ব্যক্তিদের চিকিত্সাগতভাবে উপস্থিত প্রতিকূল স্বাস্থ্যের অবস্থার রাজ্যব্যাপী তদন্ত। জে. স্পাইনাল কর্ড মেড। 33 (3), 221-231। [পাবমেড: 20737795]

(5)। সিলভার জে, এবং মিলার জেএইচ (2004) গ্লিয়াল স্কারের বাইরে পুনর্জন্ম। নাট। রেভ. নিউরোস্কি। 5 (2),146-156। [পাবমেড: 14735117]

(6)। ভার্মা AK, Das A, Wallace G, Barry J, Vertegel AA, Ray SK, and Banik NL (2013) SpinalCord Injury: A Review of Current Therapy, Future Treatments, and Basic Science Frontiers.Neurochem. Res. 38, 895-905। [পাবমেড: 23462880]

(7)। জেনডেল এ, মোনিঙ্ক এফ, হাসানজাদেহ জি, জামিনি এ, আনসার এমএম, হাবিব পি, স্লোভিক এ, কিপ এম, এবং বেয়ার সি (2018) এস্ট্রোজেন স্পাইনালকর্ড ইনজুরির পরে স্থানীয় প্রদাহজনক প্রকাশ এবং সক্রিয়করণকে কমিয়ে দেয়। মোল। নিউরোবায়োল। 55 (2), 1364-1375। [পাবমেড: 28127698]

(8)। লি জেওয়াই, চোই এইচওয়াই, জু বিজি, এবং ইউন টিওয়াই (2018) ইস্ট্রোজেন মাইক্রোগ্লিয়া এবং অ্যাস্ট্রোসাইট অ্যাক্টিভেশনকে বাধা দিয়ে মেরুদন্ডের আঘাতের পরে প্রবর্তিত নিউরোপ্যাথিক ব্যথা উপশম করে। বায়োচিম। বায়োফিস। অ্যাক্টা, মো. ভিত্তি ডিস. 1864 (7), 2472-2480। [পাবমেড: 29653184]

(9)। কক্স এ, ভার্মা এ, ব্যারি জে, ভার্টেজেল এ, এবং বানিক এন (2015) ইঁদুরের মেরুদণ্ডের আঘাতে ন্যানো পার্টিকেল ইস্ট্রোজেন প্লাজমা, সেরিব্রোস্পাইনাল ফ্লুইড এবং টিস্যুতে দ্রুত অ্যান্টি-ইনফ্ল্যামেটরি প্রভাব ফেলে। নিউরোট্রমা 32 (18), 1413–1421। [পাবমেড: 25845398]

(10)। শ্রীবনিক ইএ, সামন্তরায় এস, দাস এ, স্মিথ জে, ম্যাটজেল ডিডি, রে এসকে, এবং বানিক এনএল (2010) দীর্ঘস্থায়ী মেরুদণ্ডের আঘাতের ইস্ট্রোজেন-পরবর্তী ইস্ট্রোজেন চিকিত্সা ইঁদুরের লোকোমোটর ফাংশনকে উন্নত করে। জে. নিউরোস্কি। Res. 88 (8), 1738-1750। [পাবমেড: 20091771]

(11)। Honda K, Shimohama S, Sawada H, Kihara T, Nakamizo T, Shibasaki H, and Akaike A (2001) Nongenomic Antiapoptotic Signal Transduction by Estrogen in Cultured Cortical Neurons. জে. নিউরোসি। Res. 64 (5), 466–475। [পাবমেড: 11391701]

(12)। শ্রীবনিক ইএ, উইংগ্রাভ জেএম, ম্যাটজেল ডিডি, রে এসকে, এবং বনিক এনএল (2003) মেরুদণ্ডের আঘাতের চিকিত্সায় নিউরোপ্রোটেক্টিভ এজেন্ট হিসাবে এস্ট্রোজেন। অ্যান. NY Acad. বিজ্ঞান 993,125-133। [পাবমেড: 12853305]

For more information:1950477648nn@gmail.com