ERK-মধ্যস্থতা পুনর্গঠন প্রতিরোধের মাধ্যমে পুনঃসংযোগ থেকে বিলুপ্তির ভয় মেমরি পর্যায়ের সক্রিয় রূপান্তর

যোগাযোগ: অড্রে হু হোয়াটসঅ্যাপ/এইচপি: 0086 13880143964 ইমেল:audrey.hu@wecistanche.com

এর পুনরুদ্ধারভয়স্মৃতিদুটি বিপরীত মেমরি প্রসেস প্ররোচিত করে, যেমন, পুনর্গঠন এবং বিলুপ্তি। সংক্ষিপ্ত পুনরুদ্ধার ভয় বজায় রাখতে বা উন্নত করতে পুনর্গঠনকে প্ররোচিত করেস্মৃতি, যখন দীর্ঘায়িত পুনরুদ্ধার এই স্মৃতি নিভিয়ে দেয়। যদিও পুনর্গঠন এবং বিলুপ্তির প্রক্রিয়াগুলি তদন্ত করা হয়েছে, তবে এটি অজানা রয়ে গেছে কীভাবে মেমরি পুনরুদ্ধারের সময় মেমরির পর্যায়গুলি পুনর্গঠন থেকে বিলুপ্তির দিকে স্যুইচ করা হয়। এখানে, আমরা দেখাই যে পুনরুদ্ধারের পরে একটি এক্সট্রা সেলুলার সিগন্যাল-নিয়ন্ত্রিত কাইনেস (ইআরকে)-নির্ভর মেমরি ট্রানজিশন প্রক্রিয়া পুরুষ ইঁদুরের মধ্যে একটি ইনহিবিটরি এভয়েডেন্স (আইএ) টাস্কে পুনর্গঠনের আনয়ন রোধ করে পুনঃসংহতকরণ থেকে বিলুপ্তির দিকে মেমরি পর্যায়গুলির সুইচকে নিয়ন্ত্রণ করে। প্রথমত, ট্রানজিশন মেমরি ফেজ, যা পুনঃসংযোগের আনয়ন বাতিল করে, কিন্তু বিলুপ্তির অধিগ্রহণের জন্য অপর্যাপ্ত, পুনর্গঠনের পর চিহ্নিত করা হয়েছিল, কিন্তু বিলুপ্তির পর্যায়গুলির আগে। দ্বিতীয়ত, পুনর্গঠন, রূপান্তর এবং বিলুপ্তির পর্যায়স্মৃতি পুনরুদ্ধারঅ্যামিগডালা, হিপ্পোক্যাম্পাস এবং মিডিয়াল প্রিফ্রন্টাল কর্টেক্স (এমপিএফসি) এ সিএএমপি-প্রতিক্রিয়াশীল এলিমেন্ট-বাইন্ডিং প্রোটিন (সিআরইবি) এবং ইআরকে ফসফোরিলেশনের মাধ্যমে স্বতন্ত্র আণবিক এবং সেলুলার স্বাক্ষর দেখিয়েছে। পুনর্গঠন পর্যায়ে CREB ফসফোরিলেশন বৃদ্ধি পেয়েছে, যখন বিলুপ্তি পর্যায়ে এই মস্তিষ্ক অঞ্চলে CREB এবং/অথবা ERK ফসফোরিলেশনের বিভিন্ন সংমিশ্রণ সহ বেশ কয়েকটি নিউরাল জনসংখ্যা প্রদর্শন করেছে। মজার বিষয় হল, ট্রানজিশন ফেজ সহ তিনটি মেমরি ফেজ, পুনরুদ্ধারের পরপরই ক্ষণস্থায়ী ERK অ্যাক্টিভেশন দেখিয়েছিল। সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণভাবে, ট্রানজিশন মেমরি পর্যায়ে অ্যামিগডালা, হিপ্পোক্যাম্পাস বা এমপিএফসি-তে ERK-এর অবরোধ IA মেমরির পুনর্গঠন-প্ররোচিত বর্ধনকে বাধা দেয়। এই পর্যবেক্ষণগুলি পরামর্শ দেয় যে ERK-সিগন্যালিং পাথওয়ে সক্রিয়ভাবে মেমরি পর্বের পুনর্গঠন থেকে বিলুপ্তির রূপান্তরকে নিয়ন্ত্রণ করে এবং এই প্রক্রিয়াটি একটি সুইচ হিসাবে কাজ করে যা ভয়ের পুনর্গঠন বাতিল করে।স্মৃতি.

কীওয়ার্ড: ERK; বিলুপ্তি ভয় স্মৃতি; পুনর্মিলন; স্থানান্তর

1বায়োসায়েন্স বিভাগ, জীবন বিজ্ঞান অনুষদ, টোকিও ইউনিভার্সিটি অফ এগ্রিকালচার, টোকিও 156-8502, জাপান, এবং

2গ্র্যাজুয়েট স্কুল অফ এগ্রিকালচার অ্যান্ড লাইফ সায়েন্সেস, টোকিও বিশ্ববিদ্যালয়, টোকিও 113-8657, জাপান

তাৎপর্য বিবৃতি

ভয় স্মৃতি পুনরুদ্ধারদুটি বিপরীত মেমরি প্রক্রিয়া প্ররোচিত করে; পুনর্গঠন এবং বিলুপ্তি। পুনর্মিলন বজায় রাখে/বর্ধিত করেভয়ের স্মৃতি, যখন বিলুপ্তি ভয়ের স্মৃতি দুর্বল করে দেয়। পুনরুদ্ধারের সময় কীভাবে মেমরির পর্যায়গুলি পুনর্গঠন থেকে বিলুপ্তির দিকে স্যুইচ করা হয় তা এখনও অজানা। এখানে, আমরা একটি সক্রিয় মেমরি ট্রানজিশন প্রক্রিয়া চিহ্নিত করেছি যেটি একটি সুইচ হিসাবে কাজ করছে যা পুনর্মিলনকে বাধা দেয়। এই মেমরি ট্রানজিশন ফেজটি অ্যামিগডালা, হিপ্পোক্যাম্পাস এবং মিডিয়াল প্রিফ্রন্টাল কর্টেক্স (এমপিএফসি) এ এক্সট্রা সেলুলার সিগন্যাল-নিয়ন্ত্রিত কিনেস (ইআরকে) ফসফোরিলেশনের একটি ক্ষণস্থায়ী বৃদ্ধি দেখায়। মজার বিষয় হল, ট্রানজিশন পর্বে এই অঞ্চলে ERK-এর নিষেধাজ্ঞা ইনহিবিটরি এভয়েডেন্স (IA) মেমরির পুনর্গঠন-মধ্যস্থতা বর্ধিত করে। এই ফলাফলগুলি পরামর্শ দেয় যে ট্রানজিশন মেমরি প্রক্রিয়া সক্রিয়ভাবে ERK-সিগন্যালিং পাথওয়ের সক্রিয়করণের মাধ্যমে পুনঃসংযোগের আবেশ রোধ করে ভয় মেমরির ভয় মেমরির পর্যায়গুলির সুইচকে নিয়ন্ত্রণ করে।

ভূমিকা

স্মৃতিপুনরুদ্ধার একটি প্যাসিভ প্রক্রিয়া নয় বরং এটি একটি গতিশীল প্রক্রিয়া যা একটি আসল স্মৃতির রক্ষণাবেক্ষণ, শক্তিশালীকরণ, দুর্বল বা পরিবর্তন/আপডেট করার অনুমতি দেয় (মিসানিন এট আল।, 1968; স্নাইডার এবং শেরম্যান, 1968; লুইস, 1979; ম্যাকটুটাস এট আল। ., 1979; গর্ডন, 1981; নাদের এট আল।, 2000; নাদের এবং হার্ডট, 2009; দুদাই, 2012; ফুকুশিমা এট আল।, 2014)। গুরুত্বপূর্ণভাবে, শর্তযুক্ত উদ্দীপকের (CS) সংক্ষিপ্ত পুনঃপ্রকাশের মাধ্যমে একটি পুনরুদ্ধার করা কন্ডিশন্ড ভয় মেমরি লেবাইল হয়ে যায় এবং এর রক্ষণাবেক্ষণ বা বর্ধনের জন্য জিন এক্সপ্রেশন-নির্ভর পুনর্গঠন প্রয়োজন (নাদের এট আল।, 2000; দুদাই, 2002; কিদা এট আল।, 2002; Suzuki et al., 2004; Tronel et al., 2005; Fukushima et al., 2014)। বিপরীতভাবে, CS-এর সাথে ক্রমাগত বা বারবার পুনঃপ্রকাশের ফলে স্মৃতি বিলুপ্তি ঘটে, যা ভয়ের স্মৃতিকে দুর্বল করে দেয় (পাভলভ, 1927; রেসকরলা, 2001; মায়ার্স এবং ডেভিস, 2002)। এইভাবে, ভয় মেমরির পুনরুদ্ধার দুটি বিপরীত মেমরি প্রক্রিয়াকে প্ররোচিত করে, অর্থাত্, পুনর্গঠন এবং বিলুপ্তি, যদিও উভয় প্রক্রিয়াই একটি অভিন্ন CS-এর পুনঃপ্রকাশের দ্বারা প্ররোচিত হয়, কিন্তু CS-এ পুনরায় এক্সপোজারের সময়কাল অনুসারে পৃথক হয়।

পুনর্মিলন এবং বিলুপ্তির সাধারণ এবং সমালোচনামূলক জৈব রাসায়নিক বৈশিষ্ট্য হল সিএএমপি-প্রতিক্রিয়াশীল এলিমেন্ট-বাইন্ডিং প্রোটিন (সিআরইবি)-মধ্যস্থ জিন এক্সপ্রেশনের জন্য প্রয়োজনীয়তা (মামিয়া এট আল।, 2009)। মজার বিষয় হল, আমরা প্রাসঙ্গিক ভয় স্মৃতির পুনর্গঠন এবং বিলুপ্তির পর্যায়গুলির মধ্যে বিপরীত আণবিক, শারীরবৃত্তীয় এবং আচরণগত স্বাক্ষর দেখিয়েছি (সুজুকি এট আল।, 2004; মামিয়া এট আল।, 2009)। পুনর্মিলন পর্যায়ে প্রোটিন সংশ্লেষণ ব্লক করা মূল ভয়কে ব্যাহত করেস্মৃতি, যেখানে বিলুপ্তির পর্যায়ে প্রোটিন সংশ্লেষণকে ব্লক করা এটি করতে ব্যর্থ হয়, যদিও প্রাসঙ্গিক ভয় স্মৃতি পুনরায় সক্রিয় করা হয়েছিল। সিআরইবি-মধ্যস্থিত জিন এক্সপ্রেশনের সক্রিয়তা প্রদর্শনকারী মস্তিষ্কের অঞ্চলগুলির প্রয়োজনীয়তা পুনর্গঠন এবং বিলুপ্তির মধ্যে পার্থক্য রয়েছে; পুনর্মিলন নির্ভর করে অ্যামিগডালা এবং হিপ্পোক্যাম্পাসের উপর, যেখানে বিলুপ্তি নির্ভর করে অ্যামিগডালা এবং মিডিয়াল প্রিফ্রন্টাল কর্টেক্সের (এমপিএফসি) উপর। যাইহোক, অ্যামিগডালয়েড সিআরইবি অ্যাক্টিভেশনের সময়কাল পুনর্গঠন এবং বিলুপ্তি মেমরি পর্যায়গুলির মধ্যে আলাদা। এই পর্যবেক্ষণগুলি পরামর্শ দিয়েছে যে পুনর্গঠন এবং বিলুপ্তির পর্যায়গুলি স্বাধীন নয়, বরং একে অপরের সাথে যোগাযোগ করে। মজার বিষয় হল, সাম্প্রতিক গবেষণায় এমন একটি টাইম উইন্ডো (ট্রানজিশন ফেজ) চিহ্নিত করা হয়েছে যা অ্যামিগডালায় পুনর্গঠনের পর কোনো এক্সট্রা সেলুলার সিগন্যাল-নিয়ন্ত্রিত কিনেস (ERK) অ্যাক্টিভেশন দেখায় না, কিন্তু শ্রাবণ ভয় স্মৃতি পুনরুদ্ধারের পর বিলুপ্তির পর্যায়গুলির আগে (Merlo et al., 2018) ) একসাথে নেওয়া, এই ফলাফলগুলি সম্ভাব্য প্রক্রিয়াগুলির পরামর্শ দেয় যার দ্বারা মেমরির পর্যায়গুলি পুনঃসংহতকরণ থেকে বিলুপ্তির দিকে স্যুইচ করা হয় ভয়ের স্মৃতি পুনরুদ্ধারের সময়। অন্য কথায়, এটা সম্ভব যে মেমরি ট্রানজিশন প্রক্রিয়া সক্রিয়ভাবে এই সুইচ নিয়ন্ত্রণ করে।

একটি ইনহিবিটরি এভয়েডেন্স (IA) টাস্কে, ইঁদুর একটি হালকা বগি থেকে অন্ধকার বগিতে প্রবেশ করার পরে একটি বৈদ্যুতিক ফুটশক পায়।স্মৃতিঅন্ধকার বগি এড়াতে. পূর্বে, এই টাস্কটি ব্যবহার করে, আমরা দেখিয়েছি যে পুনর্গঠন এবং বিলুপ্তির পর্যায়গুলি সেই সময়ে বৈষম্য করা যেতে পারে যখন একটি ইঁদুর একটি পুনরায় এক্সপোজার সেশনের সময় একটি হালকা বগি থেকে একটি অন্ধকার বগিতে প্রবেশ করে (ফুকুশিমা এট আল।, 2014)। অতএব, এই কাজটি আমাদেরকে ক্ল্যাসিকাল প্রাসঙ্গিক ভয় কন্ডিশনিং দৃষ্টান্তের বিপরীতে পুনর্গঠন এবং বিলুপ্তির পর্যায়গুলির পরিপ্রেক্ষিত আণবিক স্বাক্ষরগুলিকে চিহ্নিত করার অনুমতি দেয় যেখানে CS-এর সাথে পুনরায় এক্সপোজারের মাধ্যমে শর্তযুক্ত ভয় মেমরির পুনঃসক্রিয়তা পুনর্গঠন এবং বিলুপ্তি উভয়ই শুরু করে; শর্তযুক্ত প্রেক্ষাপটে সংক্ষিপ্ত (3 মিনিট) পুনরায় সংস্পর্শ পুনর্গঠনকে প্ররোচিত করে, যেখানে দীর্ঘ (30 মিনিট) বা এই প্রসঙ্গে বারবার পুনঃপ্রকাশ বিলুপ্তি ঘটায় (আইজেনবার্গ এট আল।, 2003; পেড্রেইরা এবং মালডোনাডো, 2003; সুজুকি এট আল।, 2004; লি এট আল।, 2008; মামিয়া এট আল।, 2009)। তদ্ব্যতীত, আমরা দেখতে পেয়েছি যে পুনরুদ্ধার করা আইএ মেমরি এই টাস্কে মেমরি পুনর্গঠনের মাধ্যমে উন্নত করা হয়েছে (ফুকুশিমা এট আল।, 2014)।

ভয় পুনরুদ্ধারের সময় পুনর্গঠন থেকে বিলুপ্তির রূপান্তরের প্রক্রিয়া বোঝার জন্যস্মৃতি, আমরা আইএ মেমরির পুনর্গঠন, রূপান্তর এবং বিলুপ্তির পর্যায়গুলির আণবিক, সেলুলার এবং আচরণগত স্বাক্ষরগুলি সনাক্ত এবং চিহ্নিত করার লক্ষ্য রেখেছি। আমরা অ্যামিগডালা, হিপ্পোক্যাম্পাস এবং এমপিএফসি-তে সিআরইবি এবং ইআরকে সক্রিয়করণ বিশ্লেষণ করেছি, পুনর্গঠন, রূপান্তর এবং বিলুপ্তি পর্যায়ে এবং এই মেমরি প্রক্রিয়াগুলিতে ইআরকে সক্রিয়করণের ভূমিকা পরীক্ষা করেছি।

উপকরণ এবং পদ্ধতিসমূহ

ইঁদুরের সমস্ত পরীক্ষা-নিরীক্ষা ল্যাবরেটরি প্রাণীদের যত্ন ও ব্যবহারের নির্দেশিকা অনুসারে পরিচালিত হয়েছিল (জাপান নিউরোসায়েন্স সোসাইটি এবং টোকিও ইউনিভার্সিটি অফ এগ্রিকালচার)। এই গবেষণায় সম্পাদিত সমস্ত প্রাণী পরীক্ষা টোকিও ইউনিভার্সিটি অফ এগ্রিকালচার (অনুমোদন #280037) এর পশু যত্ন ও ব্যবহার কমিটি দ্বারা অনুমোদিত হয়েছিল। সমস্ত অস্ত্রোপচার পদ্ধতি নেম্বুটাল এনেস্থেশিয়ার অধীনে সঞ্চালিত হয়েছিল এবং কষ্ট কমানোর জন্য সর্বাত্মক প্রচেষ্টা করা হয়েছিল। পুরুষ C57BL/6N ইঁদুর চার্লস নদী থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল। ইঁদুরগুলিকে পাঁচ বা ছয় জনের খাঁচায় রাখা হয়েছিল, 12/12 ঘন্টার আলো/অন্ধকার চক্রে রক্ষণাবেক্ষণ করা হয়েছিল এবং খাবার এবং জলের অ্যাড লিবিটাম অ্যাক্সেসের অনুমতি দেওয়া হয়েছিল। পরীক্ষা করার সময় ইঁদুরের বয়স কমপক্ষে আট সপ্তাহ ছিল। চক্রের হালকা পর্যায়ে পরীক্ষা করা হয়েছিল। সমস্ত পরীক্ষা-নিরীক্ষা ইঁদুরের চিকিত্সার অবস্থার জন্য অন্ধভাবে পরিচালিত হয়েছিল।

IA পরীক্ষা স্টেপ-থ্রু IA যন্ত্রপাতি (OHARA ফার্মাসিউটিক্যাল) আলাদা আলো এবং অন্ধকার বগি (উভয়ই 15.5 12.5 11.5 সেমি) সহ একটি বাক্স নিয়ে গঠিত। আলোর বগিটি একটি ফ্লুরোসেন্ট আলো দ্বারা আলোকিত হয়েছিল (2500 লাক্স; ফুকুশিমা এট আল।, 2008, 2014; ঝাং এট আল।, 2011; ইশিকাওয়া এট আল।, 2016)। আইএ প্রশিক্ষণ শুরুর আগে, ইঁদুরগুলি এক সপ্তাহের জন্য প্রতিদিন 2 মিনিটের জন্য পৃথকভাবে পরিচালনা করা হয়েছিল। প্রশিক্ষণের সময়, প্রতিটি মাউসকে 30 সেকেন্ডের জন্য হালকা বগিতে অভ্যস্ত হওয়ার অনুমতি দেওয়া হয়েছিল এবং অন্ধকার বগিতে প্রবেশের অনুমতি দেওয়ার জন্য গিলোটিন দরজাটি উত্থাপিত হয়েছিল। অন্ধকার বগিতে প্রবেশের বিলম্বকে অধিগ্রহণের পরিমাপ হিসাবে বিবেচনা করা হত। অন্ধকার বগিতে ইঁদুর প্রবেশ করার সাথে সাথে গিলোটিনের দরজা বন্ধ হয়ে গেল। 5 সেকেন্ডের পর, একটি ফুটশক (0.2 এমএ) মোট 2 সেকেন্ড (প্রশিক্ষণ) সময়ের জন্য বিতরণ করা হয়েছিল। ট্রেনিং সেশনের 24 ঘন্টা পরে, অন্ধকার বগিতে প্রবেশ না করা পর্যন্ত মাউসটিকে আবার হালকা বগিতে রাখা হয়েছিল (গড় 459 6 15.49 সেকেন্ড)। মাউসটি অন্ধকার বগিতে প্রবেশ করার পরপরই, গিলোটিন দরজাটি বন্ধ করে দেওয়া হয়েছিল এবং মাউসটি কোনও ফুটশক (পুনরায় সক্রিয়করণ) ছাড়াই বিভিন্ন সময়ের জন্য (0, 1, বা 10 মিনিট) অন্ধকার বগিতে অবস্থান করেছিল। 48 ঘন্টা পরে মেমরি মূল্যায়ন করা হয়েছিল [পোস্ট-অ্যাক্টিভেশন লং-টার্ম মেমরি (পিআর-এলটিএম) পরীক্ষা] আলোর বগিতে প্রতিস্থাপিত হলে মাউসের অন্ধকার বগিতে প্রবেশের ক্রসওভার লেটেন্সি হিসাবে, পুনঃ সক্রিয়করণের মতো।

প্রথম পরীক্ষার জন্য, আমরা পুনরায় সক্রিয়করণের পরে প্রোটিন সংশ্লেষণ বাধার প্রভাব পরীক্ষা করেছি (0, 1, বা 10 মিনিটের জন্য অন্ধকার বগিতে পুনরায় এক্সপোজার; চিত্র 1)। প্রোটিন সংশ্লেষণ ইনহিবিটর অ্যানিসোমাইসিন (ANI; ওয়াকো) স্যালাইনে দ্রবীভূত করা হয়েছিল (NaOH-এর সাথে pH 7৷{12}}–7.4 এ সামঞ্জস্য করা হয়েছে)৷ ইঁদুরগুলিকে উপরে বর্ণিত হিসাবে প্রশিক্ষিত করা হয়েছিল, এবং 24 ঘন্টা পরে, তারা 0, 1, বা 10 মিনিটের জন্য কোনও ফুটশক ছাড়াই অন্ধকার বগিতে পুনরায় এক্সপোজারের পরপরই যান (VEH) বা ANI (150 mg/kg, ip) পেয়েছে। (পুনরায় সক্রিয়করণ)। এই মাত্রায়, ANI প্রথম 2 ঘন্টার মধ্যে মস্তিষ্কে প্রোটিন সংশ্লেষণের 90 শতাংশ বাধা দেয় (ফ্লাড এট আল।, 1973)। পুনরায় সক্রিয়করণ সেশনের 48 ঘন্টা পরে, পৃথক ইঁদুরগুলিকে আবার হালকা বগিতে রাখা হয়েছিল এবং ক্রসওভার লেটেন্সি মূল্যায়ন করা হয়েছিল।

দ্বিতীয় পরীক্ষার জন্য [ফসফোরিলেটেড সিআরইবি (পিসিআরইবি) এবং ফসফরিলেটেড ইআরকে (পিইআরকে) ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি; ডুমুর। 2-5], আমরা মস্তিষ্কের অঞ্চলগুলি পরীক্ষা করেছি যেগুলি আলোতে পুনরায় সংস্পর্শে আসার পরে সক্রিয় হয়েছিল (ইঁদুরগুলি অন্ধকার বগিতে প্রবেশ না করা পর্যন্ত, 0 মিনিটের জন্য অন্ধকার বগিতে পুনরায় এক্সপোজার) বা অন্ধকার বগি (পুনরায়- 1 বা 10 মিনিটের জন্য অন্ধকার বগিতে এক্সপোজার)। ইঁদুরগুলিকে চারটি ফুকুশিমা এট আলে বিভক্ত করা হয়েছিল। · পুনরুদ্ধার জে. নিউরোসি., ফেব্রুয়ারী 10, 2021, • 41(6):1288–1300 • 1289গ্রুপগুলির পরে ভয় মেমরি ফেজগুলির পরিবর্তন৷ প্রশিক্ষণের 24 ঘন্টা পরে, পৃথক ইঁদুরগুলিকে হালকা বগিতে পুনরায় প্রকাশ করা হয়েছিল এবং তারপরে অন্ধকার বগি থেকে তাদের প্রবেশের পরে অন্ধকার বগিতে অবস্থান করা হয়েছিল [পুনঃ সক্রিয়করণ: অন্ধকার বগিতে 0 মিনিট, পুনর্গঠন (রিকন) গ্রুপ; 1 মিনিট, ট্রানজিশন (ট্রান) গ্রুপ; 10 মিনিট, বিলুপ্তি (এক্সট) গ্রুপ]। ইঁদুরের আরেকটি দলকে আলো/অন্ধকার বগিতে [নন-রিঅ্যাক্টিভেটেড (এনআর) গ্রুপ] ফেরত দেওয়া হয়নি। পুনরায় সক্রিয় হওয়ার পরে 5, 15 বা 30 মিনিটে ইঁদুরগুলিকে নেম্বুটাল (750 মিগ্রা/কেজি, আইপি) দিয়ে অ্যানেস্থেটাইজ করা হয়েছিল।

তৃতীয় পরীক্ষার জন্য (U0126 এর মাইক্রোইনফিউশন; ডুমুর। 6,7), আমরা অ্যামিগডালা, হিপ্পোক্যাম্পাস বা এমপিএফসি-তে ইআরকে বাধার প্রভাব পরীক্ষা করেছি।স্মৃতিপুনর্গঠন/বর্ধিতকরণ, রূপান্তর, এবং বিলুপ্তি। MEK ইনহিবিটর U0126 (সিগমা-অলড্রিচ) কৃত্রিম সেরিব্রোস্পাইনাল ফ্লুইডে দ্রবীভূত হয়েছিল যার মধ্যে 7.5 শতাংশ ডাইমিথাইল সালফক্সাইড (ওয়াকো) এর 2.5 মিলিলিটার মধ্যে তিন ফোঁটা টুইন 80 (সিগমা) রয়েছে এবং পি এইচ এর সাথে সামঞ্জস্য করা হয়েছিল 7.4 NaOH সহ। ইঁদুরগুলিকে উপরে বর্ণিত হিসাবে প্রশিক্ষিত করা হয়েছিল, এবং 24 ঘন্টা পরে, তাদের আবার হালকা বগিতে (পুনরায় সক্রিয়করণ) স্থাপন করা হয়েছিল। ইঁদুরগুলিকে U0126 (1 mg) বা VEH দিয়ে মস্তিষ্কের বিভিন্ন অঞ্চলে অব্যবহিত পরে (Figs. 6A, C, E–H, 7A–C) বা 30 মিনিট পরে মাইক্রোইনফিউজ করা হয়েছিল (চিত্র 6বি, ডি) পুনরায় সক্রিয়করণ। পুনরায় সক্রিয়করণের 48 ঘন্টা পরে, পৃথক ইঁদুরগুলিকে আবার হালকা বগিতে রাখা হয়েছিল এবং ক্রসওভার লেটেন্সি মূল্যায়ন করা হয়েছিল (PR LTM)। হিপোক্যাম্পাস এবং এমপিএফসি (0.5 মিলি) এ মাইক্রোইনফিউশন 0.25 মিলি/মিনিট হারে তৈরি করা হয়েছিল। অ্যামিগডালায় (0.2 মিলি) মাইক্রোইনফিউশন 0.1 মিলি/মিনিট হারে তৈরি করা হয়েছিল। মাইক্রোইনফিউশনের পরে ইনজেকশন ক্যানুলাটি 2 মিনিটের জন্য রেখে দেওয়া হয়েছিল এবং তারপরে ইঁদুরগুলিকে তাদের বাড়ির খাঁচায় ফিরিয়ে দেওয়া হয়েছিল। MEK ইনহিবিটর SL327 (সান্তা ক্রুজ বায়োটেকনোলজি) ডাইমিথাইল সালফক্সাইডে দ্রবীভূত করা হয়েছিল এবং স্যালাইনের সাথে মিশ্রিত করা হয়েছিল। উপরে বর্ণিত ইঁদুরগুলিকে প্রশিক্ষিত করা হয়েছিল এবং 24 ঘন্টা পরে, পৃথক ইঁদুরগুলিকে হালকা বগিতে (পুনরায় সক্রিয়করণ) স্থাপন করা হয়েছিল। পুনরায় সক্রিয়করণের পরপরই ইঁদুরগুলিকে পদ্ধতিগতভাবে SL327 (10 বা 20 mg/kg) বা VEH দিয়ে ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল (চিত্র 7D-F)। পুনরায় সক্রিয়করণের 48 ঘন্টা পরে, পৃথক ইঁদুরগুলিকে আবার হালকা বগিতে রাখা হয়েছিল এবং ক্রসওভার লেটেন্সি মূল্যায়ন করা হয়েছিল (PR-LTM)।

ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি পূর্বে বর্ণিত হিসাবে সম্পাদিত হয়েছিল (মামিয়া এট আল।, 2009; সুজুকি এট আল।, 2011; ঝাং এট আল।, 2011; ফুকুশিমা এট আল।, 2014; ইশিকাওয়া এট আল।, 2016; হাসগাওয়া এট আল।, 201)। অবেদনকরণের পরে, সমস্ত ইঁদুরকে 4 শতাংশ প্যারাফর্মালডিহাইড দিয়ে পারফিউজ করা হয়েছিল। মস্তিষ্ক অপসারণ করা হয়, রাতারাতি স্থির করা হয়, 30 শতাংশ সুক্রোজে স্থানান্তর করা হয় এবং 4 ডিগ্রিতে সংরক্ষণ করা হয়। করোনাল বিভাগগুলি (30 মিমি) একটি ক্রিওস্ট্যাটে কাটা হয়েছিল।

pCREB এবং pERK স্টেনিংয়ের জন্য, ফ্রি-ফ্লোটিং বিভাগগুলিকে 1 শতাংশ H2O2 দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল এবং একটি খরগোশের পলিক্লোনাল অ্যান্টি-ফসফো-CREB (সেরিন 133; S133) অ্যান্টিবডি (1:1000; #{{10) দিয়ে রাতারাতি ইনকিউব করা হয়েছিল }}, মিলিপুর) এবং/অথবা খরগোশের মনোক্লোনাল অ্যান্টি-ফসফো-ERK1/2 (T202/Y204) অ্যান্টিবডি (1:300; #4370; সেল সিগন্যালিং প্রযুক্তি) ব্লকিং দ্রবণে (ফসফেট-বাফার স্যালাইন প্লাস 1 শতাংশ ছাগলের সিরাম অ্যালবুমিন, 1 mg/ml বোভাইন সিরাম অ্যালবুমিন, এবং 0.05 শতাংশ Triton X-100)। বিভাগগুলিকে ফসফেট-বাফারযুক্ত স্যালাইন দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয়েছিল এবং pCREB-এর জন্য হর্সরাডিশ পারক্সিডেস-কনজুগেটেড গাধা অ্যান্টি-র্যাবিট আইজিজি (1:500; জ্যাকসন ইমিউনোরিসার্চ) দিয়ে ইনকিউব করা হয়েছিল বা h1-এর জন্য ঘরের তাপমাত্রার জন্য হর্সরাডিশ পারক্সিডেস-কনজুগেটেড ছাগল অ্যান্টি-রবিট আইজিজি। pCREB সংকেতগুলিকে বায়োটিন টাইরামাইড দ্বারা প্রশস্ত করা হয়েছিল এবং অ্যালেক্সা ফ্লুর-কনজুগেটেড স্ট্রেপ্টাভিডিন (ইনভিট্রোজেন) ব্যবহার করে কল্পনা করা হয়েছিল। পিইআরকে সংকেতগুলি টিএসএ-এফসিএম (ইনভিট্রোজেন) দিয়ে প্রশস্ত করা হয়েছিল। বিভাগগুলি স্লাইডে মাউন্ট করা হয়েছিল এবং একটি মাউন্টিং মাধ্যম (মিলিপুর) ব্যবহার করে কভারস্লিপ করা হয়েছিল।

পূর্বে বর্ণিত হিসাবে পরিমাণ নির্ধারণ করা হয়েছিল (ফ্রাঙ্কল্যান্ড এট আল।, 2006; ফুকুশিমা এট আল।, 2014; মামিয়া এট আল।, 2009; ঝাং এট আল।, 2011; সুজুকি এট আল।, 2008)। ফ্র্যাঙ্কলিন এবং প্যাক্সিনোস (1997) এর অ্যাটলাস অনুসারে কাঠামোগুলি শারীরবৃত্তীয়ভাবে সংজ্ঞায়িত করা হয়েছিল। সমস্ত ইমিউনোরঅ্যাকটিভ নিউরনগুলি চিকিত্সার অবস্থার প্রতি অন্ধ একজন পরীক্ষাকারী দ্বারা গণনা করা হয়েছিল

ফলাফল

আইএ টাস্কে পুনরুদ্ধারের পরে মেমরির পর্যায়গুলির বৈশিষ্ট্য

IA টাস্ক আমাদেরকে সেই সময়ে পুনর্গঠন এবং বিলুপ্তির পর্যায়গুলিকে বৈষম্য করার অনুমতি দেয় যখন একটি মাউস একটি হালকা বগি থেকে একটি অন্ধকার বগিতে প্রবেশ করে (ফুকুশিমা এট আল।, 2014)। পুনর্গঠন থেকে বিলুপ্তির দিকে মেমরি পর্যায়গুলির সুইচের অন্তর্নিহিত প্রক্রিয়াটি বোঝার জন্য, আমরা IA মেমরির পুনর্গঠন এবং বিলুপ্তির জন্য প্রয়োজনীয় প্রোটিন সংশ্লেষণকে বাধা দেওয়ার প্রভাবগুলি পরীক্ষা করে মেমরি পুনরুদ্ধারের পরে IA মেমরির পর্যায়গুলি চিহ্নিত করেছি (ফুকুশিমা এট আল।, 2014)। ইঁদুরগুলোকে প্রথমে আলোর বগিতে রাখা হয়েছিল। অন্ধকার বগিতে প্রবেশ করার 5 সেকেন্ডে, একটি সংক্ষিপ্ত বৈদ্যুতিক ফুটশক দেওয়া হয়েছিল (প্রশিক্ষণ)। প্রশিক্ষণের (পুনরায় সক্রিয়করণ সেশন; চিত্র 1A) পরে ইঁদুরগুলিকে হালকা বগিতে পুনরায় উন্মুক্ত করা হয়েছিল এবং অন্ধকার বগিতে প্রবেশের জন্য তাদের ক্রসওভার লেটেন্সি মূল্যায়ন করা হয়েছিল (চিত্র 1বি)। ইঁদুরগুলি হালকা বগি থেকে অন্ধকার বগিতে প্রবেশ করার সাথে সাথেই তাদের বাড়ির খাঁচায় ফিরিয়ে দেওয়া হয়েছিল (0-অন্ধকার বগিতে মিনিট পুনঃপ্রকাশ; পুনর্মিলন পর্ব) অথবা অন্ধকার বগিতে 1, 3, বা 10 মিনিট কোনো ফুটশক না পেয়ে (বিলুপ্তির পর্যায়; চিত্র 1C-E)। পুনরায় সক্রিয়করণ সেশনের পরপরই, ইঁদুর VEH বা প্রোটিন সংশ্লেষণ প্রতিরোধক ANI এর একটি সিস্টেমিক ইনজেকশন পেয়েছে। 48 ঘন্টা পরে, ক্রসওভার লেটেন্সি PR-LTM মূল্যায়ন করা হয়েছিল।

আমাদের পূর্ববর্তী অধ্যয়নের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ (ফুকুশিমা এট আল।, 2014), আলোর বগিতে পুনরায় এক্সপোজার (0 মিনিট গ্রুপ) IA মেমরির পুনর্গঠন এবং বর্ধিতকরণ। দ্বি-মুখী আনোভা সময়ের উল্লেখযোগ্য প্রভাব প্রকাশ করেছে (F(1,24)=10.433, p=0৷{20}}036), ওষুধ (F(1) ,24)=23.197, p , 0.0001) এবং সময় ওষুধের মিথস্ক্রিয়া (F(1,24)=25.022, p , 0.0001; চিত্র 1B)। পোস্ট-হক বনফেরোনির পরীক্ষা এবং জোড়াযুক্ত টি-পরীক্ষা প্রকাশ করেছে যে VEH এবং ANI গ্রুপগুলি, যথাক্রমে উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি বা হ্রাস পেয়েছে, পুনরায় সক্রিয়করণ সেশনের তুলনায় PR-LTM-এ ক্রসওভার লেটেন্সি (ps , 0.05; VEH, t(6) {{28 }} 5.134, p=0.0021, ANI, t(6)=4.804, p=0.003; চিত্র 1B)। এই পর্যবেক্ষণগুলি ইঙ্গিত দেয় যে হালকা বগিতে IA মেমরি পুনরুদ্ধার মেমরিকে উন্নত করেছে, যখন প্রোটিন সংশ্লেষণ বাধা পুনরুদ্ধার করা মেমরিকে ব্যাহত করেছে, পূর্ববর্তী পর্যবেক্ষণকে নিশ্চিত করে যে IA মেমরি পুনরুদ্ধার প্রোটিন সংশ্লেষণ-নির্ভর পদ্ধতিতে পুনর্গঠনের মাধ্যমে স্মৃতিকে উন্নত করে।

বিপরীতে, অন্ধকার বগিতে পুনঃপ্রকাশ দীর্ঘমেয়াদী বিলুপ্তি প্ররোচিত করে [দ্বিমুখী আনোভা, সময় (চিত্র 1C, F(1,28)=9.575, p=0৷ {50}}04; চিত্র 1D, F(1,36)=11.699, p=0৷{72}}016), ওষুধ (চিত্র 1C, F(1,28)=4.674, p=0.039; চিত্র 1D, F(1,36)=12.285, p {{29 }}.0012), সময় ওষুধের মিথস্ক্রিয়া (চিত্র 1C, F(1,28)=7.916, p=0.009; চিত্র 1D, F(1,36) {{41 }}.915, p=0.0079)], পূর্বে পর্যবেক্ষণ করা হয়েছে (ফুকুশিমা এট আল।, 2014)। যে VEH গোষ্ঠীগুলি 3 বা 10 মিনিটের জন্য অন্ধকার বগিতে অবস্থান করেছিল তারা পুনঃসক্রিয়করণ সেশনের তুলনায় PR-LTM-এ ক্রস ওভার লেটেন্সি উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে, যেখানে ANI গ্রুপগুলি পুনরায় সক্রিয়করণ সেশনের তুলনায় PR-LTM-এ তুলনামূলক ক্রসওভার লেটেন্সি প্রদর্শন করেছে এবং VEH গ্রুপ (পোস্টহক বনফেরনি'স টেস্ট, ps , 0.05; পেয়ারড টি টেস্ট, চিত্র 1C, VEH, t(7)=4.976, p=0.0016, ANI, t(7) { 0.05 ) এই পর্যবেক্ষণগুলি ইঙ্গিত দেয় যে 3 বা 10 মিনিটের জন্য অন্ধকার বগিতে পুনরায় এক্সপোজার IA মেমরি নিভে যায় এবং প্রোটিন সংশ্লেষণের বাধা দীর্ঘমেয়াদী বিলুপ্তিকে অবরুদ্ধ করে। এইভাবে, অন্ধকার বগিতে IA মেমরি পুনরুদ্ধার একটি জিন এক্সপ্রেশন-ডি পেন্ডেন্ট পদ্ধতিতে IA মেমরিকে নিভিয়ে দেয়।

গুরুত্বপূর্ণভাবে, VEH গোষ্ঠী PR-LTM-এ তুলনীয় ক্রস ওভার লেটেন্সি দেখিয়েছে পুনঃঅ্যাক্টিভেশন সেশনের তুলনায় এবং ANI গ্রুপের সাথে যখন তারা 1 মিনিটের জন্য অন্ধকার বগিতে অবস্থান করেছিল [টু-ওয়ে আনোভা, সময় (F(1,36) {{ 5}}। 0৷{32}}5), সময় ওষুধের মিথস্ক্রিয়া (F(1,36)=0.011, p. 0.05); পোস্ট হক বনফেরনি এর পরীক্ষা, পিএস। 0.05; পেয়ার করা টি-টেস্ট, VEH, t(9)=0.091, p। 0.05, ANI, t(9)=0.328, p। 0.05; চিত্র 1ই]। এই পর্যবেক্ষণগুলি ইঙ্গিত করে যে VEH গ্রুপটি IA মেমরির বর্ধন বা বিলুপ্তি দেখায়নি এবং ANI গ্রুপ IA মেমরির কোনও ব্যাঘাত দেখায়নি। অতএব, 1 মিনিটের জন্য অন্ধকার বগিতে পুনরায় এক্সপোজার পুনরায় সক্রিয় IA মেমরির বর্ধিতকরণ এবং ANI-প্ররোচিত ব্যাঘাত উভয়ই অবরুদ্ধ করে, কিন্তু IA মেমরিকে নির্বাপিত করে না, পরামর্শ দেয় যে এই 1-মিনিটের পুনঃ এক্সপোজার পুনর্মিলনের আনয়নকে বাতিল করে , কিন্তু IA মেমরি নিভানোর জন্য অপর্যাপ্ত।

সংক্ষেপে, এই ফলাফলগুলি ইঙ্গিত দেয় যে আলোর বগিতে পুনরায় সংস্পর্শে আসা পুনঃসংযোগের পর্যায়কে প্ররোচিত করে, যেখানে অন্ধকার বগিতে (3 বা 10 মিনিট) দীর্ঘায়িত পুনঃপ্রকাশ বিলুপ্তির পর্যায়কে প্ররোচিত করে। আরও গুরুত্বপূর্ণ, অন্ধকার বগিতে 1 মিনিটের জন্য থাকা পুনঃসংযোগ থেকে বিলুপ্তির রূপান্তর পর্যায়কে প্ররোচিত করে, যা বিলুপ্তির প্ররোচিত না করেই ভয়ের স্মৃতি পুনঃসংহতকরণকে বাধা দেয়।

আইএ মেমরি পুনরুদ্ধারের পরে অ্যামিগডালা, হিপ্পোক্যাম্পাস এবং এমপিএফসি-তে পুনর্গঠন, রূপান্তর এবং বিলুপ্তির পর্যায়গুলির আণবিক স্বাক্ষর

প্রাসঙ্গিক ভয় মেমরির পুনর্গঠন এবং বিলুপ্তি S133 এ CREB ফসফোরিলেশনে বৃদ্ধি পায়, এটি পুনঃসংহতকরণ এবং দীর্ঘমেয়াদী বিলুপ্তির জন্য প্রয়োজনীয় জিন এক্সপ্রেশন অ্যাক্টিভেশনের চিহ্নিতকারী, কিন্তু CREB ফসফোরিলেশনের স্বতন্ত্র গতিশীলতা দেখায় (মামিয়া এট আল।, 20 ) মজার বিষয় হল, সাম্প্রতিক গবেষণায় দেখা গেছে যে পুনর্গঠন থেকে উত্তরণের সময় অ্যামিগডালার বেসোলেটারাল অঞ্চলে CREB (Impey et al., 1998; Wu et al., 2001) এর একটি আপস্ট্রিম নিয়ন্ত্রক ERK-এর ফসফোরিলেশনে কোন বৃদ্ধি নেই। একটি cued ভয় স্মৃতির বিলুপ্তির দিকে, যদিও এই ফসফোরিলেশন বেসোলেটারাল অঞ্চলে বৃদ্ধি পায় যখন একটি cued ভয় স্মৃতি পুনরায় একত্রিত হয় এবং নিভে যায় (Merlo et al., 2014, 2018)। অন্য একটি গবেষণায় ইঙ্গিত দেওয়া হয়েছে যে হিপ্পোক্যাম্পাল ইআরকে শুধুমাত্র তখনই সক্রিয় হয় যখন প্রাসঙ্গিক ভয়ের স্মৃতি নিভে যায়, কিন্তু পুনঃসংহত হয় না (ট্রনসন এট আল।, 2009)। এই ফলাফলগুলি পরামর্শ দেয় যে পুনর্মিলন, রূপান্তর এবং বিলুপ্তির পর্যায়গুলি স্বতন্ত্র আণবিক এবং সেলুলার স্বাক্ষর দেখায়। অতএব, আমরা ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি ব্যবহার করে পুনর্গঠন, রূপান্তর এবং বিলুপ্তি পর্যায়ে pCREB এবং pERK-এর মাত্রাগুলি পরিমাপ এবং তুলনা করেছি। আমরা চারটি পরীক্ষামূলক গোষ্ঠী ব্যবহার করে চিত্র 1B, D, E এর মতো একই পরীক্ষামূলক সময়সূচী সম্পাদন করেছি। প্রশিক্ষণের পরে 24 ঘন্টায় ইঁদুরগুলিকে হালকা বগিতে পুনরায় উন্মুক্ত করা হয়েছিল এবং তারপরে অন্ধকার বগিতে অবস্থান করা হয়েছিল [পুনঃসক্রিয়করণ: অন্ধকার বগিতে 0 মিনিট, পুনর্গঠন (রিকন) গ্রুপ; 1 মিনিট, ট্রানজিশন (ট্রান) গ্রুপ; 10 মিনিট, বিলুপ্তি (এক্সট) গ্রুপ]। ইঁদুরের আরেকটি দলকে আলো/অন্ধকার বগিতে ফেরত দেওয়া হয়নি (অ-পুনঃসক্রিয়, এনআর গ্রুপ)। আমরা pCREB-পজিটিভ (pCREB1) নিউরন, pERK-পজিটিভ (pERK1) নিউরন এবং ডাবল-পজিটিভ (pCREB1/pERK1) নিউরন গণনা করেছি অ্যামিগডালা, হিপ্পোক্যাম্পাস, এবং এমপিএফসিতে পুনঃসক্রিয়তা সেশনের 30 মিনিট পরে।

অ্যামিগডালা (পার্শ্বিক অঞ্চল) সিআরইবি বিলুপ্তি এবং পুনর্গঠন পর্যায়ে সক্রিয় হয়েছিল, যেখানে ERK শুধুমাত্র বিলুপ্তির পর্যায়ে সক্রিয় হয়েছিল (চিত্র 2A-C)। একটি একমুখী ANOVA গ্রুপের একটি উল্লেখযোগ্য প্রভাব প্রকাশ করেছে (চিত্র 2B, F(3,29)=14.85, p , 0৷{11}}001)৷ পূর্ববর্তী অনুসন্ধানের অনুরূপ (মামিয়া এট আল।, 2009), পোস্ট-হক নিউম্যান-কিউলস পরীক্ষায় দেখা গেছে যে রিকন এবং এক্সট গ্রুপগুলি অন্যান্য গ্রুপের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি pCREB1 নিউরন দেখিয়েছে (p, 0.05)। এই পর্যবেক্ষণগুলি ইঙ্গিত দেয় যে আচরণগত স্তরে পর্যবেক্ষণের মতো (চিত্র 1), 1 মিনিটের জন্য অন্ধকার বগিতে এক্সপোজার (ট্রানজিশন ফেজ) সিআরইবি ফসফোরিলেশনের "টার্নিং-অন" বাতিল করে যা পুনর্মিলন পর্যায়ে বাড়ানো হবে। বিপরীতে, অন্যান্য গ্রুপের তুলনায় Ext গ্রুপে উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি perK1 নিউরন পরিলক্ষিত হয়েছে, যদিও Ext গ্রুপে pCREB1 নিউরনের তুলনায় অনেক কম perK1 নিউরন ছিল (F(3,29)=3.793, p { {23}}.0207; চিত্র 2C)।

ধারাবাহিকভাবে, Ext গ্রুপ (F(3,29)=6.698, p=0-এ উল্লেখযোগ্যভাবে আরও ডবল পজিটিভ নিউরন (pCREB1/perK1) পরিলক্ষিত হয়েছে৷{14}}0 14; চিত্র 2D), যেখানে উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি pCREB1/ perK– (pCREB একক পজিটিভ) নিউরন রিকন এবং এক্সট গ্রুপগুলিতে পরিলক্ষিত হয়েছে (F(3,29)=13.689, p , 0 .0001; চিত্র 2E)। সুতরাং, পুনর্গঠন পর্যায়ে pCREB1/perK– নিউরনের শুধুমাত্র একটি জনসংখ্যা দেখায়। বিপরীতে, বিলুপ্তি পর্যায়ে pCREB1/pERK– এবং pCREB1/ perK1 নিউরনের দুটি জনসংখ্যা দেখায়, যা ইঙ্গিত করে যে ERK শুধুমাত্র pCREB1 নিউরনের একটি উপসেটে সক্রিয় হয়েছে। গুরুত্বপূর্ণভাবে, অ্যামিগডালা (চিত্র 2G, F(3,29)=13.042, p , 0.0001; চিত্র 2H, F(3,29) {{32} }.824, p=0.0201; চিত্র 2I, F(3,29)=12.633, p , 0.0001; চিত্র 2J, F(3,29)=12 .505, পি, 0.0001)।

বিলুপ্তির পর্যায়ে ERK-এর বিফাসিক অ্যাক্টিভেশন হল ERK হল CREB-এর একটি আপস্ট্রিম অ্যাক্টিভেটর এবং এর ফলে, ভয় মেমরির একত্রীকরণ এবং পুনঃসংহতকরণের জন্য ERK সক্রিয়করণ প্রয়োজন (Schafe et al., 200{{31 }}; ডুভারসি এট আল।, 2005)। যাইহোক, অসামঞ্জস্যপূর্ণভাবে, অ্যামিগডালা, হিপ্পোক্যাম্পাস, বা এমপিএফসিতে পুনর্মিলন পর্বে কোনো ERK অ্যাক্টিভেশন পরিলক্ষিত হয়নি যখন পিইআরকে পুনরায় সক্রিয়করণ সেশনের পর 30 মিনিটে পরিমাপ করা হয়েছিল (চিত্র। 2-4)। অতএব, আমরা ERK এবং CREB ফসফোরিলেশনের সময় কোর্সগুলি পরীক্ষা করেছি। আমরা চিত্র 2-4-এর মতো একটি অনুরূপ পরীক্ষা করেছি, ব্যতীত pCREB এবং পিইআরকে স্তরগুলি পুনরায় সক্রিয়করণ সেশনের 5, 15, এবং 30 মিনিটে পরিমাপ করা হয়েছিল ({{ এর জন্য অন্ধকার বগিতে পুনরায় এক্সপোজার) 66}}, 1, বা 10 মিনিট; চিত্র 5A)। চিত্রে দেখানো তথ্যের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ 2-4, pCREB1 নিউরনে উল্লেখযোগ্য বৃদ্ধি 30 মিনিটে পরিলক্ষিত হয়েছে, কিন্তু 5 মিনিটে নয়, রিকন (অ্যামিগডালা, এমপিএফসি এবং হিপ্পোক্যাম্পাস) এবং এক্সট (অ্যামিগডালা এবং এমপিএফসি) পুনরায় সক্রিয়করণ সেশনের পরে ) গোষ্ঠী, কিন্তু ট্রান গ্রুপ নয় (চিত্র 5E, একমুখী আনোভা, অ্যামিগডালা, 5 মিনিট, F(3,23)=0.346, p. 0.05, 30 মিনিট, F(3,23)=15.272, p , 0.0001; mPFC, 5 মিনিট, F(3,23)=1.169, p। 0.05, 30 মিনিট, F(3,23)=32। 346, p , 0.0001; হিপ্পোক্যাম্পাস, 5 মিনিট, F(3,23)=0.154, p. 0.05, 30 মিনিট, F(3,23)=16.197, p , 0.0001; জোড়াবিহীন টি পরীক্ষা, অ্যামিগডালা, পুনর্মিলন, 5 বনাম 30 মিনিট, t(12)=7.807, p , 0.0001, বিলুপ্তি, 5 বনাম 30 মিনিট, t(12)=5.405, p { {73}}.0002; mPFC, পুনর্মিলন, 5 বনাম 30 মিনিট, t(12)=5.727, p , 0.0001, বিলুপ্তি, 5 বনাম 30 মিনিট, t(12)=4.188 , p=0.0013; হিপ্পোক্যাম্পাল CA1 অঞ্চল, পুনর্মিলন, 5 বনাম 30 মিনিট, t(12)=2.339, p=0.0374)।

মজার বিষয় হল, এনআর গ্রুপের (চিত্র 5এফ, অ্যামিগডালা, এফ(3,23) এর তুলনায় পুনরায় সক্রিয়করণ সেশনের 5 মিনিটের পরে রিকন, ট্রান এবং এক্সট গ্রুপের অ্যামিগডালা, এমপিএফসি এবং হিপোক্যাম্পাসে পিইআরকে 1 নিউরনের উল্লেখযোগ্য বৃদ্ধি লক্ষ্য করা গেছে।=10.961, p=0৷{28}}001; mPFC, F(3,23)=7.525, p { {13}}.0011; হিপোক্যাম্পাস, F(3,23)=6.924, p=0.0017)। এই পর্যবেক্ষণগুলি ইঙ্গিত দেয় যে সমস্ত মেমরি পর্যায়গুলিতে পুনরায় সক্রিয়করণ সেশনের পরপরই ERK সক্রিয় হয়। যাইহোক, পিইআরকে১ নিউরনের সংখ্যার এই বৃদ্ধিগুলি পুনরায় সক্রিয়করণ সেশনের 15 মিনিটে বেসাল স্তরে ফিরে আসে (এনআর গ্রুপের সাথে তুলনীয়) (চিত্র 5এফ, অ্যামিগডালা, এফ(3,20)=2.676, পি 0.05; mPFC, F(3,23)=0.683, p. 0.05; হিপ্পোক্যাম্পাস, F(3,20)=0.74, p. 0.05)। তদ্ব্যতীত, চিত্র 2-4-এ দেখানো ফলাফলের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ, শুধুমাত্র Ext গ্রুপে (চিত্র 5F, অ্যামিগডালা, এফ( 3,23)=6.616, p=0.022; mPFC, F(3,23)=8.012, p=0.0008; হিপোক্যাম্পাস, F( 3,23)=6.206, পি=0.003)। এইভাবে, পুনর্মিলন এবং রূপান্তর পর্যায়গুলি শুধুমাত্র প্রাথমিক সময় বিন্দুতে (5 মিনিট) ERK-এর ক্ষণস্থায়ী অ্যাক্টিভেশন দেখায়, যেখানে বিলুপ্তির পর্যায়টি পুনঃসক্রিয়করণের পর প্রথম দিকে (5 মিনিট) এবং দেরী (30 মিনিট) সময় পয়েন্টে ERK-এর বাইফাসিক অ্যাক্টিভেশন দেখায়। সেশন. এই পর্যবেক্ষণগুলি নির্দেশ করে যে ERK অ্যাক্টিভেশন নিয়ন্ত্রণের প্রক্রিয়াগুলি পুনর্গঠন/পরিবর্তন এবং বিলুপ্তির পর্যায়গুলির মধ্যে আলাদা। সম্মিলিতভাবে, আমাদের পর্যবেক্ষণগুলি প্রমাণ করেছে যে পুনর্মিলন, রূপান্তর এবং বিলুপ্তির পর্যায়গুলি স্বতন্ত্র আণবিক স্বাক্ষর দেখায়।

IA মেমরির পুনর্গঠন এবং বিলুপ্তি পর্যায়ে ERK সক্রিয়করণের ভূমিকা

পুনর্গঠন/পরিবর্তন এবং বিলুপ্তির পর্যায়গুলি যথাক্রমে মনোফ্যাসিক এবং বিফাসিক ERK সক্রিয়করণ দেখিয়েছে। আমরা পরবর্তীতে তদন্ত করেছি এবং ERK (ছবি 6) প্রতিরোধের প্রভাবগুলি পরীক্ষা করে পুনর্গঠন এবং বিলুপ্তি পর্যায়ে mPFC-তে প্রাথমিক (5 মিনিট) এবং দেরী (30 মিনিট) ERK সক্রিয়করণের ভূমিকাগুলির তুলনা করেছি।

আলোচনা

এই সমীক্ষায়, আমরা আইএ মেমরি পুনরুদ্ধারের পরে পুনর্গঠন থেকে বিলুপ্তির পর্যায়গুলিতে স্মৃতি রূপান্তরের প্রক্রিয়াগুলি তদন্ত করেছি। পুনরুদ্ধারের পরে আমরা প্রথমে আইএ মেমরির পর্যায়গুলির আচরণগত স্বাক্ষরগুলি চিহ্নিত করেছি। আমাদের পূর্ববর্তী অধ্যয়নের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ (ফুকুশিমা এট আল।, 2014), IA মেমরি পুনরুদ্ধার-প্ররোচিত পুনর্গঠন এবং আলোর পুনঃপ্রকাশের মাধ্যমে বিলুপ্তি (0 মিনিট অন্ধকার বগিতে) এবং অন্ধকার ( 3 বা 10 মিনিট) বগি, যথাক্রমে। মজার বিষয় হল, IA মেমরিটি বর্ধিত বা নির্বাপিত হয়নি এবং প্রোটিন সংশ্লেষণের বাধার বিরুদ্ধে প্রতিরোধ দেখায় যখন ইঁদুরগুলিকে শুধুমাত্র 1 মিনিটের জন্য অন্ধকার বগিতে পুনরায় প্রকাশ করা হয়। অতএব, এই পর্যবেক্ষণগুলি পরামর্শ দেয় যে অন্ধকার বগিতে একটি 1-মিনিটের পুনঃপ্রকাশ পুনরায় একত্রিতকরণের আবেশকে বাতিল করে, কিন্তু IA মেমরি নিভানোর জন্য অপর্যাপ্ত। তদ্ব্যতীত, আমরা দেখতে পেয়েছি যে ERK অ্যামিগডালা, হিপ্পোক্যাম্পাস এবং এমপিএফসিতে 0, 1, বা 10 মিনিটের জন্য অন্ধকার বগিতে পুনরায় এক্সপোজারের পরে প্রাথমিক সময় পয়েন্টে (5 মিনিট) সক্রিয় হয়েছিল। ধারাবাহিকভাবে, এই মস্তিষ্কের অঞ্চলে ERK-এর বাধা IA মেমরির পুনর্গঠন/বর্ধিতকরণ এবং বিলুপ্তিকে অবরুদ্ধ করে। সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণ বিষয় হল, অ্যামিগডালা, হিপ্পোক্যাম্পাস এবং এমপিএফসিতে 1-মিনিটের অন্ধকার কম্পার্টমেন্টের পুনঃপ্রকাশের পরে ERK নিষেধাজ্ঞা IA মেমরির পুনর্গঠন-মধ্যস্থতা বর্ধিতকরণকে বাধাগ্রস্ত করে, যা পরামর্শ দেয় যে সংক্ষিপ্ত (1 মিনিট) পুনরায় এক্সপোজারের পরে ERK সক্রিয়করণ অন্ধকার বগি থেকে IA মেমরি পুনর্গঠন প্রতিরোধের জন্য প্রয়োজন. বিপরীতভাবে, অন্ধকার বগিতে একটি 1-মিনিটের পুনঃপ্রকাশ IA মেমরি নিভানোর জন্য অপর্যাপ্ত ছিল, যদিও অন্ধকার বগিতে বর্ধিত পুনঃ-এক্সপোজার (3 বা 10 মিনিট) এই স্মৃতিকে নিভিয়ে দেয়। তাই, আমাদের ফলাফলগুলি পরামর্শ দেয় যে অন্ধকার বগিতে একটি 1-মিনিটের পুনঃপ্রকাশ একটি মেমরি ট্রানজিশন প্রক্রিয়াকে প্ররোচিত করে যা পুনর্গঠন/বর্ধিতকরণ বাতিল করে কিন্তু বিলুপ্তি শেখার সূচনা করে না। সমষ্টিগতভাবে, আমরা পরামর্শ দিই যে মেমরি ট্রানজিশন প্রক্রিয়াটি মেমরির পর্যায়গুলিকে পুনর্গঠন থেকে বিলুপ্তির দিকে ERK-মধ্যস্থতা পুনর্গঠন প্রতিরোধের মাধ্যমে স্যুইচ করতে অবদান রাখে।

আমাদের বর্তমান পর্যবেক্ষণের অনুরূপ, শ্রুতি ভয় কন্ডিশনিং ব্যবহার করে একটি সাম্প্রতিক গবেষণায় দেখা গেছে যে একক (1) বা দীর্ঘায়িত (10) CS উপস্থাপনাগুলি যথাক্রমে, অ্যামিগডালার বেসোলেটারাল অঞ্চলে পিইআরকে মাত্রা বৃদ্ধির মাধ্যমে স্মৃতি পুনর্গঠন এবং বিলুপ্তি ঘটায়। বিপরীতে, মধ্যবর্তী (4-7) CS উপস্থাপনাগুলি অ্যামিগডালার বেসোলেটারাল অঞ্চলে পিইআরকে মাত্রা পরিবর্তন করে না। গুরুত্বপূর্ণভাবে, মধ্যবর্তী CS উপস্থাপনাগুলিতে ERK বাধা ভয়ের স্মৃতিকে প্রভাবিত করেনি। এই সমীক্ষায় পরামর্শ দেওয়া হয়েছে যে ভয় মেমরি পুনরুদ্ধারের পরে পুনর্গঠন থেকে বিলুপ্তির দিকে মেমরি পর্বের একটি রূপান্তর রয়েছে (মেরলো এট আল।, 2018)। বর্তমান গবেষণায়, আমরা এই অনুসন্ধানটি প্রসারিত করেছি এবং পরামর্শ দিয়েছি যে রূপান্তর পর্বটি সক্রিয়ভাবে মেমরি পর্যায়গুলিকে পুনর্গঠন থেকে বিলুপ্তির দিকে স্যুইচ করে ERK সংকেত ট্রান্সডাকশন পাথওয়ের সক্রিয়করণের মাধ্যমে। পূর্ববর্তী অনুসন্ধানের বিপরীতে (Merlo et al., 2018), আমরা দেখতে পেয়েছি যে রূপান্তর পর্যায়ে অ্যামিগডালা, হিপ্পোক্যাম্পাস এবং এমপিএফসিতে ERK ফসফোরিলেশন জড়িত। ERK ফসফোরিলেশন পরীক্ষা করার সময় পয়েন্টের পার্থক্যের কারণে এই অসঙ্গতিগুলি হতে পারে; পূর্ববর্তী গবেষণায় পিইআরকে মাত্রা পরিমাপ করা হয়েছিল; CS উপস্থাপনার 12 মিনিট পরে (Merlo et al., 2018), যখন আমাদের সমীক্ষায় দেখা গেছে যে বর্ধিত perK স্তরগুলি এই সময়ে প্রায় বেসাল স্তরে ফিরে এসেছে (পুনরায় এক্সপোজারের 15 মিনিট পরে)। অতিরিক্তভাবে, এটি লক্ষ করা গুরুত্বপূর্ণ যে IA টাস্কটি পুনঃসংহতকরণের মাধ্যমে IA মেমরির বর্ধিতকরণের পর্যবেক্ষণ সক্ষম করে, যার ফলে আমাদের খুঁজে পাওয়া যায় যে রূপান্তর পর্যায়ে ERK-এর বাধা IA মেমরির বর্ধনকে বাধা দেয়।

পূর্ববর্তী গবেষণায় দেখানো হয়েছে যে কিউড ভয় মেমরির বিলুপ্তি শেখার পরে 20-60 মিনিটে অ্যামিগডালার বেসোলেটারাল অঞ্চলে ERK ফসফোরিলেশন বৃদ্ধি পায় (হেরি এট আল।, 2006; মের্লো এট আল।, 2014, 2018), যেখানে হিপোক্যাম্পাস দেখায় প্রাসঙ্গিক ভয় মেমরির বিলুপ্তি শেখার পরে 1 ঘন্টায় এই সক্রিয়করণ (ফিশার এট আল।, 2007; ট্রনসন এট আল।, 2009)। বর্তমান সমীক্ষায়, আমরা অনুরূপ পর্যবেক্ষণ পেয়েছি যে বিলুপ্তির পর্যায়ে পুনরায় সক্রিয়করণ সেশনের পরে 30 মিনিটে পিআরকে বাড়ানো হয়। এই ফলাফলগুলি পরামর্শ দেয় যে ERK ফসফোরিলেশন হল বিলুপ্তির শেষ পর্যায়ের একটি সাধারণ আণবিক স্বাক্ষর (20-60 মিনিট)।

অধিকন্তু, আমরা লক্ষ্য করেছি যে বিলুপ্তির পর্যায়ে পুনরায় সক্রিয়করণ সেশনের পরে ERK অ্যাক্টিভেশন প্রাথমিক এবং দেরী সময় পয়েন্টে (5 এবং 30 মিনিট) biphasically ঘটে, যেখানে এই অ্যাক্টিভেশনটি পুনঃসংযোজন পর্বের প্রারম্ভিক সময় পয়েন্টে মনোগতভাবে ঘটে (চিত্র 5) . ধারাবাহিকভাবে, পুনর্গঠন এবং বিলুপ্তির পর্যায়গুলির এই সময়ে মস্তিষ্কের অঞ্চলগুলিতে ERK বাধা দেওয়া যথাক্রমে পুনর্গঠন/বর্ধিতকরণ এবং দীর্ঘমেয়াদী বিলুপ্তিকে অবরুদ্ধ করে (চিত্র 6A, C–H)। এই পর্যবেক্ষণগুলি পরামর্শ দেয় যে যথাক্রমে IA মেমরির পুনর্গঠন-মধ্যস্থতা বৃদ্ধি এবং বিলুপ্তির জন্য মনোফ্যাসিক এবং বিফাসিক ERK অ্যাক্টিভেশন প্রয়োজন। এটি লক্ষ করা গুরুত্বপূর্ণ যে ERK CREB ফসফোরিলেশনের একটি আপস্ট্রিম নিয়ন্ত্রক হিসাবে কাজ করে। অতএব, প্রারম্ভিক মেমরি পর্যায়ে ERK-এর ক্ষণস্থায়ী সক্রিয়করণ, অন্তত আংশিকভাবে, CREB-এর এই ফসফোরিলেশনে অবদান রাখতে পারে, যা পুনর্গঠন এবং দীর্ঘমেয়াদী বিলুপ্তির জন্য প্রয়োজনীয় জিনের প্রকাশকে সক্রিয় করে।

প্রাসঙ্গিক ভয় কন্ডিশনিং (মামিয়া এট আল।, 2009) ব্যবহার করে আমাদের পূর্ববর্তী অনুসন্ধানের অনুরূপ, সিআরইবি পুনর্গঠন (অ্যামিগডালা/হিপ্পোক্যাম্পাস/এমপিএফসি) এবং বিলুপ্তি (অ্যামিগডালা/এমপিএফসি) মেমরি পর্যায়ে সক্রিয় করা হয়েছিল, যখন ERK শুধুমাত্র বিলুপ্তির পর্যায়ে সক্রিয় হয়েছিল। পুনরায় সক্রিয়করণ সেশনের 30 মিনিটে। ধারাবাহিকভাবে, শুধুমাত্র pCREB1/pERK– নিউরনের একক জনসংখ্যা পুনর্গঠন পর্যায়ে পরিলক্ষিত হয়েছে, যখন বিলুপ্তির পর্যায়ে স্বতন্ত্র নিউরন জনসংখ্যা পরিলক্ষিত হয়েছে: pCREB1/pERK– এবং pCREB1/pERK1 নিউরন অ্যামিগডালায় (চিত্র 2); pCREB– /pERK1 হিপ্পোক্যাম্পাসের নিউরন (চিত্র 3); এবং pCREB1/pERK–, pCREB– /pERK1, এবং pCREB1/perK1 নিউরন mPFC-তে (চিত্র 4)। এই পর্যবেক্ষণগুলি, বিশেষ করে pCREB–/ perK1 এবং pCREB1/perK– নিউরনের বিপরীত পর্যবেক্ষণ, পরামর্শ দেয় যে CREB এবং ERK সক্রিয়করণ প্রতিটি মস্তিষ্কের এলাকায় আলাদাভাবে নিয়ন্ত্রিত হয় যখন স্মৃতি নিভে যায় এবং ERK-এর শেষ পর্যায়ে সক্রিয়করণ নির্দিষ্ট এবং স্বতন্ত্র ভূমিকা পালন করে। ভয় মেমরির বিলুপ্তির জন্য ভূমিকা অন্যান্য মেমরি প্রক্রিয়া যেমন একত্রীকরণ এবং পুনর্গঠনের সাথে তুলনা করে নীচে আলোচনা করা হয়েছে। মজার বিষয় হল, আমরা লক্ষ্য করেছি যে হিপ্পোক্যাম্পাস এবং অ্যামিগডালার তুলনায় mPFC-তে pERK1 নিউরনগুলি বেশি পরিমাণে ছিল, যেহেতু mPFC হিপ্পোক্যাম্পাসের তুলনায় pERK1 নিউরন (বিলুপ্তির পর্যায়) এবং pCREB1 নিউরনগুলির (পুনঃসংযোজন পর্যায়) একটি উচ্চ অনুপাত দেখিয়েছিল, পরামর্শ দেয় যে হিপোক্যাম্পাস এবং অ্যামিগডালা। এমপিএফসি-তে ERK সক্রিয়করণ স্মৃতি বিলুপ্তির ক্ষেত্রে আরও নির্দিষ্ট ভূমিকা পালন করে।

এটি অস্পষ্ট রয়ে গেছে যে নিউরনের একই বা ভিন্ন জনসংখ্যা পুনর্গঠন, রূপান্তর এবং বিলুপ্তির স্মৃতি পর্যায়গুলিতে সক্রিয় হয় কিনা। পূর্ববর্তী একটি গবেষণায় অ্যামিগডালায় "ভয় নিউরন" এবং "বিলুপ্তি নিউরন" সক্রিয়করণ চিহ্নিত করা হয়েছিল যখন কিউড ভয় মেমরি যথাক্রমে পুনরায় সক্রিয় বা নিভে যায় (হেরি এট আল।, 2008)। অতএব, এটা সম্ভব যে ERK এবং CREB বিভিন্ন অস্থায়ী প্রোফাইল সহ নিউরনের বিভিন্ন জনগোষ্ঠীতে সক্রিয় হয়েছে (যেমন, "পুনর্সংযোজন নিউরন" এবং বিলুপ্তি নিউরন)। উপরে যেমন আলোচনা করা হয়েছে, pCREB1 নিউরনগুলি, pCREB1/perK1 নিউরন সহ, যথাক্রমে পুনঃসংহতকরণ এবং বিলুপ্তি নিউরন হিসাবে জিন এক্সপ্রেশন সক্রিয় করার মাধ্যমে IA মেমরির পুনর্গঠন এবং দীর্ঘমেয়াদী বিলুপ্তি নিয়ন্ত্রণ করতে পারে। বিপরীতভাবে, pCREB– /pERK1 নিউরনে ERK অ্যাক্টিভেশন CREB-মধ্যস্থ ট্রান্সক্রিপশনাল অ্যাক্টিভেশন বাতিল করতে অবদান রাখতে পারে যা পুনর্গঠনের জন্য প্রয়োজন হবে কারণ এই ERK অ্যাক্টিভেশনটি বিশেষভাবে বিলুপ্তির পর্যায়ে পরিলক্ষিত হয়; ERK বিলুপ্তির পর্যায়ে জিনের প্রকাশের সক্রিয়করণ বাতিল করতে পুনর্গঠন নিউরনে সক্রিয় করেছে। মজার বিষয় হল, পূর্ববর্তী একটি গবেষণায় দেখা গেছে যে হিপ্পোক্যাম্পাল ইআরকে অ্যাক্টিভেশন সি-ফস-এর আনয়নকে অবরুদ্ধ করে যখন প্রাসঙ্গিক ভয়ের স্মৃতি নিভে যায় (গুয়েডিয়া এট আল।, 2011), এই ERK অ্যাক্টিভেশন CREB-সংকেত পথের বিরোধী হওয়ার সম্ভাবনা বাড়ায়। নিউরোনাল জনসংখ্যাগুলি সনাক্ত করা গুরুত্বপূর্ণ যা পুনর্গঠন, রূপান্তর এবং বিলুপ্তি নিয়ন্ত্রণ করে এবং সেই নিউরনের আণবিক স্বাক্ষর এবং কার্যকরী তাত্পর্য তদন্ত করা। উপরন্তু, এই গবেষণায় চিহ্নিত নিউরাল জনসংখ্যার মধ্যে মিথস্ক্রিয়া অজানা থেকে যায়। এটা সম্ভব যে "বিলুপ্তি (ট্রানজিশন) নিউরন" তাদের মধ্যে পারস্পরিক মিথস্ক্রিয়া দ্বারা পুনর্গঠন প্রতিরোধ বাতিল করতে পুনর্গঠন নিউরনগুলির কার্যকে সংশোধন করে (আইজেনবার্গ এট আল।, 2003; মের্লো এট আল।, 2014)। অতএব, অ্যামিগডালা, এমপিএফসি এবং হিপ্পোক্যাম্পাসের মধ্যে এই মিথস্ক্রিয়াগুলি পরীক্ষা করাও গুরুত্বপূর্ণ।

পূর্বে, আমরা দেখিয়েছি যে হিপ্পোক্যাম্পাস প্রাসঙ্গিক ভয়ের বিলুপ্তি শেখার পরে সিআরইবি ফসফোরিলেশন এবং আর্ক এক্সপ্রেশনের কোনও পরিবর্তন দেখায় না এবং ধারাবাহিকভাবে, বিলুপ্তির পর্যায়ে হিপোক্যাম্পাসে প্রোটিন সংশ্লেষণের বাধা দীর্ঘমেয়াদী বিলুপ্তি ব্লক করতে ব্যর্থ হয় (মামিয়া এট আল। , 2009)। এই পর্যবেক্ষণগুলি এই সম্ভাবনাকে উত্থাপন করেছে যে দীর্ঘমেয়াদী বিলুপ্তির জন্য হিপ্পোক্যাম্পাসের প্রয়োজন নেই। যাইহোক, আমরা দেখিয়েছি যে আইএ মেমরির বিলুপ্তি শেখার পরে হিপ্পোক্যাম্পাসে ইআরকে সক্রিয় হয় এবং ধারাবাহিকভাবে, হিপ্পোক্যাম্পাসে ইআরকে অ্যাক্টিভেশনকে অবরুদ্ধ করা দীর্ঘমেয়াদী বিলুপ্তিকে বাধা দেয়। অতএব, আমাদের বর্তমান পর্যবেক্ষণগুলি স্মৃতি বিলুপ্তিতে হিপ্পোক্যাম্পাসের জন্য প্রয়োজনীয় ভূমিকা নির্দেশ করে। আমাদের পূর্ববর্তী অনুসন্ধানগুলির সাথে একত্রে নেওয়া, আমরা পরামর্শ দিই যে হিপ্পোক্যাম্পাস মেমরি বিলুপ্তির জন্য প্রয়োজন কিন্তু জিন এক্সপ্রেশন সক্রিয়করণের মাধ্যমে একটি "বিলুপ্তি মেমরি" স্থিতিশীল করার জন্য একত্রীকরণের মতো প্রক্রিয়ার জন্য নয়।