একটি অভিনব প্রদাহজনক ডেনড্রাইটিক কোষ যা লুপাস নেফ্রাইটিস রোগীদের কিডনির টি কোষের সাথে প্রচুর এবং সংলগ্ন।
Feb 24, 2022
লুপাস নেফ্রাইটিস (এলএন) ফ্লেয়ারের সময় স্থানীয় প্রদাহজনিত আঘাতের প্রচারের প্রক্রিয়াগুলি মূলত অজানা। মূল ইমিউন কোষগুলি বোঝা যা অভ্যন্তরীণ প্রদাহকে চালিত করে রোগের প্যাথোজেনেসিস সম্পর্কে আমাদের জ্ঞানকে অগ্রসর করবে এবং এলএন পরিচালনার জন্য নতুন থেরাপিউটিকসের বিকাশকে অবহিত করবে। এই গবেষণায়, আমরা বিশ্লেষণকিডনি প্রলিফারেটিভ এলএন রোগীদের বায়োপসি এবং একটি অভিনব ইনফ্ল্যামেটরি ডেনড্রাইটিক সেল (ইনফডিসি) জনসংখ্যা সনাক্ত করা হয়েছে যা এলএন-এ অত্যন্ত প্রকাশ করা হয়েছেকিডনিকিন্তু সুস্থ মানুষের মধ্যে ন্যূনতম উপস্থিতকিডনি.ইমিউন ট্রান্সক্রিপ্ট এক্সপ্রেশনের একটি অজ্ঞেয়বাদী মূল্যায়নের সময়কিডনিপ্রলিফারেটিভ এলএন রোগীদের মধ্যে, বিচ্ছিন্ন গ্লোমেরুলি থেকে সর্বাধিক প্রচুর পরিমাণে অত্যধিক এক্সপ্রেসড ট্রান্সক্রিপ্ট ছিল FCER1G, যা Fc রিসেপ্টর গামা চেইন (FcR) এনকোড করে। FcR প্রকাশকারী কোষের ধরন সনাক্ত করতে যা অনুপ্রবেশ ঘটায়কিডনিএলএন-তে, গবেষণা করা হয়েছিলকিডনিকনফোকাল ইমিউনোফ্লফ্লুরেসেন্স (IF) মাইক্রোস্কোপি ব্যবহার করে সক্রিয় এলএন রোগীদের বায়োপসি। এটি দেখিয়েছে যে এফসিআর প্রচুর পরিমাণে পেরিগ্লোমেরুলার (পিজি) অঞ্চলে উপস্থিত রয়েছেকিডনিএবং অল্প পরিমাণে টিউবুলোইন্টারস্টিটিয়ামে (টিআই)। এই কোষগুলির পৃষ্ঠ চিহ্নিতকারীগুলির আরও তদন্তে দেখা গেছে যে তারা FcR প্লাস, MHC II প্লাস, CD11c প্লাস, CD163 প্লাস, CD5, DC-SIGN প্লাস, CD64 প্লাস, CD14 প্লাস, CD16 প্লাস, SIRP প্লাস, CD268, CD263, , CD3 , এবং CD11bV , কোষগুলি infDCs ছিল পরামর্শ দেয়৷ infDC-এর পরিমাপ LN-এ গড় 10-গুণ উচ্চতর স্তরের infDCs দেখায়কিডনিস্বাস্থ্যকর তুলনায়কিডনি. গুরুত্বপূর্ণভাবে, এলএন-এর পিজি স্পেসে এই ইনফডিসিগুলির সংলগ্ন CD3 প্লাস T কোষগুলি চিহ্নিত করা হলেকিডনি,যেখানে উভয় কোষের ধরনই স্বাস্থ্যকর অবস্থায় ন্যূনতম উপস্থিত থাকেকিডনিএইভাবে, আমরা লুপাসে পূর্বে বর্ণিত একটি ডিসি চিহ্নিত করেছিকিডনিযা ইন্ট্রারেনাল টি কোষের সাথে যোগাযোগ করতে পারে এবং এর প্যাথোজেনেসিসে ভূমিকা পালন করতে পারেকিডনি আঘাতএলএন ফ্লেয়ারের সময়।
কীওয়ার্ড:প্রদাহজনক ডেনড্রাইটিক কোষ, লুপাস নেফ্রাইটিস, কিডনি, অটোইমিউনিটি, অভিযোজিত ইমিউন প্রতিক্রিয়া, টি কোষ, এসএলই
ভূমিকা
লুপাস নেফ্রাইটিস (LN) হল সিস্টেমিক লুপাস এরিথেমেটোসাস (SLE) এর একটি গুরুতর জটিলতা যা যথেষ্ট অসুস্থতা এবং মৃত্যুর সাথে যুক্ত। LN রোগীদের 30 শতাংশ পর্যন্ত শেষ পর্যায়ে অগ্রসর হয়কিডনীর রোগ(ESKD) (1)। LN-এর চিকিৎসার জন্য কোনো নির্দিষ্ট ইউনাইটেড স্টেটস ফুড অ্যান্ড ড্রাগ অ্যাডমিনিস্ট্রেশন (FDA) অনুমোদিত থেরাপি নেই, এবং বর্তমান থেরাপিগুলি যথেষ্ট সাইটোটক্সিসিটি (2) সহ সাবঅপ্টিমাল রেসপন্স রেট তৈরি করে। আমরা এবং অন্যান্য তদন্তকারীরা এর আণবিক রোগবিদ্যা অন্বেষণ করা হয়েছেকিডনিসক্রিয় LN সময় এর প্যাথোজেনেসিস ভাল বুঝতেকিডনি আঘাতLN এবং পাথওয়েতে যেগুলি LN এর চিকিত্সার জন্য নির্দিষ্টভাবে লক্ষ্যবস্তু হতে পারে।
CISTANCHE কিডনি/রেনাল ফাংশন উন্নত করবে
লেজার মাইক্রোডিসেক্টেডে ট্রান্সক্রিপ্ট এক্সপ্রেশনের অজ্ঞেয়বাদী মূল্যায়নের সময়কিডনিক্লিনিকাল এলএন বায়োপসি থেকে টিস্যুতে, আমরা দেখতে পেয়েছি যে গ্লোমেরুলার কম্পার্টমেন্টে সর্বাধিক প্রচুর পরিমাণে অতিপ্রকাশিত প্রতিলিপি ছিল FCER1G, Fc রিসেপ্টর গামা চেইন (FcR) এনকোডিং। এটা অনুমান করা হয়েছিল যে এই প্রতিলিপি প্রতিফলিত প্রতিবিম্বিত অনাক্রম্য কোষ infifiltratingকিডনিসক্রিয় এলএন চলাকালীন, এবং এই কাজটি ওভার এক্সপ্রেসড এফসিআর দ্বারা উপস্থাপিত কোষের ধরনগুলি সনাক্ত করার জন্য করা হয়েছিল। এইভাবে, এই গবেষণায়, ট্রান্সক্রিপ্টোমিক ফিফাইন্ডিংগুলি কনফোকাল ইমিউনোফ্লুওরসেন্স (IF) অধ্যয়নগুলিকে নির্দেশ করতে ব্যবহৃত হয়েছিল যাতে উপস্থিত প্রধান অনুপ্রবেশকারী ইমিউন কোষগুলিকে চিহ্নিত করতেকিডনিএলএন ফ্লেয়ারের সময়। আমরা এফসিআর-এর একটি অনন্য জনসংখ্যাকে শনাক্ত করেছি - প্রদাহজনক ডেনড্রাইটিক কোষ (infDC) প্রকাশ করে যা পেরিগ্লোমেরুলার (PG) স্থান এবং CD3 প্লাস টি কোষের সংলগ্ন থাকে যা infDC এবং T কোষের জনসংখ্যার মধ্যে একটি সম্ভাব্য ক্রস-টক নির্দেশ করে।
উপকরণ এবং পদ্ধতিসমূহ
পরীক্ষামূলক অলঙ্করণএই কাজের উদ্দেশ্য ছিল ট্রান্সক্রিপশনাল বিশ্লেষণ এবং IF চালু করাকিডনিএলএন ফ্লেয়ারে বায়োপসি করা হয় যাতে উপস্থিত প্রধান অনুপ্রবেশকারী ইমিউন কোষগুলি সনাক্ত করা যায়কিডনিএলএন ফ্লেয়ারের সময়। ট্রান্সক্রিপ্টোমিক বিশ্লেষণ করা হয়েছিলকিডনি2007 এবং 2013 এর মধ্যে প্রলিফারেটিভ (ক্লাস III/IV ± V) LN সহ 58 জন রোগীর কাছ থেকে LN ফ্লেয়ারে প্রাপ্ত বায়োপসি। ক্লিনিকাল পরীক্ষা শেষ হওয়ার পরে আর্কাইভাল বায়োপসিগুলি ব্যবহার করা হয়েছিল। লেজার ক্যাপচার মাইক্রোডিসেকশন (এলসিএম) সঞ্চালিত হয়েছিল এবং গ্লোমেরুলি এবং টিউবুলোইন্টারস্টিটিয়াম (টিআই) আলাদাভাবে বিচ্ছিন্ন করা হয়েছিল। প্রি-ইমপ্লান্টেশন জীবন্ত দাতাকিডনিবায়োপসিগুলি (n=10) স্বাস্থ্যকর নিয়ন্ত্রণ (HCs) হিসাবে কাজ করে এবং LN বায়োপসিগুলির সাথে সমান্তরালভাবে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। একই নেফ্রোলজিস্ট (এএম) সমস্ত রোগীদের চিকিত্সা করেছিলেন এবং একজন অভিজ্ঞ নেফ্রোপ্যাথোলজিস্ট (ভিএ) পড়েছিলেনকিডনিবায়োপসি হাসপাতাল ফার্নান্দেজ (বুয়েনস আইরেস) নীতিশাস্ত্র বোর্ড এবং ওহিও স্টেট ইউনিভার্সিটি প্রাতিষ্ঠানিক পর্যালোচনা বোর্ড তদন্তের অনুমোদন দিয়েছেকিডনিবায়োপসি
আরএনএ নিষ্কাশন এবং বিশ্লেষণ
ট্রান্সক্রিপ্টমিক বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহৃত বায়োপসিগুলি ফরমালিন এবং প্যারাফিন-এমবেডেড (এফএফপিই) এ স্থির করা হয়েছিল। প্যারাফিন ব্লক থেকে, প্রতিটি বায়োপসি থেকে 10µm বিভাগ কাটা হয়েছিল। ডিপ্যারাফিনাইজেশনের পর, সমস্ত উপলব্ধ গ্লোমেরুলি এবং টিআই লেজার মাইক্রোডিসেকশন (PALM MicroBeam, Zeiss Labs, Bernried, Germany) দ্বারা আলাদা করা হয়েছিল, ক্যাপচার করা হয়েছিল এবং প্রোটিনেস কে দিয়ে হজম করা হয়েছিল। ডিএনএ ডিএনএ দিয়ে সরিয়ে ফেলা হয়েছিল। আরএনএ প্রিপিটিটেড করা হয়েছিল, RNeasy MinElute স্পিন কলাম (Qiagen, Redwood City, CA, USA) দিয়ে বের করা হয়েছিল এবং RNase-মুক্ত জলে নির্গত হয়েছিল। NanoString nCounter প্ল্যাটফর্ম এবং GX হিউম্যান ইমিউনোলজি ট্রান্সক্রিপ্ট প্যানেল ব্যবহার করে 250 ng বের করা RNA থেকে ট্রান্সক্রিপ্ট এক্সপ্রেশন বিশ্লেষণ করা হয়েছিল [NanoString Technologies, Seattle, WA, USA; (3-5)]। হিউম্যান ইমিউনোলজি প্যানেল v2 তে 579টি ইমিউন রেসপন্স জিন, 6টি ইতিবাচক কন্ট্রোল জিন এবং 6টি নেতিবাচক কন্ট্রোল জিন রয়েছে। এই জিনগুলির একটি সম্পূর্ণ তালিকা আমাদের গ্রুপ (6) থেকে পূর্ববর্তী প্রকাশনায় পাওয়া যাবে। কনফোকাল IF মাইক্রোস্কোপির জন্য, হিমায়িতকিডনিওহিও স্টেট নেফ্রোপ্যাথোলজি বায়োরিপোজিটরি থেকে সক্রিয় চতুর্থ শ্রেণির এলএন সহ চারজন রোগীর বায়োপসি টিস্যুগুলি প্রাপ্ত হয়েছিল। তিনটি হিমায়িত নেফ্রেক্টমি নমুনা HC হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। নেফ্রেক্টমিগুলি রোগীদের মধ্যে সঞ্চালিত হয়েছিলরেনালসেল কার্সিনোমা। বিশ্লেষণের জন্য প্রাপ্ত টিস্যু ক্যান্সার টিস্যু থেকে দূরে বিভক্ত করা হয়েছিল। বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহৃত আশেপাশের টিস্যু হিস্টোলজিক বিশ্লেষণের দ্বারা সুস্থ দেখায়। নেফ্রেক্টমিগুলি নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহার করা হয়েছিল কারণ হিমায়িত নমুনাগুলির প্রয়োজন ছিল এবং আমাদের বায়োরেপোজিটরিতে হিমায়িত ট্রান্সপ্ল্যান্ট দাতা টিস্যু সংরক্ষণ করা হয়নি।
অ্যান্টিবডি
IF-এর জন্য ব্যবহৃত প্রাথমিক অ্যান্টিবডি (Abs) সবই সম্পূরক সারণী 1-এ তালিকাভুক্ত করা হয়েছে। এই গবেষণায় ব্যবহৃত অ্যান্টিবডিগুলি IF-এর জন্য মানব লিম্ফ নোড ব্যবহার করে বা মানব লিভারকে ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহার করে বৈধ করা হয়েছিল (ডেটা দেখানো হয়নি)। ব্যবহৃত আইসোটাইপ নিয়ন্ত্রণগুলি হল ChromoPure স্বাভাবিক খরগোশ IgG, সাধারণ মাউস IgG (জ্যাকসন ইমিউনো রিসার্চ, ওয়েস্ট গ্রোভ, PA, USA), মাউস IgG1κ (বায়োলেজেন্ড, সান দিয়েগো, CA, USA), এবং মাউস IgG2bκ (জ্যাকসন ইমিউনো গবেষণা)। IF-এর জন্য ব্যবহৃত সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডিগুলি হল ছাগল এফ(ab′ 2 অ্যান্টি-মাউস আইজিজি 488 (জ্যাকসন ইমিউনো রিসার্চ) এবং ছাগল অ্যান্টি-র্যাবিট আইজিজি 568, ছাগল অ্যান্টি-র্যাবিট আইজিজি 488 এবং ইনভিট্রোজেন (থার্মো এফইশার) থেকে ছাগল অ্যান্টি-র্যাবিট আইজিজি 647। বৈজ্ঞানিক, Waltham, MA, USA)।
CISTANCHE কিডনি/রেনাল রোগের উন্নতি ঘটাবে
ইমিউনোফ্লুরোসেন্সহিমায়িত নেফ্রেক্টমি এবং এলএনকিডনিবায়োপসিগুলিকে বিভাগ করা হয়েছিল (প্রতি স্লাইডে 5µm বিভাগ), ঘরের তাপমাত্রায় 15 মিনিটের জন্য 4 শতাংশ প্যারাফর্মালডিহাইডফসফেট বাফার স্যালাইনে (PBS) স্থির করা হয়েছিল এবং PBS (0.02 শতাংশ সোডিয়াম অ্যাজাইড সহ) দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয়েছিল। বিভাগগুলিকে পিবিএস-এ 5 শতাংশ দুধ দিয়ে ব্লক করা হয়েছিল, তারপরে প্রাথমিক অ্যাবের সাথে রাতারাতি ইনকিউবেশন করা হয়েছিল। 1 ঘন্টার জন্য পিবিএসের সাথে তিনটি ধোয়ার পরে, বিভাগগুলিকে ফ্লুরোসেন্টলি ট্যাগ করা সেকেন্ডারি অ্যাবস দিয়ে ঘরের তাপমাত্রায় আরও এক ঘন্টার জন্য ইনকিউব করা হয়েছিল এবং নিউক্লিয়াসগুলিকে 10 মিনিটের জন্য DAPI (100 ng/ml) দিয়ে দাগ দেওয়া হয়েছিল। তারপরে বিভাগগুলি কভারস্লিপের নীচে প্রলং গোল্ড (ইনভিট্রোজেন) দিয়ে মাউন্ট করা হয়েছিল। কন্ট্রোল অ্যাব তাদের নিজ নিজ সেকেন্ডারি অ্যাব সহ আইসোটাইপ অ্যাবসের তালিকা উল্লেখ করে। ছবিগুলি একটি অলিম্পাস ফ্লুওভিউ 1000 লেজার স্ক্যানিং কনফোকাল মাইক্রোস্কোপ সজ্জিত (অলিম্পাস কর্পোরেশন, টোকিও, জাপান) ব্যবহার করে ফ্লফ্লুরোক্রোম (এফভি1000 স্পেকট্রা) এর ফাইনার বিভাজনের জন্য একটি বর্ণালী সনাক্তকরণ সিস্টেম সহ × 60 s তেলের তাপমাত্রায় নিমজ্জন লেন দিয়ে প্রাপ্ত করা হয়েছিল৷
পরিমাণগত মাইক্রোস্কোপিLN এবং HC-তে infDC-এর অভিব্যক্তি স্তরকিডনিঅ্যান্টি CD163 ব্যবহার করে infDC-এর জন্য দাগ দেওয়া ছবি থেকে পরিমাপ করা হয়েছে। InfDC এক্সপ্রেশনের উপর ভিত্তি করে CD163 এর মোট তীব্রতা ImageJ সফ্টওয়্যার (ন্যাশনাল ইনস্টিটিউট অফ হেলথ, বেথেসডা, MD, USA) ব্যবহার করে গণনা করা হয়েছিল। CD163 তীব্রতা আইসোটাইপ প্লাস সেকেন্ডারি অ্যাব-দাগযুক্ত চিত্রগুলি থেকে ব্যাকগ্রাউন্ড ফ্লুরোসেন্স বিয়োগ করার পরে এবং পূর্বে বর্ণিত CD163 অ্যান্টিবডি ব্যবহার করে infDC থেকে নির্গত সবুজ পিক্সেলগুলির এলাকা এবং গড় ফ্লফ্লুরোসেন্স তীব্রতা পরিমাপ করে প্রাপ্ত হয়েছিল (7)।
পরিসংখ্যান সংক্রান্ত বিশ্লেষণট্রান্সক্রিপ্টোমিক বিশ্লেষণের জন্য, বর্ণনামূলক পরিসংখ্যান গড় ± স্ট্যান্ডার্ড বিচ্যুতি বা শতাংশ হিসাবে উপস্থাপন করা হয়। ক্লিনিকাল ভেরিয়েবলের জন্য, টি-টেস্ট, আনোভা, বা উইলকক্সন র্যাঙ্ক সমষ্টি পরীক্ষাগুলি উপযুক্ত হিসাবে প্রয়োগ করা হয়েছিল। শ্রেণীবদ্ধ ক্লিনিকাল ভেরিয়েবলের জন্য, ফিশারের সঠিক পরীক্ষা ব্যবহার করা হয়েছিল। ন্যানোস্ট্রিং ডেটার জন্য, কাঁচা সংখ্যাগুলিকে ইতিবাচক স্পাইক-ইন নিয়ন্ত্রণে স্বাভাবিক করা হয়েছিল এবং তারপরে লগ 2 রূপান্তরিত হয়েছিল। প্রযুক্তিগত পক্ষপাত কমানোর জন্য, গড় থেকে নিচে একটি অভিব্যক্তি স্তর সহ জিনগুলি এবং নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণগুলির দুটি মানক বিচ্যুতি ফিল্টার করা হয়েছিল। কোয়ান্টাইল স্বাভাবিকীকরণ অবশিষ্ট ট্রান্সক্রিপ্টগুলিতে প্রয়োগ করা হয়েছিল (গ্লোমেরুলির জন্য 522 এবং টিআইয়ের জন্য 502)। গ্লোমেরুলার নমুনাগুলি টিআই নমুনাগুলি থেকে আলাদাভাবে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। এলএন থেকে ডিফারেনশিয়াল এক্সপ্রেশন, গ্লোমেরুলার এবং টিআই ট্রান্সক্রিপ্ট এক্সপ্রেশন নির্ধারণ করতেকিডনিনিয়ন্ত্রণের সাথে তুলনা করা হয়েছিল। একটি 1৷{1}}ভাঁজ পরিবর্তন এবং p < 0৷{6}}5="" একটি="" ট্রান্সক্রিপ্ট="" আলাদাভাবে="" প্রকাশ="" করার="" জন্য="" প্রয়োজনীয়="" ছিল৷="" কনফোকাল="" মাইক্রোস্কোপির="" পরিসংখ্যানগত="" বিশ্লেষণের="" জন্য,="" একটি="" টুটেইলড="" স্টুডেন্টস="" টি-টেস্ট="" দুই-গ্রুপ="" তুলনার="" জন্য="" ব্যবহার="" করা="" হয়েছিল,="" এবং="" পি=""><0.05 তাৎপর্যপূর্ণ="" বলে="" বিবেচিত="" হয়েছিল।="" সমস্ত="" বিশ্লেষণ="" অরিজিন="" প্রো="" সংস্করণ="" 2020="" (originlab="" corp.,="" northampton,="" ma,="" usa)="" ব্যবহার="" করে="" চালানো="">
ফলাফল
এলএন ফ্লেয়ারে কিডনি বায়োপসিগুলির ট্রান্সক্রিপ্টোমিক বিশ্লেষণ গ্লোমেরুলিতে এফসিইআর1জি এবং এলএন ফ্লেয়ারে টিআই-এর উল্লেখযোগ্য অতিরিক্ত এক্সপ্রেশন প্রকাশ করেআমরা গ্লোমেরুলি এবং টিআই থেকে এলসিএম ব্যবহার করে বিচ্ছিন্ন আরএনএ-তে ট্রান্সক্রিপ্টোমিক বিশ্লেষণ করেছি।কিডনিপ্রলিফারেটিভ এলএন ফ্লেয়ারে প্রাপ্ত বায়োপসি (n=58)। প্রি-ইমপ্লান্টেশন জীবন্ত দাতাকিডনি প্রতিস্থাপনবায়োপসিগুলি HCs হিসাবে ব্যবহার করা হয়েছিল (n {{0}})। 579টি ইমিউন ট্রান্সক্রিপ্টের ট্রান্সক্রিপ্টোমিক বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে FCER1G সবচেয়ে উল্লেখযোগ্যভাবে অতিপ্রকাশিত গ্লোমেরুলার ট্রান্সক্রিপ্ট [ফোল্ড চেঞ্জ (FC): 3.6, p-value (p): 1E-10] কিন্তু এটি TI (FC:) তেও উল্লেখযোগ্যভাবে অতিরিক্ত এক্সপ্রেসড ছিল। 1.7, p=0.001) LN ফ্লেয়ারে (চিত্র 1 এবং পরিপূরক সারণী 2) HC এর তুলনায়। উপরন্তু, FCER1G অভিব্যক্তি NIH হিস্টোলজিক রোগ কার্যকলাপ সূচকের সাথে সম্পর্কযুক্ত (r=−0.43, p=0.01)।
কিডনি এফসিআর এলএন ফ্লেয়ারে উচ্চভাবে প্রকাশ করা হয় এবং পেরিগ্লোমেরুলার অঞ্চলে সীমাবদ্ধFCER1G প্রকাশ করে এমন ইমিউন সেলকে চিহ্নিত করার জন্য, আমরা FCER1G এনকোডেড প্রোটিন, Fc রিসেপ্টর গামা চেইন [FcR ; (8)] মানব LN, এবং HCকিডনিএকটি নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডি ব্যবহার করে IF মাইক্রোস্কোপিক বিশ্লেষণের মাধ্যমে টিস্যু। IF বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে এফসিআর ন্যূনতমভাবে গ্লোমেরুলিতে প্রকাশ করা হয় (পডোসাইট মার্কার, সিনাপটোপোডিন দ্বারা চিহ্নিত), তবে এলএন ফ্লফ্লেয়ার বায়োপসিগুলির পিজি এবং টিআই অঞ্চলে প্রচুর পরিমাণে প্রকাশ করা হয়। এফসিআর প্রকাশকারী কোষগুলি পিজি অঞ্চলে সেলুলার ইনফিলট্রেটের একটি সাধারণ চেহারা বলে মনে হয়েছিল, মাইক্রোস্কোপিকভাবে (চিত্র 2)। IF বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে LN ফ্লেয়ারের সময়, সেলুলার ইনফিফিল্ট্রেটের উপস্থিতির কারণে PG অঞ্চলটি প্রসারিত হয়, যেখানে চিত্র 2-এর একত্রিত চিত্রগুলিতে দেখা যায় যে HC-তে PG অঞ্চলটি পাতলা এবং কোষের অনুপ্রবেশ ছাড়াই।
এবং পরিপূরক চিত্র 4. সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণভাবে, আমরা একই সাথে প্রক্রিয়া করা আইসোটাইপ অ্যান্টিবডি নিয়ন্ত্রণ ব্যবহার করে LN এবং HC-তে FcR-এর একটি দুর্বল-শূন্য অভিব্যক্তি দেখেছি (ডেটা দেখানো হয়নি)। এই ডেটাগুলি ট্রান্সক্রিপ্টোমিক ফাইন্ডিংগুলিকে সমর্থন করে যা FCER1G কোড করে FcR এবং প্রচুর পরিমাণে প্রসারিত LN ফ্লেয়ারে অতিমাত্রায় প্রকাশ করা হয়।
ম্যাক্রোফেজ মার্কার CD11b এবং CD68 মানুষের LN কিডনিতে FcR এর সাথে একত্রিত হয়নি
এলএন (9-11) এ ইন্টারস্টিশিয়াল লিউকোসাইটের পূর্বের বর্ণনার উপর ভিত্তি করে, আমরা এফসিআর এক্সপ্রেসিং সেলকে ম্যাক্রোফেজ বলে ভবিষ্যদ্বাণী করেছি। আমরা ম্যাক্রোফেজ মার্কার CD68, CD206, এবং CD11b-এর বিরুদ্ধে অ্যান্টি-এফসিআর অ্যান্টিবডি এফসিআর অ্যান্টিবডি সহ দ্বৈত দাগযুক্ত বায়োপসি বিভাগ করি। অপ্রত্যাশিতভাবে, M2-নির্দিষ্ট ম্যাক্রোফেজ মার্কার, CD11b এবং CD206 [(12); ডেটা দেখানো হয়নি], LN-এ দুর্বল থেকে শূন্য অভিব্যক্তি দেখিয়েছেকিডনিইতিমধ্যে, প্যানম্যাক্রোফেজ চিহ্নিতকারী CD68 (13) গ্লোমেরুলার অভিব্যক্তি দেখিয়েছে; এইভাবে, M1 ম্যাক্রোফেজগুলি প্রাথমিকভাবে গ্লোমেরুলির মধ্যে পাওয়া গেছে বলে পরামর্শ দেয়। যাইহোক, সিডি 68 স্টেনিং এফসিআর (চিত্র 3) এর জন্য পিজি এবং টিআই স্টেনিংয়ের সাথে মিলেনি। এই তথ্যগুলি দেখায় যে FcR কোষগুলিকে প্রকাশ করেকিডনিম্যাক্রোফেজ নয়। যদিও CD206, CD68, এবং CD11b-এর বিরুদ্ধে অ্যান্টিবডি LN-তে দুর্বল বা কোন সংকেত দেয়নিকিডনি, তারা সুস্থ মানুষের লিভারে কুফফার কোষগুলিকে শক্তভাবে দাগ দিয়েছিল, অ্যান্টিবডিগুলির নির্ভরযোগ্যতা এবং নির্দিষ্টতা নিশ্চিত করে [(14); উপাত্ত দেখাচ্ছে না].
LN কিডনিতে প্রচলিত ডেনড্রাইটিক সেল মার্কার CD11c এবং MHCII-এর সাহায্যে FcR স্থানীয়করণ
এফসিআর এক্সপ্রেসিং সেলটি একটি ডেনড্রাইটিক সেল (ডিসি) ছিল কিনা তা নির্ধারণ করতে, প্রচলিত DC মার্কার CD11c এবং MHCII ব্যবহার করে তিন রঙের IF মাইক্রোস্কোপি করা হয়েছিল যা সমস্ত মানব ডিসি (15, 16) তে উচ্চভাবে প্রকাশ করা হয়। অন্যান্য মাইলয়েড কোষ। গুণগত বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে এফসিআর এক্সপ্রেশন (এন্টি-এফসিআর অ্যান্টিবডি ব্যবহার করে লেবেল করা হয়েছে তারপরে আলেক্সা-594 ডাই কনজুগেটেড সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডি (ইনভিট্রোজেন) যা কনফোকাল মাইক্রোস্কোপিতে লাল নির্গমনের রঙ দেখায়) CD11c এবং MHCII উভয়ের সাথেই একত্রিত। CD11c/MHCII-কে CD11c/MHC II অ্যান্টিবডি ব্যবহার করে লেবেল করা হয়েছে তারপরে আলেক্সা-488 ডাই কনজুগেটেড সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডি (ইনভিট্রোজেন) কনফোকাল মাইক্রোস্কোপিতে সবুজ নির্গমনের রঙ দেখিয়েছে (চিত্র 4)। একত্রিতকরণের ফলে XY মাত্রার (চিত্র 4) একই অবস্থান/কোষে সহ-ঘটতে ফ্লফ্লুরেসিং FcR (লাল) এবং CD11c/MHCII (সবুজ) উভয়ের উপস্থিতি প্রতিফলিত করে একটি হলুদ রঙ দেখা দেয়। CD11c এর স্টেনিং প্যাটার্ন PG এবং TI অঞ্চলে FcR (চিত্র 4) এর সাথে মিলেছে এবং গ্লোমেরুলির মধ্যে কোনো অ্যান্টিবডি দাগ নেই। CD11c-এর সাথে সামঞ্জস্য রেখে, MHCII (চিত্র 4, নীচের সারি) এছাড়াও PG-তে দৃঢ়ভাবে দাগ, FcR-এর সাথে একত্রিত হয়। কিন্তু, শক্তিশালী PG স্টেনিং ছাড়াও, MHCII গ্লোমেরুলাসের মধ্যে দুর্বল দাগও প্রদর্শন করেছে, একটি দুর্বল MHCII প্রকাশকারী গ্লোমেরুলার কোষের উপস্থিতির পরামর্শ দেয় যা একটি মাইলয়েড কোষ হতে পারে।
FcR প্লাজমাসাইটয়েড ডেনড্রাইটিক সেল মার্কার CD123 এর সাথে একত্রিত হয় নি, কিন্তু মনোসাইট থেকে প্রাপ্ত ডেনড্রাইটিক সেল মার্কার DC-SIGN এর সাথে একত্রিত হয়
এলএন ফ্লেয়ারের সময় পিজি অঞ্চলে এফসিআর-এক্সপ্রেসিং ডিসির কোন উপসেটটি পাওয়া যায় তা সনাক্ত করতে, বায়োপসি টিস্যুটি সিডি 123-এর জন্য দাগযুক্ত ছিল, যা একটি প্লাজমাসাইটয়েড ডিসি (পিডিসি) (16, 17) এর একটি নির্দিষ্ট চিহ্নিতকারী। CD123 প্লাস কোষগুলি টিআই অঞ্চলে পাওয়া গেছে (চিত্র 5, শীর্ষ সারি) তবে গ্লোমেরুলি এবং এলএন-এর পিজি অঞ্চল থেকে অনুপস্থিত ছিলকিডনি. CD123 প্লাস কোষগুলি বিক্ষিপ্ত ছিল এবং TI-তে CD123 স্টেনিং FcR স্টেনিংয়ের সাথে সারিবদ্ধ হয়নি। এটি পরামর্শ দেয় যে LN-এ ইন্ট্রারেনাল এফসিআর-এক্সপ্রেসিং ডিসি একটি পিডিসি নয়। সংকেত নিয়ন্ত্রক প্রোটিন আলফা (SIRP) অভিব্যক্তি FcR (চিত্র 5, মধ্য সারি) এর সাথে একত্রিত করা হয়েছে, পরামর্শ দেয় যে PG DCগুলি প্রচলিত টাইপ 1 DC (cDC1) (16) নয়। অবশিষ্ট সম্ভাবনাগুলি ছিল যে পিজি ডিসিগুলি হল মাইলয়েড প্রচলিত টাইপ 2 ডিসি (সিডিসি 2) বা মনোসাইট থেকে প্রাপ্ত ডিসি (মোডিসি)। এই ডিসি উপসেটগুলির মধ্যে পার্থক্য করার জন্য, DC-SIGN এক্সপ্রেশন, moDCs-এর জন্য নির্দিষ্ট একটি মার্কার মূল্যায়ন করা হয়েছিল। DC-SIGN PG অঞ্চলে FcR এর সাথে একত্রিত করা হয়েছে (চিত্র 5, নীচের প্যানেল) যা পরামর্শ দেয় যে PG DC একটি moDC।
FcR কিডনির পেরিগ্লোমেরুলার অঞ্চলে CD64, CD16, এবং CD14 এর সাথে একত্রিত করা হয়েছে এবং নিশ্চিত করা হয়েছে যে ডিসি
এলএন এ পাওয়া গেছেকিডনিFlare Are moDCs-এ FcR প্রকাশকারী DC গুলি moDCs তা নিশ্চিত করার জন্য, CD64, CD16, এবং CD14 সহ moDC-তে উপস্থিত বলে পরিচিত অতিরিক্ত কোষ পৃষ্ঠ চিহ্নিতকারীর উপস্থিতি মূল্যায়ন করে তাদের আরও বৈশিষ্ট্যযুক্ত করা হয়েছিল। এই মার্কারগুলির প্রতিটি এলএন-তে পাওয়া গেছেকিডনিটিস্যু এবং এফসিআর (পরিপূরক চিত্র 1) সহ স্থানীয়করণ।
FcR পূর্বে চিহ্নিত সার্কুলেটিং infDC মার্কার CD163 এবং CD163 এক্সপ্রেশনের সাথে একত্রিত করা LN ফ্লেয়ারে অতিমাত্রায় প্রকাশ করা হয়
পরবর্তীকালে, FcR-এর সাথে CD163-এর সমষ্টিগত বিশ্লেষণ করা হয়েছিল যে এখানে দেখা moDC জনসংখ্যা সাম্প্রতিক বর্ণনা করা infDC (18) হতে পারে কিনা তা নির্ধারণ করতে। চিত্র 6 পিজি অঞ্চলে FcR (লাল) সহ CD163 সমষ্টিকরণ (সবুজ) নিশ্চিত করে এবং TI (চিত্র 6B) দৃঢ়ভাবে পরামর্শ দেয় যে moDC উপসেটকিডনিLN ফ্লেয়ারের সময় আসলেই infDCs। যেহেতু infDCs CD5 (18) প্রকাশ করে না, দকিডনিটিস্যু CD5 জন্য দাগ ছিল. যদিও CD5-এক্সপ্রেসিং সেলগুলি উপস্থিত ছিলকিডনি, তারা PG অঞ্চলের সান্নিধ্যে অবস্থিত ছিল না এবং FcR (পরিপূরক চিত্র 2) এর সাথে একত্রিত হয় নি, যা পরামর্শ দেয় যে এই infDC-তে CD5 অভিব্যক্তি নেই। LN এবং HC-তে infDC-এর পার্থক্য পরিমাপ করতেকিডনি, infDC-এর পরিমাপ করা হয়েছিল CD163 এক্সপ্রেশনের ক্ষেত্রফল পরিমাপ করার পরে একটি অ্যান্টি-CD163 মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডি, এবং CD163 এর গড় ফ্লুরোসেন্স তীব্রতা দিয়ে দাগ দেওয়ার পরে। 4 LN ফ্লেয়ার থেকে 16টি গ্লোমেরুলার ছবি ব্যবহার করাকিডনি, এবং তিনটি HC থেকে 18টি গ্লোমেরুলার ছবিকিডনি, আমরা HC (চিত্র 6C) এর তুলনায় LN কিডনিতে একটি 9- থেকে 21-গুণ উচ্চতর স্তরের infDC পেয়েছি। যেহেতু infDCs কে পূর্বে CD11b (19, 20) প্রকাশ করতে দেখানো হয়েছে, তাই আমরা মানব এলএনকে আরও বিশ্লেষণ করেছিকিডনিইঁদুর বিরোধী মানব CD11b mAb (ক্লোন M1/70) সাথে অ্যান্টি-CD163 অ্যান্টিবডি। এই পাণ্ডুলিপিতে (চিত্র 3) পূর্ববর্তী অনুসন্ধানের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ, ক্লোন M1/70 infDCs-এ একটি দুর্বল থেকে শূন্য সংকেত দিয়েছে (পরিপূরক চিত্র 3)।
প্রদাহজনক ডেনড্রাইটিক কোষগুলি এলএন ফ্লেয়ারে টি কোষের কাছাকাছি উপস্থিত ছিল
লুপাস নেফ্রাইটিসকিডনিবিভাগগুলিকে টি কোষ চিহ্নিতকারী CD3 এবং FcR এবং CD163-এর অ্যান্টিবডিগুলিকে স্থানিকভাবে T কোষ এবং infDCs-এর স্থানীয়করণের জন্য কস্টেন করা হয়েছিল। infDC মার্কার সহ CD3 কস্টেইনিং দুটি উপায়ে দুটি ভিন্ন ক্লোন অ্যান্টি-CD3 অ্যান্টিবডি (মাউস mAb UCHT1 এবং খরগোশ mAb SP7) এবং 2টি infDC মার্কার ব্যবহার করে করা হয়েছিল। CD3 mAb UCHT1 এবং অ্যান্টি-এফসিআর স্টেনিং LN-এর PG অঞ্চলে FcR প্লাস infDC-এর সংলগ্ন উপস্থিত CD3 প্লাস টি কোষের উপস্থিতি দেখিয়েছে।কিডনি(চিত্র 7A)। অ্যান্টি-CD163 প্লাস CD3 mAb SP7 (চিত্র 7B) দিয়ে দাগ দেওয়া নিশ্চিত করেছে যে infDC মানুষের LN-এ CD3 প্লাস টি কোষের কাছাকাছি উপস্থিত ছিলকিডনিযদিও infDC মার্কার সহ CD3 এর কস্টেইনিং উভয় কোষের জন্য প্রধানত পৃথক সবুজ এবং লাল দাগ দেখায়, কিছু জায়গায় লাল এবং সবুজ দাগ ওভারল্যাপ করা হয়েছে।
আলোচনা এই গবেষণায়, আমরা একটি অভিনব infDC জনসংখ্যার অনুপ্রবেশ শনাক্ত করেছিকিডনিLN ফ্লেয়ার এ এই infDCগুলি অনুপ্রবেশ করে, PG এবং TI স্পেসগুলিতে স্থানীয়করণ করে এবং তাদের অভিব্যক্তি LN ফ্লেয়ারে 10-গুণ বেশি ছিলকিডনিHCs তুলনায়। এগুলি যে উপন্যাসের প্রমাণ তাদের পৃষ্ঠ চিহ্নিতকারীর উপর ভিত্তি করে, FcR প্লাস , MHCII প্লাস , CD11c plus , CD163 plus , CD5 , DC-SIGN plus , CD64 plus , CD14 plus , CD16 plus , SIRP প্লাস , CD268 , CD263 , , CD3 এবং CD11bV। উল্লেখযোগ্যভাবে, এই ইনএফডিসি পিজি অঞ্চলে টি কোষের কাছাকাছি উপস্থিত ছিলকিডনিএলএন ফ্লেয়ার সময়। এই তদন্তের পর্যবেক্ষণগুলি পূর্ববর্তী গবেষণা দ্বারা সমর্থিত যা পরীক্ষামূলক গ্লোমেরুলোনফ্রাইটিস (21, 22) এর বিভিন্ন মাউস মডেলগুলিতে পিজি ডিসি অনুপ্রবেশ সনাক্ত করেছে। তবে, কেন infDC পিজি স্পেসে বসতি স্থাপন করেছে তা স্পষ্ট নয়। পূর্ববর্তী সাহিত্য পরামর্শ দেয় যেরেনালডিসি গ্লোমেরুলাস থেকে শুরু হয় এবং PG (23) এ টি কোষে অ্যান্টিজেন উপস্থাপন করার জন্য গ্লোমেরুলার টাফ্ট এবং লিম্ফ্যাটিক্সের মাধ্যমে লিম্ফ নোডগুলি নিষ্কাশন করে মেসাঞ্জিয়াম থেকে অতিক্রম করে। এই ক্ষেত্রে, দরেনালডিসি গ্লোমেরুলাসে শুরু হতে পারে কিন্তু যখন LN ক্লিনিক্যালি স্পষ্ট হয়ে ওঠে, এই ডিসি ইতিমধ্যেই গ্লোমেরুলাস থেকে বেরিয়ে পিজি স্পেসে বসতি স্থাপন করে। ইনহিবিটরি সিগন্যালগুলি তখন প্রকাশিত হতে পারে এবং বায়োপসির সময় LN গ্লোমেরুলি থেকে infDC-এর অনুপস্থিতি ব্যাখ্যা করে, infDC-তে মনোসাইট পার্থক্যের জন্য প্রয়োজনীয় সাইটোকাইন/কেমোকাইনগুলিকে ব্লক করে। বিকল্পভাবে, এটা সম্ভব যে ডিসি কেমোট্যাকটিক ফ্যাক্টর সরাসরি থেকে মুক্তি পায়রেনালটিউবুলার কোষগুলি অনুপ্রবেশকারী ডিসিকে আকর্ষণ করে (24)। আমরা অনুমান করি যে উভয়ই প্রদাহজনক উদ্দীপনার প্রতিক্রিয়াতে ঘটে যার ফলে এলএন-এর সময় ইনফডিসি-র পিজি এবং টিআই জমে।
এই তদন্তটি প্রতিষ্ঠিত হয়েছে যে পিজি ডিসি প্লাজমাসাইটয়েড বা প্রচলিত ডিসি নয়। মনোসাইট মার্কার CD14, CD64, এবং CD16 এর অভিব্যক্তি যা আগে রিপোর্ট করা হয়েছিল, তা নিশ্চিত করেছে যে এই PG DCগুলি একটি moDC প্রতিনিধিত্ব করে (16, 25, 26)। সক্রিয় প্রদাহ বা সংক্রমণের সেটিংয়ে, moDCs বলা হয় infDCs (27)। এই moDC গুলির আরও বৈশিষ্ট্য একটি অনন্য infDC জনসংখ্যা প্রকাশ করেছে যা পূর্বে মানব LN তে বর্ণিত হয়নি। উল্লেখযোগ্যভাবে, তবে, এসএলই রোগীদের পেরিফেরাল ব্লাড ইমিউন কোষের সাম্প্রতিক ট্রান্সক্রিপ্টোমিক স্টাডিতে একটি infDC স্বাক্ষর চিহ্নিত করা হয়েছে যা ছিল CD163 plus, CD14 plus, এবং CD5h, যা এখানে রিপোর্ট করা ইন্ট্রারেনাল infDC জনসংখ্যার অনুরূপ (18)। সম্প্রতি, একক-কোষ RNA-Seq ব্যবহার করে ইমিউন কোষগুলির একটি বিস্তৃত মূল্যায়ন করা হয়েছিলকিডনিএলএন ফ্লেয়ারে বায়োপসি (28)। এই গবেষণায় বেশ কয়েকটি মনোসাইট ক্লাস্টার চিহ্নিত করা হয়েছিল একটি মনোসাইট ক্লাস্টার যা একটি CD163 প্লাস, CD14 প্লাস, CD16 প্লাস, CD64 প্লাস, এবং DC-SIGN প্লাস স্বাক্ষর প্রকাশ করে, এখানে বর্ণিত infDC-এর মতো। তদ্ব্যতীত, বৈশিষ্ট্যযুক্ত মনোসাইট বংশকে একটি অনুপ্রবেশকারী মনোসাইট উপসেট বলে মনে করা হয়েছিল কারণ এটি স্বাস্থ্যকরভাবে ন্যূনতমভাবে প্রকাশ করা হয়েছিলকিডনি. যদিও এই IF অধ্যয়নগুলি বংশ চিহ্নিতকারী অভিব্যক্তির স্তরের একটি সুনির্দিষ্ট পরিমাপ প্রদান করে না, এবং এটি ডিসি রূপান্তর dDFOult থেকে মনোসাইটের ট্রানজিশনাল পর্যায়গুলির সনাক্তকরণ করতে পারে, এই ফলাফলগুলি আরও পরিমাণগত অধ্যয়নকে অবহিত করার জন্য চরিত্রায়ন এবং স্থানিক অভিযোজনের অনুমতি দেয়।
লিস্টেরিয়া-সংক্রমিত ইঁদুরের লিম্ফ নোড (CD64 প্লাস CD11c প্লাস MHCII প্লাস) (27), এবং সিলিয়াক ডিজিজের অন্ত্রের শ্লেষ্মা (29) থেকে এই অভিনব infDC জনসংখ্যা পূর্বে রিপোর্ট করা infDC-এর সাথে সাদৃশ্যপূর্ণ। InfDCs এর আগেও রিউমাটয়েড আর্থ্রাইটিস (20) রোগীদের থেকে মানুষের আর্থ্রাইটিক সাইনোভিয়াল ফ্লুইডে বর্ণনা করা হয়েছে। যাইহোক, LN বর্ণিত infDCকিডনিসাইনোভিয়াল ফ্লুইড infDC থেকে পৃথক; এতে, তাদের ম্যাক্রোফেজ মার্কার CD11b এবং CD206 এর অভাব রয়েছে যা সাইনোভিয়াল ফ্লুইড infDC-তে উপস্থিত থাকে। এটি পরামর্শ দেয় যে এখানে বর্ণিত infDC জনসংখ্যা অন্তত কিছু অন্যান্য অটোইমিউন রোগে দেখা infDC থেকে পৃথক এবং হতে পারে অনন্যকিডনিএলএন ফ্লেয়ারের সময়। অধিকন্তু, পূর্ববর্তী গবেষণাগুলি FcεRI [(19, 30); অ্যান্টিবডি বাইন্ডিং সাইটের জন্য একটি antiFcεRI অ্যান্টিবডি (eBioscience, Inc., San Diego, CA, USA) ব্যবহার করে চিহ্নিত করা হয়েছে] infDC আলাদা করার জন্য সেরা মার্কার হতে পারে
চিত্র 6|Fc রিসেপ্টর গামা চেইন পূর্বে চিহ্নিত সঞ্চালন প্রদাহজনক ডেনড্রাইটিক সেল (infDC) চিহ্নিতকারী CD163 এবং CD163 অভিব্যক্তি HCs এর তুলনায় মানব LN-এ অতিমাত্রায় প্রকাশ করা হয়। (A) তিনটি রঙের IF ছবি যা 3টি মানব এলএন-এর প্রতিনিধি৷কিডনিসবুজ চিত্র 6-এ CD163 এর একত্রীকরণ দেখানো হচ্ছে|(প্রথম) পিজি অঞ্চলে লাল (মাঝখানে) এফসিআর সহ। দ্বিতীয় সারিটি বিন্দুযুক্ত বর্গক্ষেত্রে হাইলাইট করা উপরের সারির চিত্রগুলির একটি জুম করা অংশ দেখায়। তৃতীয় কলামটি নিউক্লিয়াস (নীল) এর ডিআইসি এবং ডিএপিআই স্টেনিংয়ের সাথে প্রথম 2-এর একত্রীকরণ দেখায়। (বি) তিনটি রঙের IF চিত্র যা 3টি মানব এলএন-এর প্রতিনিধি৷কিডনিটিউবুলোইন্টারস্টিশিয়াল (টিআই) অঞ্চলে লাল (মাঝখানে) এফসিআর সহ সবুজ (প্রথম) CD163 এর একত্রীকরণ দেখানো হচ্ছে। (সি) বার গ্রাফটি ইমেজজে সফ্টওয়্যার ব্যবহার করে 4টি ভিন্ন এলএন নমুনা থেকে 3টি ভিন্ন এইচসি-এর 18 জি চিত্র এবং 16টি গ্লোমেরুলি চিত্র থেকে অ্যান্টি-CD163 স্টেনিং থেকে সবুজ রঙ ব্যবহার করে CD163 এক্সপ্রেশনের উপর ভিত্তি করে infDCs-এর পরিমাণ চিত্রিত করে। CD163 (সবুজ) এর ক্ষেত্রফল একা (বাম দিকে গ্রাফ) এবং এলাকা × মানে ফ্লুরোসেন্স তীব্রতা (বামে গ্রাফ) মাপা হয়েছিল এবং গড় ± SD দিয়ে প্লট করা হয়েছিল। প্রতিটি পরিমাপ ব্যবহার করে জোড়াবিহীন টি-টেস্ট (এক-টেইলড) দ্বারা ডেটা বিশ্লেষণ করা হয়েছিল এবং পি-মানগুলি বার গ্রাফে নির্দেশিত হয়েছিল। চিত্র 7|সারি 3 রঙের IF চিত্রগুলিকে চিত্রিত করে যা তিনটি ভিন্ন LN প্রতিনিধিত্ব করেকিডনিCD163 (সবুজ রঙে infDC মার্কার) সংলগ্ন CD3 (লাল রঙে প্যান টি সেল মার্কার) এর উপস্থিতি দেখাচ্ছে যা PG অঞ্চল থেকে অত্যন্ত বিবর্ধিত। নীচের সারিটি ডানদিকে প্রথম 2টি কলামের মার্জ করা ছবি এবং প্রথম 2টি কলামের ডিআইসি এবং ডিএপিআই স্টেনিং অফ নিউক্লিয়াস (নীল) একত্রিত করা ছবি দেখায়৷ ফ্লফ্লো সাইটোমেট্রি দ্বারা ম্যাক্রোফেজ এবং সিডিসি থেকে। আমাদের গবেষণায় বলা হয়েছে যে FcR, একটি সাইটোপ্লাজমিক গামা সাবুনিট যার মাধ্যমে একাধিক FcR ফাংশন করে, যার মধ্যে রয়েছে FcεRI, Fc RI, Fc RIIIa, এবং Fc RI, সেইসাথে অন্যান্য ইমিউন রিসেপ্টর যেমন GPVI, OSCAR, এবং TREM (8), একটি নির্ভরযোগ্য হতে রোগীর বায়োপসি নমুনার উপর IF অধ্যয়নের জন্য চিহ্নিতকারী। এটা সম্ভবত LN মধ্যে infDCকিডনিএক্সপ্রেস FcεRI, Fc RI এবং Fc RIIIa (পরিপূরক চিত্র 1) এর অনুরূপ যেহেতু FcR এর উপস্থিতি পরোক্ষভাবে FcεRI সহ একাধিক রিসেপ্টরের উপস্থিতির পরামর্শ দেয়।
CISTANCHE কিডনি/রেনাল রোগের উন্নতি ঘটাবে
CD163 প্রকাশকারী অভ্যন্তরীণ কোষের ধরণকে বৈশিষ্ট্যযুক্ত করার গুরুত্ব আমাদের গ্রুপের সাম্প্রতিক ফাইন্ডিং দ্বারা বাড়ানো হয়েছে, এটি প্রকাশ করে যে এক্সট্রারেনাল এসএলই বা নিষ্ক্রিয় এসএলই (31) এর তুলনায় সক্রিয় এলএন-এ প্রস্রাবের CD163 মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল। প্রস্রাব CD163 রোগের তীব্রতা এবং হিস্টোলজিক কার্যকলাপ সূচকের সাথে সম্পর্কযুক্ত। মেজিয়া এট আল (31) দ্বারা গবেষণা করার সময়। প্রস্তাবিত CD163 M2 ম্যাক্রোফেজ থেকে উদ্ভূত, আমরা এখন পরামর্শ দিই যে প্রস্রাব CD163 এছাড়াও infDC থেকে উদ্ভূত, এই ধারণাটিকে সমর্থন করে যে প্রস্রাব CD163 একটি বায়োমার্কার যা LN-তে রোগের কার্যকলাপকে প্রতিফলিত করে।
এই ইনএফডিসিগুলির উত্স সম্পর্কে, মনোসাইট মার্কারগুলির অভিব্যক্তিটি পরামর্শ দেয় যে ইনফডিসিগুলি অনুপ্রবেশ করা মনোসাইট থেকে আলাদা হতে পারে।কিডনিইমিউন কমপ্লেক্স সহ বিভিন্ন অটোইমিউন উদ্দীপনা দ্বারা সৃষ্ট প্রদাহের সময়। অন্যদিকে, লুপাস (18) সঞ্চালন রোগীদের মধ্যে CD163 প্লাস CD14 প্লাস infDC-এর উপস্থিতি পরামর্শ দেয় যে পেরিফেরাল সঞ্চালন থেকে infDC প্রবেশ করে।কিডনিএলএন-এ। এটাও সম্ভব যে উভয় প্রক্রিয়াই এর জন্য দায়ীরেনালinfDCs মানব এলএন চলাকালীন টি কোষের সাথে ইনএফডিসি যোগাযোগের প্রক্রিয়াগুলি বর্তমানে অজানা। যদিও infDC মার্কারগুলির সাথে CD3-এর কস্টেইনিং মূলত কাছাকাছি উভয় কোষের বিচ্ছিন্ন জনসংখ্যা দেখায় (চিত্র 7B), কিছু ওভারল্যাপের প্রমাণও রয়েছে যা ইমিউনোলজিক্যাল সিন্যাপস গঠন এবং LN-তে এই infDC এবং T কোষগুলির মধ্যে মিথস্ক্রিয়া নির্দেশ করে।কিডনিযাইহোক, টি কোষগুলি সেকেন্ডারি লিম্ফয়েড অঙ্গে স্থানান্তরিত হয়; একটি সাম্প্রতিক প্রতিবেদনে এলএন এবং মুরিন এলএন রোগীদের মধ্যে টারশিয়ারি লিম্ফয়েড স্ট্রাকচার (টিএলএস) হিসাবে সংগঠিত ইমিউন সমষ্টির উপস্থিতি দেখানো হয়েছে।কিডনিযা জিনের স্বাক্ষর এবং কোষের গঠন দ্বারা লিম্ফ নোডের অনুরূপ (32)। এটি পূর্ববর্তী প্রতিবেদনের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ যেটি এলএন-তে টি- এবং বি-কোষ সমষ্টি সহ জীবাণু কেন্দ্রগুলিকে চিহ্নিত করেছে।কিডনি(৩৩)। LN-এ infDCs সনাক্তকরণের প্রসঙ্গে এই ফাইন্ডিংগুলি বিবেচনা করেকিডনিপরামর্শ দেয় যে PG এবং TI-এর infDCs LN কিডনির মধ্যে স্থানীয় অভিযোজিত প্রতিরোধ ক্ষমতার গুরুত্বপূর্ণ চালক হতে পারে। যদিও এখনও স্পষ্ট নয় যে এই টি কোষগুলি আবাসিক টি কোষ নাকি প্রাইমড টি কোষ, ইনএফডিসিগুলি বিভিন্ন রোগের পরিস্থিতিতে পরিচিত হয় যেগুলি Th1, Th2 এবং Th17 (20) নামে প্রধান T সহায়ক কোষের উপসেটগুলির বিকাশকে ট্রিগার করার ক্ষমতা রাখে। , 34, 35)। যদিও, ইন ভিট্রো গবেষণায় পরামর্শ দেওয়া হয়েছে যে InfDCs Th17 প্রতিক্রিয়ার সূচনা এবং রক্ষণাবেক্ষণের সাথে জড়িত (19), উপন্যাস LN এর উপর আরও গবেষণাকিডনি infDCs প্রয়োজন কারণ প্রদাহজনক উদ্দীপনা এবং টিস্যু মাইক্রোএনভায়রনমেন্ট সিটুতে infDC ফাংশন নির্ধারণ করে (36)।
উপসংহার
উপসংহারে, আমরা একটি অভিনব ইনএফডিসি জনসংখ্যা চিহ্নিত করেছি যা পূর্বে এলএন-তে বর্ণনা করা হয়নিকিডনিএই ইনফডিসিগুলি পিজি অঞ্চলে এবং অনুপ্রবেশকারী টি কোষগুলির সংলগ্ন থাকে। আমাদের অনুসন্ধানগুলি, সাম্প্রতিক সাহিত্যের সাথে SLE-তে CD163 প্লাস infDC এবং LN-এ রোগের কার্যকলাপের একটি মূল্যবান চিহ্নিতকারী হিসাবে প্রস্রাব CD163 চিহ্নিত করে, পরামর্শ দেয় যে infDCs এবং তাদের T সেল অংশীদাররা সক্রিয় LN চলাকালীন স্থানীয় অভিযোজিত প্রতিরোধ ক্ষমতা চালনা করার ক্ষেত্রে মূল অবদানকারী হতে পারে। infDCs-এর পাশে থাকা T কোষের উপসেটগুলিকে সংজ্ঞায়িত করার জন্য আরও অধ্যয়ন করা প্রয়োজন এবং LN-এ স্থানীয় প্রদাহ চালানোর জন্য PG infDCs টি কোষের সাথে যোগাযোগ করে এমন প্রক্রিয়াগুলি বোঝার জন্য।