Cistanche Polysaccharides প্রোস্টেট ক্যান্সার কোষের বিস্তারকে বাধা দেয় এবং ROS জেনারেশন এবং অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট জিন দমনের মাধ্যমে অ্যাপোপটোসিসকে প্ররোচিত করে
Jun 10, 2025
বিমূর্ত:
উদ্দেশ্য:এর প্রভাব এবং অন্তর্নিহিত প্রক্রিয়া তদন্ত করতেসিস্টানচে পলিস্যাকারাইডএর বিস্তার এবং apoptosis উপরপ্রোস্টেট ক্যান্সার কোষ.
পদ্ধতি:
মানব প্রোস্টেট ক্যান্সার DU145 কোষগুলি নিম্ন, মাঝারি এবং উচ্চ ঘনত্বের সাথে চিকিত্সা করা হয়েছিলসিস্টানচে পলিস্যাকারাইড(যথাক্রমে 20, 40, এবং 80 mg/mL)। কোষের বিস্তার ব্যবহার করে মূল্যায়ন করা হয়েছিলএমটিটি পরীক্ষা, এবং অ্যাপোপটোসিস দ্বারা মূল্যায়ন করা হয়েছিলপ্রবাহ সাইটোমেট্রি. অন্তঃকোষীয়প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতি (ROS)স্তরগুলি প্রবাহ সাইটোমেট্রির মাধ্যমে পরিমাপ করা হয়েছিল, যখনগ্লুটাথিয়ন (GSH)ব্যবহার করে মাত্রা নির্ধারণ করা হয়েছিলএলিসা. এমআরএনএ এবং প্রোটিন প্রকাশের মাত্রাগ্লুটামেট-সিস্টাইন লিগেস ক্যাটালিটিক সাবুনিট (GCLC), গ্লুটামেট-সিস্টাইন লিগেস মডিফায়ার সাবুনিট (GCLM), এবংথিওরেডক্সিন রিডাক্টেস 1 (TXNRD1)দ্বারা বিশ্লেষণ করা হয়েছিলআরটি-পিসিআরএবংপশ্চিমী দাগ, যথাক্রমে।
ফলাফল:
এর অর্ধ-সর্বোচ্চ নিরোধক ঘনত্ব (IC₅₀)সিস্টানচে পলিস্যাকারাইডDU145 কোষে ছিল 40.35 mg/mL, এইভাবে 40 mg/mL পরবর্তী পরীক্ষার জন্য মাঝারি ডোজ হিসাবে নির্বাচিত হয়েছিল। নিম্ন, মাঝারি এবং উচ্চ মাত্রা যথাক্রমে IC₅₀ এর 50%, 100% এবং 200% হিসাবে সংজ্ঞায়িত করা হয়েছিল।
সমস্ত চিকিত্সা গোষ্ঠীগুলি নিয়ন্ত্রণ গোষ্ঠীর তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধিপ্রাপ্ত অ্যাপোপটোসিস হার প্রদর্শন করেছে। দউচ্চ-ডোজ Cistanche গ্রুপকোষের বিস্তারের সর্বশ্রেষ্ঠ বাধা এবং সর্বোচ্চ অ্যাপোপটোসিস হার প্রদর্শন করেছে, তারপরে মাঝারি- এবং নিম্ন-ডোজ গ্রুপগুলি (P<0.01)। ROS স্তরগুলি উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত ছিল এবং GSH স্তরগুলি উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছেCistanche-চিকিত্সা গ্রুপবনাম নিয়ন্ত্রণ। উল্লেখযোগ্যভাবে, দউচ্চ ডোজ গ্রুপমাঝারি- এবং নিম্ন-ডোজ গ্রুপগুলির তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে উচ্চতর ROS এবং নিম্ন GSH মাত্রা ছিল (P<0.05); নিম্ন-ডোজ গ্রুপের তুলনায় মাঝারি-ডোজ গ্রুপ একই রকম পার্থক্য দেখিয়েছে (P<0.05)।
এর অভিব্যক্তি মাত্রাজিসিএলসি, জিসিএলএম, এবংTXNRD1(এমআরএনএ এবং প্রোটিন উভয়ই) নিয়ন্ত্রণের তুলনায় সিস্টানচে-চিকিত্সা করা সমস্ত গ্রুপে উল্লেখযোগ্যভাবে নিয়ন্ত্রিত ছিল (P<0.05)। দউচ্চ ডোজ গ্রুপএই অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট-সম্পর্কিত জিন এবং প্রোটিনগুলির সবচেয়ে উল্লেখযোগ্য দমন দেখায়, তারপরে মাঝারি- এবং নিম্ন-ডোজ গ্রুপগুলি (P<0.05)।
উপসংহার:
সিস্টানচে পলিস্যাকারাইডঅ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কারণগুলির প্রকাশকে বাধা দেয়জিসিএলসি, জিসিএলএম, এবংTXNRD1, যার ফলে হ্রাসজিএসএইচ সংশ্লেষণ, প্রচারROS জমে, এবং শেষ পর্যন্ত প্ররোচিতপ্রোস্টেট ক্যান্সার কোষে অ্যাপোপটোসিস. এই ফলাফলগুলি ইঙ্গিত করেসিস্তানচেএকটি হিসাবে পরিবেশন করতে পারেপ্রাকৃতিক থেরাপিউটিক এজেন্টমাধ্যমে প্রোস্টেট ক্যান্সারের জন্যঅক্সিডেটিভ স্ট্রেস-মধ্যস্থতা প্রক্রিয়া.
উচ্চ পলিস্যাকারাইড Cistanche নির্যাস
Wecistanche-এর সহায়ক পরিষেবা- পাইকারি মূল্য পেতে আমাদের সাথে যোগাযোগ করুন
ইমেল:wallence.suen@wecistanche.com
হোয়াটসঅ্যাপ/টেল:+86 15292862950
পটভূমি এবং পদ্ধতি
প্রোস্টেট ক্যান্সারপ্রায় জন্য অ্যাকাউন্টসমস্ত পুরুষ ম্যালিগন্যান্সির 7.1%, 60 বছর বয়সের পরে সর্বোচ্চ ঘটনা ঘটছে। চীনের জনসংখ্যার বয়স বাড়তে থাকায় এই রোগের প্রকোপ আরও বাড়বে বলে আশা করা হচ্ছে [1]। অধ্যয়নগুলি পরামর্শ দেয় যে বয়স্ক পুরুষদের মধ্যে প্রোস্টেট ক্যান্সারের উচ্চ প্রকোপ এর সাথে সম্পর্কিত হতে পারেপ্রোস্টেট মধ্যে degenerative পরিবর্তন, জেনেটিক প্রবণতা, খাদ্যাভ্যাস, এবংজীবনধারার কারণ [2].
সার্জিক্যাল রিসেকশনপ্রোস্টেট ক্যান্সারের চিকিত্সার একটি প্রধান ভিত্তি হিসাবে রয়ে গেছে, টিউমারের বেশিরভাগ ভর অপসারণের লক্ষ্য। যাইহোক, এটি উল্লেখযোগ্য জটিলতার সাথে যুক্ত, যেমনপ্রস্রাবের অসংযম, যৌন কর্মহীনতাএবং সবচেয়ে সমালোচনামূলকভাবে,টিউমার পুনরাবৃত্তি এবং মেটাস্টেসিস, যা দুর্বল পূর্বাভাসের প্রধান কারণ [3]।
সাম্প্রতিক বছরগুলোতে,ট্র্যাডিশনাল চাইনিজ মেডিসিন (TCM)ক্যান্সার থেরাপিতে এর ভূমিকার জন্য ক্রমবর্ধমান মনোযোগ অর্জন করেছে। TCM সাহায্য করতে পারেরোগ প্রতিরোধ ক্ষমতা বাড়ান, কেমোথেরাপি/রেডিওথেরাপির পার্শ্বপ্রতিক্রিয়া প্রতিরোধ করুন, এবংডিটক্সিফিকেশন বাড়ায়. কিছু ঔষধি ভেষজও প্রদর্শন করেসরাসরি অ্যান্টিটিউমার বৈশিষ্ট্য, টিউমার বৃদ্ধির বাধা সহক্যান্সার কোষে অ্যাপোপটোসিস আনয়ন [4].
এর মধ্যে,Cistanche (Cistanche deserticola)এটির জন্য পরিচিত একটি ঐতিহ্যবাহী টনিক ভেষজimmunomodulatory, অ্যান্টিঅক্সিডেটিভ, এবংঅ্যান্টিটিউমার প্রভাব. এর প্রধান জৈব সক্রিয় উপাদানপলিস্যাকারাইডএবংphenylethanoid glycosides. এই গবেষণার প্রভাব এবং অন্তর্নিহিত প্রক্রিয়া তদন্ত করেসিস্টানচে পলিস্যাকারাইডঅনপ্রোস্টেট ক্যান্সার DU145 কোষের বিস্তার এবং অ্যাপোপটোসিস.
1. উপকরণ এবং পদ্ধতি
1.1 প্রধান উপাদান এবং বিকারক
DU145 মানুষের প্রোস্টেট ক্যান্সার কোষটংপাই বায়োটেক (সাংহাই, চীন) থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল।
সিস্টানচে পলিস্যাকারাইড(ব্যাচ নং: 0287181) Weikeqi Bio Co., Ltd. (সিচুয়ান, চীন) থেকে কেনা হয়েছে।
ফেটাল বোভাইন সিরাম, পেনিসিলিন/স্ট্রেপ্টোমাইসিন, এবংডিএমইএমজেটা লাইফ (ইউএসএ) দ্বারা সরবরাহ করা হয়েছিল।
এমটিটি পরীক্ষা, অ্যানেক্সিন ভি/পিআই অ্যাপোপটোসিস কিট, RIPA লাইসিস বাফার, বিসিএ প্রোটিন পরিমাণ নির্ধারণ কিটইলাবসায়েন্স (সাংহাই, চীন) থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল।
প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতি (ROS) সনাক্তকরণ কিটএবংGSH ELISA কিটসবায়োল্যাব (সাংহাই, চীন) থেকে কেনা হয়েছিল।
ট্রিজল বিকারক, বিপরীত প্রতিলিপি কিট, এবংপিসিআর কিটসনিউরোসিম (হ্যাংজু, চীন) থেকে নেওয়া হয়েছিল।
বিরুদ্ধে অ্যান্টিবডিজিসিএলসি, জিসিএলএম, TXNRD1, -অ্যাক্টিন, এবং সংশ্লিষ্ট সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডিগুলি UnivBio (সাংহাই, চীন) থেকে কেনা হয়েছিল।
1.2 কোষ সংস্কৃতি এবং বিস্তার পরীক্ষা
DU145 কোষে সংস্কৃত করা হয়েছিলDMEM 10% FBS এবং 1% পেনিসিলিন/স্ট্রেপ্টোমাইসিন দিয়ে পরিপূরকএকটি CO₂ ইনকিউবেটরে। জন্যএমটিটি পরীক্ষালগারিদমিক-ফেজ DU145 কোষগুলিকে 96-ওয়েল প্লেটে বীজ দেওয়া হয়েছিল এবং এর সাথে চিকিত্সা করা হয়েছিলCistanche পলিস্যাকারাইড সমাধানএর ঘনত্বে10, 20, 40, এবং 80 mg/mL. নিয়ন্ত্রণ গোষ্ঠী শুধুমাত্র DMEM মাধ্যম পেয়েছে।
24 ঘন্টা চিকিৎসার পর,5 mg/mL MTT এর 20 µLপ্রতিটি কূপে যোগ করা হয়েছিল এবং 4 ঘন্টার জন্য ইনকিউব করা হয়েছিল। supernatant সরানো হয়েছে, এবংDMSO এর 150 μLযোগ করা হয়েছিল। 10 মিনিটের জন্য কাঁপানোর পরে, শোষণ পরিমাপ করা হয়েছিল490 nmএকটি মাইক্রোপ্লেট রিডার ব্যবহার করে। দIC₅₀গণনা করা হয়েছিল, এবং20, 40, এবং 80 mg/mLহিসাবে নির্বাচিত হয়েছিলকম, মাঝারি এবং উচ্চ ডোজপরবর্তী পরীক্ষার জন্য। দকোষের বিস্তার প্রতিরোধের হারহিসাবে গণনা করা হয়েছিল:
বাধার হার (%)=(OD_control - OD_treated) / OD_control × 100
1.3 অ্যাপোপটোসিস অ্যাস
লগ-ফেজ DU145 কোষগুলিকে বিভিন্ন ঘনত্বের সাথে চিকিত্সা করা হয়েছিলসিস্টানচে পলিস্যাকারাইডগ্রুপিং অনুযায়ী। স্থির এবং দাগ দেওয়ার পরে,অ্যানেক্সিন ভি-এফআইটিসিএবংপি.আইঅ্যাপোপটোটিক কোষের লেবেল ব্যবহার করা হয়েছিল।ফ্লো সাইটোমেট্রিফ্লুরোসেন্স সংকেত সনাক্ত করতে সঞ্চালিত হয়েছিল এবং অ্যাপোপটোটিক কোষের শতাংশ রেকর্ড করা হয়েছিল।
1.4 অন্তঃকোষীয় ROS এবং GSH স্তর সনাক্তকরণ
ROS স্তরগুলি একটি ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিলROS ফ্লুরোসেন্স প্রোবএবং প্রবাহ সাইটোমেট্রি। GSH মাত্রা ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিলএলিসা. GSH মানগুলির পরিচিত ঘনত্ব ব্যবহার করে একটি আদর্শ বক্ররেখা প্রস্তুত করা হয়েছিল এবং নমুনাগুলিতে GSH ঘনত্ব গণনা করার জন্য শোষণ পরিমাপ করা হয়েছিল।
GCLC, GCLM, TXNRD1 এর mRNA এক্সপ্রেশনের জন্য 1.5 RT-PCR
ব্যবহার করে মোট আরএনএ বের করা হয়েছিলট্রিজল, এবং সিডিএনএ সংশ্লেষিত হয়েছিল। পিসিআর নির্দিষ্ট প্রাইমার ব্যবহার করে সঞ্চালিত হয়েছিল:
জিসিএলসি:
ফরোয়ার্ড: 5'-GTCGGTGTCAAAATACGGAGTTCCA-3'
বিপরীত: 5'-CGTGACGAGGACTGCGTGCATGGAT-3'
জিসিএলএম:
ফরোয়ার্ড: 5'-CCGATGACGCCATAAACGTCGTAGC-3'
বিপরীত: 5'-GGCTAAGCGTACGTAGTACGCAACGTA-3'
TXNRD1:
ফরোয়ার্ড: 5'-TGACAGTCCTACGTACGTAGAATGCC-3'
বিপরীত: 5'-ATAATGCGTAGGGGATGCGCTAGCAATGG-3'
অ্যাক্টিন (অভ্যন্তরীণ নিয়ন্ত্রণ):
ফরোয়ার্ড: 5'-TTAGGCGCGATGCAGTCAGATAAGC-3'
বিপরীত: 5'-ATCGACGTACGTACGGACGCGATAG-3'
পরিবর্ধন শর্ত: 60 সেকেন্ডের জন্য 95 ডিগ্রি, তারপর 30 সেকেন্ডের জন্য 95 ডিগ্রির 30টি চক্র, 30 সেকেন্ডের জন্য 60 ডিগ্রি এবং 60 সেকেন্ডের জন্য 72 ডিগ্রি। দ্বারা PCR পণ্য বিশ্লেষণ করা হয়জেল ইলেক্ট্রোফোরসিস, এবং আপেক্ষিক জিনের অভিব্যক্তি স্বাভাবিক করা হয়েছিল-অ্যাক্টিন.
1.6 প্রোটিন প্রকাশের জন্য ওয়েস্টার্ন ব্লটিং
ব্যবহার করে মোট প্রোটিন বের করা হয়েছিলRIPA বাফার, এবং প্রোটিনের ঘনত্ব দ্বারা নির্ধারিত হয়েছিলবিসিএ পরীক্ষা. প্রোটিন দ্বারা পৃথক করা হয়SDS-পৃষ্ঠা,তে স্থানান্তরিত হয়েছেপিভিডিএফ ঝিল্লি, অবরুদ্ধ, এবং বিরুদ্ধে প্রাথমিক অ্যান্টিবডি সহ 4 ডিগ্রীতে রাতারাতি incubatedজিসিএলসি, জিসিএলএম, TXNRD1, এবং-অ্যাক্টিন. সঙ্গে ইনকিউবেশন পরেএইচআরপি-সংযুক্ত সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডি, ব্যান্ডগুলি ব্যবহার করে কল্পনা করা হয়েছিলকেমিলুমিনেসেন্সএবং দ্বারা পরিমাপ করা হয়েছেইমেজজে সফটওয়্যার.
1.7 পরিসংখ্যান বিশ্লেষণ
সমস্ত ডেটা ব্যবহার করে বিশ্লেষণ করা হয়েছিলSPSS 25.0. একমুখী ANOVA এবংএলএসডি-টি পরীক্ষাপরিসংখ্যানগত তাত্পর্য নির্ধারণ করতে ব্যবহৃত হয়।
